Werkzaamheid en mechanisme van cistanches herba-extract bij de behandeling van reproductieve disfunctie bij ratten met nier-yang-deficiëntie op basis van metabolomics ⅱ

3.2 Effect van cistanche -extract op de algemene staat van ratten met nier yang -tekort

Vóór het experiment waren ratten in elke groep in goed humeur, met normaal haar en normaal eten en drinken. Tijdens het experiment werden geen afwijkingen gevonden in de normale groepsratten en hun lichaamsgewicht nam gestaag toe met de uitbreiding van de voedingstijd; Naarmate de adeninemodelleringstijd verlengd, viel het haar van de modelgroepratten af ​​en werden ruw, hun geesten waren laag, hun reacties waren langzaam, ze krulden en boog hun rug, hun urinefolume nam toe, hun lichaamsgewicht daalde aanzienlijk, en hun rectale temperatuur daalde aanzienlijk (p <{0}}.Cistanche -extract en LC -interventiebehandelingkan het bovenstaande verlichtenSymptomen in verschillende mate, waaronder de rectale temperatuur aanzienlijk werd aangepast (p <0. 001), zie figuur 1.

Fig.1 Effect van cistanches herba-extract op het lichaamsgewicht en rectale temperatuur van ratten met nier-yang-deficiëntie (𝑥̅ ± s (n =10 (

3.3 Effect van cistanche-extract op de viscerale hersenverhoudingscoëfficiënt van ratten met nier-yang-tekort

Vergeleken met de normale groep werden de viscerale hersenverhoudingscoëfficiënten van de testis en epididymis in de modelgroep aanzienlijk verminderd (p <0. 0 0 1); compared with the model group, the visceral-brain ratio coefficients of the testis and epididymis in each dose group of Cistanche extract were significantly increased (P < 0.05, P < 0.01, P < 0.001), and the visceral-brain ratio coefficients of the testis and epididymis in the LC group waren ook significant verhoogd (p <0,01, p <0,001), zie figuur 2.

Tabel 2 Effect van cistanches Herba-extract op de spermamotiliteitsparameters in ratten met nier-yang-deficiëntie (𝑥̅ ± s, n =10)

3.5 Effect van cistanche -extract op het aantal sperma, motiliteit en vervormingssnelheid bij ratten met nier yang -tekort

Normaal sperma heeft een sikkelvormige kop, een slank lichaam, een natuurlijk gebogen staart en een gladde algehele vorm. De morfologie van ander vervormd sperma wordt getoond in figuur 3. Vergeleken met de normale groep waren de spermodichtheid en spermamotiliteit van de ratten in de modelgroep aanzienlijk verminderd (P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.001); compared with the model group, the sperm density and motility of the rats in each dose group of Cistanche extract and the LC group were significantly increased (P<0.05, P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.001), as shown in Figure 4.

3.6 Effect van cistanche -extract op testiculaire en epididymale weefselmorfologie bij ratten met nier yang -tekort
De testiculaire seminiferous tubuli van ratten in de normale groep waren intact, met regelmatige opstelling van spermatogene cellen op alle niveaus en heldere lagen. Overvloedige spermatocyten en langwerpige spermatiden waren zichtbaar in het lumen. Vergeleken met de normale groep nam het aandeel laesie seminiferous tubuli bij ratten in de modelgroep aanzienlijk toe (P<0.001), which was manifested as irregular structure of seminiferous tubules, thinning of tubular walls, enlargement of lumen, increased number of exfoliated cell blocks in the lumen, decreased number of linear sperm, and disordered arrangement of spermatogenic cells. Compared with the model group, the proportion of testicular seminiferous tubule lesions in rats in all dose groups of Cistanche extract and LC group was significantly reduced (P<0.05, P<0.01), among which the low dose group of Cistanche extract had better improvement effect, which was equivalent to the LC group, as shown in Figure 5.

Krijg meer details over Cistanche voor het verbeteren van de seksuele functie

De epididymale tubuli van ratten in de normale groep waren intact, de epitheelcellen waren netjes gerangschikt en gelijkmatig verdeeld sperma kon worden waargenomen; De epididymale tubuli van ratten in de modelgroep werden gezwollen, de epitheelcellen werden wanordelijk gerangschikt en het aantal sperma in het lumen was aanzienlijk verminderd; Vergeleken met de modelgroep waren de epididymale lumen -laesies van ratten in de cistanche -extractgroepen en de LC -groep aanzienlijk verbeterd, de epitheelcellen waren strak en netjes gerangschikt en het aantal normaal sperma in het lumen nam toe en werd gelijkmatig uitgegeven, zoals getoond in figuur 6.

4 Discussie

Nier Yang Deficiency Syndrome is een syndroomtype in de traditionele Chinese geneeskunde, dat verwijst naar het tekort aan nier yang en het onvermogen van het lichaam om op te warmen. De moderne geneeskunde is van mening dat nier yang-tekort verband houdt met disfunctie van de as van de hypothalamisch-hypofyse doelklier (voornamelijk bijnieren, gonaden en schildklier) [11]. Adenine kan op de HPG -as van ratten werken, waardoor de disfunctie ervan wordt veroorzaakt, waardoor de homeostase van de hormoonspiegels van het lichaam wordt verstoord, wat symptomen vertoont die vergelijkbaar zijn met nier yang -deficiëntie. T -niveau kan worden gebruikt als een van de detectie -indicatoren van dit model [12]. De andere algemene diagnostische criteria voor nier yang -tekort worden toegepast op modelratten, namelijk verlaagde lichaamstemperatuur, gewichtsverlies, krullend, dun haar, verhoogd urinvolume, losse ontlasting, enz. [9,13]. Cistanche Deserticola is een van de meest gebruikte medicijnen in traditionele Chinese geneeskunde -recepten voor het tonen van nier yang. De belangrijkste actieve substantie, fenylethanoïde glycosiden, is ook gemeld dat het de functies heeft van het reguleren van homeostase van HPG-as en anti-vette [14]. In deze studie werden ratten met adeninedeficiëntie gebruikt als een model van nier yang -tekort. Het verbeteringseffect van cistanche -woestijnticola -extract op ratten met nier yang -deficiëntie werd geëvalueerd op basis van de algemene manifestaties van ratten en de veranderingen in hormonen gerelateerd aan de HPG -as. De resultaten toonden aan dat alle doses cistanche -woestijnticola -extract de symptomen van nier yang -deficiëntie bij ratten veroorzaakt door adenine kunnen verbeteren en het hpg -as remmende effect van adenine kunnen verminderen.

Oligospermie en asthenospermie kunnen worden ingedeeld in de categorieën "kinderloosheid", "onvruchtbaarheid", "koud sperma" en "sperma -blokkade" in de traditionele Chinese geneeskunde. De belangrijkste pathogenese omvat nier yang -tekort, vochtige hitte, yin -deficiëntie en hyperactiviteit van vuur, qi -stagnatie en bloedstasis, waaronder nier yang -tekort is de meest voorkomende [15-16]. Nier Yang -tekort kan het spermapaleis niet verwarmen, wat resulteert in koud sperma en Qi, dus kinderloosheid [17]. De werkzaamheid van opwarming en tonificatie van nier Yang -recepten voor nier yang -tekort en onvruchtbaarheid is ook breed gemeld [18]. De resultaten van dit experiment toonden aan dat de extracten van cistanche -woestijnticola in alle doses, een traditionele Chinese geneeskunde voor stimulerende nier yang, de afname van de verhouding van de testiculaire en epididymale organen tot de hersenen veroorzaakt door adenine aanzienlijk kunnen verlichten; De resultaten van de parameteranalyse van de sperma -dynamiek toonden aan dat de extracten van cistanche woestijnola in alle doses de parameters van de sperma -dynamiek aanzienlijk kunnen verbeteren, waaronder VCL en VAP, en de spermamotiliteit en spermaconcentratie van sperma aanzienlijk verhogen; De resultaten van spermapluorescentie toonden aan dat de extracten van cistanche -woestijnweticola de afname van de spermamotiliteit veroorzaakt door adenine aanzienlijk kunnen verbeteren; De resultaten van HE -kleuring toonden aan dat de extracten van Cistanche -woestijnweticola de sperma -vervorming veroorzaakt door adenine aanzienlijk kunnen verlichten en de morfologische veranderingen van de testis en epididymis veroorzaakt door adenine kunnen verlichten; De resultaten van ELISA toonden aan dat de extracten van cistanche-woestijnticola het serumniveau van T aanzienlijk aanpassen, wat nodig is voor testiculaire spermatogenese en de lage dosis extracten van cistanche-woestijnola vertoonden betere resultaten. De bovenstaande resultaten tonen aan dat de extracten van Cistanche Deserticola een verbeterend effect hebben op de reproductieve schade van ratten met nier yang -tekort.

LC, ook bekend als L-carnitine, is een essentiële energiemetabolisme in het menselijk lichaam. Het bestaat meestal in het mannelijke reproductieve systeem in twee vormen: vrij en geacetyleerd. Het biedt energie voor de beweging en rijping van sperma in de epididymis door de oxidatie van vetzuren te bevorderen en wordt veel gebruikt bij de behandeling van mannelijke voortplantingssysteemziekten [19]. Studies have shown that LC can alleviate the HPG axis disorder caused by glutamine, regulate the levels of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone, and increase the T level by regulating the expression levels of genes such as cytochrome P450 family 11subfamily A member 1 (CYP11A1), steroidogenic acute regulatory protein (STAR), etc., which are key enzymes in T Synthese [20]. Bovendien kan LC overmatige reactieve zuurstofspecies in de testis veroorzaakt door varicocele verwijderen, oxidatieve stressschade verminderen en dus testiculaire spermatogenese herstellen [21]. In dit experiment werd LC geselecteerd als een positieve controle. De resultaten toonden aan dat LC de reproductieve schade van ratten veroorzaakt door adenine effectief kon verlichten, wat consistent was met de eerdere onderzoeksresultaten; en het Cistanche Deserticola -extract vertoonde een therapeutisch effect vergelijkbaar met LC.

Metabolomics kan kwalitatief en kwantitatief analyseren van metabolieten van kleine moleculen in het lichaam als geheel, en vervolgens de informatie -integratie van meerdere databases combineren voor multidimensionale statistische analyse, die de complexe relatie tussen fysiologie, pathologie en drugsactie [{0}}}}}}}}}}}} kunnen karakteriseren. Gebaseerd op LC-MS-technologie voerde dit experiment metabolomica-analyse uit op serummonsters van ratten in de normale groep, modelfroep en lage dosis cistanche woesticola-groep, gericht op het verkennen van het metabole mechanisme van cistanche-woestijnweticola in tussenkomst in reproductieve schade veroorzaakt door adenine in ratten met nieren met nieren. De resultaten toonden aan dat in totaal 22 gerelateerde differentiële metabolieten en 3 metabole routes werden gescreend. Cistanche deserticola extract mainly affects the levels of 13-HpODE, 20-carboxy-arachidonic acid (20-COOH-AA), LPC (O{{10}}:0/0:0), pantethine, and bimatoprost through Metabole routes zoals lipidemetabolisme, pantotheenzuur en co -enzym een ​​biosynthese, waardoor een reproductief beschermend effect wordt uitgeoefend.

Lipiden spelen een cruciale rol in signaaltransductie, energieproductie en het handhaven van celhomeostase [24]. Lipidemoleculen kunnen worden verdeeld in acht categorieën op basis van hun structuren: vetzuren, glycerolipiden, fosfolipiden, sfingolipiden, sterolen, pre-alcohols, glycolipiden en polyketiden. Aandoeningen in vetzuurmetabolisme zijn nauw verwant aan abnormale spermacapaciteit [25] en chronische nierschade [26]. 13- hpode en {20- COOH-AA zijn metabolieten van respectievelijk linolzuur en arachidonzuur die deelnemen aan lipideperoxidatiereacties. Wanneer hun niveaus toenemen, geeft dit aan dat het lichaam gevoeliger is voor oxidatieve stress. Dit kan leiden tot overmatige productie van reactieve zuurstofspecies, wat op zijn beurt leidt tot een verminderde mannelijke reproductieve functie [27]. LPC is het meest voorkomende type lysoglycerofosfolipide in menselijk bloed en kan oxidatieve stress in testiculaire cellen induceren, wat reproductieve schade veroorzaakt [28]. Sommige onderzoekers hebben ontdekt dat lpc (o -18: {{1 0}}}/0: 0) Stress en apoptose van nierweefselcellen induceert door de expressie van peroxisoom proliferator geactiveerde receptor delta (pparδ) in de buis van de nier te activeren. Functie verslechtering [29]. Het suggereert dat Cistanche Deserticola -extract een reproductieve beschermende rol kan spelen bij ratten met nier yang -deficiëntie door lipideperoxidatieniveaus te verlagen en oxidatieve stress te remmen. Pantotheenzuur heeft een belangrijk effect op testosteronsecretie en spermamotiliteit. De metabolietpantshine is de grondstof voor de synthese van co -enzym A, die verder deelneemt aan de regulatie van energiemetabolisme en vetzuurmetabolisme [30]. Cistanche -woestijnticola -extract kan het energiemetabolisme van het lichaam bevorderen en de schade van oxidatieve stress aan het reproductieve systeem van ratten met nier yang -deficiëntie verminderen door het niveau van pantethine aan te passen. Dit geeft aan dat cistanche -woestijnticola -extract een antioxiderende rol kan spelen door het reguleren van lipidemetabolisme, de biosynthese van pantotheenzuur en co -enzym A, en dus de reproductieve functie van ratten beschermen met nier yang -deficiëntie.
Bovendien zijn Leydig -cellen de hoofdlocatie van T -productie en de vorming van T -voorloper zwangerolon hangt af van de mitochondriale functie in Leydig -cellen. Studies hebben aangetoond dat overmatige accumulatie van reactieve zuurstofspecies in Leydig -cellen geassocieerd is met T -synthesestoornissen. Overmatige reactieve zuurstofsoorten induceren mitochondriale schade, wat resulteert in de remming van adenosinetrifosfaat (ATP) en adenosinecyclofosfaat (CAMP) -synthese, waardoor de expressie van T-synthesegerelateerde enzymen wordt geremd en leidt tot een afname van T-niveaus [31]. De resultaten van dit experiment toonden aan dat cistanche-woestijnticola-extract de door adenine geïnduceerde afname van serum T-niveaus aanzienlijk omkeerde. De resultaten van de metabolomische analyse waren vergelijkbaar met die gerapporteerd in de literatuur, dat wil zeggen dat Cistanche Deserticola -extract de synthese kan bevorderen door oxidatieve schade van leydigcel te verlichten.

De resultaten van de inhoudsbepaling van cistanche -woesterticola -extract toonden aan dat echinacoside, verbascoside, salidroside, betaïne en cistancheeside A potentiële actieve ingrediënten kunnen zijn. Eerdere studies hebben aangetoond dat echinacoside de testis kan beschermen tegen oxidatieve stressschade door antioxiderende enzymen en mitogeen-geactiveerde eiwitkinase (MAPK) signaleringsgerelateerde factoren te activeren [32]; Salidroside kan de antioxiderende factoren van het lichaam op reguleren om de schade van de bloedtestisbarrière veroorzaakt door oxidatieve stress tegen te gaan, waardoor spermatogenese wordt bevorderd [33]; Verbascoside kan de proliferatie-activiteit van met waterstofperoxide behandelde TM3-cellen aanzienlijk verbeteren, waardoor ze gedeeltelijk worden beschermd tegen oxidatieve stressschade [34]; Betaïne kan de expressieniveaus van antioxidant-gerelateerde genen in de testis van met lood blootgestelde muizen opreguleren, waaronder superoxide dismutase 1, glutathione peroxidase 1 en catalase, en de testiculaire Johnson-score aanzienlijk verbeteren [35]; Er is ook gemeld dat cistancheside A de abnormale toename van reactieve zuurstofspecies bij spermatogonie geïnduceerd door hypoxie vermindert en celapoptose vermindert [36]. Al deze suggereren dat echinacoside, verbascoside, salidroside, betaïne en cistancheside A de belangrijke materiële basis kan zijn voor cistanche om de symptomen van nier yang -tekort bij ratten te verlichten die worden geïnduceerd door adenine. Samenvattend kan cistanche -extract de symptomen van nier yang -deficiëntie bij ratten veroorzaken die worden geïnduceerd door adenine, evenals de pathologische schade van de testis en epididymis, de beschadigde HPG -asfunctie herstellen, de verminderde spermakwaliteit verbeteren en dus de reproductieve functie van ratten met nieren -yang -tekortschade verbeteren; Het werkingsmechanisme kan verband houden met de regulatie van lipidemetabolisme, biosynthese van pantotheenzuur en co -enzym A, enz. Echinacoside, verbascoside, salidroside, betaine en cistancheside A zijn de mogelijke potentiële bioactieve materiaalbasis, die verdere experimentele verificatie nodig heeft.