Abstract

Achtergrond:Bloedplaatjesaggregatie en geavanceerde glycatie-eindproducten (AGE's) en oxidatieve stress staan ​​bekend als sleutelfactoren voor de ontwikkeling van hart- en vaatziekten en diabetische complicaties. In deze context is de consumptie van groenten en fruit, goede bronnen van antioxidanten, grotendeels gerapporteerd als een effectieve manier om mensen tegen deze ziekten te voorkomen. De huidige studie richt zich op de evaluatie van antioxiderende, antibloedplaatjes- en anti-glycatie-activiteiten van granaatappel (Punica granatum L.) bloemen (PF), bladeren (PL), schil (PP), sap (PJ) en zadenolie (PSO). .

Glycoside van cistanche kan ook de activiteit van SOD in hart- en leverweefsels verhogen en het gehalte aan lipofuscine en MDA in elk weefsel aanzienlijk verminderen, waardoor verschillende reactieve zuurstofradicalen (OH-, H₂O₂, enz.) door OH-radicalen. Cistanche-fenylethanoïdeglycosiden hebben een sterk wegvangend vermogen van vrije radicalen, een hoger reducerend vermogen dan vitamine C, verbeteren de activiteit van SOD in spermasuspensie, verminderen het gehalte aan MDA en hebben een zeker beschermend effect op de functie van het spermamembraan. Cistanche-polysacchariden kunnen de activiteit van SOD en GSH-Px in erytrocyten en longweefsels van experimenteel senescente muizen veroorzaakt door D-galactose verbeteren, evenals het gehalte aan MDA en collageen in long en plasma verminderen en het gehalte aan elastine verhogen, hebben een goed wegvangend effect op DPPH, verlengt de tijd van hypoxie bij senescente muizen, verbetert de activiteit van SOD in serum en vertraagt ​​de fysiologische degeneratie van de longen bij experimenteel senescente muizen Met cellulaire morfologische degeneratie hebben experimenten aangetoond dat Cistanche het goede antioxiderende vermogen heeft en heeft het potentieel om een ​​medicijn te zijn om huidverouderingsziekten te voorkomen en te behandelen. Tegelijkertijd heeft echinacoside in Cistanche een aanzienlijk vermogen om DPPH-vrije radicalen op te vangen en reactieve zuurstofsoorten op te vangen, door vrije radicalen veroorzaakte collageenafbraak te voorkomen en heeft het ook een goed herstellend effect op anionschade door vrije radicalen van thymine.

Klik op Cistanche en Tongkat Ali Reddit

【Voor meer info: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

methoden: Antioxidant-activiteiten werden gemeten tegen ABTS-radicaal- en lipideperoxidatie. Antiglycatie-activiteit werd bepaald met behulp van de vorming van AGE-fluorescentie-intensiteit in het BSA/ribose-systeem. De antibloedplaatjesactiviteit werd gemeten in bloedplaatjesrijk plasma (PRP) tegen adenosinedifosfaat (ADP), collageen en arachidonzuur (AA).

Resultaten:PF-extract vertoonde de hoogste antioxidantactiviteit tegen ABTS en lipideperoxidatie met IC50-waarden van respectievelijk 0.7mg/mL en 0.63mg/mL. Voor anti-glycatie-activiteit remden PP, PF en PL matig de vorming van pentosidine-achtige AGE's in vergelijking met positieve controles met een AGE-IC50-waarde van 0,4 mg/ml. PJ en PSO hebben geen anti-AGE-effect. Alle extracten remden selectief de bloedplaatjesaggregatie veroorzaakt door één, twee of drie inductoren op een dosisafhankelijke manier. PF was de krachtigste remmer veroorzaakt door alle drie de inductoren, met remmende effecten variërend van 35,6 tot 66,6 procent. PP en PJ vertoonden een plaatjesaggregatieremmend effect tegen zowel ADP als collageen en PL en PSO alleen tegen AA.

Conclusies:Deze resultaten suggereren dat sommige granaatappelextracten potentiële in vitro antiglycatie- en antibloedplaatjesactiviteiten uitoefenen

Trefwoorden:Granaatappel, plaatjesaggregatieremmende activiteit, geavanceerde glycatie-eindproducten, oxidatieve stress, lipideperoxidatie

Achtergrond

Granaatappel (Punica granatum L.), staat algemeen bekend als een zeer krachtige antioxidantfruit [1-3]. Er is gemeld dat de antioxiderende kracht van granaatappelsap 3-maal hoger is dan die van rode wijn of groene thee [4] en 8-maal hoger dan die in sinaasappelsap [5]. Bovendien is een natuurlijke vrucht waarnaar veel onderzoek wordt gedaan, de granaatappel en zijn bestanddelen waarvan is gemeld dat ze een sterke biologische activiteit en medicinale waarde hebben. Van granaatappelsap, schil, zadenolie, bladeren en bloemextracten is beschreven dat ze zowel in vitro als in vivo antidiabetische [6], ontstekingsremmende [7], antioxiderende, anti-obesitas [8] en antitumoreffecten hebben [ 9]. Deze gunstige effecten houden verband met de aanwezigheid van zeer hoge niveaus van antioxidanten zoals polyfenolverbindingen, waaronder hydrolyseerbare tannines, anthocyanines en flavonolen [10]. In onze eerdere onderzoeken naar de antidiabetische effecten van granaatappel, benadrukken de resultaten de neuroprotectieve effecten van granaatappelextracten en tonen ze aan dat een langdurige inname van granaatappel een mogelijke alternatieve strategie kan zijn voor de preventie van een door HFD (High Fat High Fructose Diet) geïnduceerde insuline weerstand en oxidatieve stress [6, 11]. De consumptie van granaatappelsap, bladeren en schillen resulteerde in een significante verlaging van de nuchtere plasmaglucose- en insulinespiegels. Bijgevolg werd de homeostatische index van insulineresistentie (HOMA-IR), die wordt gebruikt om insulineresistentie te kwantificeren, respectievelijk verlaagd, wat wijst op een significante verbetering van de insulinegevoeligheid.

In deze context hebben we geprobeerd het effect van granaatappelextracten te evalueren tegen de meest bekende diabetescomplicaties zoals bloedplaatjesaggregatie en geavanceerde glycatie-eindproducten (AGE's) waarvan is gemeld dat ze verband houden met de progressie van diabetes en veroudering [12, 13] . De remming van de bloedplaatjesfunctie wordt al lange tijd gebruikt als een strategie voor de behandeling van acute vasculaire atherotrombotische aandoeningen zoals diabetes, hart- en vaatziekten en ischemische beroerte [14, 15]. Geavanceerde glycatie-eindproducten (AGE's) worden in verband gebracht met een groter risico op diabetische complicaties zoals diabetische retinopathie, neuropathie en nefropathie [16]. Bovendien zijn er weinig rapporten uitgebracht over het remmende effect van verschillende granaatappelboomdelen op AGE-vorming [17] of bloedplaatjesaggregatie [18]. In dit werk hebben we in vitro de anti-AGE- en antibloedplaatjescapaciteiten en enkele antioxiderende activiteiten van granaatappelsap (PJ), schil (PP), bloemen (PF), bladeren (PL) en zadenolie (PSO) onderzocht.

methoden

Plantaardig materiaal en extractie

Bladeren en fruit werden in oktober 2021 geoogst van Tounsi-granaatappelbomen uit de Mahdia-regio, Tunesië. De authenticiteit van de variëteit werd bevestigd door taxonoom Dr. Faten Zaouay van het Department of Horticulture, Higher Agronomic Institute, Chott-Meriem (Universiteit van Sousse, Tunesië), en een exemplaar van een voucher werd gedeponeerd in onze nationale collectie die in tweevoud wordt bijgehouden in Gabes en Chott-Mariem (Sousse), met de code 'TNl, TN2, TN3, TN5, TN5".

Granaatappelextracten werden bereid zoals beschreven in onze vorige studie [11]. Fruit werd gewassen en met de hand geschild. Arils werden geperst met behulp van een commerciële blender (Moulinex, Frankrijk). Het geëxtraheerde sap werd 15 minuten gecentrifugeerd bij 15.000 rpm. Vervolgens werd het supernatant gerecupereerd en gelyofiliseerd. Bladeren, bloemen en fruitschillen werden gedroogd, verpoederd en geëxtraheerd met methanol (MeOH) 50 g/250 ml in het donker gedurende 48 uur. Elk extract werd gefiltreerd door Whatman nr. 42 filtreerpapier en drooggedampt met behulp van een rotatieverdamper (Heidolph, Duitsland) onder vacuüm bij 45 graden en bewaard bij -20 graden voor verdere bepaling. Granaatappelpitten werden gedroogd en verpoederd. Olie werd gewonnen door de methodes van soxhlet. Ongeveer 30 g zaden werden geëxtraheerd met 200 ml hexaan bij kamertemperatuur gedurende 6 uur. Het oplosmiddel werd verwijderd door verdamping bij 40 graden en de olie werd gespoeld met een stikstofstroom en opgeslagen bij -20 graden in afgesloten buizen.

ABTS radicale scavenging-test

De antioxidantcapaciteit van granaatappelextracten door de ABTS (2,2′-casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonzuur)-assay werd gemeten met een eerdere methode [19]. In het kort, ABTS• plus radicaal oplossing werd geproduceerd door de ABTS-voorraadoplossing (5 mM) te laten reageren met kaliumpersulfaat (K2S2O8)-oplossing (2,7 mM). Voor de beoordeling van de antioxidantcapaciteit werd de ABTS• plus-oplossing verdund met fosfaatbuffer (20 mM, pH 7,4) om een ​​absorptie te verkrijgen van 0 0,700 ± 0,020 bij 660 nm. Ten, ABTS• plus-oplossing werd gemengd met granaatappelextracten bereid in verschillende concentraties. Na incubatie werd de absorptie gemeten bij 734 nm. Ascorbinezuur werd gebruikt als de positieve controle Het percentage remming van ABTS• plus radicaal werd berekend met de volgende formule:

Acontrole verwijst naar de oplossing die pure MeOH bevat in plaats van het monster, en een monster verwijst naar de absorptie van oplossingen die granaatappelextract bevatten. De effectieve concentratie van het monster is nodig om de absorptie ABTS•plus met 50 procent te verlagen (EC50).

Lipideperoxidatie met behulp van de ferrithiocyanaatmethode

De remming van lipideperoxidatie door granaatappelextracten werd getest volgens de voorgaande procedure [20]. Linolzuur (LA) werd gebruikt als de lipidenmatrix en 2,2'-azobis (2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH) als de vrije-radicaalinitiator. Er werden verschillende concentraties van elk granaatappelextract bereid. Elke concentratie werd gemengd met 1,3 procent (w/v) methanolische LA en 0.2M fosfaatbuffer (pH 7,0) en de peroxidatie werd geïnitieerd door de toevoeging van AAPH-oplossing (55,3 mM) in fosfaatbuffer. De controle-oplossing werd bereid door pure MeOH toe te voegen in plaats van het monster. Na incubatie bij 50 graden gedurende 24 uur in het donker werd het reactiemengsel opgelost in een 3:1 (v/v) H2O-MeOH-oplossing. Tien, een 10 procent waterige oplossing van NH4SCN en 20 mM FeCl2 in 3,5 procent HC1 werden toegevoegd. Na 3 minuten incubatie bij kamertemperatuur werd de absorptie gemeten bij 546 nm ten opzichte van de overeenkomstige blanco. Ascorbinezuur werd gebruikt als de positieve controle. De resultaten worden uitgedrukt als het percentage remming van lipideperoxidatie:

Een controleverwijst naar de oplossing die pure MeOH bevat in plaats van het monster, en een monster verwijst naar de absorptie van oliehoudende oplossingen. De EC50 werd bepaald.

Geavanceerde remmingstest van glycatie-eindproducten

Remming van de vorming van pentosidine-achtige AGE's en EC50-waarden werden bepaald en berekend met behulp van een eerder beschreven methode door Séro et al. 2013, met kleine aanpassingen [21]. In het kort werd BSA (10 mg/ml) geïncubeerd met D-ribose (0,5 M) samen met het geteste extract in 50 mM fosfaatbuffer bij pH 7,4 (NaN3, 0,02 procent). Oplossingen werden geïncubeerd in microtiterplaten met 96-putjes bij 37 graden gedurende 24 uur in een gesloten systeem vóór AGE-fluorescentiemeting. Fluorescentie resulterend uit de incubatie, onder dezelfde BSA (10 mg/ml) en geteste extractieomstandigheden, werd voor elke meting afgetrokken. Pentosidine-achtige (Aexc 335nm, Aem 385nm) AGE's fluorescentie werd gemeten met behulp van een microplaat spectrofluorometer. Het percentage AGE-vorming werd als volgt berekend voor elke extractconcentratie en de EC50-waarden werden bepaald:

AGE's ( procent )=[fluorescentie-intensiteit (monster) − fluorescentie-intensiteit (blanco van het monster)] ∗100/[fluorescentie-intensiteit (controle) − fluorescentie-intensiteit (blanco van controle)]

In vitro evaluatie van anti-bloedplaatjesaggregatie-activiteit

Vers bloed werd verkregen van gezonde vrijwilligers met een negatieve geschiedenis van consumptie van medicijnen, dranken of voedsel die de aggregatie gedurende ten minste 10 dagen kunnen beïnvloeden en die bij voorkeur 's nachts hadden moeten vasten omdat de aanwezigheid van chylomicron ook de aggregatiepatronen kan verstoren. De studie werd goedgekeurd door de lokale ethische commissie van het Universitair Ziekenhuis Hedi Chaker van Sfax, Tunesië.

Veneus bloed werd verzameld in een plastic buis die trinatriumcitraat 109 mM bevatte. PRP werd verkregen door gedurende 12 minuten te centrifugeren bij kamertemperatuur bij 200 x g. PRP werd zorgvuldig verwijderd om besmetting met rode bloedcellen of buffy coat te voorkomen, en tot het moment van testen bij kamertemperatuur bewaard. Alle tests moeten binnen 3 uur na het opstellen van de PRP zijn voltooid. Het resterende bloed werd vervolgens gedurende 20 minuten bij 2000 x g gecentrifugeerd om plaatjesarm plasma (PPP) te verkrijgen. We gebruikten een screeningpanel van aggregatiemiddelen: adenosine 5'-difosfaat (ADP, 20 μM), collageen (5 ug / ml) en arachidonzuur (2 mM).

PRP en PPP werden gebruikt om respectievelijk 0 en 100 procent lichttransmissie in de aggregometer in te stellen. De bloedplaatjesaggregatie werd gevolgd gedurende ten minste 5 minuten na toevoeging van een agonist.

Voor extracten van granaatappelbladeren (PL), bloemen (PF), sap (PJ) en schil (PP) werden vooraf verschillende concentraties bereid voor elk extract opgelost in DMSO (bij {{0}}.05 procent uiteindelijk concentratie). Voor PSO werden verschillende concentraties opgelost in 70 procent polyethyleenglycol (PEG), een veelgebruikt oplosmiddel in vivo om in water onoplosbare verbindingen op te lossen. Tien microliter van elk extract werd toegevoegd aan 260 μl controle-PRP en vervolgens werd het mengsel gedurende ten minste 5 minuten (tot 30 minuten) bij 37 graden geïncubeerd voordat agonisten werden toegevoegd. Tien collageen (5 µg/ml), AA (2 mM) of ADP (20 μmol/L) werd toegevoegd en de verandering van de vorm van de bloedplaatjes en aggregatie werden gedurende 5 minuten gevolgd. DMSO (0,5 procent v/v) werd gebruikt als negatieve controle en aspirine werd gebruikt als positieve controle.

Aggregatie van D=bloedplaatjes in aanwezigheid van teststoffen

S=bloedplaatjesaggregatie in aanwezigheid van een oplosmiddel.

De bloedplaatjesaggregatieremmende activiteit werd uitgedrukt als percentage remming in vergelijking met die gemeten voor het vehiculum (DMSO of PEG) alleen. Elk monster werd in drievoud gemeten en de gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde ± SD. De waarden van effectieve concentraties vereist voor 50 procent remming van bloedplaatjesaggregatie (EC50) werden verkregen uit ten minste drie bepalingen.

statistische analyse

Resultaten werden uitgedrukt als het gemiddelde van ten minste drie onafhankelijke metingen, tenzij standaarddeviaties zijn gerapporteerd (gemiddelden ± SD) en geanalyseerd met behulp van SPSS ver. 21.0, professionele editie. Voor antioxiderende activiteiten werd de Duncan-test gebruikt om de significantie van de belangrijkste effecten te schatten op het waarschijnlijkheidsniveau van 5 procent (P<0.05).

resultaten en discussie

Antioxiderende eigenschappen van granaatappelextracten

De antioxidantcapaciteiten van granaatappelextracten werden gemeten met ABTS en lipideperoxidatietesten. De resultaten zijn samengevat in tabel 1 en zijn uitgedrukt als de EC50-waarde. Lagere EC5{{10}} wees op hogere antioxidantactiviteit. Het bleek dat de extracten van elkaar verschillen wat betreft hun antioxiderende effecten. PF vertoonde bijvoorbeeld de hoogste antioxidantactiviteit tegen ABTS met EC50-waarden van 0,7 mg/ml, zelfs superieur aan het standaard ascorbinezuur dat een IC50 van 1,4 mg/ml had. PF vertoonde de op één na laagste EC50 voor de lipideperoxidatietest (0,63 mg/ml), iets groter dan het standaard ascorbinezuur (0,52 mg/ml), maar dit verschil was niet statistisch significant (p < 0,05). PP-extract gevolgd door PL- en PJ-extracten kunnen de vrije radicalen ABTS effectief verminderen. Dezelfde volgorde werd gevonden in lipideperoxidatietesten. PSO vertoonde echter de zwakste antioxidantactiviteit in beide in vitro assays. Er is gemeld dat er een vaststaand verband bestaat tussen het fenolgehalte en de antioxidantcapaciteit [22]. In onze vorige studie [23] bestudeerden we de fenolische inhoud van granaatappelbloemen, bladeren, schil en sap en vergeleken we hun reducerend vermogen en anti-DPPH-activiteit. De resultaten tonen aan dat alle organen ook een effectief reducerend vermogen en antiradicale activiteit hadden. Bloemen en bladeren waren rijker aan fenolen en bleken de sterkste antioxidanten te zijn.

Anti‑AGEs-capaciteiten van granaatappelextracten

The anti-glycation capacities of pomegranate extracts evaluated by their inhibition of the formation of global fluorescent AGEs in the BSA/ribose system are depicted in Fig. 1 and Table 2. PP, PF, and PL extracts demonstrated a dose-response inhibition of the pentosidine-like AGEs formation (Fig. 1) with an AGE-EC50 value of 0.4mg/ml  (Table 2). This anti-AGEs capacity is considered moderate compared to that exhibited by Aminoguanidine (AGEEC50; 0.16-0.17mg/mL) and weak compared to Rutoside trihydrate (AGE-EC50; 0.05mg/mL). However, results show that PJ and PSO haven't any anti-AGE effect (AGEEC50; >1mg/ml). In een dubbelblinde studie concludeerde Sohrab (2015) dat granaatappelsap (Punica granatum) de lipideperoxidatie vermindert, maar geen effect heeft op plasma geavanceerde geglyceerde eindproducten bij volwassenen met diabetes type 2 [24]. Onze resultaten met betrekking tot granaatappelsap zijn niet in overeenstemming met enkele eerdere bevindingen gerapporteerd door Liu (2014), die ontdekte dat extract van granaatappelfruit (PFE) krachtige anti-glycatie-activiteit vertoonde [25]. De anti-glycatie-activiteit van verschillende granaatappelextracten kan worden toegeschreven aan hun fenolische bestanddelen. Kumagai (2015) toonde aan dat de vorming van AGE's afgeleid van BSA met glucose, fructose en glyceraldehyde in vitro afhankelijk van de concentratie werd onderdrukt door de toevoeging van granaatappelfruitextract PFE en zijn fenolische componenten zoals punicaline, punicalagin, ellaginezuur en galluszuur. zuur [17].

Antibloedplaatjesactiviteit van granaatappelextracten

Granaatappeldelen werden geëvalueerd op hun vermogen om bloedplaatjesaggregatie van menselijk PRP geïnduceerd door ADP, collageen en AA te remmen als krachtige aggregatie-inductoren. Tabel 3 toont de remmende effecten van verschillende extracten bij verschillende concentraties en aspirine als positieve controle en Tabel 4 vat de EC50-waarden van granaatappelextracten of verbindingen samen met de gemiddelde waarden van drie metingen. Alle extracten remden selectief de bloedplaatjesaggregatie veroorzaakt door één, twee of drie inductoren op een dosisafhankelijke manier.

Bloemenextract bleek de krachtigste remmer van bloedplaatjesaggregatie te zijn, veroorzaakt door alle drie de inductoren, met remmende effecten variërend van 35,6 tot 66,6 procent bij 3,5 mg / ml. Het was actief tegen door collageen geïnduceerde bloedplaatjesaggregatie met een EC50-waarde van 2,8 mg/ml, vervolgens tegen AA-geïnduceerde bloedplaatjesaggregatie met een EC50-waarde van 3,85 mg/ml en met 4.{ {15}} mg/ml wanneer aggregatie werd gestimuleerd door ADP. Vergeleken met aspirine als positieve controle hebben PF, PP en PJ remmende effecten tegen door collageen geïnduceerde aggregatie. Aspirine remde echter de door AA en ADP geïnduceerde aggregatie met een EC50 van respectievelijk 0,42 en 0,66 mg/ml, maar tegen collageen werd geen effect gevonden. In deze studie en onze vorige studie [23], bleek PF het meest antioxiderende granaatappelonderdeel te zijn tegen DPPH-radicaal, ABTS-radicaal en lipideperoxidatie in vergelijking met PP, PL en PJ. Deze bevinding zou kunnen verklaren waarom PF de beste remmer van bloedplaatjesaggregatie was. Bovendien is PF rijk aan fenolen (16,6 procent), waaronder voornamelijk gehydrolyseerde tannines (ellagitannine) en aan oplosbare voedingsvezels (30,2 procent) [26]. Van gehydrolyseerde tannines is eerder aangetoond dat ze zeer effectief zijn bij het remmen van de bloedplaatjesfunctie [18]. Aan de andere kant was de plaatjesaggregatieremmende activiteit van voedingsvezels nat onzeker [27, 28]. We veronderstelden dus dat de krachtige en multi-targeted antibloedplaatjesactiviteit van PF kan worden toegeschreven aan gehydrolyseerde tannines, belangrijke fenolen die in dit orgaan worden aangetroffen.

PP en PJ vertoonden remmende effecten tegen zowel ADP als collageen-geïnduceerde aggregatie van bloedplaatjes. Er werd echter voor beide extracten geen effect aangetoond wanneer AA als agonist werd gebruikt. Onze resultaten bevestigen niet die gevonden door Mattiello et al., 2009 die aantonen dat beide extracten de respons van bloedplaatjes op AA remmen [18]. De vergelijking van EC50-waarden onthulde dat PP ADP en collageen-geïnduceerde bloedplaatjesaggregatie efficiënter verminderde dan PJ.

Het verschil in remmende werking tussen beide extracten kan worden verklaard door het verschil in antioxidantcapaciteit. PP was een krachtigere antioxidant dan PJ tegen ABTS-radicalen en lipideperoxidatie in deze studie en ook tegen DPPH-radicaal en reducerend vermogen [23]. Deze verklaring was in strijd met sommige eerdere rapporten die suggereerden dat het antibloedplaatjespotentieel van fruit geen verband leek te houden met of tegengesteld was aan hun antioxiderende activiteit [29, 30]. PL en PSO waren in staat om alleen door ADP veroorzaakte bloedplaatjesaggregatie te remmen, terwijl ze niet effectief waren wanneer collageen en AA als agonisten werden gebruikt.

Conclusie

Concluderend hebben granaatappelbloemen, -bladeren en -schil in vitro remmende effecten op eiwitglycatie en aggregatie van bloedplaatjes. Deze effecten werden toegeschreven aan de antioxiderende eigenschappen van verschillende actieve bestanddelen van granaatappel. Er is echter verder onderzoek nodig om deze resultaten te bevestigen en om een ​​beter begrip te krijgen van het werkingsmechanisme voordat het wordt voorgesteld als een natuurlijke AGE-remmer. De antioxiderende eigenschap? Actieve stoffen in granaatappel dragen mogelijk bij aan deze eigenschappen.

Afkortingen

AA: arachidonzuur; AAPH: 2,2'-azobis (2-methylpropionamidine) dihydrochloride; ABTS: 2,2′-casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonzuur; ADP: adenosinedifosfaat (ADP); AGE's: geavanceerde glycatie-eindproducten; BSA: Bovin Serum Albumin; DMSO: dimethylsulfoxide ; FeCl2: ferrochloride; HCl: chloorwaterstofzuur; HFD: vetrijk dieet met hoog fructosegehalte; K2S2O8: kaliumpersulfaatoplossing; LA: linolzuur; MeOH: methanol; NaN3: natriumazide; NH4SCN: ammoniumthiocyanaat; PEG: polyethyleenglycol; PRP : Bloedplaatjesrijk plasma PPP: Bloedplaatjesarm plasma.

Dankbetuigingen

Verklaring plantrichtlijnen

De authenticiteit van het ras werd bevestigd door taxonoom Dr. Faten Zaouay van het Department of Horticulture, Higher Agronomic Institute, Chott-Meriem (Universiteit van Sousse, Tunesië), en een exemplaar van een voucher werd gedeponeerd in onze nationale collectie die in tweevoud wordt bijgehouden in Gabes en Chott-Mariem (Sousse), met de code 'TNl, TN2, TN3, TN5, TN5'. De studie voldoet aan relevante institutionele, nationale en internationale richtlijnen en wetgeving, en toestemming voor het verzamelen van Punica granatum L. werd verkregen van het Regionaal Onderzoekscentrum op Tuinbouw en biologische Chott-Mariem, IRESA-Universiteit van Sousse, 8.P.57-4042, Tunesië.

Bijdragen van auteurs

ZA en IA; methodiek, ZA; en IA; software, AZ en RC; validatie, middelen, ZA; schrijven—originele conceptvoorbereiding, JG; supervisie, MH en SH; schrijven - beoordelen en bewerken. Alle auteurs hebben de gepubliceerde versie van het manuscript gelezen en gaan ermee akkoord.

Financiering

Dit werk werd gefinancierd door het Ministerie van Hoger Onderwijs en Wetenschappelijk Onderzoek-Tunesië.

Beschikbaarheid van gegevens en materialen

De datasets die tijdens het huidige onderzoek zijn gegenereerd en/of geanalyseerd, zijn op redelijk verzoek verkrijgbaar bij de corresponderende auteur.

Verklaringen

Ethische goedkeuring en toestemming om deel te nemen

Deze studie werd goedgekeurd door de lokale ethische commissie van het Universitair Ziekenhuis Hedi Chaker van Sfax, Tunesië. Alle experimenten werden uitgevoerd volgens relevante richtlijnen en voorschriften. Geïnformeerde toestemming werd verkregen van alle proefpersonen en/of hun wettelijke voogd(en).

Toestemming voor publicatie

Niet toepasbaar.

Concurrerende belangen

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Auteur Details

1 Laboratorium voor biochemie, LR12ES05 "Nutrition- Functional Foods and vascular Health", Faculteit Geneeskunde, Universiteit van Monastir, 5019 Monastir, Tunesië. 2 Centre Régional de Transfusion Sanguine de Sfax, Route El-Ain Km 0.5, CP 3003 Sfax, Tunesië.

Referenties

1. Hanafy SM, Abd El-Shafea YM, Saleh WD, Fathy HM. Chemische profilering, in vitro antimicrobiële en antioxiderende werking van granaatappel-, sinaasappel- en bananenschilextracten tegen pathogene micro-organismen. J Genet Eng Biotechnol. 2021;19:80.

2. Benchagra L, Berrougui H, Islam MO, Ramchoun M, Boulbaroud S, Hajjaji A, et al. Antioxiderende werking van Marokkaanse granaatappel (variëteit Punica granatum L. Sefri) extracten rijk aan Punicalagin tegen het oxidatieve stressproces. Voedingsmiddelen. 2021;10:2219.

3. Akuru EA, Chukwuma CI, Oyeagu CE, Erukainure OL, Mashile B, Setlhodi R, et al. Voedings- en fytochemisch profiel van granaatappel ("prachtige variëteit") schil en de effecten ervan op oxidatieve stress in de lever en metabole veranderingen. J Voedsel Biochem. 2022:46.

4. Gil MI, Tomas-Barberan FA, Hess-Pierce B, Holcroft DM, Kader AA. Antioxiderende activiteit van granaatappelsap en de relatie met fenolische samenstelling en verwerking. J Agric Food Chem. 2000;48:4581–9.

5. Rosenblat M, Hayek T, Aviram M. Anti-oxidatieve effecten van consumptie van granaatappelsap (PJ) door diabetespatiënten op serum en op macrofagen. Atherosclerose. 2006; 187: 363-71.

6. Amri Z, Ben Khedher MR, Zaibi MS, Kharroubi W, Turki M, Ayadi F, et al. Anti-diabetische effecten van granaatappelextracten bij langdurig met fructose gevoede ratten met een hoog fructosegehalte. Clin Fytowetenschap. 2020;6:55.

7. Harzallah A, Hammami M, Kępczyńska MA, Hislop DC, Arch JRS, Cawthorne MA, et al. Vergelijking van mogelijke preventieve effecten van granaatappelbloem, schil en zaadolie op insulineresistentie en ontsteking in een vetrijk en sucroserijk dieet-geïnduceerd obesitas-muismodel. Arch Physiol Biochem. 2016;122:75-87.

8. Al-Muammar MN, Khan F. Obesitas: de preventieve rol van de granaatappel (Punica granatum). Voeding. 2012;28:595-604.

9. Amri Z, Kharroubi W, Fidanzi-Dugas C, Leger DY, Hammami M, Liagre B. Groeiremmende en pro-apoptotische effecten van siergranaatappelextracten in Du145 menselijke prostaatkankercellen. Nutr Kanker. 2020;72:932–8.

10. Arlotta C, Puglia GD, Genovese C, Toscano V, Karlova R, Beekwilder J, et al. MYB5-like en bHLH beïnvloeden de samenstelling van flavonoïden in granaatappel. planten sc. 2020;298:110563.

11. Amri Z, Ghorbel A, Turki M, Akrout FM, Ayadi F, Elfeki A, et al. Effect van granaatappelextracten op hersen-antioxidantmarkers en cholinesterase-activiteit bij vet- en fructoserijk dieet-geïnduceerde obesitas in een rattenmodel. BMC Aanvulling Alternatief Med. 2017;17:339.

12. Okura T, Ueta E, Nakamura R, Fujioka Y, Sumi K, Matsumoto K, et al. Hoge serum geavanceerde glycatie-eindproducten worden geassocieerd met verminderde insulinesecretie bij patiënten met diabetes type 2: een kort rapport. J Diabetes Res. 2017;2017.

13. Al-Sofani ME, Yanek LR, Faraday N, Kral BG, Mathias R, Becker LC, et al. Diabetes en reactie van bloedplaatjes op een lage dosis aspirine. J Clin Endocrinol Metab. 2018;103:4599–608.

14. McEwen BJ. De invloed van voeding en voedingsstoffen op de bloedplaatjesfunctie. Semin Tromb Hemost. 2014;40:214–26.

15. Lim ST, Coughlan CA, Murphy SJX, Fernandez-Cadenas I, Montaner J, Thijs V, et al. Bloedplaatjesfunctietesten bij voorbijgaande ischemische aanval en ischemische beroerte: een uitgebreide systematische review van de literatuur. Bloedplaatjes. 2015;26:402–12.

16. Dhananjayan K, Forbes J, Münch G. Geavanceerde glycatie, diabetes en dementie. In: diabetes type 2 en dementie; 2018. p. 169-93.

17. Kumagai Y, Nakatani S, Onodera H, Nagatomo A, Nishida N, Matsuura Y, et al. Anti-glycatie-effecten van granaatappel (Punica granatum L.) fruitextract en zijn componenten in vivo en in vitro. J Agric Food Chem. 2015;63:7760–4.

18. Mattiello T, Trifrò E, Jotti GS, Pulcinelli FM. Effecten van granaatappelsap en extract polyfenolen op de bloedplaatjesfunctie. J Med-eten. 2009;12:334–9.

19. Delgado-Andrade C, Morales FJ. Ontrafelen van de bijdrage van melanoidines aan de antioxiderende werking van koffiebrouwsels. J Agric Food Chem. 2005;53:1403–7.

20. Olszewska MA, Presler A, Michel P. Profilering van fenolverbindingen en antioxiderende activiteit van droge extracten van de geselecteerde Sorbus-soorten. Moleculen. 2012;17:3093-113.

21. Sero L, Sanguinet L, Blanchard P, Dang BT, Morel S, Richomme P, et al. Het afstemmen van een 96-well-microtiterplaat-fluorescentie-gebaseerde assay om AGE-remmers in ruwe plantenextracten te identificeren. Moleculen. 2013;18:14320-39.

22. Piluzza G, Bullitta S. Correlaties tussen fenolgehalte en antioxiderende eigenschappen in vierentwintig plantensoorten van traditioneel etnoveterinair gebruik in het Middellandse Zeegebied. Pharm Biol. 2011;49:240-7.

23. Amri Z, Zaouay F, Lazreg-Aref H, Soltana H, Mneri A, Mars M, et al. Fytochemisch gehalte, samenstelling van vetzuren en antioxidantpotentieel van verschillende granaatappeldelen: vergelijking tussen eetbare en niet-eetbare variëteiten geteeld in Tunesië. Int J Biol Macromol. 2017;104:274–80.

24. Sohrab G, Angoorani P, Tohidi M, Tabibi H, Kimiagar M, Nasrollahzadeh J. Granaatappelsap (Punicagranatum) vermindert de peroxidatie van lipiden, maar heeft geen invloed op plasma-geavanceerde geglyceerde eindproducten bij volwassenen met diabetes type 2: een gerandomiseerde dubbel- blinde klinische proef. Voedsel. nutr res. 2015:59.

25. Liu W, Ma H, Frost L, Yuan T, Dain JA, Seeram NP. Granaatappelfenolen remmen de vorming van geavanceerde glycatie-eindproducten door reactieve carbonylspecies op te vangen. Voedselfunctie. 2014;5:2996-3004.

26. Aviram M, Volkova N, Coleman R, Dreher M, Reddy MK, Ferreira D, et al. Granaatappelfenolen uit de schillen, zaadlijsten en bloemen zijn antiatherogeen: studies in vivo bij atherosclerotische apolipoproteïne E-deficiënte (E0) muizen en in vitro in gekweekte macrofagen en lipoproteïnen. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2008;56:1148-57.

27. Hannan JMA, Rokeya B, Faruque O, Nahar N, Mosihuzzaman M, Azad Khan AK, et al. Effect van oplosbare voedingsvezelfractie van Trigonella foenum graecum op de glycemische, insulinemische, lipidemische en bloedplaatjesaggregatiestatus van type 2 diabetische modelratten. J Ethnopharmacol. 2003;88:73-7.

28. Bagger M, Andersen O, Nielsen JB, Ryttig KR. Voedingsvezels verlagen de bloeddruk, het totale serumcholesterol en de aggregatie van bloedplaatjes bij ratten. Br J Nutr. 1996;75:483-93.

29. Dutta-Roy AK, Gordon MJ, Kelly C, Hunter K, Crosbie L, Knight-Carpentar T, et al. Remmend effect van Ginkgo biloba-extracten op de aggregatie van menselijke bloedplaatjes. Bloedplaatjes. 1999;10:298-305.

30. Dutta-Roy AK, Crosbie L, Gordon MJ. Effecten van tomatenextract op de aggregatie van menselijke bloedplaatjes in vitro. Bloedplaatjes. 2001; 12: 218-27.

Opmerking van de uitgever 

Springer Nature blijft neutraal over jurisdictieclaims in gepubliceerde kaarten en institutionele voorkeuren.

【Voor meer info: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】