4.6. Thiobarbituurzuur-reactieve stoffen (TBAR's)

Het gehalte aan TBAR's werd gebruikt als een index voor lipoperoxidatie. In hersenweefsel werd 50 mM fosfaatbuffer (pH 7,4) toegevoegd tot een concentratie van 25 mg/ml (w/v), en de suspensie werd gedurende 10 seconden gehomogeniseerd door sonicatie. Aan 30 µl van het homogenaat werden 250 µl 1 procent fosforzuur en 75 µl 0,6 procent thiobarbituurzuur (TBA) toegevoegd. Het reagensmengsel werd 45 min geïncubeerd bij 100 ◦C in een waterbad, waarna het werd gekoeld in een ijsbad en daarna 10 min gecentrifugeerd bij 3000 x g bij 4 ◦C. Uit elk monster werd een volume van 150 µl supernatant genomen. Fluorescentie werd gemeten met behulp van een FLUOSTAR-microplaatlezer (BMG LABTECH, Ortenberg, Baden-Württemberg, Duitsland) met het excitatiefilter ingesteld op 485 nm (bandbreedte 5 nm) en het emissiefilter ingesteld op 530 nm (bandbreedte 5 nm). Er werd een ijkkromme gemaakt met malondialdehyde (MDA) als standaard. De resultaten werden uitgedrukt in pmol MDA/mg eiwit.

Glycoside van cistanche kan ook de activiteit van SOD in hart- en leverweefsels verhogen en het gehalte aan lipofuscine en MDA in elk weefsel aanzienlijk verminderen, waardoor verschillende reactieve zuurstofradicalen (OH-, H₂O₂, enz.) door OH-radicalen. Cistanche-fenylethanoïdeglycosiden hebben een sterk wegvangend vermogen van vrije radicalen, een hoger reducerend vermogen dan vitamine C, verbeteren de activiteit van SOD in spermasuspensie, verminderen het gehalte aan MDA en hebben een zeker beschermend effect op de functie van het spermamembraan. Cistanche-polysacchariden kunnen de activiteit van SOD en GSH-Px in erytrocyten en longweefsels van experimenteel senescente muizen veroorzaakt door D-galactose verbeteren, evenals het gehalte aan MDA en collageen in long en plasma verminderen en het gehalte aan elastine verhogen, hebben een goed wegvangend effect op DPPH, verlengt de tijd van hypoxie bij senescente muizen, verbetert de activiteit van SOD in serum en vertraagt ​​de fysiologische degeneratie van de longen bij experimenteel senescente muizen Met cellulaire morfologische degeneratie hebben experimenten aangetoond dat Cistanche het goede antioxiderende vermogen heeft en heeft het potentieel om een ​​medicijn te zijn om huidverouderingsziekten te voorkomen en te behandelen. Tegelijkertijd heeft echinacoside in Cistanche een aanzienlijk vermogen om DPPH-vrije radicalen op te vangen en heeft het het vermogen om reactieve zuurstofsoorten op te vangen en door vrije radicalen veroorzaakte collageenafbraak te voorkomen, en heeft het ook een goed herstellend effect op schade door anionen door vrije radicalen van thymine.

Klik op Waar kan ik Cistanche kopen

【Voor meer informatie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.7. Enzymatische activiteit van de belangrijkste antioxidant-enzymen

Voor de bepaling van enzymactiviteit in hersenweefsel werd een lysisbuffer met 50 mM fosfaatbuffer (pH 7,4) en antiproteasen (1 mM EDTA, 1 mM PMSF, 1 g/ml pepstatine en 1 g/ml leupeptine) toegevoegd aan een concentratie van 50 mg/ml (w/v). Vervolgens werd de suspensie gedurende 30 seconden gesoniceerd in een ijsbad en het homogenaat werd gedurende 15 minuten bij 4 °C gecentrifugeerd bij 10,{10}× g. Supernatanten werden verzameld voor de bepaling van de enzymatische activiteit van de antioxiderende enzymen.

De activiteit van superoxidedismutase (SOD) werd gemeten door de remming van pyrogallol-auto-oxidatie bij 420 nm te volgen [69]. Eén eenheid enzym werd gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die nodig is om de auto-oxidatiesnelheid van pyrogallol met 50 procent te remmen. De SOD-enzymatische activiteit werd uitgedrukt als internationale eenheden (IU)/mg eiwit. Catalase (CAT)-activiteit werd gemeten in met Triton-X-100 (1 procent , v/v) behandelde supernatanten door waterstofperoxide (H2O2) te volgen bij 240 nm [70], en enzymactiviteit werd gerapporteerd als substraat ( µmol H2O2) getransformeerd/min · mg eiwit. Totaal glutathionperoxidase (GPx) werd bepaald na NADPH-oxidatie bij 340 nm in aanwezigheid van overmaat GR, GSH en cumeenhydroperoxide [71]. GPx-activiteit werd uitgedrukt als substraat (nmol NADPH) getransformeerd/min mg eiwit. Glutathionreductase (GR)-activiteit werd geanalyseerd na NADPH-oxidatie bij 340 nm in aanwezigheid van GSSG [72] en uitgedrukt als substraat (nmol NADPH) getransformeerd/min · mg eiwit. GR en beide GPx-activiteiten werden gecorrigeerd voor spontane reactie in afwezigheid van biologische monsters (in afwezigheid van enzym).

4.8. BACE1 Activiteitentest

Het BACE1-testprotocol omvat het gebruik van een secretase-specifiek substraat (peptide) dat is geconjugeerd aan twee reportermoleculen, namelijk EDANS en DABCYL, wat resulteert in de afgifte van een fluorescerend signaal [73,74]. De BACE1-activiteit werd zowel in de cortex als in de hippocampuslysaten gemeten. De reactie werd uitgevoerd bij 37 °C gedurende 1 uur met behulp van 10 µM substraat in 50 mM natriumacetaatbuffer (pH 4,5). Fluorescentie-intensiteitsmetingen werden uitgevoerd met behulp van een FLUOSTAR-microplaatlezer (BMG LABTECH, Ortenberg, BadenWürttemberg, Duitsland) met het excitatiefilter ingesteld op 360 nm (bandbreedte 5 nm) en het emissiefilter ingesteld op 530 nm (bandbreedte 5 nm). Het niveau van secretase-enzymatische activiteit is evenredig met de fluorometrische reactie en de gegevens worden uitgedrukt als een x-voudige toename in fluorescentie ten opzichte van die van achtergrondcontroles (reacties bij afwezigheid van substraat of weefsel). De BACE1-activiteit werd genormaliseerd met eiwitconcentratie. De BACE1-activiteit van de muizen, met quercetine of rutine behandeld, werd uitgedrukt als het percentage activiteit van dat van TgAPP-controlemuizen.

4.9. RT-PCR-genexpressie van de belangrijkste antioxidant-enzymen, APP, BACE1, ADAM10, caspase-3 en caspase-6 en ontstekingscytokines

4.9.1. Totale RNA-extractie en zuivering

We analyseerden de verschillende hersengebieden, namelijk de cortex en de hippocampus, opgeslagen bij −80 ◦C. Aan een bekende hoeveelheid hersenweefsel werd Triomol® lysisbuffer toegevoegd in een verhouding van 1:10 (w/v). Monsters werden gedurende 30 seconden gehomogeniseerd met behulp van een draadloze motor (pelletstamper, Sigma-Aldrich) en gedurende 5 minuten bij 25 °C geïncubeerd om volledige dissociatie van nucleoproteïnecomplexen mogelijk te maken. Vervolgens werd 0,2 ml chloroform toegevoegd voor elke gebruikte ml Triomol® lysisbuffer. De buisjes werden gedurende 15 seconden krachtig geschud en gedurende 3 minuten bij 25 ◦C geïncubeerd. Daarna werden ze gecentrifugeerd bij 11,000× g gedurende 15 min bij 4 ◦C. Na centrifugeren werden drie fasen verkregen, met RNA in de bovenste fase.

Om het RNA te isoleren werd de bovenste fase overgebracht naar een ander buisje en geprecipiteerd door toevoeging van 0,5 ml isopropanol. Na grondig mengen van isopropanol en waterige oplossing door inversie, werd het mengsel gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd om precipitatie te bevorderen, en gecentrifugeerd bij 12,{4} x g gedurende 10 minuten bij 4 ◦C. De supernatanten werden verwijderd en de pellets werden gewassen met 75 procent ethanol en gecentrifugeerd bij 7500 x g gedurende 5 minuten bij 4 °C. De pellets werden bij kamertemperatuur gedroogd en opgelost in 50 µl met DEPC behandeld water. Om sporen DNA te verwijderen, werd 2,5 µl DNase (RNase-vrij) toegevoegd en gedurende 30 minuten bij 37 °C geïncubeerd. Ten slotte werden monsters gedurende 5 minuten bij 64 °C geïncubeerd om het DNase te inactiveren.

Vervolgens werden de RNA-concentraties gemeten in een UV-VIS-spectrofotometer (BMG LABTECH, Ortenberg, Baden-Württemberg, Duitsland) bij 260 nm en de zuiverheid werd beoordeeld rekening houdend met de absorptieverhouding bij 260 en 280 nm (A260/A280).

De bepaling van RNA-integriteit en -zuiverheid werd uitgevoerd door elektroforese in een 1 procent agarosegel gekleurd met GelRed en gevisualiseerd onder UV-licht, waar, als het RNA intact was, twee bovenste banden overeenkomend met ribosomaal RNA (28S en 18S) en twee onderste banden. overeenkomend met transfer-RNA (tRNA) en 5S ribosomaal RNA moest worden waargenomen.

4.9.2. Complementaire DNA (cDNA) Synthese

cDNA is veel stabieler dan RNA en zorgt daarom voor een gemakkelijkere en veiligere monsterbehandeling. Het cDNA werd gesynthetiseerd uit mRNA door middel van retrotranscriptie met behulp van de First Strand cDNA Synthesis Kit voor RT-qPCR (Fermentas Life Sciences).

Om de retrotranscriptie voor cDNA-synthese tot 2 µg RNA uit te voeren, werden 11 µl met DEPC behandeld water en 1 µl 10X willekeurige primers toegevoegd. Vervolgens werd het mengsel gedurende 10 minuten bij 65 °C geïncubeerd om het RNA te denatureren. Na deze tijd werden de buisjes onmiddellijk gedurende 5 minuten op 4 ◦C gebracht om renaturatie van het RNA te voorkomen. De reagensmix voor cDNA-synthese wordt weergegeven in tabel S1 (aanvullende gegevens).

Acht µL van het reactiemengsel werd aan elk monster toegevoegd. Het volledige volume werd naar de bodem van de buizen gebracht en gedurende 60 minuten bij 42 °C geïncubeerd. Uiteindelijk werd de reactie gestopt door het reverse transcriptase te inactiveren door het gedurende 10 minuten op 70 ◦C te verhitten.

4.9.3. Realtime PCR

Het belangrijkste kenmerk van real-time PCR is dat de analyse van de producten plaatsvindt tijdens het amplificatieproces door de fluorescentie te bepalen. Op deze manier vinden de amplificatie- en detectieprocessen gelijktijdig plaats in dezelfde buis of flacon zonder dat er verdere actie nodig is. Voor real-time PCR worden thermische cyclers gebruikt, die tegelijkertijd fluorescentie kunnen versterken en detecteren. We gebruikten de LightCycler real-time thermische cycler (Roche Diagnostics, Mannheim, Duitsland).

Tabel S2 (aanvullende gegevens) somt de reagentia op die nodig zijn voor real-time PCR, met behulp van sequentiespecifieke primers en DNA-bindende kleurstof (SYBR Green I, Roche Molecular Systems, Inc., Rotkreuz, Zwitserland) als een detectiesysteem.

Voor het ontwerp van de primers voor de verschillende gekwantificeerde markers werd het bio-informaticaprogramma Primer3Plus gebruikt, waarvoor we de cDNA-sequenties van de genen van interesse uit de Medline open-access database haalden. De primers werden geleverd door Merck (Sigma-Aldrich). De hybridisatietemperatuur en de volgorde van de verschillende gebruikte primers worden weergegeven in tabel S3 (aanvullende gegevens).

De reactieomstandigheden voor de amplificatie van de genen van belang worden weergegeven in tabel S4 (aanvullende gegevens).

Ten slotte werden de monsters onderworpen aan een smeltprogramma: 95 ◦C gedurende 15 s, 65 ◦C gedurende 30 s en tot 98 ◦C met een snelheid van 0,1 ◦C/s met continue fluorescentieregistratie.

Voor de kwantificering van cDNA-niveaus werd de vergelijkingsmethode voor de cyclusdrempel (Ct) [75] gebruikt, waarbij GADPH als huishoudster werd gebruikt. De amplificatie van de huishoudster gebeurde parallel met het geanalyseerde gen. Ct-waarden werden berekend met behulp van de 4.0-software van LightCycler (Roche Diagnostics, Mannheim, Duitsland). De software maakt onderscheid tussen fluorescentie als gevolg van monsterversterking en achtergrond. Er werden ook smeltkrommen geregistreerd. Bepaling van de smelttemperatuur van het geamplificeerde fragment maakte de karakterisering van het geamplificeerde product mogelijk. De grootte van de banden werd gecontroleerd op een 1,5 procent agarosegel.

De variatie van de expressie van het onderzochte gen met de behandeling met quercetine of rutine werd uitgedrukt als een functie van de controle TgAPP (muizen zonder behandeling) en het normaliseren van deze expressie met de niveaus van GADPH. De veranderingsvouw (2−∆∆Ct) vertegenwoordigt het aantal keren dat het gen van interesse wordt gewijzigd onder de specifieke behandeling met betrekking tot de controlemuizen.

4.10. Statistische analyse

Alle tests werden ten minste in duplo en in drie verschillende experimenten uitgevoerd. De verkregen resultaten worden uitgedrukt als het gemiddelde ± standaardfout. One-way variantieanalyse (ANOVA) werd uitgevoerd nadat de gegevens waren getest en hadden aangetoond dat ze in een normale verdeling passen. De post-hoc tests van Newman-Keuls met meervoudige vergelijkingen werden uitgevoerd, waarbij de gemiddelde verschillen tussen groepen werden onderzocht. Waarden van p < 0.05 werden als significant beschouwd. SigmaPlot 11.0-software werd gebruikt voor statistische analyses.

5. Conclusies

Voedingsgewoonten en suppletie kunnen de cellulaire redoxstatus beïnvloeden. Op basis hiervan wilden we de cellulaire redox-homeostase verbeteren in een AD-muismodel met een flavonoïde dieet dat quercetine of rutine bevat om amyloïde pathologie te verlichten, rekening houdend met de wisselwerking tussen cellulaire redoxstatus en proteasoomafhankelijke amyloïde kenmerken bij asymptomatische AD. Onze datasets zijn relevant omdat de flavonoïde-effecten die worden weergegeven in het TgAPP-muismodel consistent zijn met de effecten die eerder zijn gerapporteerd in onze in vitro- en ex vivo-modellen.

Concluderend tonen onze bevindingen aan dat het starten van een dieetbehandeling in het asymptomatische stadium of het begin van AD-achtige symptomen de cellulaire redoxstatus en APP-fysiologische verwerking zou kunnen herstellen via gelijktijdige regularisatie van APP-expressie en BACE1-activiteit.

Hoewel het moeilijk is om onze bevindingen te extrapoleren naar de menselijke conditie, kunnen ze brede implicaties hebben voor de menselijke reactie op toekomstige therapieën. Van de twee flavonoïden lijkt rutine, met over het algemeen meer prominente in vivo effecten, het meest geschikt om te worden opgenomen in een dagelijkse voeding als adjuvante therapie bij AD, gebaseerd op de vergroting van intracellulaire redoxhomeostase van de hersenen.

Aanvullende materialen:De volgende ondersteunende informatie kan op de website worden gedownload. Referentie [76] wordt geciteerd in de aanvullende materialen.

Bijdragen van auteurs:PB-B. en SM-A. bedacht het idee en het experimentele ontwerp, hielp bij de experimenten, interpreteerde de verkregen resultaten en schreef het manuscript. KLJ-A. voerde de experimenten uit, voerde de data-analyses uit en interpreteerde de verkregen resultaten. JB hielp met data-analyse en revisie van het manuscript. Alle gegevens werden in eigen beheer gegenereerd en er werd geen papierfabriek gebruikt. Alle auteurs stemmen ermee in verantwoordelijk te zijn voor alle aspecten van het werk en daarbij integriteit en nauwkeurigheid te waarborgen. Alle auteurs hebben de gepubliceerde versie van het manuscript gelezen en gaan ermee akkoord.

Financiering:Dit onderzoek werd gefinancierd door de Medical Research Foundation «Mutua Madrileña» (vierde editie van Grants for Medical Research Projects), het Spaanse Ministerie van Onderwijs en Wetenschap (Ref. AGL2008-04892-C03-02) en de Spaans Ministerie van Wetenschap en Innovatie (Ref. CTQ2010-16170).

Verklaring van de institutionele beoordelingsraad:Dierprotocollen werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) aan de Complutense Universiteit van Madrid en waren volledig in overeenstemming met de Europese Richtlijn 2010/63/betreffende de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt en de Spaanse wetgeving inzake dierenwelzijn ( Koninklijk Besluit 53/2013, 1 februari 2013).

Geïnformeerde toestemmingsverklaring:Niet toepasbaar.

Verklaring gegevensbeschikbaarheid:De gegevens die de bevindingen van deze studie ondersteunen, zijn op redelijk verzoek verkrijgbaar bij de corresponderende auteur.

dankbetuigingen:Wij danken Stichting Folch voor een predoctorale beurs aan KLJA.

Belangenconflicten:De auteurs verklaren dat er geen belangenconflicten zijn.

Afkortingen

AD, de ziekte van Alzheimer; ADAM-10, een desintegrine- en metalloproteïnasedomein-bevattend eiwit 10; APP, Amyloïde voorlopereiwit; APPswe, Zweedse mutatie van het amyloïde voorlopereiwit; A, amyloïde-; BACE1, -site APP-splitsend enzym 1; KAT, Katalase; GPx, glutathionperoxidase; GR, glutathionreductase; GSH, Gereduceerd glutathion; GSSG, geoxideerd glutathion; SOD, Superoxide-dismutase.

Referenties

1. Ebenau, JL; Pelkmans, W.; Verberk, IMW; Verfaillie, SCJ; van den Bosch, KA; van Leeuwenstijn, M.; Collij, LE; Scheltens, P.; Prins, ND; Barkhof, F.; et al. Associatie van CSF-, plasma- en beeldvormingsmarkers van neurodegeneratie met klinische progressie bij mensen met subjectieve cognitieve achteruitgang. Neurologie 2022, 98, e1315-e1326. [Kruisreferentie] [PubMed]

2. Dominguez, LJ; Veronese, N.; Vernuccio, L.; Catanese, G.; Inzerillo, F.; Salemi, G.; Barbagallo, M. Voeding, lichaamsbeweging en andere leefstijlfactoren bij de preventie van cognitieve achteruitgang en dementie. Voedingsstoffen 2021, 13, 4080. [CrossRef]

3. Tsarbopoulos, A. De ziekte van Alzheimer: onderzoek naar de 'medicinale borst' van de natuur voor nieuwe therapeutische middelen. Biomol. Concepten 2020, 11, 201–208. [Kruisreferentie] [PubMed]

4. Ashe, KH; Zahs, KR Onderzoek naar de biologie van de ziekte van Alzheimer bij muizen. Neuron 2010, 66, 631-645. [Kruisreferentie] [PubMed]

5. Zahs, KR; Ashe, KH 'Te veel goed nieuws' - Proberen de muismodellen van Alzheimer ons te vertellen hoe we de ziekte van Alzheimer kunnen voorkomen, niet genezen? Trends Neurowetenschappen. 2010, 33, 381-389. [KruisRef]

6. Foley, AM; Ammar, ZM; Lee, RH; Mitchell, CS Systematisch overzicht van de relatie tussen amyloïde-niveaus en metingen van cognitieve stoornissen bij transgene muizen bij de ziekte van Alzheimer. J. Alzheimer Dis. 2015, 44, 787-795. [KruisRef]

7. Anand David, A.; Arulmoli, R.; Parasuraman, S. Overzichten van het biologische belang van quercetine: een bioactieve flavonoïde. Pharm. Rev. 2016, 10, 84-89.

8. Habtemariam, S. Rutine als natuurlijke therapie voor de ziekte van Alzheimer: inzicht in de werkingsmechanismen. Curr. Med. Chem. 2016, 23, 860–873. [KruisRef]

9. Martín-Aragón, S.; Jiménez-Aliaga, K.; Benedí, J.; Bermejo-Bescós, P. Neurohormetische reacties van quercetine en rutine in een cellijn die het amyloïde precursor-eiwit (APPswe-cellen) tot overexpressie brengt. Phytomedicine 2016, 23, 1285-1294. [KruisRef]

10. Zhou, W.; Qing, H.; Tong, Y.; Song, W. BACE1 genexpressie en eiwitafbraak. Ann. NY Acad. Wetenschap. 2004, 1035, 49-67. [KruisRef]

11. Gutbier, S.; Spreng, ALS; Delp, J.; Schildknecht, S.; Karreman, C.; Suciu, ik.; Brunner, T.; Groettrup, M.; Leist, M. Preventie van neuronale apoptose door astrocyten door thiol-gemedieerde stressresponsmodulatie en versneld herstel van proteotoxische stress. Celdood verschilt. 2018, 25, 101-117. [Kruisreferentie] [PubMed]

12. Aoyama, K. Glutathion in de hersenen. Int. J Mol. Wetenschap. 2021, 22, 5010. [CrossRef] [PubMed]

13. Scholey, A. Voedingsstoffen voor neurocognitie bij gezondheid en ziekte: maatregelen, methodologieën en mechanismen. Proc. Nutr. Soc. 2018, 77, 73-83. [Kruisreferentie] [PubMed]

14. Apelt, J.; Bigl, M.; Wunderlich, P.; Schliebsm, R. Verouderinggerelateerde toename van oxidatieve stress correleert met het ontwikkelingspatroon van bèta-secretase-activiteit en bèta-amyloïde plaquevorming bij transgene Tg2576-muizen met Alzheimer-achtige pathologie. Int. J. Dev. Neurowetenschappen. 2004, 22, 475-484. [Kruisreferentie] [PubMed]

15. Howlett, DR; Richardson, JC De pathologie van APP-transgene muizen: een model van de ziekte van Alzheimer of simpelweg overexpressie van APP? Histol. Histopathol. 2009, 24, 83-100. [PubMed]

16. Cencioni, C.; Spallotta, F.; Martelli, F.; Valente, S.; Mai, A.; Zeiher, AM; Gaetano, C. Oxidatieve stress en epigenetische regulatie bij veroudering en leeftijdsgerelateerde ziekten. Int. J Mol. Wetenschap. 2013, 14, 17643-17663. [KruisRef]

17. Tsang, AH; Chung, KK Oxidatieve en nitrosatieve stress bij de ziekte van Parkinson. Biochim. Biophys. Acta 2009, 1792, 643-650. [KruisRef]

18. Mandal, PK; Saharan, S.; Tripathi, M.; Murari, G. Brain glutathion-niveaus - Een nieuwe biomarker voor milde cognitieve stoornissen en de ziekte van Alzheimer. Biol. Psychiatrie 2015, 78, 702-710. [KruisRef]

19. Chen, JJ; Thiyagarajah, M.; Lied, J.; Chen, C.; Hermann, N.; Gallagher, D.; Rapport, MJ; Zwart, ZO; Ramírez, J.; Andreazza, AC; et al. Veranderd centraal en bloedglutathion bij de ziekte van Alzheimer en milde cognitieve stoornissen: een meta-analyse. Alzheimer res. Daar. 2022, 14, 23. [KruisRef]

20. Pocernich, CB; Butterfield, DA Verhoging van glutathion als een therapeutische strategie bij de ziekte van Alzheimer. Biochim. Biophys. Acta (BBA)-Mol. Basis Dis. 2012, 1822, 625-630. [KruisRef]

21. Raza, A.; Xie, W.; Kim, KH; Dronamraju, VR; Williams, J.; Vince, R.; Meer, SS-dipeptide van ψ-GSH remt oxidatieve stress en neuro-inflammatie in een muismodel voor de ziekte van Alzheimer. Antioxidanten 2022, 11, 1075. [CrossRef] [PubMed]

22. Yang, H.; Xie, Z.; Wei, L.; Ding, M.; Wang, P.; Bi, J. Glutathion-mimetic D609 verlicht geheugentekorten en vermindert amyloïde-afzetting in een A PP/PS1 transgeen muismodel. Neurorapport 2018, 29, 833-838. [Kruisreferentie] [PubMed]

23. Guerrero-Gómez, D.; Mora-Lorca, JA; Sáenz-Narciso, B.; Naranjo-Galindo, FJ; Muñoz-Lobato, F.; Parrado-Fernández, C.; Goikolea, J.; Cedazo-Minguez, A.; Koppeling, CD; Neri, C.; et al. Verlies van glutathion redox-homeostase schaadt proteostase door autofagie-afhankelijke eiwitafbraak te remmen. Celdood verschilt. 2019, 26, 1545–1565. [Kruisreferentie] [PubMed]

24. Lefaki, M.; Papaevgeniou, N.; Chondrogianni, N. Redox-regulatie van de proteasoomfunctie. Redox biol. 2017, 13, 452-458. [Kruisreferentie] [PubMed]

25. Bonet-Costa, V.; Pomatto, LC; Davies, KJ Het proteasoom en oxidatieve stress bij de ziekte van Alzheimer. antioxidant. Redox-signaal. 2016, 25, 886-901. [KruisRef]

26. Belkacemi, A.; Ramassamy, C. Tijdvolgorde van oxidatieve stress in de hersenen van transgene muismodellen van de ziekte van Alzheimer gerelateerd aan de amyloïde cascade. Gratis radicaal. Biol. Med. 2012, 52, 593-600. [KruisRef]

27. Tanigawa, S.; Fujii, M.; Hou, DX Actie van Nrf2 en Keap1 in ARE-gemedieerde NQO1-expressie door quercetine. Gratis radicaal. Biol. Med. 2007, 42, 1690-1703. [KruisRef]

28. Chondrogianni, N.; Kapeta, S.; Chinou, ik.; Vassilatou, K.; Papassideri, ik.; Gonos, ES Anti-aging en verjongende effecten van quercetine. Exp. Gerontol. 2010, 45, 763-771. [KruisRef]

29. Bodendorf, U.; Danner, S.; Fischer, F.; Stefani, M.; Sturchler-Pierrat, C.; Wiederhold, KH; Staufenbiel, M.; Paganetti, P. Expressie van menselijke beta-secretase in de muizenhersenen verhoogt het steady-state niveau van beta-amyloïde. J.Neurochem. 2002, 80, 799-806. [KruisRef]

30. Yamakawa, H.; Yagishita, S.; Futai, E.; Ishiura, S. bèta-Secretase-remmerpotentie wordt verminderd door afwijkende bèta-splitsingslocatie van het "Zweedse mutante" amyloïde voorlopereiwit. J. Biol. Chem. 2010, 285, 1634-1642. [KruisRef]

31. Keller, D.; Erö, C.; Markram, H. Celdichtheden in de muizenhersenen: een systematische review. Voorkant. Neuroanat. 2018, 12, 83. [CrossRef] [PubMed]

32. Mladenovic Djordjevic, AN; Kapetanou, M.; Loncarevic-Vasiljkovic, N.; Todorovic, S.; Athanasopoulou, S.; Jovic, M.; Prvulovic, M.; Taoufik, E.; Matsas, R.; Kanazir, S.; et al. Farmacologische interventie in een transgeen muismodel verbetert het met Alzheimer geassocieerde pathologische fenotype: betrokkenheid van proteasoomactivering. Gratis radicaal. Biol. Med. 2021, 162, 88-103. [Kruisreferentie] [PubMed]

33. Tamagno, E.; Bardini, P.; Guglielmotto, M.; Danni, O.; Tabaton, M. De verschillende aggregatietoestanden van bèta-amyloïde 1-42 mediëren verschillende effecten op oxidatieve stress, neurodegeneratie en BACE-1-expressie. Gratis radicaal. Biol. Med. 2006, 41, 202-212. [Kruisreferentie] [PubMed]

34. Jorissen, E.; Prox, J.; Bernreuther, C.; Weber, S.; Schwanbeck, R.; Serneels, L.; Snellinx, A.; Craessaerts, K.; Thathiah, A.; Tesseur, ik.; et al. De desintegrine/metalloproteïnase ADAM10 is essentieel voor de vorming van de hersenschors. J. Neurosci. 2010, 30, 4833-4844. [KruisRef]

35. Kuhn, PH; Wang, H.; Dislich, B.; Colombo, A.; Zeitschel, U.; Elwart, JW; Kremmer, E.; Rossner, S.; Lichtenthaler, SF ADAM10 is de fysiologisch relevante, constitutieve -secretase van het amyloïde voorlopereiwit in primaire neuronen. EMBO J. 2010, 29, 3020-3032. [KruisRef]

36. Postina, R.; Schröder, A.; Dewachter, I.; Bohl, J.; Schmitt, U.; Kojro, E.; Prinsen, C.; Endres, K.; Hiemke, C.; Zegen, M.; et al. Een desintegrine-metalloproteïnase voorkomt de vorming van amyloïde plaques en defecten in de hippocampus in een muismodel met de ziekte van Alzheimer. J Clin. Onderzoeken 2004, 113, 1456-1464. [KruisRef]

37. Elfiky, AM; Mahmud, AA; Elreedy, HA; Ibrahim, KS; Ghazy, MA Quercetine stimuleert de niet-amyloïdogene route via activering van ADAM10- en ADAM17-genexpressie in door aluminiumchloride geïnduceerd Alzheimer-rattenmodel. Levenswetenschappen. 2021, 285, 119964. [KruisRef]

38. Copanaki, E.; Chang, S.; Vlachos, A.; Tschape, JA; Müller, UC; Kögel, D.; Deller, T. sAPPalpha antagoneert dendritische degeneratie en neuronsterfte veroorzaakt door proteasomale stress. mol. Cel Neurosci. 2010, 44, 386-393. [KruisRef]

39. Renziehausen, J.; Hiebel, C.; Nagel, H.; Kundu, A.; Kins, S.; Kogel, D.; Behl, C.; Hajieva, P. Het splitsingsproduct van amyloïde-bèta-eiwitprecursor sAbetaPPalpha moduleert BAG{2}}afhankelijke agressieve vorming en verbetert cellulaire proteasomale activiteit. J. Alzheimer Dis. 2015, 44, 879-896. [KruisRef]

40. Livingstone, RW; Ouderling, MK; Singh, A.; Westlake, CM; Tate, WP; Abraham, WC; Williams, JM Secreted Amyloid Precursor Protein-Alpha verbetert LTP door de synthese en handel in Ca2 plus -permeabele AMPA-receptoren. Voorkant. mol. Neurowetenschappen. 2021, 14, 660208. [KruisRef]

41. Crawford, HC; Dempsey, PJ; Bruin, G.; Adam, L.; Moss, ML ADAM10 als een therapeutisch doelwit voor kanker en ontsteking. Curr. Pharm. des. 2009, 15, 2288-2299. [Kruisreferentie] [PubMed]

42. Saftig, P.; Lichtenthaler, SF De alfasecretase ADAM10: een metalloprotease met meerdere functies in de hersenen. prog. Neurobiol. 2015, 135, 1–20. [Kruisreferentie] [PubMed]

43. Borreca, A.; Geroni, K.; Amadoro, G.; Ammassari-Teule, M. Tegengestelde ontregeling van Fragile-X mentale retardatie-eiwit en heteronucleaire ribonucleoproteïne C-eiwitassociaties met verbeterde APP-vertaling bij de ziekte van Alzheimer. mol. Neurobiol. 2016, 53, 3227-3234. [Kruisreferentie] [PubMed]

44. Augustinus, S.; Rimbach, G.; Augustinus, K.; Schliebs, R.; Wolffram, S.; Cermak, R. Effect van een korte- en langetermijnbehandeling met Ginkgo biloba-extract op amyloïde precursor-eiwitniveaus in een transgeen muismodel dat relevant is voor de ziekte van Alzheimer. Boog. Biochem. Biophys. 2009, 481, 177-182. [Kruisreferentie] [PubMed]

45. Borreca, A.; Valeri, F.; De Luca, M.; Ernst, L.; Russo, A.; Nobili, A.; Cordella, A.; Korsetti, V.; Amadoro, G.; Mercuri, NB; et al. Voorbijgaande opregulatie van translationele efficiëntie in prodromale en vroege symptomatische Tg2576-muizen draagt ​​bij aan A-pathologie. Neurobiol. Dis. 2020, 139, 104787. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​D'Amelio, M.; Sheng, M.; Cecconi, F. Caspase-3 in het centrale zenuwstelsel: voorbij apoptose. Trends Neurowetenschappen. 2012, 35, 700-709. [KruisRef]

47. Ertürk, A.; Wang, Y.; Sheng, M. Lokale snoei van dendrieten en stekels door caspase-3-afhankelijke en proteasoom-beperkte mechanismen. J. Neurosci. 2014, 34, 1672-1688. [KruisRef]

48. D'Amelio, M.; Cavallucci, V.; Middei, S.; Marchetti, C.; Pacioni, S.; Ferri, A.; Diamantini, A.; De Zio, D.; Carrara, P.; Battistini, L.; et al. Caspase-3 veroorzaakt vroege synaptische disfunctie in een muismodel van de ziekte van Alzheimer. Nat. Neurowetenschappen. 2011, 14, 69-76. [KruisRef]

49. Gervais, FG; Xu, D.; Robertson, GS; Vaillancourt, JP; Zhu, Y.; Huang, J.; LeBlanc, A.; Smit, D.; Rigby, M.; Shearman, MS; et al. Betrokkenheid van caspasen bij proteolytische splitsing van het amyloïde-bèta-precursoreiwit van Alzheimer en de vorming van amyloïdogene A-bèta-peptiden. Cel 1999, 97, 395-406. [KruisRef]

50. Park, G.; Nhan, HS; Tyan, SH; Kawakatsu, Y.; Zhang, C.; Navarro, M.; Koo, EH Caspase-activering en caspase-gemedieerde splitsing van APP is geassocieerd met amyloïde-eiwit-geïnduceerd synapsverlies bij de ziekte van Alzheimer. Cell Rep. 2020, 31, 107839. [CrossRef]

51. Lu, gelijkstroom; Rabizadeh, S.; Chandra, S.; Shayya, RF; Ellerby, LM; Ja, X.; Salvesen, GS; Koo, EH; Bredesen, DE Een tweede cytotoxisch proteolytisch peptide afgeleid van amyloïde beta-eiwitprecursor. Nat. Med. 2000, 6, 397-404. [Kruisreferentie] [PubMed]

52. LeBlanc, AC Caspase-6 als een nieuw vroeg doelwit bij de behandeling van de ziekte van Alzheimer. EUR. J. Neurosci. 2013, 37, 2005-2018. [KruisRef]

53. Albrecht, S.; Bogdanovic, N.; Ghetti, B.; Winblad, B.; LeBlanc, AC Caspase-6-activering in familiale hersenen met de ziekte van Alzheimer die amyloïde voorlopereiwit of preseniline I- of preseniline II-mutaties dragen. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2009, 68, 1282-1293. [Kruisreferentie] [PubMed]

54. Morihara, T.; Teter, B.; Yang, F.; Lim, huisarts; Boudinot, S.; Boudinot, FD; Frautschy, SA; Cole, GM Ibuprofen onderdrukt interleukine-1bèta-inductie van pro-amyloïdogene alfa1-antichymotrypsine om beta-amyloïde (Abeta) pathologie in Alzheimer-modellen te verbeteren. Neuropsychofarmacologie 2005, 30, 1111-1120. [Kruisreferentie] [PubMed]

55. Niu, YL; Zhang, WJ; Wu, P.; Liu, B.; Zon, GT; Yu, DM; Deng, JB Expressie van de apoptose-gerelateerde eiwitten caspase-3 en NF-kappaB in de hippocampus van Tg2576-muizen. Neurowetenschappen. Stier. 2010, 26, 37-46. [KruisRef]

56. Voller, S.; Steele, M.; Munch, G. Geactiveerde astroglia tijdens chronische ontsteking bij de ziekte van Alzheimer - verwaarlozen ze hun neuroondersteunende rol? Mutat. Res. 2010, 690, 40-49. [KruisRef]

57. Lee, M.; Cho, T.; Jantaratnotai, N.; Wang, YT; McGeer, E.; McGeer, PL Uitputting van GSH in gliacellen veroorzaakt neurotoxiciteit: relevantie voor veroudering en degeneratieve neurologische aandoeningen. FASEB J. 2010, 24, 2533-2545. [KruisRef]

58. Hensley, K. Neuro-inflammatie bij de ziekte van Alzheimer: mechanismen, pathologische gevolgen en potentieel voor therapeutische manipulatie. J. Alzheimer Dis. 2010, 21, 1–14. [KruisRef]

59. Lu, J.; Wu, DM; Zheng, YL; Middelpunt.; Zhang, ZF; Shan, Q.; Zheng, ZH; Liu, CM; Wang, YJ Quercetine activeert AMP-geactiveerde proteïnekinase door de PP2C-expressie te verminderen en oude muizenhersenen te beschermen tegen door hoge cholesterol geïnduceerde neurotoxiciteit. J Pathol. 2010, 222, 199-212. [KruisRef]

60. Chen, JC; Hoe, FM; Chao, PDL; Chen, CP; Jeng, KC; Hsu, HB; Lee, ST; Wen Tung, W.; Lin, WW Remming van iNOS-genexpressie door quercetine wordt gemedieerd door de remming van IkappaB-kinase, nucleaire factor-kappa B en STAT1, en is afhankelijk van heem-oxygenase-1-inductie in muis-BV-2-microglia. EUR. J. Pharmacol. 2005, 521, 9–20. [KruisRef]

61. Dwivedi, D.; Megha, K.; Mishra, R.; Mandal, PK Glutathione in Brain: overzicht van de conformaties, functies, biochemische kenmerken, kwantificering en potentiële therapeutische rol bij hersenaandoeningen. Neurochem. Res. 2020, 45, 1461–1480. [Kruisreferentie] [PubMed]

62. Rossner, S.; Sastre, M.; Bourne, K.; Lichtenthaler, SF Transcriptionele en translationele regulatie van BACE1-expressie - implicaties voor de ziekte van Alzheimer. prog. Neurobiol. 2006, 79, 95-111. [Kruisreferentie] [PubMed]

63. Westerman, MA; Cooper-Blacketer, D.; Mariash, A.; Kotilinek, L.; Kawarabayashi, T.; Younkin, links; Carlson, GA; Younkin, SG; Ashe, KH De relatie tussen Abeta en geheugen in het Tg2576-muismodel van de ziekte van Alzheimer. J. Neurosci. 2002, 22, 1858-1867. [Kruisreferentie] [PubMed]

64. Irizarry, MC; Locascio, JJ; Hyman, BT Beta-site APP-splitsingsenzym-mRNA-expressie in APP-transgene muizen: anatomische overlap met transgene expressie en statische niveaus met veroudering. Ben. J Pathol. 2001, 158, 173-177. [Kruisreferentie] [PubMed]

65. Hsiao, K.; Chapman, P.; Nilsen, S.; Eckman, C.; Harigaya, Y.; Younkin, S.; Yang, F.; Cole, G. Correlatieve geheugentekorten, Abeta-verhoging en amyloïde plaques bij transgene muizen. Wetenschap 1996, 274, 99-102. [Kruisreferentie] [PubMed]

66. Hsiao, K. Transgene muizen die amyloïde voorlopereiwitten van Alzheimer tot expressie brengen. Exp. Gerontol. 1998, 33, 883-889. [KruisRef]

67. Simon, AM; Schiaparelli, L.; Salazar-Colocho, P.; Cuadrado-Tejedor, M.; Escribano, L.; López de Maturana, R.; Del Río, J.; Pérez-Mediavilla, A.; Frechilla, D. Overexpressie van wildtype menselijk APP bij muizen veroorzaakt cognitieve tekorten en pathologische kenmerken die geen verband houden met Abeta-niveaus. Neurobiol. Dis. 2009, 33, 369-378. [KruisRef]

68. Senft, AP; Dalton, TP; Shertzer, HG Bepaling van glutathion en glutathiondisulfide met behulp van de fluorescentiesonde oftalaldehyde. Anaal. Biochem. 2000, 280, 80–86. [KruisRef]

69. Marklund, S.; Marklund, G. Betrokkenheid van het superoxide-anionradicaal bij de auto-oxidatie van pyrogallol en een handige test voor superoxide-dismutase. EUR. J. Biochem. 1974, 47, 469-474. [KruisRef]

70. Aebi, H. Catalase in vitro. Methoden Enzymol. 1984, 105, 121-126.

71. Barja de Quiroga, G.; Perez-Campo, R.; Lopez Torres, M. Anti-oxidant afweer en peroxidatie in lever en hersenen van oude ratten. Biochem. J. 1990, 272, 247-250. [Kruisreferentie] [PubMed]

72. Massey, V.; Williams, CH, Jr. Over het reactiemechanisme van glutathionreductase in gist. J. Biol. Chem. 1965, 240, 4470-4480. [KruisRef]

73. Jash, K.; Gondaliya, P.; Sunkaria, A.; Kalia, K. MicroRNA-29b Moduleert -Secretase-activiteit in de SH-SY5Y-cellijn en diabetische muizenhersenen. Cel mol. Neurobiol. 2020, 40, 1367-1381. [Kruisreferentie] [PubMed]

74. Jimenez-Aliaga, K.; Bermejo-Bescos, P.; Benedi, J.; Martin-Aragon, S. Quercetine en rutine vertonen in vitro anti-amyloïdogene en fibrildesaggregerende effecten en krachtige antioxiderende activiteit in APPswe-cellen. Levenswetenschappen. 2011, 89, 939-945. [Kruisreferentie] [PubMed]

75. Ramos, CA; Boogschutter, TA; Boles, NC; Koopman, AA; Zheng, Y.; Parra, ik.; Fuqua, SA; Shaw, CA; Goodell, MA Bewijs voor diversiteit in transcriptionele profielen van enkelvoudige hematopoëtische stamcellen. PLoS Genet. 2006, 2, e159.

76. Schmued, LC; Stowers, CC; Schaaltje, AC; Xu, L. Fluoro-Jade C resulteert in ultrahoge resolutie en contrastlabeling van degenererende neuronen. Hersenonderzoek. 2005, 1035, 24-31. [Kruisreferentie] [PubMed]

Disclaimer/Opmerking van de uitgever:De verklaringen, meningen en gegevens in alle publicaties zijn uitsluitend die van de individuele auteur(s) en bijdrager(s) en niet van MDPI en/of de redacteur(en). MDPI en/of de redacteur(en) wijzen alle verantwoordelijkheid af voor enig letsel aan mensen of eigendommen als gevolg van ideeën, methoden, instructies of producten waarnaar in de inhoud wordt verwezen.

【Voor meer informatie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】