Veranderingen in niveaus van fenylethanoïdeglycosiden, antioxiderende activiteit en andere kwaliteitskenmerken in Cistanche Deserticola-plakjes door stoomverwerking

Cistanche deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), algemeen bekend als "Woestijnginseng", wordt al lang als tonicum gebruikt in China en Japan. De vlezige stengels worden in plakjes gesneden voor de behandeling van verschillende ziekten, waaronder impotentie, vrouwelijke onvruchtbaarheid, koud gevoel in de lendenen en knieën en geriatrische constipatie. In de afgelopen jaren hebben verschillende onderzoeken de effectiviteit ervan aangetoond in experimentele modellen die verband houden met neurologische aandoeningen, met name de ziekte van Alzheimer en de ziekte van Parkinson.De natuurvoedingsmarkt raakt steeds meer geïnteresseerd in dit nuttige natuurlijke voedingssupplement. Wijn en thee gemaakt van sappige stengels zijn populaire gezondheidsvoedingsmiddelen die vermoeidheid verlichten en het leervermogen en het geheugen verbeteren.C. deserticolais een rijke bron van fenylethanoïdeglycosiden, polysachariden en oplosbare suikers, die voornamelijk antioxidatieve,neuroprotectief,hepatoprotectief,immuunversterkend,laxeermiddel,en anti-veroudering effecten, waaronder de antioxidatieve activiteit wordt beschouwd als de basis van de andere farmacologische werkingen. Echinacoside en acteoside zijn representatieve markers voor de kwaliteitscontrole van Cistanches Herba in de Chinese Farmacopee (editie 2015), vanwege hun overheersende overvloed, geslachtsspecificiteit en opmerkelijke bioactiviteiten. De bepaling van verdunde, in ethanol oplosbare extracten maakt ook deel uit van de kwaliteitscontrole van Cistanches Herba. Er is ook gemeld dat Cistanoside A, isoacteoside en 2′-acetylacteoside overvloedig voorkomen inC. deserticola. 

NATUURLIJK CISTANCHE-EXTRACT ANTI-VERMOEIDHEID VOEDINGSSUPPLEMENT PHGS75% ECH 30% ACT 12%

De toenemendeDe vraag naar C. deserticola heeft de teelt ervan enorm gestimuleerd. C. deserticola behoort tot een overblijvend parasitair kruid, dat voornamelijk groeit in droge of semi-aride gebieden in het noordwesten van China. Onmiddellijk na de oogst moeten deze zeer suikerrijke, zware rauwe stengels worden gedroogd om verlies van voedingsstoffen en bederf te voorkomen. Verse stengels bevatten doorgaans 75-85% water en het waterniveau moet voor hun behoud worden verlaagd tot onder de 10%. In de meeste Cistanche-producerende regio's worden hele verse stengels ongeveer twee maanden in open velden geplaatst voor het voorbereidende droogproces. Het gedroogde materiaal wordt vervolgens naar fabrieken getransporteerd, in water gedrenkt, in plakjes gesneden en opnieuw gedroogd. De vertraging in de plakverwerking kan het gevolg zijn van slecht opgeleide of slecht uitgeruste boeren. Het grootste probleem is echter een gebrek aan kennis en technologie om een ​​efficiënt productieproces mogelijk te maken.

Behandeling met hoge temperaturen wordt op grote schaal toegepast op groenten en fruit en kan de microbiële groei remmen en de houdbaarheid verlengen. Het kan echter ook aanleiding geven tot veranderingen in het uiterlijk en de samenstelling van de voedingsstoffen. Van bepaalde bioactieve componenten en farmacologische activiteiten zoals antioxiderende werking is aangetoond dat ze na het stomen toenemen in geneeskrachtige kruiden. Het stomen van C. deserticola kan dus verschillende gezondheidsvoordelen verbeteren. Er is ook gemeld dat het gebruik van stomen of blancheren op vers gesneden C. deserticola de hoeveelheden ervan verhoogtechinacoside en acteoside.19,20) Er is echter geen gedetailleerd onderzoek uitgevoerd om de veranderingen in de bioactieve stoffen en de antioxiderende activiteit van vers gesneden C. deserticola tijdens het stoomproces te vergelijken. Het doel van deze studie was daarom om het effect van de stoomtijd (1, 3, 5, 7 min) te onderzoeken op de hoeveelheid fenylethanoïdeglycosiden, polysachariden, oplosbare suikers, verdunde in ethanol oplosbare extracten, gewichtsverlies en antioxiderende eigenschappen. in C. deserticola-schijfjes vergeleken met drie andere groepen (vers, direct in de oven gedroogd, geblancheerd).

Experimenteel

Chemicaliën

Chemicaliën van analytische kwaliteit: methanol, ethanol, D-glucose, zwavelzuur, kaliumwaterstoffosfaat en kaliumdiwaterstoffosfaatmonohydraat werden verkregen van Beijing Chemical Works (Beijing, China). Mierenzuur en fenol werden gekocht bij Sinopharm Chemical Reagent Co. (Shanghai, China). Methanol van HPLC-kwaliteit werd gekocht bij Fisher Scientific (Toronto, Canada). Het gedeïoniseerde water werd verkregen met behulp van een Milli-Q-systeem (Millipore Corp., Bedford, MA, VS). 2,2-Difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) werd geleverd door Alfa Aesar (Ward Hill, MA, VS) en 2,2′-azobis(2-aminopropaan) dihydrochloride (AAPH ) door Adamas-beta (Shanghai, China). 6-Methoxy-2,5,7,8- tetramethylchromaan-2-carbonzuur (Trolox), 2,6-di-tertbutyl-p-cresol (BHT) en fluoresceïne (natriumzout) (FL) werden verkregen van TCI (Tokio, Japan), en de testkit voor de totale antioxidantcapaciteit (T-AOC) van het Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, China). De normen voor acteoside (111530-200706) en echinacoside (111670-200503) zijn gekocht bij het National Institute for Food and Drug Control (Beijing, China). De normen voor2′-acetylacteoside, cistanoside A en isoacteoside werden als geschenk aangeboden door Dr. Zhiguo Ma. Er werd vastgesteld dat de zuiverheid van elke referentieverbinding meer dan 98% bedroeg door normalisatie van het piekoppervlak gedetecteerd door de HPLC-diode array detector (DAD).

Materiële behandeling en bepaling van gewichtsverlies

Monsters werden verzameld in de lente van 2{{10}}14 in de Ningxia-plantage van Cistanches Herba (106.08 graden N, 38,24 graden O, 1124,2 m ) in China, en geïdentificeerd door een van ons (prof. Jun Chen). Een voucher-exemplaar werd gedeponeerd bij het Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College. Ongeveer 3 kg stengels van C. deserticola werden willekeurig verzameld en gespoeld met schoon water. De bloeiwijzedelen werden verwijderd met een keramisch mes, daarna werden de stengels in plakjes van 3 mm gesneden. Elke plak van 100 g werd als replica gemeten in gewicht (W0). Zeven experimentele behandelingen met drie replicaties per behandeling werden geëvalueerd. Voor het stomen werden vier batches plakjes gedurende 1, 3, 5 of 7 minuten in waterdamp van 93 graden geplaatst. Voor het blancheren werd één behandeling gedurende 5 minuten in water van 96 graden geplaatst. Verse en direct in de oven gedroogde plakjes waren de andere twee behandelingen die in dit experiment werden gerapporteerd. De behandelde plakjes werden gewogen (W1) en bij 60 graden in de oven gedroogd. De gedroogde plakjes werden vervolgens opnieuw gewogen (W2), gemalen en verpulverd (65 mesh). De monsterpoeders werden tot de dag van analyse in vacuümzakken bij -20 graden bewaard. Gewichtsverlies werd als volgt berekend: gewichtsverlies na behandeling met hoge hitte (%)=[(W0−W1)/ W0]×100, gewichtsverlies na drogen in de oven (%)=[(W0 −W2)/W0]× 100, waarbij W0 het initiële gewicht is, en W1 en W2 de gewichten zijn gemeten na respectievelijk behandeling met hoge hitte en drogen in de oven.

Fenylethanoïde glycosiden en antioxiderende eigenschappen

Monsterextractie

Een poedervormig monster van {{0}},5-g werd geëxtraheerd met 25 ml 60% methanol-waterige oplossing door middel van KQ-250DE-echografie (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, China) bij 40 kHz, 200 W en 40 graden gedurende 30 minuten. Na extractie werden de behandelde monsters gedurende 10 minuten bij 4600 x g gecentrifugeerd (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, China). Het supernatant werd voor daaropvolgende analyses door een filter met een poriegrootte van 0,45- µm gefilterd.

Bepaling van fenylethanoïdeglycosiden

Bepaling van echinacoside, cistanoside A,acteoside, isoacteoside en 2′-acetylacteosidevan C. deserticola-monsters werd uitgevoerd zoals beschreven door Ma et al.21) met enkele aanpassingen. De analyse werd uitgevoerd met behulp van een 2695–2996 HPLC-instrument (Waters Corp., Milford, MA, VS) waarbij de ultraviolette absorptie werd gevolgd bij 33 0 nm. De scheiding werd uitgevoerd op een Merck Purospher® Star RP-C18-kolom (250 mm×4,6 mm, 5 µm) die werkte bij 30 graden. De mobiele fase bij een stroomsnelheid van 1 ml/min bestond uit oplosmiddel A (methanol) en oplosmiddel B (0,1% waterig mierenzuur, v/v). Een gradiëntelutie werd als volgt uitgevoerd: 28% A ({{30}}–10 min), 28–38% A (10–30 min), 38% A (30– 45 min), en het injectievolume was 10 µl. Een gemengde oplossing met vijf referentiestandaarden werd bereid door de referentiestandaarden op te lossen in 60% methanol tot een eindconcentratie van 0,20 mg/ml voor echinacoside, 0,21 mg/ml voor acteoside, 0,20 mg/ml voor 2′-acetylacteoside, 0,05 mg/ml. ml voor cistanoside A en 0,05 mg/ml voor isoacteoside. De oplossing werd vervolgens verdund tot zeven verschillende concentraties om ijkcurves vast te stellen. De concentratie fenylethanoïdeglycosiden van monsters werd uitgedrukt in g/kg vers gewicht (FW).

NATUURLIJK CISTANCHE-EXTRACT VERBETERT HET GEHEUGEN VOEDINGSSUPPLEMENT PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Bepaling van het zuurstofradicale absorptievermogen (ORAC)

De ORAC-test werd uitgevoerd zoals beschreven door Huang et al.22) met enkele aanpassingen. De synthetische antioxidant BHT werd als positieve controle gebruikt. In het kort werden 25 µl verdunde monsterextracten en 160 µl FL gemengd in een microtiterplaat met 96-putjes. Het mengsel werd gedurende 15 minuten bij 37 graden geïncubeerd, vóór de toevoeging van 20 µl AAPH. De fluorescentie werd gevolgd met behulp van 485 nm (excitatie) en 520 nm (emissie) met intervallen van 3- minuten gedurende 72 minuten met behulp van Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, VS). Trolox (2,5–50,0 µmol/l) werd gebruikt als referentiestandaard en de resultaten werden uitgedrukt als micromol Trolox per massa vers plakje, µmol TE/g FW.

Bepaling van 2,{1}}difenyl-1-picrylhydrazyl vrije radicalen wegvangende activiteit (DPPH)

De DPPH-test werd uitgevoerd zoals beschreven door Goupy et al.23) met enkele aanpassingen. De synthetische antioxidant BHT werd als positieve controle gebruikt. In het kort werd 1 ml van het verdunde monsterextract gemengd met 1 ml 0,2 mmol/l DPPH-methanoloplossing. De oplossingen werden gedurende 90 minuten in het donker bij 25 graden bewaard, daarna werd de absorptie gemeten bij 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/l) werd gebruikt als referentiestandaard en de resultaten werden uitgedrukt als micromol Trolox per massa vers plakje, µmol TE/g FW.

Bepaling van de ijzerreducerende antioxiderende eigenschappen (FRAP)

De FRAP-test werd uitgevoerd met behulp van de T-AOC-testkit volgens de instructies van de fabrikant.

Oplosbare suikers en polysachariden

Monsterbereiding van oplosbare suikers

Een poedervormig monster van 0.5-g werd geëxtraheerd met 25 ml van een 80% waterige ethanoloplossing door middel van KQ-250DE-echografie bij 40 kHz, 150 W en 80 graden gedurende 30 minuten. De eerste extractieve oplossing werd gefiltreerd en overgebracht naar een maatkolf van 50-ml. De sedimenten werden opnieuw geëxtraheerd en het filtraat werd gecombineerd met de eerste extractieve oplossing in de maatkolf van 50- ml en tot de maatstreep gevuld met 80% waterige ethanoloplossing.

Vervolgens werd 1 ml van deze oplossing in een glazen buis van 10- ml gepipetteerd om de ethanol in een kokend waterbad te verdampen. Er werd gedestilleerd water (5 ml) toegevoegd om het residu op te lossen. Vervolgens werd dit overgebracht naar een maatkolf van 100- ml en tot de maatstreep gevuld met gedestilleerd water. Tenslotte werd 2 ml van deze verdunde oplossing gebruikt voor de bepaling van oplosbare suikers.

Monstervoorbereiding van polysachariden

De sedimenten van de extractie van de oplosbare suikers werden aan de lucht gedroogd en geëxtraheerd met 25 ml gedestilleerd water door middel van KQ- 250DE-echografie bij 40 kHz, 150 W en 80 graden gedurende 30 minuten. De eerste extractieve oplossing werd gefiltreerd en overgebracht naar een maatkolf van 50- ml. De sedimenten werden opnieuw geëxtraheerd en het filtraat werd gecombineerd met de eerste extractieve oplossing in de maatkolf van 50- ml en tot de maatstreep gevuld met gedestilleerd water. Vervolgens werd een 5-ml oplossing hiervan in een maatkolf van 50-ml gepipetteerd en tot de maatstreep gevuld met gedestilleerd water. Tenslotte werd 2 ml van deze verdunde oplossing gebruikt voor de bepaling van polysachariden.

Bepaling van oplosbare suikers en polysachariden

De bepaling van oplosbare suikers en polysachariden werd uitgevoerd met behulp van de fenol-zwavelzuurmethode, zoals beschreven door Wang et al.24) Eén milliliter 6% fenoloplossing werd toegevoegd aan 2 ml van de monsteroplossing en goed gemengd. Vervolgens werd 5 ml geconcentreerd zwavelzuur snel toegevoegd en gedurende 5 minuten geschud. Het mengsel werd gedurende 15 minuten overgebracht naar een kokend waterbad en snel afgekoeld tot kamertemperatuur voor ultraviolette detectie. De ultraviolette absorptie werd gevolgd bij 490 nm in een UV2550-spectrofotometer (Shimadzu Co., Kyoto, Japan). Als blanco werd gedestilleerd water gebruikt. De referentiestandaard watervrije D-glucose werd nauwkeurig afgewogen en opgelost in gedestilleerd water tot een eindconcentratie van 0,10 mg/ml. Vervolgens werd 1, 2, 3, 4, 5, 6 en 7 ml van de stockoplossing in zeven maatkolven van 10-ml gepipetteerd en tot de maatstreep gevuld met gedestilleerd water. Vervolgens werden de zeven verschillende concentraties van standaardoplossingen gebruikt om ijkcurves vast te stellen.

Verdunde in ethanol oplosbare extracten

Monsters (4,0 g) werden nauwkeurig gewogen om hun verdunde, in ethanol oplosbare extracten te bepalen, volgens de methode beschreven in de Chinese Pharmacopoeia (editie 2015).25) Het poedervormige monster werd gewogen (W3) en geëxtraheerd met 100 ml 50% waterige ethanoloplossing in een erlenmeyer van 250- ml, af en toe schudden gedurende 6 uur en 18 uur laten staan. De extractieve oplossing werd gefiltreerd en 20 ml van het filtraat werd tot droog ingedampt, gedurende 3 uur bij 105 graden gedroogd en gedurende 30 minuten in een exsiccator (silicagel) gekoeld. Tenslotte werd de hoeveelheid nauwkeurig afgewogen (W4). Het verdunde, in ethanol oplosbare extractgehalte werd uitgedrukt als g/kg FW van het monster. Verdunde in ethanol oplosbare extracten werden als volgt berekend: verdunde in ethanol oplosbare extracten (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, waarbij W3 het initiële gewicht is W4 is het gewicht gemeten na extractie, en W5 is het gewichtsverlies na drogen in de oven (%).

Statistische analyse

Om eventuele verschillen tussen behandelingsgroepen te verduidelijken, werd eenrichtings-ANOVA toegepast met behulp van SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, VS). De verschillen werden beoordeeld met behulp van de Duncan-test met een significantielimiet van 0.05. De gegevens werden uitgedrukt als de standaardafwijking (SD) (n=3).

Resultaten en discussie

Gewichtsverlies

Het gewicht van C. deserticola-schijfjes bepaalt rechtstreeks de commerciële waarde ervan op de geneeskrachtige kruidenmarkt. Zoals weergegeven in Tabel 1 werd het gewichtsverlies van C. deserticola geanalyseerd na behandeling met hoge temperaturen en drogen in een oven. Er werd een lager gewichtsverlies gevonden wanneer de plakjes direct in de oven werden gedroogd in plaats van gestoomd of geblancheerd. Geblancheerde monsters vertoonden het hoogste gewichtsverlies. Gestoomde monsters hadden een hoger gewichtsverlies bij een langere stoomtijd. Zeven minuten stomen, de langste tijd waarin de vers gesneden plakjes hun vorm behouden, bleek significant (p<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Fenylethaanglycosiden

Echinacoside-, cistanoside A-, acteoside-, isoacteoside- en 2′-acetylacteoside-niveaus in plakjes C. deserticola verwerkt met verschillende methoden zijn weergegeven in figuur 1. Monsters die 7 minuten werden gestoomd, bevatten 2,16 g / kg FW echinacoside en {{6} },29 g/kg FW cistanoside A, een toename van respectievelijk −140 en −6 maal, vergeleken met de verse plakjes. Het gehalte aan fenylethanoïdeglycosiden steeg scherp wanneer de verse monsters met name werden behandeld met hoge temperaturen en gedroogdacteoside, isoacteoside en 2′-acetylacteoside,terwijl ze niet werden gedetecteerd in de verse monsters. Een mogelijke reden hiervoor zou de afbraak van fenylethanoïdeglycosiden door peroxidase en -glucosidase kunnen zijn. Deze enzymen zouden worden geïnactiveerd in de monsters die zijn gedroogd door hoge temperaturen en een verlaagd watergehalte, wat ertoe leidt dat hoge niveaus van fenylethanoïdeglycosiden in de extracten achterblijven. Bovendien zijn fenylethanoïdeglycosiden fenolverbindingen, die in verse planten zouden worden gesynthetiseerd als reactie op de stress van hoge temperaturen en vochtverlies.

NATUURLIJKE CISTANCHE TUBULOSA VERBETEREN DE NIERFUNCTIE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Van zowel het stomen als het blancheren van vers gesneden C. deserticola werd gerapporteerd dat het de inhoud van echinacoside en acteoside verhoogt.19,20) In de huidige studie gaf blancheren echter een significant (p<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by fenylethanoïde glycosidenin C. deserticola-schijfjes kunnen worden verbeterd door een stoombehandeling.

Bovendien ontdekten we dat de stoomtijd cruciaal was bij het bepalen van het gehalte aan fenylethanoïdeglycosiden. Echinacoside, cistanoside A, acteoside en isoacteoside vertoonden een soortgelijke stijgende trend tijdens het stoomproces, dat scherp toenam (na 1, 3 minuten) en hun maximale niveaus bereikte na 7 minuten. Er werden geen significante veranderingen waargenomen in de vier bovengenoemde fenylethanoïdeglycosiden tijdens het stoomproces van 3 tot 7 minuten. Integendeel, 2′-acetylacteoside nam significant toe (p<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

Fig. 1. Concentratie (g/kg FW) van echinacoside (A), Cistanoside A (B), Acteoside (C), isoacteoside (D) en 2′-acetylacteoside (E) in Cistanche deserticola-plakjes volgens verschillende verwerkingsmethoden Verschillende letters (a-e) duiden op statistisch significante verschillen tussen behandelingen (Duncan-test, p<0.05, n=3).

Antioxidante werking

De antioxiderende eigenschappen van de plakjes, zoals getest door ORAC, DPPH en FRAP, worden weergegeven in figuur 2. Zoals verwacht vertoonden de ORAC-waarden een grote variatie tussen de monsters, variërend van 13,34 µmol TE/g FW in verse monsters tot 108,62 µmol TE/g FW bij 7 minuten stomen. Tijdens het stoomproces nam de ORAC-waarde 4-voudig toe tussen 1 en 7 minuten stomen. Soortgelijke trends werden waargenomen in zowel de DPPH- als de FRAP-assays, waarbij snelle stijgingen tijdens de stoombehandeling te zien waren. Hoewel de met stoom behandelde monsters aanvankelijk lagere antioxidantwaarden hadden (na 1 min), vertoonden ze een veel beter behoud van antioxidantcapaciteit tijdens het proces. In het geval van blancheren werden geen significante verschillen in antioxiderende eigenschappen waargenomen vergeleken met direct drogen in de oven.

Fig. 2. Niveaus (μmol TE/g FW) van de zuurstofradicale absorptiecapaciteit (ORAC) (A), 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl vrije radicalen wegvangende activiteit (DPPH) (B), en IJzerreducerende antioxiderende eigenschappen (FRAP) (C) van Cistanche deserticola-plakjes volgens verschillende verwerkingsmethoden Verschillende letters (a-f) duiden op statistisch significante verschillen tussen behandelingen (Duncan-test, p<0.05, n=3).

De ORAC-antioxidantactiviteit in rauwe stengels of plakjes C. deserticola is niet eerder gerapporteerd. De ethanolextracten van ruwe stengels van C. deserticola zijn echter gemeten in de DPPH- en FRAP-assays,28) en laten een hoge antioxiderende activiteit zien, iets lager dan die van 2(3)-t-butyl-4-hydroxyanisol (BHA) en hoger dan BHT. Bovendien vertoonden fenylethanoïdeglycosiden geïsoleerd uit C. deserticola sterke DPPH-wegvangende activiteiten, iets lager dan ascorbinezuur29) en hoger dan -tocoferol.2) C. deserticola kan een potentiële bron van natuurlijke antioxidanten zijn, omdat de antioxiderende eigenschappen van de geïsoleerde zuivere verbindingen van C. deserticola waren hoger dan die van sommige synthetische antioxidanten. Zoals weergegeven in Tabel 2 vertoonde BHT significant (p<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

De DPPH-test maakt gebruik van zowel waterstofatoomoverdracht (HAT) als single elektronenoverdracht (SET) mechanismen, terwijl de ORAC- en FRAP-testen respectievelijk de principes van HAT- en SET-reacties volgen.30) In de huidige studie zijn de algemene trends van de antioxidantcapaciteit geëvalueerd door de drie assays waren zeer vergelijkbaar. Zo bevestigden we dat gedroogde plakjes C. deserticola (gestoomd, direct in de oven gedroogd en geblancheerd) significant (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Oplosbare suikers, polysachariden en verdunde, in ethanol oplosbare extracten

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>geblancheerd. Geblancheerde plakjes hadden een zeer laag gehalte aan oplosbare suikers, polysachariden en verdund in ethanol oplosbaar extract.het goed met hun hoge gewichtsverlies. Verse monsters hadden een significante (p<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

Fig. 3. Concentratie (g/kg FW) van oplosbare suikers (A), polysachariden (B) en verdunde in ethanol oplosbare extracten (C) van Cistanche deserticola-plakjes volgens verschillende verwerkingsmethoden. Verschillende letters (a-e) duiden statistisch aan significante verschillen tussen behandelingen (Duncan-test, p<0.05, n=3).

Direct in de oven gedroogde plakjes hadden het hoogste gehalte aan verdunde, in ethanol oplosbare extracten (89,26 g/kg FW), terwijl de geblancheerde plakjes het laagste hadden (47,60 g/kg FW). Hoewel alle verwerkte plakjes C. deserticola voldeden aan de norm van de Chinese Farmacopee (editie 2015) om als Cistanches Herba te worden gekwalificeerd, zouden de geblancheerde plakjes minder gezondheidsvoordelen opleveren dan direct in de oven gedroogde monsters vanwege het ernstige verlies aan verdunde, in ethanol oplosbare uittreksels. Wat het stoomproces betreft, was de trend van oplosbare suikers zeer vergelijkbaar met de trend die werd waargenomen voor de verdunde, in ethanol oplosbare extracten, en nam geleidelijk af zonder significante veranderingen tussen 3 en 7 minuten. De concentratie polysachariden fluctueerde met een lichte stijging gedurende de gehele stoomperiode. Opvallend was dat 7 minuten stomen een goed behoud van polysachariden liet zien, maar een groot verlies aan oplosbare suikers, terwijl 5 minuten stomen het omgekeerde liet zien, vergeleken met direct drogen in de oven.

Conclusie

We hebben voor het eerst het effect van stomen op bioactieve verbindingen en antioxiderende activiteit in vers gesneden C. deserticola gerapporteerd en belangrijke informatie verstrekt voor het ontwikkelen van effectieve processen voor de behandeling na de oogst van C. deserticola-stengels. Verse plakjes vertoonden de slechtste efficiëntie bij het extraheren van fenylethanoïdeglycosiden en antioxidantverbindingen, waaruit bleek dat deze stoffen gevoelig waren voor enzymatische afbraak. Gestoomde monsters hadden daarentegen de hoogste niveaus van fenylethanoïdeglycosiden en antioxiderende activiteiten. Hoewel blancheren het gehalte aan acteoside, isoacteoside en 2′-acetylacteoside enigszins verhoogde in vergelijking met direct drogen in de oven, daalden de waarden voor gewicht, oplosbare suikers, polysachariden en verdunde in ethanol oplosbare extracten allemaal dramatisch. Bij het stoomproces namen de niveaus van fenylethanoïdeglycosiden en polysachariden in de loop van de tijd licht toe. Stomen gedurende 5 en 7 minuten aanzienlijk (p<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sugars, polysachariden en verdunde in ethanol oplosbare extracten.

Cistanche TUBULOSA ANTI-VERMOEIDHEID ANTI-OXIDANT PHGS75% ECH 30% ACT 12%