CaWRKY30 reguleert op positieve wijze de immuniteit van peper door zich te richten op CaWRKY40 tegen Ralstonia Solanacearum-inenting door modulerende afweergerelateerde genen Deel 1

Abstract:

Het WRKY-transcriptiefactorennetwerk (TF's) is samengesteld uit de subset van de WRKY TF's, die een cruciale rol speelt in de immuniteitsregulatie van planten. De functies van het netwerk van WRKY TF's blijven echter onduidelijk, met name in niet-modelplanten zoals peper (Capsicum annum L.). Deze studie kenmerkte functioneel CaWRKY30 - een lid van groep III Pepper WRKY-eiwit - voor de immuniteit van peper tegen Ralstonia solanacearum-infectie. De CaWRKY30 werd gedetecteerd in de kern en de transcriptie-expressieniveaus werden aanzienlijk opgereguleerd door R. solanacearum-inoculatie (RSI), bladtoepassing ethyleen (ET), abscisinezuur (ABA) en salicylzuur (SA). Virus-geïnduceerde gene silencing (VIGS) van CaWRKY30 versterkte de kwetsbaarheid van de paprika voor RSI.

Bovendien compromitteerde het tot zwijgen brengen van CaWRKY30 door VIGS HR-achtige celdood veroorzaakt door RSI en neerwaarts gereguleerde afweer-geassocieerde markergenen, zoals CaPR1, CaNPR1, CaDEF1, CaABR1, CaHIR1 en CaWRKY40. Omgekeerd veroorzaakte voorbijgaande overexpressie van CaWRKY30 in peperbladeren HR-achtige celdood en opgereguleerde afweergerelateerde merkergenen. Bovendien verhoogde tijdelijke overexpressie van CaWRKY30 de transcriptionele niveaus van CaWRKY6, CaWRKY22, CaWRKY27 en CaWRKY40.

Aan de andere kant verhoogde tijdelijke overexpressie van CaWRKY6, CaWRKY22, CaWRKY27 en CaWRKY40 de transcriptionele expressieniveaus van CaWRKY30. De resultaten bevelen aan dat nieuw gekarakteriseerde CaWRKY30 de immuniteit van peper tegen Ralstonia-aanval positief reguleert, die wordt beheerst door synergistisch gemedieerde signalering door fytohormonen zoals ET, ABA en SA, en transcriptioneel assimileert in WRKY TFs-netwerken, bestaande uit CaWRKY6, CaWRKY22, CaWRKY27 en CaWRKY40 . Gezamenlijk zullen onze gegevens het gemakkelijker maken om het onderliggende mechanisme van overspraak tussen de immuniteit van peper en de reactie op RSI te verklaren.

Transcriptiefactoren spelen een sleutelrol in het immuunsysteem en regelen de regulatie van genexpressie en de vorming van specifieke celtypen. Het volgende is de relatie tussen transcriptiefactoren en immuniteit:

1. Transcriptiefactor - NF-KB: NF-KB is een sleuteltranscriptiefactor die betrokken is bij de regulatie van adaptieve immuunresponsen van T-cellen en B-cellen. NF-KB-activering kan ontstekingsreactie, immuunrespons en celapoptose bevorderen.

2. Transcriptiefactoren - STAT's: STAT's zijn transcriptiefactoren die dragersignalering en cellulaire reacties bemiddelen. STAT's kunnen worden geactiveerd, spelen een sleutelrol in geactiveerde T-cellen en B-cellen en nemen deel aan processen zoals proliferatie, differentiatie en activering van immuuncellen.

3. Transcriptiefactor - AP-1: AP-1 is een familie van transcriptiefactoren die betrokken zijn bij de regulatie van verschillende cellulaire functies en immuunresponsen. Activering van AP-1 kan processen zoals celproliferatie, -differentiatie en -transformatie bevorderen, en antivirale en immuunresponsen in stand houden.

4. Transcriptiefactoren—CEBP's: CEBP's vormen een grote familie van transcriptiefactoren, waaronder CEBP , , , enz. in verschillende weefselcellen. In het immuunsysteem is CEBP betrokken bij de activering van macrofagen en de afgifte van cytokines, evenals bij de differentiatie en activering van B-cellen en T-cellen.

Alles bij elkaar genomen spelen transcriptiefactoren een belangrijke rol bij de immuniteit en nemen ze deel aan de regulering en instandhouding van de activiteit van het immuunsysteem in verschillende celtypen en functies. Daarom moeten we ook aandacht besteden aan de verbetering van de immuniteit in ons dagelijks leven. Cistanche kan de immuniteit verbeteren en de polysacchariden in vlees kunnen de immuunrespons van het menselijke immuunsysteem reguleren, het stressvermogen van immuuncellen verbeteren en het effect van sterilisatie van immuuncellen verbeteren.

Klik op gezondheidsvoordelen van cistanche

Trefwoorden:

Spaanse peper (Capsicum annuum); Ralstonia solanacearum; CaWRKY30; WRKY TF's.

1. Inleiding

Planten worden tijdens hun leven vaak blootgesteld aan verschillende biotische en abiotische stress vanwege hun immobiele aard [1,2]. Planten hebben verschillende afweermechanismen ontwikkeld als reactie op herhaalde selectiedruk van grote ecologische en ecologische beperkingen. Verschillende transcriptionele factoren (TF's) verbinden zich met elkaar om geavanceerde transcriptionele netwerken te ontwikkelen voor het reguleren van deze klassieke afweermechanismen op transcriptioneel niveau [3,4]. Afweerreacties op verschillende spanningen worden goed gesynchroniseerd en gecontroleerd, aangezien ze cruciaal zijn voor planten in de vorm van energieverbruik en ontwikkeling [5]. De verdedigingsmechanismen kunnen variëren in verschillende plantensoorten vanwege verschillende omgevingsomstandigheden die hun acclimatisering beïnvloeden [6-8].

Daarom kan het afweersysteem dat door modelplanten wordt gebruikt, niet volledig worden geïmpliceerd door niet-modelplanten. Daarom hebben de afweersystemen van planten de afgelopen decennia centraal gestaan; deze studies waren echter vooral gericht op modelplanten, dwz Arabidopsis thaliana en rijst (Oryza sativa L.). Desalniettemin is de functionele synchronisatie van deze transcriptionele complexen om de reactie van planten op verschillende spanningen te reguleren slecht onderzocht, voornamelijk in niet-modelplanten.

De WRKY-eiwitten vormen de grootste TF-familie in planten. De WRKY TF's bevatten een of twee WRKY-domeinen en gewoonlijk WRKYGQK-sequentie aan het N-uiteinde gevolgd door C2HC- of C2H2-zinkvingermotief [4,9,10]. De WRKY-eiwitten zijn fylogenetisch verdeeld in drie hoofdgroepen (dwz groepen I-III) op basis van verschillende WRKY-domeinen en de structuur van het zinkvingermotief.

Groep II van WRKY TF's is weer onderverdeeld in vijf subgroepen (IIa, IIb, IIc, IId en IIe) [11–13]. De WRKY-leden binden zich voornamelijk met W-boxen [TTGAC(C/T)] die worden gevonden in promotorregio's van verschillende doelgenen door een exclusieve wig verticaal in de grote groef van DNA te steken [14] door WRKY GQK-motief op de tweede b-streng, die stimuleert transcriptionele modulatie van de expressie van doelgenen [14-16]. De WRKY's zijn betrokken geweest bij verschillende biologische systemen in planten, waaronder zaadrust, zaadontkieming, veroudering en zaadontwikkeling. Evenzo zijn deze ook betrokken bij de reactie op biotische en abiotische stress en bij het wisselen van transcriptie van hun doelgenen [17-20].

Er is gemeld dat een groep WRKY TF's of één WRKY TF transcriptioneel geïnduceerd door slechts één spanning verschillende spanningen moduleert. De W-boxen zijn verrijkt in promotorregio's [21-24]. Deze studies tonen de aanwezigheid van WRKY-netwerken die betrokken zijn bij een bepaalde stress, of een combinatie van twee of meer. De rol van WRKY-eiwitten en onderliggende mechanismen als reactie op biotische en abiotische stress zijn de afgelopen tien jaar veelvuldig onderzocht; de nadruk van deze studies lag echter voornamelijk op één gen als reactie op één stress in modelplanten, bijvoorbeeld A. thaliana en O. sativa. Onlangs is een belangrijke functionele variantie gesuggereerd tussen nauwe homologen van WRKY TF's van verschillende plantensoorten [24,25]. De functies van WRKY's en WRKY-web in niet-modelplanten zoals Capsicum annuum L., als reactie op enkelvoudige of gecombineerde spanningen, zijn tot nu toe slecht onderzocht.

Peper staat wereldwijd bekend om zijn economisch belang. Het wordt gezaaid in hooglanden tijdens gematigde seizoenen [26,27]. Paprika wordt blootgesteld aan verschillende bodemziekten zoals peperziekte en bacteriële verwelking veroorzaakt door bacteriële pathogenen, respectievelijk Phytophthora capsicum en Ralstonia solanacearum [28,29]. Het samenvallen van deze ziekteverwekkers heeft verwoestende gevolgen voor de peperproductie bij hoge temperaturen en hoge luchtvochtigheid (HTHH). De HTHH schaadt de immuniteit van peper, gemedieerd door het R-eiwit, en versnelt de groei en ontwikkeling van ziekteverwekkers. Bovendien oefenen pathogeenaanval en HTHH tegelijkertijd natuurlijke selectiedruk uit op peper, wat de evolutie van peper in het verleden heeft beïnvloed [30-32]. Omgekeerd is het mogelijk dat het gelijktijdig optreden van infectie met pathogenen en HTHH geen invloed heeft op de evolutie van modelplanten, zoals A. thaliana en O. sativa. Daarom lijkt peper geschikter voor onderzoek naar immuniteit tegen biotische of abiotische stress, dwz RSI of HTHH.

Ralstonia solanacearum veroorzaakt bacteriële verwelkingsziekte in tal van gewassen, dwz paprika, tomaat, aardappel, enz. Het is een gramnegatieve proteobacterie in de bodem [33]. Het vormt snelle kolonies in de xyleemweefsels, wat leidt tot bacteriële verwelkingsziekte in de aangetaste planten [34].

Het is bekend dat de reacties van plantensoorten op biotische en abiotische stress worden gereguleerd door fytohormonen [35]. Fytohormonen zijn kleine moleculen die betrokken zijn bij de regulering van plantengroei, plantenreproductie en overleving. Salicylzuur (SA) en jasmonzuur (JA) zijn cruciaal voor de immuunrespons van plantensoorten. Deze twee worden beschouwd als cruciale fundamenten van de immuunresponsen van planten tegen ziekteverwekkers. Biosynthese en signalering van SA zijn van vitaal belang voor de verdediging tegen biotrofe pathogenen, terwijl JA verdediging biedt tegen necrotrofe pathogenen [36,37]. Ethyleen (ET) helpt bij afweerreacties tegen verschillende interacties tussen plant en ziekteverwekker [37].

Verschillende inheemse paprikacultivars van subtropische gebieden vertonen een versnelde ziekteresistentie, zelfs onder HTHH [38]. Hittegerelateerd cis-element HSE bestaat over het algemeen naast fytohormonen, waaronder SA, JA, ET, ABA, of pathogeen-gerelateerde cis-elementen in promotergebieden van de meeste MAPK's en CDPK's die betrokken zijn bij de immuniteit van planten [39-41]. Het beveelt de aanwezigheid van overspraak tussen immuniteit en HTHH aan. Pepper-genoom is 27 en 7,5 keer groter in vergelijking met respectievelijk A. thaliana en O. sativa. Het heeft echter slechts 73 WRKY-genen, terwijl kleinere genomen van A. thaliana en O. sativa respectievelijk 72 en 122 WRKY-genen hebben [9,42,43]. We hebben eerder ontdekt dat CaWRKY6 [44], CaWRKY22 [9], CaWRKY40 [45] en CaWRKY58 [46] betrokken zijn bij de reactie van peper op RSI.

Hiervan fungeren CaWRKY6, -22, -27 en -40 als positieve regulatoren van plantimmuniteit, terwijl CaWRKY58 een negatieve regulator is. Deze genen bezitten een subset van HSE-elementen en W-boxen in hun promotorregio en de promotors van andere WRKY TF's, wat de rol van WRKY-netwerken in de regulatie van de reactie van peper tegen RSI afleidt. Bovendien werd CaWRKY40 direct gereguleerd door CaWRKY6 [44] en CabZIP63 [16], terwijl CaWRKY40 indirect werd gereguleerd door CaCDPK15 [47]. Omgekeerd zijn de meeste WRKY TF's van de paprika nog niet gekarakteriseerd voor hun reactie op aanvallen van pathogenen.

In de huidige studie werd een cDNA van volledige lengte voor de WRKY TFs-familie van peper geïsoleerd en CaWRKY30 genoemd. We karakteriseerden het expressioneel en functioneel en ontdekten dat CaWRKY30 werd geïnduceerd door RSI en bladtoepassing van SA, JA, ET en ABA. Voorbijgaande overexpressie van CaWRKY30 in peperbladeren veroorzaakte HR-achtige celdood en H2O2-productie. Het uitschakelen van CaWRKY30 in peper bracht de immuniteit van peper voor RSI in gevaar. Deze resultaten suggereren dat CaWRKY30 de immuniteit van peper tegen RSI positief reguleert.

2. Resultaten

2.1. Klonering en sequentieanalyse van CaWRKY30

Een nieuw WRKY-gen CaWRKY30 (CA01g34480) werd geïdentificeerd door genoombrede analyse. Het CaWRKY30-gen werd gekozen voor functionele karakterisering, aangezien het bestaan ​​van immuniteitsgerelateerde cis-elementen zoals TGA (TGACG-motiefbindende factor), TGACG-motief, TATC-box, TATAbox en W-box in het promotorgebied de mogelijke rol in de immuniteit van peper (Figuur S1). Een cDNA-fragment van CaWRKY30 (CA01g34480) van 924 bp open-reading-frame (ORF) werd gekloneerd met behulp van genspecifieke primers (tabel S1). De lengte van de afgeleide aminozuursequentie van CaWRKY30 was 307 aminozuurresiduen, met geconserveerd WRKY-domein, en het werd gecategoriseerd in groep III (Figuur 1). Het voorspelde eiwit heeft een grootte en een theoretische pI van respectievelijk 34,55 kDa en 7,32. De CaWRKY30 deelt 88, 60, 68 en 57 procent aminozuuridentiteit met respectievelijk NsWRKY53, CcWRKY53, NaWRKY53 en StWRKY53 (Figuur S2).

2.2. Transcriptionele expressie van CaWRKY30 onder RSI en behandeling met verschillende fytohormonen

De aanwezigheid van immuniteit-geassocieerde cis-elementen in het promotorgebied van CaWRKY30 wees op de potentiële rol ervan in de immuniteit RSI van peper. Om het idee te controleren, werd qRT-PCR-analyse uitgevoerd om de transcriptionele niveaus van CaWRY30 op RSI te beoordelen. De transcriptieniveaus van CaWRKY30 waren verhoogd in met Ralstonia behandelde bladeren in vergelijking met nep-behandelde bladeren (Figuur 2A). De verbeterde CaWRKY30-transcriptie-expressieniveaus waren consistent tussen 0 uur en 48 uur na de behandeling (HPT). De hoogste transcriptie-expressieniveaus werden geregistreerd bij 48 hpt (Figuur 2A).

Fytohormonen, waaronder ET-, ABA-, SA- en JA-gemedieerde signaalroutes, zijn belangrijke regulatoren van plantreacties op biotische en abiotische stress. De regulatie van CaWRKY30 door fytohormonen-gemedieerde signaalroutes werd bestudeerd door bladtoepassing van ET, ABA, SA en JA met behulp van qRT-PCR-analyse. De resultaten gaven aan dat relatieve transcriptie-expressieniveaus van CaWRKY30 waren verbeterd van 0 uur tot 48 hpt met 100 µM ET in vergelijking met de mock. Deze transcriptionele niveaus waren het hoogst bij 48 hpt met ET (Figuur 2B). Bladtoepassing van 100 μM ABA verhoogde significant de transcriptieniveaus van CaWRKY30 in vergelijking met de mock. Transcriptionele niveaus bereikten het hoogste niveau bij 12 hpt met ABA (Figuur 2C). De resultaten gaven aan dat transcriptionele accumulatie van CaWRKY30 significant was toegenomen na het aanbrengen van 1 mM SA, in vergelijking met de mock. Deze verbeterde transcriptie-expressieniveaus waren het hoogst bij 24 hpt (Figuur 2D).

Figuur 2. De qRT-PCR-test van CaWRKY30 relatieve transcriptie-expressieniveaus in peperbladeren onderworpen aan Ralstonia solanacearum-inoculatie (RSI) en bladtoepassing van verschillende fytohormonen. De qRT-PCR-analyse werd gebruikt om de transcriptieniveaus van CaWRKY30 te controleren in peperbladeren die werden onderworpen aan verschillende behandelingen, waaronder RSI (A), toepassing van 100 µm ET (B), toepassing van 100 µm ABA (C) en toepassing van 1 mM SA (D) met verschillende tijdsintervallen. De transcriptionele overvloed in met RSI behandelde bladeren werd vergeleken met met MgCl{9}}behandelde controlebladeren (mock), waarvan het relatieve expressieniveau was ingesteld op "1". (B – D) De transcriptie-expressieniveaus in met fytohormoon behandelde bladeren werden vergeleken met met ddH2O behandelde bladeren (mock), waarvan het expressieniveau was ingesteld op "1". De hoogte van de balk geeft gemiddelden aan en foutbalken geven de standaardfout van gemiddelden aan. Verschillende letters boven de balkjes tonen een significant verschil tussen de middelen op basis van Fisher's beschermde LSD-test.

2.3. CaWRKY30 bleek gelokaliseerd te zijn in de kern

Sequentieanalyse met behulp van WoLFPSORT toonde aan dat de voorspelde CaWRKY30-eiwitsequentie een vermeend nucleair lokalisatiesignaal bezit (Figuur 1), wat de potentiële targeting in de kern aantoont. Om deze perceptie te valideren, werd een aCaWRKY30 GFP-fusieconstructie gegenereerd die werd aangestuurd door een constitutieve promotor van CaMV35S. Daarna werd deze gevormde vector overgebracht in Agrobacterium stam GV3101. We brachten het CaWRKY30 GFP-construct tijdelijk tot overexpressie in bladeren van Nicofiamabenthamiana door A. tumefacient-injectie, en GFP-signalen werden onderzocht met een confocale fluorescerende microscoop. De resultaten toonden aan dat GFP-signalen van CaWRKY30-GFP aanwezig waren in de kernen, terwijl GFP van controle werd gedetecteerd in verschillende subcellulaire delen, zoals cytoplasma en kernen (Afbeelding 3).

Figuur 3. Subcellulaire lokalisatie van CaWRKY30. De CaWRKY30 is volledig gelokaliseerd in de kern van nicotiana benthaminna-bladeren. De groene kleur demonstreert GFP Blauwe kleur demonstreert DAPI-kleuring van de kern. De cyaankleur demonstreert de versmelting van groene CFP en blauwe DAPI-gekleurde kernen. CPP signaGreen) voor de controle, N. benthamiana-bladeren werden overal in de cel gedetecteerd. beelden werden 48 uur na inoculatie vastgelegd door confocale microscopie. Staven=25 uhm.

2.4. Het tot zwijgen brengen van CaWRKY30 door VIGS beknotte Pepper's immuniteit voor RSI en gedownreguleerde immuniteit-geassocieerde merkergenen.

De CaWRKY30 werd tot zwijgen gebracht door virus-geïnduceerde gene silencing (VIGS) om zijn rol in de immuniteit van peper te bestuderen. Er werden in totaal 50 CaWRKY30-niet-gedempte (TRV:00) en 50 CaWRKY30- gedempte (TRV: CaWRKY30)-planten aangeschaft. Zes CaWRKY30 tot zwijgen gebrachte planten werden willekeurig geselecteerd om hun efficiëntie van genuitschakeling te controleren door wortelinoculatie met cellen van compatibele virulente R. solanacearum-stam. Onze bevindingen gaven aan dat de transcriptieniveaus van CaWRKY30 met ~ 30 procent waren verlaagd in met Ralstonia behandelde CaWRKY30-gedempte planten in vergelijking met niet-gedempte planten, wat de uitschakeling van CaWRKY30 valideerde (Figuur 4A).

De CaWRKY30 gedempte planten vertoonden een significant hogere gevoeligheid voor RSI in vergelijking met niet-gedempte planten. De gevoeligheid van peper voor ziekteverwekkers werd verhoogd door een stijging van de bevolkingsgroei in Ralstonia te laten zien, gekenmerkt door hogere cfu-waarden in CaWRKY30 tot zwijgen gebrachte peperplanten in vergelijking met niet-gedempte planten op 3 d en 5 dagen na inoculatie (dpi) (Figuur 4B). Er werd een histochemische kleuringstest uitgevoerd om de H2O2-productie en celnecrose te detecteren in in Ralstonia geïnoculeerde CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY30) en niet-gedempte (TRV:00) peperbladeren. Een donkere DAB-kleuring (een teken van H2O2-productie) en HR-achtige celdood aangegeven door donkere trypaanblauwe kleuring werden opgemerkt in niet-gedempte peperbladeren bij 48 hpi (uren na inoculatie). Omgekeerd waren de concentraties van trypanblauw en DAB-kleuring significant verlaagd in CaWRKY30 tot zwijgen gebrachte peperbladeren (Figuur 4C). Elektrische geleidbaarheid - een indicator van ionenlekkage - werd berekend om plasmamembraanschade en celdood na RSI te bestuderen.

De resultaten toonden aan dat niet-gedempte planten die met RSI waren behandeld een hogere ionenlekkage vertoonden dan met Ralstonia behandelde CaWRKY30-gedempte planten bij 24 en 48 dpi (Figuur 4D). De relatieve ziekte-index werd geschat op maximaal 10 dpi voor het afleiden van het ziekteniveau in CaWRKY 30-gedempte en niet-gedempte planten na RSI (aanvullende tabel S2). Prominente ziektesymptomen werden opgemerkt in CaWRKY30 tot zwijgen gebrachte planten bij 10 dpi, terwijl niet-gedempte planten weinig ziektesymptomen vertoonden (Figuur 4E). Zes CaWRKY30-gedempte en niet-gedempte planten werden willekeurig gekozen en geïnfiltreerd met R. solanacearum in de wortels voor fenotype-assay. Duidelijke verwelkingsziektesymptomen werden opgemerkt in CaWRKY30 tot zwijgen gebrachte peper bij 10 dpi, terwijl niet-gedempte planten zeer zwakke verwelkingssymptomen vertoonden (Figuur 4F). De qRT-PCR-analyse werd uitgevoerd om de transcriptionele accumulatie van immuniteitsgerelateerde markergenen te bestuderen en de resultaten toonden aan dat transcriptionele expressieniveaus van immuniteitsgerelateerde markergenen zoals CaPR1, CaNPR1, CaDEF1, CaABR1 en CaHIR1 waren verminderd in CaWRKY{{ 25}}gedempte planten in vergelijking met niet-gedempte planten bij 48 dpi (Figuur 4G).

Figuur 4. Het tot zwijgen brengen van CaWRKY30 door VIGS beknotte de weerstand van peper tegen RSI en opgereguleerde immuniteit-geassocieerde merkergenen. De qRT-PCR-assay van CaWRKY30-expressieniveaus in met R. solanacearum geïnoculeerde, mock (geïnoculeerd met MgCl2-oplossing) CaWRKY30-gedempte peperplanten (TRV: CaWRKY30) en controleplanten (TRV:00) (A). Het verschil in de groei van R. solanacearum tussen CaWRKY30-gedempte en niet-gedempte (controle) peperplanten geïnoculeerd met R. solanacearum bij 3 en 5 dpi (B). Histochemische kleuring (DAB- en trypaanblauwkleuring) in met R. solanacearum geïnoculeerde CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY30) en niet-gedempte (TRV:00) peperbladeren bij 48 dpi. Schaalbalk=50 µm (C). Meting van elektrolytlekkage als ionengeleiding om de celdoodreacties in de bladschijven van CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY22) en niet-gedempte (TRV:00) paprikaplanten bij 24 en 48 hpi te evalueren met en zonder R. solanacearum (D). CaWRKY30-uitschakeling door VIGS verhoogde de gevoeligheid van peperplanten voor R. solanacearum-infectie.

De ziekte-index escaleerde aanzienlijk met de tijd. CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY30) planten vertoonden na verloop van tijd een hoge gevoeligheid voor R. solanacearum-infectie in vergelijking met niet-gedempte (TRV:00) planten. Gemiddelden zijn gebaseerd op vier biologische herhalingen met vijf planten per herhaling (E). Het fenotypische effect van behandeling met R. solanacearum op CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY30) en niet-gedempte (TRV:00) peperplanten bij 10 dpi (F). qRT-PCR-assay van transcriptieniveaus van afweergeassocieerde merkergenen in CaWRKY30-gedempte (TRV: CaWRKY30) en niet-gedempte (TRV:00) peperplanten 48 uur na inoculatie met R. solanacearum (G). Het relatieve transcriptie-expressieniveau van nep-behandelde niet-gedempte planten werd ingesteld op "1". De hoogte van de balk geeft gemiddelden aan en foutbalken geven de standaardfout van gemiddelden aan. Gegevens vertegenwoordigen de gemiddelden ± SE van vier biologische replicatieonderzoeken. Verschillende letters boven de balken laten significante verschillen tussen de gemiddelden zien.

For more information:1950477648nn@gmail.com