Effect van glycosiden van cistanche op de expressie van mitochondriaal voorlopereiwit en keratine type II cytoskelet 6A in een rattenmodel van vasculaire dementie

Meer informatie kunt u contact opnemen met:Joanna.jia@wecistanche.com

Abstract

Invoering

VasculairDementieis de op één na meest voorkomende vorm van dementie (Neltner et al., 2014; Sachdev et al., 2014; Tatlisumak et al., 2014; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Reijmer et al., 2016 ). De niet aflatende en onomkeerbare geheugenbeschadiging die optreedt bij patiënten met vasculaire dementie leidt tot een ernstige verslechtering van de kwaliteit van leven en legt een zware economische last op de familie van de patiënt (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Chen et al., 2014; Chen et al. al., 2014; Brandenburg et al., 2016). Preventie en behandeling van de ziekte worden steeds belangrijker in landen met een vergrijzende bevolking. Daarom is er toenemende onderzoeksinteresse in het zoeken naar effectieve medicijnen voor de behandeling van vasculaire dementie.

Cistancheis een plant die wordt gebruikt als noötropicum in de traditionele Chinese medische theorie (Chen et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015). Glycosiden vanCistanche(GC) zijn een preparaat dat is geëxtraheerd uitCistanche. Er is aanzienlijk bewijs dat het idee ondersteunt dat GC de axonale regeneratie kan verbeteren (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu et al., 2016). Talrijke dierstudies hebben aangetoond dat GC de cognitieve functie verbetert (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer en Maier, 2015).

We gebruikten eerder bilaterale occlusie van de gemeenschappelijke halsslagader om ratmodellen vanvasculairDementie. In dit model zijn ruimtelijk leren en geheugen aanzienlijk verbeterd na interventie met GC (Chen et al., 2015). GC kan ook reguleren en verbeterenimmuniteitmaar is vooral bekend als zenuwtonicum en geheugenversterker (Chen et al., 2014; Procaccio et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016).

Er zijn echter maar weinig studies die de moleculaire mechanismen hebben onderzocht die ten grondslag liggen aan de effecten van GC invasculairDementie. Hier gebruiken we proteomics om de relatie tussen eiwitten en vasculaire dementie te onderzoeken, om het mechanisme te bepalen dat ten grondslag ligt aan het neuroprotectieve effect van GC.

Cistanchedeserticola heeft veel effecten, klik hier voor meer informatie

Materialen en methodes

Dieren

Zes weken oude volwassen mannelijke Wistar-ratten zonder specifieke ziekteverwekkers (n=37), met een gewicht van 230-270 g, werden geleverd door het Experimental Animal Center, Hubei Province, China (licentienummer: SYXK (E) { {7}}). Het experiment volgde de nationale richtlijnen voor de zorg en het gebruik van proefdieren en de consensus-auteursrichtlijnen voor dierethiek en dierenwelzijn, opgesteld door de International Association of Veterinary Editors. Het manuscript is opgesteld in overeenstemming met de richtlijnen voor Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE).

Ratten werden gehuisvest in groepen van drie per kooi bij 25 graden met een 12 -uur licht/donker cyclus en vrije toegang tot voedsel en water. Ratten (n=37) werden willekeurig toegewezen aan een controlegroep (n=10), een vasculaire dementiegroep (n=12) en een vasculaire dementie plus GC-groep (GC-behandeld, n=15).

Oprichting van rattenmodellen van vasculaire dementie

Onder diepe anesthesie met 10 procent chloraalhydraat werden bilaterale gemeenschappelijke halsslagaders van ratten met vasculaire dementie en met GC behandelde groepen zorgvuldig gescheiden van de omringende weefsels, vervolgens stevig geligeerd met behulp van 10-0 hechtdraad aan beide uiteinden, en de gemeenschappelijke halsslagader slagaders werden doorgesneden. De ratten in de controlegroep werden onderworpen aan dezelfde chirurgische procedure, behalve dat de gemeenschappelijke halsslagaders werden blootgesteld maar niet afgebonden. Het Morris-waterdoolhof werd uitgevoerd volgens eerder beschreven methoden om te verifiëren of het diermodel met succes was vastgesteld (Chen et al., 2015).

Farmacologische behandeling

Cistanche poeder(Certificaat nr. Z20050216, Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, China) werd gemengd met ultrapuur water en geëxtraheerd door TF-2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, China) (vermogen 100 procent, 30 graad, 40 minuten). De GC-concentratie werd gemeten door het testen van fenylethanoïde glycosiden. Na de verwonding kregen alle ratten in de met GC behandelde groep GC (10 mg/kg/dag, 1 ml, intraperitoneaal, eenmaal daags) gedurende 14 opeenvolgende dagen. Ratten in de controle- en vasculaire dementiegroepen kregen zoutoplossing (1 ml, intraperitoneaal).

Immunohistochemie

Na 14 dagen toediening van GC (of zoutoplossing) werden zeven ratten van elke groep onthoofd en werden de hersenen geëxtraheerd. De cerebrale cortex werd verwijderd en het hippocampusweefsel werd zorgvuldig uitgesneden en in 3- μm dikke coupes gesneden met behulp van een vriesmicrotoom. Secties van hippocampusweefsel werden 30-60 minuten gefixeerd met 4% paraformaldehyde, gewassen met PBS en 10 minuten geïncubeerd in 3% H202 gevolgd door geitenserum gedurende 15 minuten, alles bij kamertemperatuur.

Secties werden vervolgens geïncubeerd in konijn-anti-rat gefosforyleerd p-tau primair antilichaam

(1:1,000 in PBS; Bioworld Technology, Inc., TX, VS) en primair antilichaam tegen ratten-amyloïde-beta (A ) (1:1,000; Bioworld Technology, Inc.) in een natte doos bij 37 graden gedurende 2-3 uur, vóór incubatie in het secundaire antilichaam (geiten-anti-muis IgG; Bioworld Technology, Inc.) gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur. Monsters werden gevisualiseerd met 3,3'-diaminobenzidinetetrahydrochloride (Dako, Tokyo, Japan). Beelden werden vastgelegd met een lichtmicroscoop (Olympus, Tokyo, Japan) en verwerkt met Photoshop (versie 7.0; Adobe, San Jose, CA, VS).

Immunopositieve deeltjes waren bruin, dus bruine kleuring in het cytoplasma werd geselecteerd als een positieve reactie en semi-kwantificering werd uitgevoerd met behulp van een HMIAS-2000 beeldanalysesysteem (Qianpin Co., Wuhan, China). In elk monster werden willekeurig vijf gezichtsvelden geselecteerd en in elke weergave werden vijf positieve cellen geselecteerd en de gemiddelde grijswaarde werd gemeten als een reeks relatieve waarden.

Cistanchekan verbeterenimmuniteiten voorkomencardiovasculairencerebrovasculairziekten

Tweedimensionale gelelektroforese (2-DE)

Na 14 dagen toediening van GC of zoutoplossing werden acht ratten van elke groep verdoofd en onthoofd, en werden de hippocampusweefsels snel geoogst en onmiddellijk ingevroren in vloeibare stikstof. Alle weefsels werden gehomogeniseerd in vloeibare stikstof met behulp van een mortier en stamper en verzameld in lysisbuffer (7 M ureum, 2 M thioureum, 2 procent CHAPS, 20 mM Tris). Onoplosbare deeltjes werden verwijderd door centrifugatie bij 13 000 x g gedurende 20 minuten bij 4 graden. Verontreinigd nucleïnezuur werd verbroken door intermitterende sonische oscillatie gedurende 5 minuten. Monsters werden opnieuw onder dezelfde omstandigheden gecentrifugeerd en de supernatanten werden verzameld. Eiwitconcentratie werd gemeten met behulp van de Bradford-assay (Beyotime Inc., China) en de monsters werden tot gebruik bij -80 graden bewaard.

Om het eiwitexpressieprofiel in de hippocampus te onderzoeken, werd 2-DE uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, VS). De eiwitoplossing (120 ug/monster) werd aangepast met rehydratatiebuffer tot een eindvolume van 350 L. Iso-elektrische focussering werd uitgevoerd met behulp van IPG-strips (pH 4-7, maat 22 cm) op een Ettan IPG of II-systemen (allemaal van GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare). Daarna werden de stroken gedurende 15 minuten geëquilibreerd.

{{0}}DE werd uitgevoerd met 12,5 procent natriumdodecylsulfaat (SDS) polyacrylamidegels (24 cm x 19,5 cm x 1,0 mm) met 0,5 procent agarose-afdichtingslijm in een Ettan DALTSix-elektroforese systeem (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare).

Elektroforese werd uitgevoerd bij 2 W gedurende 45 minuten, gevolgd door scheiding bij 17 W gedurende 4 uur totdat het broomfenolblauw bijna de bodem van de 2-DE-gel had bereikt.

De gels werden gekleurd met zilvernitraat (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, China) en afbeeldingen werden vastgelegd op een 2-DE-beeldscansysteem (VT, VS).

Image Master 2D Platinum 5.0-software (GE, Inc., PA, VS) werd gebruikt om het 2-DE-beeld te scannen en te analyseren.

informatie werd verkregen met behulp van een 4700 MALDI TOF/TOF massaspectrometer (GE, Inc.).

Matrix-ondersteunde laserdesorptie/ionisatie vluchttijd massaspectrometrie

Voor peptide-massa-vingerafdrukken en daaropvolgende analyse werden gels in plakjes gesneden en onderworpen aan een enigszins aangepast in-gel-protocol zoals beschreven in de instructies van de fabrikant. Er was methanol (Fisher M/4056/17), acetonitril (Fisher A/0626/17), trypsine (Promega V5280), trypsine-resolve-oplossing (Promega V530), ammoniumbicarbonaat (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096) en trifluorazijnzuur (GE HealthCare).

In het kort werden eiwitvlekken ontkleurd met ontkleuringsoplossing (30 mM K3Fe(CN)6:100 mM NaS2O3=1:1) en gedehydrateerd met 100 mm ammoniumbicarbonaat en acetonitril, gereduceerd met trichloormethylfosfaat gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur, en vervolgens gealkyleerd in joodazijnzuur gedurende 30 minuten in het donker. De gel werd 's nachts bij 37°C geïncubeerd in 50 L 12 ng/μL gemodificeerde trypsine-oplossing in 25 mM ammoniumbicarbonaat, pH 8,6. Peptiden werden uit de gelplug geëxtraheerd met 1 procent mierenzuur/2 procent acetonitril en geconcentreerd met behulp van C-18 Zip-Tips. Daarna werden monsters bereid met behulp van een Prespotted AnchorChip (PAC96) -doel met een alfa-cyaan-4-hydroxykaneelzuurmatrix voor 96 monstervlekken en 24 kalibratievlekken. Massaspectrumpeptide-informatie werd verkregen met behulp van een 4700 MALDI TOF/TOF-massaspectrometer. De resulterende gegevens werden geanalyseerd met behulp van een GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, VS), die een MASCOT-databasezoekopdracht opriep (Matrix Science, Londen, VK) met behulp van een muissubset van de National Center for Biotechnology Information-database.

Cistanchekan antibacterieel zijn en voorkomenvasculairDementie

Western blot-test

De hippocampus werd bereid en de eiwitconcentratie werd gemeten zoals hierboven beschreven. Eiwitmonsters werden op een SDS-polyacrylamidegel geladen, aan elektroforese onderworpen en overgebracht naar een polyvinylideendifluoridemembraan. Het membraan werd gewassen in Tris-gebufferde zoutoplossing en Tween 20, geblokkeerd in 10% magere melk en 0,05% Tween in fosfaatgebufferde zoutoplossing. De membranen werden 's nachts bij 4 graden geïncubeerd met polyklonaal anti-mitochondriaal voorlopereiwit van konijn (1:2, 000; Proteintech Inc., Chicago, IL, VS) en konijn-anti-keratine type II cytoskelet 6A (KRT6A) polyklonaal antilichaam (1:1,000; Proteintech Inc.) in 10 procent magere melk. Het secundaire antilichaam, mierikswortelperoxidase-geconjugeerd geit-anti-konijn (Google Biotechnology Inc., Wuhan, provincie Hubei, China) werd verdund (1:2,000) in 10 procent magere melk en geïncubeerd bij 25 graden voor 1 uur. Monoklonaal anti-rat-actine-antilichaam van muizen (1:2,000; Google Biotechnology Inc.) werd als interne referentie gebruikt. Een western blot-scansysteem (V300; EPSON, Nagano-ken, Japan) en AlphaEaseFC Adobe PhotoShop (Alpha Innotech, CA, VS) werden gebruikt om mitochondriaal precursoreiwit en KRT6A-expressieniveaus te bepalen, uitgedrukt als geïntegreerde optische dichtheid genormaliseerd naar -actine.

statistische analyse

Kwantitatieve gegevens werden uitgedrukt als het gemiddelde ± SD. ImageMaster 2D Platinum 5.0-software (GE, Inc.) werd gebruikt om de 2-DE-informatie te scannen en te analyseren. Een tweerichtingsvariantieanalyse werd uitgevoerd met GraphPad Prism 6. 0 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, VS). P < 0,05="" werd="" als="" statistisch="" significant="">

Resultaten

Effecten van GC op p-tau en A-immunoreactiviteit in de hippocampus van rattenmodellen van vasculaire dementie

Immunohistochemie toonde aan dat p-tau- en A-expressie groter was na 14 dagen behandeling met GC dan in de controlegroep. De expressie van deze eiwitten in de met GC behandelde groep was echter significant lager dan die in de vasculaire dementiegroep (P <0.05; figuur="">

GC gereguleerde expressie van mitochondriaal voorlopereiwit en KRT6A in de hippocampus van rattenmodellen van vasculaire dementie

De expressie van de twee eiwitten was significant anders in de met GC behandelde groep dan in de groep met vasculaire dementie: mitochondriaal precursoreiwit (ook bekend als heat shock protein (HSP) 75 kDa) werd opgereguleerd en KRT6A werd neerwaarts gereguleerd (figuren Figuren 22, 33 ). Eiwitinformatie staat vermeld in Tabel 1.

Discussie

Vasculaire dementie is een syndroom dat wordt gekenmerkt door stoornissen in geheugen, gedrag en cognitie, en wordt voornamelijk veroorzaakt door cerebrovasculaire aandoeningen (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Oliveira et al., 2014; Szalárdy et al., 2015). De pathologie die alle vormen van dementie gemeen hebben, en verantwoordelijk is voor de progressie ervan, is neurodegeneratie (Foster et al., 2014; Fischer en Maier, 2015; Kalaria et al., 2015;

Cistanchekan de immuniteit verbeteren envoorkomenvasculairDementie

Chen et al., 2016; Pérez-Hernández et al., 2016). Veel plantenextracten hebben therapeutische eigenschappen. De biologische activiteit van deze verbindingen tegen neurodegeneratie is voornamelijk te danken aan hun antioxiderende en anti-amyloïdogene effecten (Fischer en Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez-Hernández et al., 2016).

Cistancheis een Chinees kruid dat wordt gebruikt als noötropicum in de traditionele Chinese geneeskunde. Opkomend onderzoek wijst uit datCistancheis gunstig bij geheugenverlies, met name bij de remming van de progressie van geheugenverlies (Procaccio et al., 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016). Er is aanzienlijk bewijs dat GC axonale regeneratie kan bevorderen en als een zenuwgroeimodulator kan werken (Talarowska et al., 2014; Gu et al., 2016; Xu et al., 2016). In ons eerdere werk met behulp van het Morris-waterdoolhof, ontdekten we dat de ontsnappingslatentie van rattenmodellen van vasculaire dementie afnam na behandeling met GC, wat aangeeft dat GC het ruimtelijk leervermogen verbetert. Hoewel GC op grote schaal is gebruikt vanwege zijn neuroprotectieve effect (Chen et al., 2015), blijft het mechanisme dat aan dit effect ten grondslag ligt onduidelijk.

Het is algemeen bekend dat A-peptiden en p-tau in hoge mate tot expressie worden gebracht in seniele plaques en neurofibrillaire tangles. A- en tau-eiwitten spelen een sleutelrol in de morfogenese van neuronen, maar in bepaalde pathologische situaties genereren ze afwijkende aggregaten die neurotoxisch zijn (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Wang et al., 2015; Reijmer et al., 2016). De huidige immunohistochemische resultaten geven aan dat p-tau- en A-eiwitexpressie in met GC behandelde rattenmodellen van vasculaire dementie significant groter was dan die in controleratten maar lager dan die in onbehandelde modelratten. Daarom kan het neuroprotectieve effect van GC optreden door de toxiciteit van A en p-tau te verminderen.

Onze proteomische studie in de hippocampus van de rat onthulde grote verschillen in de expressie van het mitochondriale voorlopereiwit, keratine en KRT6A. In termen van functie speculeren we dat het neuroprotectieve effect van GC geassocieerd kan zijn met de hermodellering van de dendritische wervelkolomstructuur.

Mitochondriaal voorlopereiwit behoort tot de HSP70-familie (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar en Baines, 2015; McGeer en McGeer, 2015). HSP75 is betrokken bij moleculaire chaperonne-activering en rijping en handhaaft de stabiliteit en normale functie van cellen (Booth et al., 2014, 2016; Tavallai et al., 2015).

Men denkt dat het mitochondriale voorlopereiwit een belangrijke rol speelt bij de transductie van sommige signaalroutes (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b). Recente onderzoeken hebben aangetoond dat de HSP90-familie de werkomgeving van mitochondriale eiwitvouwing reguleert (An et al., 2014; Liu en Landgraf, 2015; Roberts et al., 2015; Stary en Giffard, 2015). HSP75 is gelokaliseerd in mitochondriën en remt de vorming van vrije zuurstofradicalen (Radu et al., 2014; Holloway et al., 2016). Onze resultaten laten zien dat de expressie van HSP75 in de met GC behandelde groep met een factor 2 was verhoogd, wat suggereert dat GC een antioxiderende rol speelt, de cellulaire oxidatieve balans verbetert en apoptose vertraagt. Deze bevinding levert interessante aanwijzingen op over de interacties van het mitochondriale chaperonne-eiwit met andere eiwitten.

Een ander verschillend tot expressie gebracht eiwit was KRT6A. De keratines, ook wel cytokeratines genoemd, zijn intermediaire filamenteiwitten die een onoplosbaar dicht netwerk door het cytoplasma creëren, wat structurele ondersteuning geeft aan de epitheelcel (Haricharan et al., 2014; Rorke et al., 2015; Szymanski et al., 2015) . Cytokeratines spelen echter ook een actieve rol in verschillende cellulaire overlevingsprocessen (proliferatie en apoptose) (Zhu et al., 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov en Komianos, 2016). Deze eiwitten kunnen fosforylering ondergaan en maken ook deel uit van het overbruggende contact tussen de epitheelcel en zijn micro-omgeving (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo et al., 2014; Zhou et al., 2014; Chakrabarti et al., 2015) . CK6a is de dominante isovorm in de borstklier (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) en wordt opgereguleerd bij het genezen van wondranden van de huid, wat aangeeft dat cytokeratine betrokken is bij cellulaire proliferatie en migratie. We zijn echter de eersten die downregulatie van KRT6A in de hippocampus laten zien; KRT6A-expressie was 1,58-voudig verlaagd in de met GC behandelde groep vergeleken met de vasculaire dementiegroep.

Daarom kan het neuroprotectieve effect van GC geassocieerd zijn met remming van neurogliale hyperplasie tijdens cerebrovasculaire ischemie.

Samen suggereren de resultaten van onze studie dat GC zijn leer- en geheugenbevorderende effecten uitoefent in rattenmodellen van vasculaire dementie door de expressie van A en p-tau te verminderen, waardoor de accumulatie van deze twee toxische eiwitten wordt verzwakt en op zijn beurt de neuronale toxiciteit. Bovendien zou GC de expressie van mitochondriaal precursoreiwit en KRT6A kunnen reguleren, die geassocieerd zijn met synaptische cytoskeletmorfogenese en mitochondriaal energiemetabolisme. Daarom bieden onze gegevens nieuw inzicht in de onderliggende mechanismen van GC's, wat de mogelijkheid benadrukt dat GC's meerdere doelen hebben, wat een veelbelovende nieuwe therapeutische optie biedt voor de behandeling van vasculaire dementie.

voetnoten

Financiering:Deze studie werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China, nr. 30960520; de Natural Science Foundation van de autonome regio Binnen-Mongolië van China, nr. 2016MS0837.

Belangenconflicten: Geen verklaard.

Onderzoeksethiek:Het onderzoeksprotocol werd goedgekeurd door de Animal Ethics Committee van het eerste ziekenhuis van Wuhan. De experimentele procedure volgde de National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Publications No. 8023, herzien 1978), en "Consensus Author Guidelines on Animal Ethics and Welfare", opgesteld door de International Association for Veterinary Editors (IAVE ). Alles werd in het werk gesteld om het aantal en het lijden van de in de experimenten gebruikte dieren tot een minimum te beperken. De paper is opgesteld in overeenstemming met de "Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments Guidelines" (ARRIVE-richtlijnen).

Overeenkomst voor bijdragers: een verklaring van de "Publicatieovereenkomst" is ondertekend door een geautoriseerde auteur namens alle auteurs voorafgaand aan publicatie.

Plagiaatcontrole: Dit papier is twee keer gecontroleerd met kopieersoftware iThenticate.

Peer-review:Er is een dubbelblind en streng peer review-proces uitgevoerd om de integriteit, kwaliteit en betekenis van dit document te waarborgen.

Gekopieerd door Slone-Murphy J, Fransman B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M

Referenties

1. Een J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. Weefsel-type plasminogeenactivator bemiddelt neurogliale koppeling in het centrale zenuwstelsel. Neurowetenschap. 2014; 257: 41-48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. Pathofysiologie van perfusie van witte stof bij de ziekte van Alzheimer en vasculaire dementie. Brein. 2014;137:1524-1532.

3. Booth L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A, Dent P. Regulering van OSU-03012-toxiciteit door ER-stress-eiwitten en ER-stress-inducerende geneesmiddelen. Mol Kanker Ther. 2014;13:2384-2398.

4. Behandeling met Booth L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012 en Viagra-behandeling remt de activiteit van meerdere chaperonne-eiwitten en verstoort de bloed-hersenbarrière : implicaties voor antikankertherapieën. J Cell Fysiol. 2015a;230:1982-1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K is een universeel therapeutisch doelwit voor menselijke ziekten. J Cell Fysiol. 2015b;230:1661- 1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. multi-kinaseremmers kunnen associëren met een hitteschok eiwitten via hun NH2-uiteinden waardoor ze de chaperonnefunctie onderdrukken. Oncodoel. 2016;7:12975-12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. Modulatie van extracellulair signaalgerelateerd kinase, cycline D1, gliaal fibrillair zuur eiwit en vimentine-expressie in met estradiol voorbehandelde astrocytculturen behandeld met

competentie en progressie groeifactoren. J Neurosci Res. 2015a;93:1378– 1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. Effect van groeifactoren en steroïde hormonen op heemoxygenase en cycline D1-expressie in primaire astrogliale celculturen. J Neurosci Res. 2015b; 93: 521-529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. Neuroactieve moleculen en groeifactoren moduleren cytoskeletale eiwitexpressie tijdens astrogliale celproliferatie en differentiatie in cultuur. J Neurosci Res. 2016;94:90-98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Resident microglia in plaats van perifere macrofagen vascularisatie in hersentumoren bevorderen en een bron zijn van alternatieve pro-angiogene factoren. Acta neuropathie. 2016;131:365-378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN. Morfometrie van de hippocampale microvasculatuur bij post-beroerte en leeftijdsgerelateerde dementieën. Neuropathol Appl Neurobiol. 2014;40:284-295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS. Farmacologische regulatie van AMPK bij borstkanker beïnvloedt de eigenschappen van het cytoskelet die betrokken zijn bij de vorming van microtentakel en

bijlage. Oncodoel. 2015;6:36292-36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K , Ihara M, Kalaria RN. Frontale hyperintensiteiten van de witte stof, clasmatodendrose en neovasculaire afwijkingen bij veroudering en dementie na een beroerte. Brein. 2016;139:242-258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. Glycosides van Cistanche verbeteren het leren en geheugen in het rattenmodel van vasculaire dementie. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Asiaticoside verzwakt geheugenbeschadiging veroorzaakt door voorbijgaande cerebrale ischemie-reperfusie bij muizen via een ontstekingsremmend mechanisme. Pharmacol Biochem Gedrag. 2014;122:7–

16. Fischer R, Maier O. Interrelatie van oxidatieve stress en ontsteking bij neurodegeneratieve ziekte: rol van TNF. Oxid Med Cell Longev. 2015; 2015: 610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN. Piramidale neuronen van de prefrontale cortex bij post-beroerte, vasculaire en andere verouderingsgerelateerde dementieën. Brein. 2014;137:2509– 2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. Hsp70-regulatie op Nox4/p22phox en de integriteit van het cytoskelet als een effect van losartan in vasculaire gladde spiercellen. Celstress begeleiders. 2014;19: 115-134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: een review van neurofarmacologie. Voorzijde Pharmacol. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. Structurele mechanismen van cyclofiline D-afhankelijke controle van de mitochondriale permeabiliteitstransitieporie. Biochim Biophys Acta. 2015; 1850: 2041-2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. Bijdrage van een alveolaire cel van oorsprong aan het hoogwaardige kwaadaardige fenotype van zwangerschapsgerelateerde borstkanker. oncogeen. 2014;33:5729-5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. Het richten van oncogenen op een gedefinieerde subset van borstcellen toont aan dat de initiërende oncogene mutatie het resulterende tumorfenotype definieert. Int J Biol

Wetenschap. 2016;12:381-388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. Vaatziekte, hypoxie en gerelateerde aandoeningen. In: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​redactie. Neuropathologie van Greenfield. Londen: CRC; 2015.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA. Keratine 16 reguleert de aangeboren immuniteit als reactie op het doorbreken van de epidermale barrière. Proc Natl Acad Sci VS A. 2013;110:19537-19542.

25. Liu W, Landgraf R. Gefosforyleerde en niet-gefosforyleerde serine 13 van CDC37 stabiliseren verschillende interacties tussen zijn client- en HSP90-bindende domeinen. Biochemie. 2015; 54: 1493-1504.

26. Love S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG. Erratum: ontwikkeling, beoordeling, validatie en implementatie van een consensusprotocol voor de beoordeling van cerebrale amyloïde angiopathie in post-mortem hersenweefsel. Ben J Neurodegener Dis. 2015;4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. Gericht op microglia voor de behandeling van de ziekte van Alzheimer. Expert Mening Ther Targets. 2015;19:497-506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT. Arteriolosclerose die meerdere hersengebieden aantast, is gekoppeld aan hippocampale sclerose van veroudering. Brein. 2014;137:255-267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT. Loopbandtraining verhoogt de SIRT-1- en PGC-1-alfa-eiwitniveaus en AMPK-fosforylering in quadriceps van ratten van middelbare leeftijd op een intensiteitsafhankelijke manier. Bemiddelaars Ontstek. 2014;2014:987017. [PMC gratis artikel]

30. Pérez -Hernández J, Zaldívar -Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. Een mogelijk alternatief tegen neurodegeneratieve ziekten: fytodrugs. Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC gratis

artikel] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: mechanochemische simulaties van contractie en polariteituitlijning in actomyosinenetwerken. PLoS-berekening

Biol. 2016;12:e1004877. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

32. Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. Perspectieven van op geneesmiddelen gebaseerde neuroprotectie gericht op mitochondriën. Rev Neurol (Parijs) 2014; 170: 390-400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK-signalering tijdens de ontwikkeling en progressie van kanker. Nat Rev Kanker. 2014;14:13-25. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. Mitochondriale permeabiliteit transitie porie is een potentieel geneesmiddel doelwit voor neurodegeneratie. Biochim Biophys Acta. 2014;1842:1267– 1272. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. HSPA5 is een essentiële gastheerfactor voor Ebola-virusinfectie. Antivirale res. 2014;109:171-174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD, van Veluw SJ, Greenberg SM. Ischemisch hersenletsel bij cerebrale amyloïde angiopathie. J Cereb Bloedstroom Metab. 2016;36:40-54. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K is een doelwit voor Nexavar/ stivarga/votrient bij de behandeling van menselijke maligniteiten, virale infecties en bacteriële ziekten. J Cell Fysiol. 2015;230:2552-2578. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Rice RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL. Structurele en biochemische veranderingen die ten grondslag liggen aan een keratoderma-achtig fenotype bij muizen zonder suprabasale AP1-transcriptiefactorfunctie. Celdood Dis. 2015;6:e1647. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Roman G, Scheltens P. International Society for Vascular Behavioral and Cognitive Disorders (2014) Diagnostische criteria voor vasculaire cognitieve stoornissen: een VASCOG-verklaring. Alzheimer Dis Assoc-stoornis. 28:206-218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amyloid-beta: een cruciale factor bij de ziekte van Alzheimer. Med Prins Praktijk. 2015;24:1-10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK-1 reguleert de cytokinesecretie van gekweekte humane alveolaire epitheelcellen, onafhankelijk van herschikkingen van het cytoskelet. PLoS Een. 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. Synaptische eiwitniveaus veranderd bij vasculaire dementie. Neuropathol Appl Neurobiol. 2015;41:533-543.

43. Stary CM, Giffard RG. Vooruitgang in op astrocyten gerichte benaderingen voor beroertetherapie: een opkomende rol voor mitochondriën en microRNA's. Neurochem Res. 2015;40:301-307.

44. Szalárdy L, Zádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. Elektronentransportstoornissen en neurodegeneratie: van het concept van Albert Szent-Gyorgyi (Szeged) tot nieuwe benaderingen om de mitochondriale bio-energetica te stimuleren. Oxid Med-cel

Longev. 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX. Cytoskeletcomponenten bepalen de eiwitlocatie tot membraanmicrodomeinen. Mol Cell Proteomics. 2015;14:2493-2509.

46. ​​Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. Impact van oxidatieve / nitrosatieve stress en ontsteking op cognitieve functies bij patiënten met terugkerende depressieve stoornissen. Med Sci-Monit. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. Minder vaak voorkomende oorzaken van een beroerte: diagnose en management. In: Norrving B, redacteur. Oxford Textbook of Stroke and Cerebrovascular Disease. Oxford: Oxford University Press; 2014. blz. 153-162. [Google geleerde]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. Nexavar/Stivarga en viagra werken samen om tumorcellen te doden. J Cell Fysiol. 2015;230:2281–2298. [PMC gratis artikel] [PubMed] [Google Scholar]

49. Thomas T, Miners S, Love S. Postmortale beoordeling van hypoperfusie van de hersenschors bij de ziekte van Alzheimer en vasculaire dementie. Brein. 2015;138:1059– 1069. [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. Overexpressie van mitochondriaal Hsp75 beschermt neurale stamcellen tegen microglia-afgeleide oplosbare factor-geïnduceerde neurotoxiciteit door mitochondriale permeabiliteit overgang porie opening in vitro te reguleren. Int J Mol Med. 2015;36:1487-1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa Beschermt dopaminerge neuronen door regulatie van apoptose en van gliacellen afgeleide neurotrofe factor: in vivo en in vitro. Veroudering aan de voorkant

neurosci. 2016;8:295.

52. You SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. Preventieve effecten van fenylethanolglycosiden van Cistanche tubulosa op door runderserumalbumine geïnduceerde leverfibrose bij ratten. Daru. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. Repressie van choroïdale neovascularisatie via actine-cytoskeletroutes door microRNA-24. Mol Ther. 2014;22:378-389.

54. Zhu M, Lu C, Li W. Voorbijgaande blootstelling aan echinacoside is voldoende om Trk-signalering te activeren en neuronale cellen te beschermen tegen rotenon. JNeurchem. 2013;124:571-580.