Effecten van diabetes mellitus op seksuele functie, histomorfologie en -smooth spieractine -expressie in cavernous body of penis bij ratten
Mar 05, 2025
Abstract:
Objectief:Om deSeksuele functie van diabetesModelratten en verken het mogelijke mechanisme van secundaire seksuele disfunctie veroorzaakt door hyperglykemie.
MethodenDe experimentele ratten werden willekeurig verdeeld in de lege groep (n =5) en dediabetesgroep(n =15). Nadat het diabetes -diermodel met succes was geconstrueerd, werd de seksuele functie van twee groepen geëvalueerd. De histologische kenmerken van testis in twee groepen werden waargenomen. De expressie van -Smooth -spieractine (-SMA) in het penisweefsel van twee groepen werd gemeten. Resultaten De niveaus van serum -geslachtshormonen waren aanzienlijk verlaagd (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ConclusieDe verlaagde niveaus van geslachtshormonen, het verminderde aantal gladde spiercellen in een grotere penis, de verminderde expressie van -SMA in cavernous body of penis, de ongeordende structuur van interstitieel weefsel van testis, de morfologische veranderingen van gladde spiercellen en de verergering van fibrose in de diabetes ratten zijn belangrijke fenotypische kenmerken van deze ziekte. Het onderzoeken van de diagnose en behandeling van deze ziekte met deze fenotypische kenmerken zal van groot belang zijn.
Sleutelwoorden:diabetes mellitus;erectiestoornissen; seksuele functie; geslachtshormoon; - Actine -expressie van gladde spieren
Kruiden cistanche supplementen voor erectiestoornissen veroorzaakt door diabetes
Diabetes mellitus (DM)is al lang een aandachtspunt van aandacht zowel in het binnenland als internationaal vanwege de hoge incidentie en prevalentie [1]. De verschillende door DM veroorzaakte complicaties beïnvloeden de kwaliteit van leven van patiënten aanzienlijk. Daarvan de incidentie vanerectiestoornissen (ed)in het mannelijkDM -patiëntenis aanzienlijk verhoogd. Momenteel is DM een risicogroep geworden voor ED [2–3]. Daarom, het uitvoeren van diepgaande studies naarDM-geïnduceerde ED (DMED)heeft grote betekenis. Deze studie heeft als doel de effecten van DM op de erectiele functie, geslachtshormonen, de expressieniveaus van -Smooth -spieractine (-SMA) in het Cavernous -lichaam van de penis en de morfologie van testiculaire interstitiële enPenile Cavernous gladde spierWeefsels bij ratten, voorlopig de potentiële pathologische basis van ED verkennen die door DM wordt geïnduceerd.
1 Materialen en methoden
1.1 Experimentele dieren en reagentia
Twintig volwassen SPF-grade mannelijke SD-ratten met uniform lichaamsgewicht werden geselecteerd. De belangrijkste experimentele reagentia omvatten streptozotocine (STZ) en apomorfine (APO), evenals antilichamen die nodig zijn voor het detecteren van -SMA -expressie. Deze studie werd goedgekeurd door de Animal Welfare and Ethics Committee van Dongzhimen Hospital, Beijing University of Chinese Medicine (Nee. 17-04).
1.2 Experimentele methoden
1.2.1 Een diabetische rattenmodel opzetten
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/l op elk moment na 5 dagen van STZ intraperitoneale injectie werden beschouwd als de standaard voor succesvolle DM -modelinstelling [4].
1.2.2 Erectiele functietest bij ratten
Na het bevestigen van succesvolle DM -modellering, werden de ratten gewogen en in een transparante glazen doos geplaatst. Het APO -oplosmiddel (100 ug/kg) werd subcutaan geïnjecteerd aan de achterkant van de nek op basis van lichaamsgewicht. De omliggende omgeving werd stil gehouden en de binnenverlichting werd aangepast aan een niveau dat net voldoende is om penis erectie bij ratten te observeren. Het aantal penise -erecties binnen 30 minuten na subcutane injectie werd waargenomen en geregistreerd. Criteria voor penis erectie: Penile -vergroting, terugtrekking van de voorhuid, blootstelling van de eikel gepaard met hyperemie en roodheid, en zichtbaarheid van de middelste en lagere segmenten van de penis.
1.2.3 Meting van geslachtshormonen bij ratten
De serum -geslachtshormoonspiegels van de twee groepen werden gemeten met behulp van de radioimmunoassay -methode, volgens de specifieke procedures die zijn beschreven in de instructies RadioImmunoAssay Kit.
1.2.4 Histopathologische observatie van testiculair interstitieel weefsel
Na het verzamelen van bloed uit de buikaorta van de ratten, werd de rechter testbal uniform geëxtraheerd. De testikel werd gewassen met PBS -buffer en 72 uur volledig in paraformaldehyde gefixeerd. Het weefsel was ingebed in paraffine, sectioned, gekleurd met hematoxyline-eosine (H&E) en waargenomen voor histologische kenmerken.
1.2.5 Observatie van penis grotere fibrose bij ratten
Na het verzamelen van bloed uit de abdominale aorta werd penileweefsel uitgesneden en gewassen met PBS -buffer. Het weefsel werd 72 uur volledig in paraformaldehyde gefixeerd, ingebed in paraffine, sectioned en gekleurd met Massons trichrome. Het relatieve gehalte van gladde spier-/collageenvezels in het penis grotere weefsel van elke groep werd waargenomen onder een microscoop.
1.2.6 Meting van -SMA -expressieniveaus in Cavernous Tissue
Het Cavernous Tissue van Penile werd gedurende 20 minuten onderworpen aan routinematige deparaffinisatie van water, gewassen met PBS -buffer en onderworpen aan magnetronwarmte -reparatie in citraatbuffer (pH 6. 0). Na het afkoelen tot kamertemperatuur werd het tissue driemaal gewassen met PBS, elke keer 3 minuten. Een 3% waterstofperoxide -oplossing werd gedurende 15 minuten in een donkere kamer bij kamertemperatuur aangebracht, gevolgd door PBS -wassen. -SMA -antilichaam werd vervolgens toegevoegd en het weefsel werd 's nachts op 4 graden geïncubeerd. Na terugkeer naar kamertemperatuur werd het tissue gewassen met PBS, geïncubeerd met een secundair antilichaam gedurende 30 minuten op 37 graden en opnieuw gewassen met PBS. DAB werd toegepast voor kleurontwikkeling in het donker en de reactie werd beëindigd met water. PBS werd gebruikt als vervanging voor het primaire antilichaam als een negatieve controle en kwantitatieve analyse werd uitgevoerd met een beeldanalysator.
1.3 Statistische methoden
De in deze studie verzamelde gegevens werden georganiseerd met behulp van Microsoft Excel en vervolgens geanalyseerd met behulp van SPSS 25. 0 voor statistische testen. De gegevens van elke groep worden uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking (x̄ ± s). Een p-waarde van minder dan 0. 0 5 (p <0,05) werd als statistisch significant beschouwd.
2 resultaten
2.1 Vergelijking van lichaamsgewicht en bloedglucoseveranderingen tussen de twee groepen
Zie tabel 1.
2.2 Vergelijking van de erectiepercentage van de penis tussen de twee groepen
Zie tabel 2.
2.3 Vergelijking van serum -geslachtshormoonspiegels tussen de twee groepen
Zie tabel 3.
2.4 Pathologische observatie van testiculair interstitieel weefsel tussen de twee groepen
Het testiculaire interstitiële weefsel van de controlegroep leek normaal. De interstitiële cellen waren rond of ovaal van vorm, met regelmatige morfologie, normale intercellulaire afstand, ordelijke opstelling en geen significante vermindering van het celaantal. Daarentegen vertoonde de diabetische groep testiculair interstitieel oedeem, onregelmatige celmorfologie, losse intercellulaire ruimtes, wanordelijke opstelling, verstoorde intracellulaire structuren en tekenen van dedifferentiatie in sommige cellen, het verliezen van structurele kenmerken. Raadpleeg figuur 1.
| Groep | Steekproefgrootte (n) | Baseline lichaamsgewicht (g) | Lichaamsgewicht 5 dagen na het modelleren (G) | Bloedglucose 5 dagen na het modelleren (mmol/L) | Lichaamsgewicht voor opoffering (G) | Bloedglucose vóór opoffering (mmol/l) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Diabetesgroep | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Controlegroep | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Opmerking: Vergeleken met de controlegroep,P <0. 01.
Tabel 2: Vergelijking van de erectiepercentage van de penis tussen twee groepen
| Groep | Steekproefgrootte (n) | Positieve gevallen in erectietest (N) | Erectiepercentage (%) |
|---|---|---|---|
| Diabetesgroep | 15 | 5 | 33.3** |
| Controlegroep | 5 | 4 | 80.0 |
Opmerking: Vergeleken met de controlegroep,P <0. 01.
Tabel 3: Vergelijking van serum -geslachtshormoonspiegels tussen twee groepen (x̄ ± s)
| Groep | Steekproefgrootte (n) | T (nmol·l⁻¹) | Fsh (iu · l⁻¹) | LH (ng · l⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Diabetesgroep | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Controlegroep | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Opmerking: Vergeleken met de controlegroep,P <0. 01.
2.4 Pathologische observatie van testiculair interstitieel weefsel tussen twee groepen
In de controlegroep leek het testiculaire interstitiële weefsel normaal, waarbij interstitiële cellen rond of ovaal van vorm waren, met regelmatige morfologie, normale intercellulaire ruimtes en ordelijke opstelling. Het aantal cellen vertoonde geen significante reductie. In vergelijking met de controlegroep vertoonde de diabetische groep testiculair interstitieel oedeem, onregelmatig gevormde cellen, losse intercellulaire ruimtes, ongeordende opstelling, verstoorde intracellulaire structuren en tekenen van dedifferentiatie in sommige cellen, hun structurele kenmerken verliezen. Raadpleeg figuur 1.
2.5 Observatie van penis caverneuze fibrose tussen twee groepen
De kleuring van Masson werd gebruikt om de verschillen in de mate van fibrose in het caverneuze weefsel tussen de twee groepen te observeren. In de diabetische groep was het aandeel collageenvezels aanzienlijk hoger, met een toename van het relatieve gehalte, terwijl het aandeel gladde spiercellen kleiner was, met een afname van het relatieve gehalte. Raadpleeg figuur 2.
Figuur 1 Hij kleurde resultaten van testikels in twee groepen (× 10, n=3))
Figuur 2 Masson -kleurresultaten van corpora cavernosa in twee groepen (× 4, n=3)
2.6 Expressie van -SMA in corpus cavernosum gladde spiercellen in twee groepen
Immunohistochemie werd gebruikt om de expressie van -SMA in de twee groepen te detecteren. Vergeleken met de lege groep was het bruin -geel gekleurde deel in de diabetische groep aanzienlijk verminderd, dat wil zeggen dat de positieve celpressie van -SMA in de diabetische groep significant werd verminderd. Zie figuur 3.
Fig. 3 Immunohistochemie -resultaten van corpus cavernosum in twee groepen (× 10, n=3)
