Abstract:Blootstelling aan ultraviolet (UV) veroorzaakt fotoveroudering van de huid, wat leidt tot rimpels en verslapping van de huid via de productie van reactieve zuurstofspecies (ROS). Om deze reden is bescherming tegen fotoveroudering een belangrijk kenmerk van cosmeceutische en dermatologische producten. Van natuurlijke producten afgeleide biomaterialen zijn zeer gewenst als toekomstige mogelijke ingrediënten, omdat deze biomaterialen vaak veilig en effectief zijn. In deze studie wilden we de huidbeschermende activiteit van Pradosia multisite karakteriseren, traditioneel gebruikt om zonnebrand en erytheem te behandelen. We bepaalden de vrije radicalen wegvangende, anti-melanogene en hydraterende effecten van een methanolextract van Pradosia multisite (Pm-ME) in keratinocyten (HaCaT-cellen), melanocyten (B16F10-cellen) en fibroblasten (humane dermale fibroblasten (HDF's)) bij niet-cytotoxische concentraties. Het multi-site methanol-extract van Pradosia bevat coumarinezuur als hoofdbestanddeel en het extract vertoonde een beschermende activiteit tegen door UVB en H2O2-geïnduceerde cytotoxiciteit. Dit extract onderdrukte ook de expressie van metalloproteïnasen (MMP's) en cyclo-oxygenase (COX)-2 in HaCaT-cellen. Een vermindering van Sirt-1-expressie onder UVB- en H2O2-behandelde omstandigheden werd teruggevonden in HaCaT-cellen door Pm-ME. Dit extract vertoonde significante vrije radicalen wegvangende activiteit volgens de 2,20 -casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonzuur) diammoniumzout (ABTS) assay. De Pm-ME reguleerde ook de expressieniveaus van hyaluronzuursynthase (HAS) en transglutaminase-1 (TGM-1) in HaCaT-cellen, wat wijst op een vermoedelijke hydraterende activiteit. Interessant is dat de expressie van het collageen type 1 (Col1A1) -gen en zijn promotoractiviteit, zoals beoordeeld door een reportergentest, verhoogd bleek te zijn in HDF- en HEK293-cellen. Evenzo hielp Pm-ME het collageengehalte te herstellen na UVB- en H2O2-behandeling in HDF's en verminderde het de synthese en secretie van melanine uit B16F10-melanoomcellen, wat kan wijzen op een gunstige cosmetische waarde voor het bleken. De p38-remmer SB203580 en de JNK-remmer SP600125 onderdrukten MMP-9- en COX-2-expressie in met H2O2-behandelde HaCaT-cellen. Evenzo remde de ERK-remmer U0126 HAS-2 in met Pm-ME/H2O2-behandelde HaCaT-cellen. Deze bevindingen suggereerden dat remming van JNK en p38 en activering van ERK het doelwit zou kunnen zijn van Pm-ME. Daarom kan Pm-ME anti-fotoveroudering en anti-melanogene eigenschappen uitoefenen via de regulatie van mitogeen-geactiveerde proteïnekinase, wat gunstig zou kunnen zijn in de cosmeceutische industrie.

Volgens relevante studies,cistancheis een veel voorkomendekruiddat staat bekend als "het wonderkruid dat het leven verlengt". Het hoofdbestanddeel iscistanoside, wat verschillende effecten heeft, zoalsantioxidant, ontstekingsremmend, Enbevordering van de immuunfunctie. Het mechanisme tussen cistanche enbleken van de huidligt in het antioxiderende effect van cistanche-glycosiden. Melanine in de menselijke huid wordt geproduceerd door deoxidatievan tyrosine gekatalyseerd doortyrosinase, en de oxidatiereactie vereist de deelname van zuurstof, dus de zuurstofvrije radicalen in het lichaam worden een belangrijke factor die van invloed ismelanineproductie. Cistanche bevat cistanoside, een antioxidant en kan de aanmaak ervan verminderenvrije radicalenin het lichaam, waardoor de productie van melanine wordt geremd.

Klik op Cistanche Tubulosa-supplement voor bleken

Vraag voor meer:

david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501

1. Inleiding

De huid is het grootste orgaan in het lichaam, dat dient als een barrière tussen het organisme en de omgeving, en is verantwoordelijk voor het in stand houden van de homeostase van de huid en bepaalt uiteindelijk de overleving van het organisme [1]. De huid is georganiseerd met de epidermis, dermis met adnexale structuren en onderhuids vet [2]. Bovendien is de huid belangrijk voor continue communicatie met immuun-, neurale en endocriene systemen [3], het biedt vooral bescherming tegen ziekteverwekkers, chemicaliën, lichamelijk letsel en ultraviolette (UV) straling [4]. Ultraviolette spectra zijn verdeeld in drie zones, UVC (200 tot 280 nm), UVB (280 tot 320 nm) en UVA (320 tot 400 nm) [5]. Hiervan wordt UVB voornamelijk geabsorbeerd door de bovenste lagen van de huidepidermis en door de papillaire dermis, terwijl UVA de reticulaire dermis binnendringt met een 1000 keer lagere efficiëntie bij het induceren van verschillende biologische effecten, vergeleken met UVB [5]. Hoewel UVC zeer reactief is en wordt geabsorbeerd door het stratum corneum, wordt het grotendeels verwijderd door de ozonlaag en de atmosfeer. Als een belangrijke UV-bestralingsbron kan UVB leiden tot de productie van reactieve zuurstofspecies (ROS) zoals waterstofperoxide (H2O2) via activering van ROS-genererende enzymen, waaronder NADPH-oxidase, xanthine-oxidase en D-aminozuuroxidase [6– 8] en de inductie van fotoveroudering van de huid, wat leidt tot rimpels en verslapping van de huid [9,10]. Bovendien is gemeld dat de reactie op oxidatieve stress verschillende schade aan cellulaire componenten veroorzaakt, zoals cellulaire membraanlipiden, eiwitten en nucleïnezuren [11]. Deze beschadigde huidcellen kunnen ontstekingsreacties op gang brengen die uiteindelijk leiden tot schade die zich manifesteert in een chronisch blootgestelde huid [12].

Oxidatieve stress induceert de activering van inflammatoire en redoxgevoelige transcriptiefactoren, nucleaire factor (NF)-KB en activatorproteïne (AP)-1, en hun stroomopwaartse signaalenzymen waaronder mitogeen-geactiveerde proteïnekinasen (MAPK's) zoals extracellulaire signaalgereguleerd kinase (ERK), p38 en c-Jun-N-terminale kinase (JNK) in de AP-1-route, of als een remmer van κB (IκB ), IκB kinase (IKK / ), en AKT in de NF-KB-route gekoppeld aan de inductie van ontsteking en rimpelvorming [13]. Extracellulaire signaalgereguleerde kinase bemiddelt normaal gesproken cellulaire reacties gerelateerd aan groeifactoren, JNK en p38-gemedieerde cellulaire reacties gerelateerd aan cytokines en fysieke stress [14]. Door mitogeen geactiveerde proteïnekinasen kunnen ook de productie van proteolytische matrixmetalloproteïnasen (MMP's) induceren [15], die collageenafbraak induceren en zo de elasticiteit van de huid verminderen [16]. Met betrekking tot deze componenten, anti-oxidatieve componenten of extracten zoals ginsenoside, curcumine, epicatechine, asiaticoside, ziyuglycoside I, magnolol, galluszuur, hydroxychavicol, hydroxykaneelzuren, glycyrrhizinezuur, mangiferine, Mirko, rozemarijnzuur, tectorigenine, tyrosol, BIOGF1K en hydroalcoholisch extract van Spartium junceum L.-volgers zijn gebruikt voor de ontwikkeling van producten tegen huidveroudering [17-21]. Omdat oxidatieve stress bekend staat als een belangrijke oorzaak van ziekten bij de mens en het verouderingsproces dat een lang leven beïnvloedt, worden secundaire bioactieve metabolieten in menselijke diëten metaantioxidatieve eigenschappenworden beschouwd als waardevolle ingrediënten [22,23].

Andere aan fotoveroudering gerelateerde genen zijn cyclo-oxygenase-2 (COX-2) en Sirt-1. Cyclo-oxygenase-2 komt gewoonlijk tot overexpressie in premaligne door UV geïnduceerde huidlaesies [24], en de remming ervan kan kwaadaardige transformatie in de opperhuid verminderen [25]. Sirt-1-expressie kan celapoptose voorkomen en celoverleving verhogen [26]. Een ander beschermingsmechanisme tegen UVB-straling is de productie van melanine, een pigment dat wordt gesynthetiseerd in melanocyten en verder wordt uitgescheiden naar de keratinocyten in de epidermislaag [1]. Melanine wordt geproduceerd door de oxidatie van L-tyrosine en de daaropvolgende omzetting in L-dihydroxyfenylalanine (L-DOPA) [6] door katalysatie met het koperafhankelijke enzym tyrosinase [27]. Ondanks zijn beschermende functie kan de overmatige productie van melanine ouderdomsvlekken veroorzaken [28], melisma en hyperpigmentatie [29]. Vanwege de huidige trend die een lichte huidskleur als de schoonheidsstandaard beschouwt, zijn preparaten voor het bleken van de huid die hypergepigmenteerde laesies bleken of bleken van de huid, zeer wenselijk geworden in de farmaceutische en cosmeceutische industrieën [29]. Er is dus veel aandacht besteed aan de ontwikkeling van preparaten die de melaninesynthese verminderen [30]. Omdat huidveroudering gepaard gaat met verlies van huidvocht, is voldoende hydratatie een belangrijke overweging voor het behoud van een gezonde huid [31]. Hyaluronzuur (HA), een hoogmoleculair glycosaminoglycaan met hydrofiele eigenschappen, draagt ​​bij aan de hydratatie en plastische eigenschappen van de huid door de expressie van hyaluronzuursynthasen (HAS's) te reguleren [32]. Een ander belangrijk gen in de huid is collageen, dat ondersteuning biedt aan epidermale structuren [33] en daarom verantwoordelijk is voor de sterkte en veerkracht van de huid [34] en waarvan de afbraak leidt tot zowel huidverslapping als rimpelvorming. Daarnaast is transglutaminase-1 (TGM-1) een epidermaal constitutief tot expressie gebracht enzym dat de vorming van verhoornde epidermale celomhulsels katalyseert, waardoor waterverlies wordt voorkomen [35,36].

De Sapotaceae-familie wordt voornamelijk gedistribueerd in de tropische en subtropische gebieden van Azië en Meso-Amerika. Veel Sapotaceae-familiesoorten produceren eetbare vruchten met een hoge economische waarde. Deze vruchten zijn gebruikt voor medicinale doeleinden. Met name de zaden zijn rijk aan voedingsstoffen, plantaardige vetten, eiwitten en andere heilzame stoffen. Mamey-olie wordt bijvoorbeeld van oudsher gebruikt in huidverzorging, om zonnebrand en erytheem te behandelen [37]. Pradosia-muziek is een lid van de Sapotaceae-familie waarvan de olie van oudsher wordt gebruikt om huidlittekens te genezen [38]. De eigenschappen ervan moeten echter nog wetenschappelijk worden bewezen. Het doel van dit onderzoek was daarom om de potentiële waarde van P. mutisii in huidverzorging, cosmetologie en farmacologie te bepalen.

2. Resultaten

2.1. Pm-ME-karakterisering en het effect ervan op de levensvatbaarheid van cellen

Pm-ME blokkeerde de levensvatbaarheid niet tot 100 µg/ml, maar verminderde de levensvatbaarheid lichtjes bij 200 µg/ml in HaCaT-, B16F10- en menselijke dermale fibroblasten (HDF)-cellen, volgens de 3-(4,{{ 7}}dimethylthiazool-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromide (MTT)-assay (Figuur 1a–c). Met behulp van ultrahogedrukvloeistofchromatografie (UHPLC) en vloeistofchromatografie (LC)/massaspectrometrie bleek een belangrijke verbinding in Pm-ME coumarinezuur te zijn na 4,27 min (Figuur 1d).

2.2. Beschermend effect van Pm-ME tegen UVB- en H2O2-schade

Om te bepalen of Pm-ME HaCaT-cellen beschermde tegen schade veroorzaakt door UVB- en H2O2-geïnduceerde fotoveroudering, werden cellen voorbehandeld met verschillende concentraties Pm-ME (0–100 µg/ml) vóór blootstelling aan UVB of H2O2. Figuur 2a laat zien dat UVB-bestraling het aantal hechtende HaCaT-cellen verminderde, terwijl Pm-ME de celhechting verhoogde. Bovendien werd cellulaire schade veroorzaakt door H2O2 hersteld door Pm-ME bij 100 µg/ml (Figuur 2b). Om te verduidelijken of Pm-ME UVB- en H2O2-gemedieerde rimpelvorming verzwakte, werden de expressieniveaus van MMP-1 en MMP-9 gemeten na UVB- of H2O2-behandeling in aanwezigheid of afwezigheid van Stuur me een privebericht. Pm-ME remde de expressie van MMP-1 en MMP-9 onder beide omstandigheden (Figuur 2c, d). Vervolgens onderzochten we of Pm-ME door vrije radicalen geïnduceerde ontstekingsreacties onderdrukte door mRNA-niveaus van COX te meten-2. Onder met UVB of H2O2-behandelde omstandigheden werden mRNA-niveaus van COX-2 sterk onderdrukt door Pm-ME bij 100 µg/ml (Figuur 2e,f). Vervolgens hebben we de mRNA-niveaus van het antiverouderingsgen, Sirt-1, gemeten om de impact ervan op fotoveroudering te bepalen. Zowel UVB als H2O2 verminderden de Sirt-1-expressie, terwijl Pm-ME de expressie opmerkelijk herstelde bij 50 en 100 µg/ml (Figuur 2g,h). Omdat Pm-ME bepaalde moleculaire en cellulaire reacties onderdrukte in HaCaT-cellen behandeld met UVB of H2O2, onderzochten we vervolgens of dit extract directe anti-oxidatieve activiteit had met behulp van 2,2′-casino-bis (3-ethylbenzothiazoline{{57 }}sulfonzuur) ABTS-assay, waarin Pm-ME dosisafhankelijke activiteit voor het wegvangen van vrije radicalen vertoonde (Figuur 2i).

2.3. Hydraterende en collageenverhogende effecten van Pm-ME

Pm-ME verbeterde de expressie van aan hydratatie gerelateerde genen zoals HAS-2 en TGM-1 in HaCaT-cellen (Figuur 3a). Om te bepalen of Pm-ME de expressie van een collageengen (Col1A1) kon versterken, behandelden we eerst HDF-cellen met Pm-ME (0–100 µg/ml) en bepaalden vervolgens het expressieniveau van Col1A1. Zoals figuur 3b laat zien, werd dosisafhankelijk een verhoogde expressie van het Col1A1-gen onder Pm-ME-behandelingsomstandigheden waargenomen. Deze resultaten werden verder bevestigd met behulp van een reportergen-assay met het Col1A1-Luc-construct getransfecteerd in HEK293-cellen en HDF-cellen. Naar verwachting verhoogde Pm-ME de promoteractiviteit van het Col1A1-gen op een dosisafhankelijke manier in beide cellen (Figuur 3c, d). Bovendien bleek Pm-ME de collageengenniveaus te herstellen die afnamen onder zowel UV-bestraling als H2O2-behandelingsomstandigheden (Figuur 3e, f).

2.4. Anti-melanogeen effect van Pm-ME

Aangezien onze doelconcentratie overeenkwam met 100 µg/ml, hebben we bepaald of Pm-ME in staat was de afscheiding van melanine en de cellulaire inhoud ervan te onderdrukken. Om dit te bepalen werden B16F10-melanoomcellen gestimuleerd door -melanocytstimulerend hormoon (-MSH) in aan- of afwezigheid van Pm-ME of arbutine (positieve controle). Niveaus van melanine werden vervolgens gemeten. Pm-ME verminderde de afscheiding van melanine tot 75 procent bij 100 µg/ml (Figuur 4a,b). Pm-ME verlaagde ook het melaninegehalte in met MSH behandelde B16F10-cellen tot 30 procent bij 100 µg/ml, terwijl het melaninegehalte bij 50 µg/ml niet significant was verminderd in vergelijking met de positieve controle (-MSH) (Figuur 4c) . Ten slotte hebben we een tyrosinase-enzymtest uitgevoerd om het effect van Pm-ME op de activiteit van melanineproducerende enzymen te bepalen. Interessant is dat Pm-ME (0-400 μg / ml) de tyrosinase-activiteit aanzienlijk verminderde bij concentraties hoger dan 200 μg / ml, terwijl Kojic Acid (KA), een gecontroleerd medicijn, de activiteit van tyrosinase sterk verminderde (Figuur 4d).

2.5. Moleculaire mechanismen van Pm-ME-gemedieerde antifotoveroudering en hydraterende effecten

3. Discussie

Vanwege hun rijkdom aan voedingsstoffen en vitamines zijn verschillende soorten uit de Sapotaceae-familie in de traditionele geneeskunde gebruikt [39]. Het potentiële gebruik van P. mutisii in de cosmetische en farmaceutische industrie moet echter nog worden onderzocht. Om deze reden hebben we de huidbeschermende activiteit van P. mutisii in keratinocyten en fibroblasten onder huidbeschadigende omstandigheden bestudeerd. We hebben ook de geschiktheid ervan voor cosmetische preparaten geëvalueerd. Omdat toxiciteitstesten om potentiële risico's bij mensen te identificeren een noodzakelijke en cruciale stap is in zowel de geneesmiddelen- als de cosmetische industrie [40], werd de cytotoxiciteit van P. mutisii getest in HaCaT-, B16F10- en HDF-cellen. Pradosia mutisii vertoonde een lage toxiciteit tot 200 µg/ml en geen toxiciteit bij 100 µg/ml in HaCaT-, B16F10- (figuur 1a, b) en HDF-cellen (figuur 3c). Met behulp van UHPLC/MS-analyse (Figuur 1c) werd aangetoond dat Pm-ME een hoge concentratie coumarinezuur, een fenolzuur [41,42]. Polyfenolen zijn secundaire metabolieten van planten en zijn over het algemeen betrokken bij de afweer tegen UV-straling of infectie door ziekteverwekkers. In het menselijk lichaam is aangetoond dat polyfenolen beschermen tegen de ontwikkeling van kanker, hart- en vaatziekten, diabetes, osteoporose en neurodegeneratieve ziekten [1]. Van coumarinezuur is aangetoond dat het antioxiderende en ontstekingsremmende eigenschappen heeft [43].

Ultraviolette straling is een van de hoofdoorzaken van de productie van vrije radicalen (bijv. ROS) in de huid. Vrije radicalen kunnen huidveroudering en kanker veroorzaken als ze zich gedurende lange perioden ophopen [44]. Het is bekend dat door vrije radicalen gegenereerde oxidatieve stress en schade celoverleving, proliferatie, differentiatie en metabolisme in gevaar kunnen brengen [45,46]. In overeenstemming met eerdere rapporten [47,48], ontdekten we ook dat UVB-bestraling cellulaire schade veroorzaakte in HaCaT-cellen. Schade omvatte verminderde proliferatie, verhoogde apoptose en moleculaire reacties, waaronder de expressie van genen die verband houden met ontsteking, rimpelvorming en veroudering (figuren 2 en 3). Omdat UVB-geïnduceerde radicalen belangrijke factoren zijn die cellen, weefsels en organen beschadigen, werd ontdekt dat sommige endogene verbindingen zoals melatonine en zijn metaboliet [49-52] en bilirubine [53] betrokken zijn bij het opruimen van toxische radicalen door antioxidanten te vertonen. , fotobeschermende en anti-verouderingseigenschappen in ons lichaam. Tot nu toe zijn deze verbindingen ook ontwikkeld als zeer waardevolle biomaterialen die door de farmaceutische industrie op ons lichaam kunnen worden aangebracht [54]. Desalniettemin worden vitamine C, co-enzym Q10 en -tocoferol wereldwijd de belangrijkste verkoopproducten voor de menselijke gezondheid vanwege hun significante anti-oxidatieve eigenschappen. Onderzoekslaboratoria bij farmaceutische en cosmetische bedrijven blijven grote nadruk leggen op het identificeren en ontwikkelen van effectieve anti-oxidatieve geneesmiddelen en natuurlijke verbindingen. In onze studie hebben we waargenomen dat Pm-ME een sterke antioxidantactiviteit had bij testen met de ABTS-assay (Figuur 2i). Evenzo keerde Pm-ME de door vrije radicalen geïnduceerde onderdrukking van celhechting, de inductie van nucleaire schade en de gewijzigde expressie van genen zoals MMP-1, MMP-9 en COX{{27} om. } onder UVB- en H2O2-omstandigheden op een dosisafhankelijke manier (Figuur 2a – f). Met name herstelde Pm-ME de niveaus van het Sirt-1-gen (Figuur 2g, h), dat betrokken is bij het voorkomen van apoptose en het verhogen van de celoverleving onder omstandigheden van oxidatieve stress [26]. Deze resultaten impliceerden sterk dat de veroudering van cellen verband hield met oxidatieve stress via de neerwaartse regulatie van Sirt1-expressie. De anti-oxidatieve eigenschappen van Pm-ME maakten het herstel van Sirt1-expressie mogelijk. Dit kan resulteren in bescherming tegen huidbeschadiging en veroudering onder natuurlijke UVB-bestralingsomstandigheden in vivo. Bovendien is er een mogelijkheid dat Pm-ME ook UVC-geïnduceerde cellulaire reacties kan beschermen, aangezien onze UV-bestralingsomstandigheden mogelijk besmet zijn met UVC, hoewel we een filtersysteem gebruikten om alle golflengten onder 290 nm te verwijderen. Het concept dat anti-oxidatieve biomaterialen cellulaire en moleculaire schade kunnen verbeteren onder omstandigheden van oxidatieve stress, heeft geleid tot de commerciële productie van verschillende producten zoals BIOGF1K, ginsenoside Ro, EGCG, Fraxinus chinensis-extract en bepaalde synthetische antioxidanten. De antirimpel- en fotoverouderingseffecten van biomaterialen in deze en andere producten zijn breed uitgemeten in de cosmetische industrie [48,55,56].

Het handhaven van voldoende hydratatie van de huid [31] en het genereren van nieuw collageen [57] zijn belangrijke processen voor een gezonde huid. De expressie van hydraterende (HAS2, TGM-1) (Figuur 3a) en collageen (Col1A1) genen was opmerkelijk verhoogd door Pm-ME (Figuur 3b-d), en hielp bij het herstellen van collageenniveaus na UVB-blootstelling en H2O2-behandeling (Figuur 3e, f). Daarom suggereert dit dat Pm-ME een effectief ingrediënt kan zijn bij het behoud van een gezonde huid. De onderdrukking van melanine door Pm-ME is ook gunstig voor het gebruik ervan in cosmetische preparaten. Hoewel melanine waardevol is bij het beschermen van de huid tegen UV-straling, omdat veel vrouwen er de voorkeur aan geven hun huid lichter te maken, is bleken door anti-melanogene activiteit een nuttige functie in cosmetische materialen [29]. Pm-ME (100 μg / ml) vertoonde een sterke remmende activiteit tijdens melanogenese, zoals beoordeeld door de bepaling van melanineniveaus van uitgescheiden medium en de afname getoond in melaninesecretieniveaus (Figuur 4a-c). Bovendien onderdrukte Pm-ME (200 μg / ml) de tyrosinase-enzymactiviteit aanzienlijk (Figuur 4d), wat impliceert dat hogere concentratie direct effectief is om enzymactiviteit te onderdrukken, terwijl lagere concentratie betrokken is bij de regulatie van melaninesecretie. Daarom kan Pm-ME, vanwege zijn anti-oxidatieve, anti-photoaging, anti-rimpel, vochtinbrengende stimulerende en anti-melanogene activiteiten, worden beschouwd als een goede cosmeceutische kandidaat. Om deze mogelijkheid verder te onderzoeken, zijn we van plan om de klinische werkzaamheid ervan in toekomstige studies te evalueren.

We hebben studies uitgevoerd om de moleculaire mechanismen te bepalen waarmee Pm-ME zijn anti-oxidatieve en hydraterende werking uitoefende in keratinocyten. We hebben ons gericht op MAPK-gerelateerde enzymen (ERK, JNK en p38), omdat deze enzymen een cruciale rol spelen bij de veroudering en melanogenese van huidkeratinocyten en melanocyten [58,59]. De ERK-route bemiddelt bijvoorbeeld cellulaire reacties op transformerende groeifactor- 1 door collageen [60] en HA-syntheseroutes in keratinocyten te verhogen [61]. JNK speelt een sleutelrol bij door oxidatieve stress geïnduceerde apoptose van keratinocyten [62]. Het enzym p38 is belangrijk bij het handhaven van de homeostase van de menselijke huid [63]. De JNK- en p38-routes mediëren beide cellulaire reacties op cytokines en fysieke stress [14]. Deze routes worden geactiveerd door UVB- en ROS-geïnduceerde stress. Deze routes kunnen de productie van proteolytische MMP- en COX{18}}-genen verhogen [15], die respectievelijk verband houden met collageenafbraak en huidontsteking [64]. Met name blokkeerde oxidatieve stress de fosforylering van ERK, terwijl p38 en JNK werden gefosforyleerd bij behandeling met H2O2 (Figuur 5a). Daarentegen verhoogde Pm-ME de ERK-fosforylering en verminderde het de fosforylering van p38 en JNK (Figuur 5a), wat impliceert dat deze enzymen differentieel kunnen deelnemen aan Pm-ME-gemedieerde farmacologische activiteiten. Om de functionele rol van MAPK in de anti-fotoaging, anti-melanogene en anti-inflammatoire effecten van Pm-ME in UVB-bestraalde en H2O{36}}gestimuleerde keratinocyten verder te begrijpen, werden specifieke MAPK-remmers gebruikt. De resultaten van figuur 5b suggereerden sterk dat remming van p38 en JNK door Pm-ME resulteerde in antirimpel- en ontstekingsremmende effecten, omdat een p38-remmer (SB203580) en een JNK-remmer (SP600125) de expressie van MMP blokkeerden{{45 }} en COX-2, respectievelijk. Bovendien induceerde Pm-ME-getriggerde ERK-fosforylering de expressie van genen die verband houden met hydratatie, omdat Pm-ME-behandeling de expressie van HAS -2 veroorzaakte, terwijl U0126 het onderdrukte (Figuur 5c). Deze resultaten suggereerden dat MAPK-gerelateerde enzymen bijdroegen aan PM-ME-gemedieerde anti-verouderings-, anti-rimpel- en ontstekingsremmende activiteiten. Het is bekend dat UVB-straling andere signaalcascades verhoogt, zoals die gekoppeld aan NF-KB en STAT3 [65,66]. Of Pm-ME deze signaalroutes kan reguleren, moet nog worden onderzocht.

Concluderend vonden we dat coumarinezuur-rijk Pm-ME anti-oxidatieve, anti-rimpel, vochtinbrengende stimulerende en anti-melanogene activiteiten vertoonde in huidcellen bestraald met UVB of behandeld met H2O2. Pm-ME verhoogde de fosforylering van ERK op een dosisafhankelijke manier, maar verminderde de fosforylering van p38 en JNK (Figuur 6). Onze resultaten suggereerden sterk dat Pm-ME een effectief huidbeschermend biomateriaal kan zijn. Aangezien Pm-ME veelbelovende activiteiten vertoonde in zowel kankerachtige huidcellen (HaCaT- en B16F10-cellen) als normale menselijke keratinocyten tijdens oxidatieve stresscondities, stellen we daarom de gunstige rol van het gebruik van Pm-ME in cosmetische preparaten voor. Melanoomcellen hebben echter abnormale kenmerken, zoals een verstoorde controle van de celcyclus, afwijkende genexpressiepatronen en beperkte differentiatiecapaciteit [67], en er moet aanvullend werk met primaire melanocyten worden gevolgd om de anti-melanogenese-activiteit van Pm-ME en zijn moleculair mechanisme. Bovendien zullen planten uit dezelfde familie (Sapotaceae) of geslacht (Pradosia spp.) worden getest op vergelijkbare huidbeschermende activiteiten.

Vraag om meer: ​​david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501