FGIN-1-27 is een synthetische mitochondriale diazepam-bindingsremmerreceptor (MDR)agonist die pro-apoptotische, anti-angst en steroïdogene activiteit heeft aangetoondbij verschillende studies. Hier rapporteren we, voor deEersttijd, de anti-melanogene werkzaamheidvanFGIN-1-27in vitroEnin vivo. FGIN-1-27 aanzienlijkgeremde basale en -melanocyt-stimulerend hormoon ( -MSH)-, 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol (OAG)-en door endotheline-1 (ET-1) geïnduceerde melanogenese zonder cellulaire toxiciteit.Champignontyrosinase-activiteitstest toonde aan dat FGIN-1-27 niet direct remdetyrosinase-activiteit, wat suggereert dat FGIN-1-27 geen directe tyrosinaseremmer was. Hoewel het de katalytische activiteit van niet kon modulerenpaddestoel tyrosinasein vitro, verlaagde FGIN-1-27 de uitdrukkingsniveaus vanbelangrijke eiwitten die functioneren bij melanogenese. FGIN-1-27 speelde deze functiesdoor de PKA/CREB, PKC- en MAPK-routes. Eenmaal geïnactiveerd, hetverminderde de expressie van MITF, tyrosinase, TRP-1 en TRP-2 en remde detyrosinase-activiteit,Eindelijkmelanogenese remmen. Tijdensin vivoexperimenten,FGIN-1-27 remde de lichaamspigmentatie van zebravissenen verminderde UVB-geïnduceerdhyperpigmentatie in caviahuid, maar geen vermindering van een aantal melanocyten.Onsbevindingengaf aan dat FGIN-1-27 geen cytotoxiciteit vertoonde en remdemelanogenese in beidein vitroEnin vivomodellen. Het kan heel nuttig blijken als eenveiliger huidbleekmiddel.

Volgens relevante studies,cistancheis een veel voorkomend kruid dat bekend staat als "het wonderkruid dat het leven verlengt". Het hoofdbestanddeel is cistanoside, dat verschillende effecten heeft, zoalsantioxidant, ontstekingsremmend, en bevordering van de immuunfunctie. Het mechanisme tussen cistanche enbleken van de huidligt in het antioxiderende effect van cistanche-glycosiden.Melaninein de menselijke huid wordt geproduceerd door de oxidatie van tyrosine gekatalyseerd doortyrosinase, en de oxidatiereactie vereist de deelname van zuurstof, dus de zuurstofvrije radicalen in het lichaam worden een belangrijke factor die de melanineproductie beïnvloedt. Cistanche bevat cistanoside, dat een antioxidant is en zo de vorming van vrije radicalen in het lichaam kan verminderenremming van de productie van melanine.

Klik op Cistanche Tubulosa

Voor meer informatie: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

INVOERING

Melanogenese is de belangrijkste functie van melanocyten in de huid. Verschillende kritische factoren met betrekking tot melanogenese zijn opgehelderd (Raposo en Marks, 2007; Noguchi et al., 2014). Het belangrijkste enzym dat melanogenese reguleert, is tyrosinase en het werkt samen met tyrosinase-gerelateerd eiwit 1 (TRP1) en tyrosinase-gerelateerd eiwit 2 (TRP2) om de melaninesynthese te bevorderen (Zhu et al., 2015). Een andere belangrijke factor die betrokken is bij pigmentatie is een microftalmie-geassocieerde transcriptiefactor (MITF), die niet alleen de proliferatie en overleving van melanocyten reguleert, maar ook de expressie van tyrosinase, TRP1 en TRP2 reguleert (Kawasaki et al., 2008; Levy and Fisher, 2011 ). Omgevingsstimuli, zoals ultraviolette (UV) bestraling, spelen een cruciale rol bij melanogenese (Abdel-Naser et al., 2003). Bij blootstelling aan UV-straling produceren geactiveerde keratinocyten en melanocyten een -melanocytstimulerend hormoon ( -MSH), diacylglycerol (DAG) en endotheline-1 (ET-1) (D'Mello et al., 2016; Bae Harboe en Park, 2012). Wanneer -melanocyt-stimulerend hormoon (-MSH) zich bindt aan de melanocortine-1-receptor (MC1R) in melanocyten, kan het de intracellulaire niveaus van cyclisch adenosinemonofosfaat (cAMP) verhogen en de proteïnekinase A (PKA)/(CREB) activeren ) route, die uiteindelijk melanogenese bevordert (Corre et al., 2004; Rzepka et al., 2016). Diacylglycerol (DAG) is essentieel voor de activering van proteïnekinase C- (PKC-) in melanocyten, wat de activiteit van tyrosinase verhoogt en pigmentatie induceert (Kim et al., 2006; Kawaguchi et al., 2012; Yuan en Jin, 2018 ). 1-Oleoyl-2- acetyl-sn-glycerol (OAG) is een synthetisch, membraandoorlatend DAG-analogon dat uitgebreid is gebruikt als farmacologische activator van PKC- (Rainbow et al., 2011). Endotheline-1 (ET- 1) induceert melanogenese in melanocyten via de activering van de mitogeen-geactiveerde proteïnekinaseroute (MAPK) (Park et al., 2015; Regazzetti et al., 2015).

Melanine speelt een belangrijke rol bij de bescherming van de huid tegen de schadelijke effecten van ultraviolette straling, zoals huidkanker en huidveroudering (Slominski et al., 2004). Niettemin leiden overmatige productie en abnormale ophoping van melanine tot huidesthetische problemen, zoals melasma, sproeten en donkere vlekken (Jadotte en Schwartz, 2010). Verschillende van de actieve bleekmiddelen, waaronder kojiczuur en arbutine, zijn al goedgekeurd als cosmetische additieven (Kim et al., 2008). Maar er is gemeld dat arbutine cytotoxische effecten heeft en dat kojiczuur kanker kan veroorzaken (Singh et al., 2016). De ontdekking van efficiëntere en veiliger huidbleekmiddelen is dus van het grootste belang.

Mitochondriale diazepam-bindingsremmerreceptor (MDR) speelt een centrale rol bij de regulatie van de synthese van lipiden en steroïden en is wijd verspreid in perifere weefsels, waaronder de huid (Alho et al., 1993). In onze eerdere studies reguleerde diazepam, één MDR-agonist, pigmentatie via de PKA/CREB-route (Lv et al., 2019). Bovendien suggereerden recente bevindingen dat MDR-activering het aantal nieuwe melanocyten in de zebravis enigszins verhoogde (Allen et al., 2020). In vergelijking met diazepam vertoont FGIN-1-27 (N,N-Dihexyl-2-(4-fluorfenyl)indool-3-acetamide) een relatief hogere affiniteit en specificiteit voor de MDR (Freeman en jong, 2000). FGIN-1–27 heeft pro-apoptotische en steroïdogene activiteit aangetoond (Lacapère en Papadopoulos, 2003). Onlangs is gemeld dat FGIN-1-27 in vivo anti-angst- en anti-paniekeffecten veroorzaakte (Lima-Maximino et al., 2018). Het effect van FGIN-1-27 op pigmentatie in vitro en in vivo is echter niet gerapporteerd.

MATERIALEN EN METHODES

Materialen

FGIN-1-27(N, N-Dihexyl-2-(4-fluorfenyl)indool-3-aceetamide), OAG (1-Oleoyl-2-acetyl-sn -glycerol), en de antilichamen tegen PKC- (1:200), p-PKA kat (fosfo T197)(1:200), PKA kat (1:500), p-CREB (1:200), CREB (1:200), p-ERK(1:200), ERK (1:200), p-p38 (1:200), p38 (1:200), p-JNK (1:200),en JNK (1:200) werden verkregen van Santa Cruz Biotechnology(CA, VS). Tyrosinase van paddestoel, -MSH, ET-1(Endotheline-1) en PTU(N-Phenylthioureum) werden verkregenuit Aladdin (Shanghai, China). De antilichamen tegentyrosinase (1:1,000), TRP-1(1:1,000), TRP-2 (1:1,000), MITF(1:2000), en -actine (1:3,000) werden verkregen van Abcam(Cambridge, VK). Masson-Fontana melanine kleuroplossingwerd gekocht van SenBeiJia Biological Technology (Nanjing,China). RT-qPCR-kits zijn gekocht bij Takara BiomedicalTechnologie (Beijing, China). Cellysisbuffer en BCA-eiwittestkit werden verkregen van Beyotime Biotechnology (Shanghai,China).

Cellen Cultuur

Cel levensvatbaarheidstest

De levensvatbaarheid van SK-MEL-2-cellen en HEM werd gemeten met de MTT-assay (Zhou et al., 2014). SK-MEL-2-cellen en HEM werden respectievelijk uitgeplaat in 96-putjesplaten met een dichtheid van 2 x 104 cellen per putje. FGIN-1-27 (0, 1, 2, 4, 8, 16 μM) werd gedurende 48 uur aangebracht op SK-MEL-2-cellen en HEM. MTT-oplossing (20 μl) werd nog eens 4 uur aan elk putje van een 96-putjesplaat toegevoegd. Na verwijdering van de oplossing werd DMSO (200 μl) aan elk putje toegevoegd en werd de absorptie bij 570 nm onderzocht met behulp van een microplaat-spectrofotometer (BioTek Instruments).

Melanine-test

SK-MEL-2-cellen en HEM werden respectievelijk uitgeplaat in 6-putjesplaten met een concentratie van 5×105 cellen per putje. Na 24 uur incubatie bij 37 graden werd FGIN-1-27 (0, 1, 2, 4 μM) aangebracht op SK-MEL-2-cellen en HEM. De cellen werden nog eens 48 uur geïncubeerd, gewassen met PBS, gevolgd door lysis met cellysisbuffer gedurende 20 minuten bij 4 °C, en de lysaten werden gecentrifugeerd bij 13,000 rpm gedurende 10 minuten bij 4 °C. De totale melanine in de celpellet werd opgelost in 100 μL NaOH-oplossing (1 mol/L, die 10 procent DMSO bevat) bij 80 ° C gedurende 1 uur (Lv et al., 2015). Optische absorptie werd gemeten bij 405 nm met behulp van een microplaat-spectrofotometer (BioTek Instruments).

Tyrosinase-activiteitstest

De cellulaire tyrosinase-activiteit werd uitgevoerd zoals eerder beschreven (Lv et al., 2020). SK-MEL-2-cellen werden geïncubeerd met verschillende concentraties FGIN-1-27 (0, 1, 2, 4 μM) of OAG (200 μM) gedurende 12 uur of 48 uur en vervolgens gelyseerd met cellysisbuffer. Cellysaten werden gecentrifugeerd bij 13,000 rpm gedurende 10 minuten bij 4°C om het supernatant te verkrijgen voor de tyrosinase-activiteitstest. Eiwitconcentraties werden bepaald met een BCA-kit met runderserumalbumine (BSA) als standaard. 100 μl PBS (0,1 M, pH 6,5) met 30 ug eiwitten gemengd met 100 μL L-DOPA (0,1 procent) en vervolgens geïncubeerd bij 37 graden. C gedurende 1 uur. Optische absorptie werd gemeten bij 475 nm met behulp van een microplaat-spectrofotometer (BioTek Instruments).

Het directe effect van FGIN{{0}} op de tyrosinase-activiteit werd uitgevoerd in overeenstemming met een eerdere methode (Tomita et al., 2010; Lv et al., 2020). 100 μl PBS (0,1 M, pH 6,5) met verschillende concentraties FGIN -1-27 gemengd met paddestoeltyrosinase (10 eenheden) en 50 μl L-tyrosine (0,05 procent) en vervolgens gedurende 10 minuten bij 37 graden geïncubeerd. Optische absorptie werd gemeten bij 475 nm met behulp van een microplaat-spectrofotometer (BioTek Instruments).

Masson-Fontana ammoniakale zilverkleuring

Voor de detectie van melaninepigment werden SK-MEL-2-cellen uitgeplaat op een 6-putjesplaat met 13-mm glazen dekglaasjes in 2.0 ml kweekmedium (10 procent foetaal runderserum) in elk putje. 48 uur na de toediening werden de cellen gedurende 20 minuten gefixeerd met formaline (10 procent neutraal gebufferd).

Cellen en huidglaasjes werden gekleurd volgens de Masson-Fontana ammoniakale zilverkleuringsmethode (Lee et al., 2013). Cellen en huidglaasjes werden 16 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met Masson-Fontana melanine-kleuroplossing. Vervolgens werden cellen en huidglaasjes 3 keer in gedestilleerd water gespoeld en gedurende 7 minuten met hypo-oplossing geïncubeerd. Na grondig wassen in gedestilleerd water werden cellen en huidglaasjes gedurende 7 minuten tegengekleurd met een neutrale rode vlek. Cellen en huidglaasjes werden geobserveerd met behulp van een Nikon Ti{6}}U-microscoop.

Immunohistochemie voor S-100

S-100 immunohistochemie werd uitgevoerd zoals eerder beschreven (Lee et al., 2013). De objectglaasjes werden geblokkeerd met 5 procent BSA gedurende 1 uur bij kamertemperatuur en vervolgens geïncubeerd in anti-S-100 primair antilichaam (Dako, Carpentaria, CA) verdund in blokkeeroplossing gedurende de nacht bij 4 °C. De volgende dag werden de objectglaasjes werden 4 keer gewassen met TBST en geïncubeerd met een secundair antilichaam (Dako, Carpentaria, CA). Vervolgens werden objectglaasjes behandeld met aminoethylcarbazool om de secties te ontwikkelen. Er werden huidglaasjes geobserveerd met behulp van een Nikon Ti{8}}U-microscoop.

Omgekeerde transcriptie-kwantitatieve PCR (RT-qPCR)

RT-qPCR werd uitgevoerd zoals eerder beschreven (Lv et al., 2020). In het kort werd het totale RNA van SK-MEL-2-cellen geëxtraheerd met behulp van TRIzol-reagens en spectrofotometrisch gekwantificeerd. Enkelstrengs cDNA werd gesynthetiseerd met behulp van SuperScript II Reverse transcriptase volgens de instructies van de fabrikant. SYBR-Green kwantitatieve PCR-analyse werd uitgevoerd met een ABI PRISM Sequence Detection System (Applied Biosystems) en vooraf gevalideerde primersets. Alle monsters werden in drievoud uitgevoerd. Drempelcycli werden in het logaritmische deel van de amplificatiecurve geplaatst en de resultaten werden genormaliseerd naar GAPDH. Het vouwverschil tussen de twee monsters werd bepaald met de delta-delta Cq-methode. De primersequenties van het Mitf-gen zijn 5′-AGAGCAGGGCAGAGAGTGAGTG-3′, 5′-AACTTGATT CCAGGCTGATGATGTC-3′.

Western Blot-analyse

De eiwitsuspensie werd verkregen volgens de hierboven genoemde methode. De geëxtraheerde intracellulaire eiwitten (30 µg) werden gescheiden door SDS-PAGE (10 procent) en vervolgens overgebracht naar een polyvinylideen L-fluoride (PVDF)-membraan, waarbij een standaardprotocol voor natte overdracht werd gevolgd. Het membraan werd geblokkeerd met 2,5% BSA bij kamertemperatuur gedurende 1 uur, gedurende de nacht blootgesteld aan geschikte primaire antilichamen bij 4°C en 4 keer gewassen met TBST. De membranen werden blootgesteld aan HRP-gelabeld Goat Anti-Rabbit IgG (1:1,000) of Goat Anti-Mouse IgG (1:1,000) bij kamertemperatuur gedurende 1 uur en gewassen met TBST 4 keer (Liao et al., 2017). De membranen werden vervolgens gevisualiseerd met behulp van een multifunctioneel chemiluminescentiebeeldvormingssysteem (Tanon 4600). Interne controles van dezelfde blot werden onderzocht met anti-actine.

Op fenotype gebaseerde evaluatie en bepaling van het melaninegehalte in zebravissen

Volwassen zebravissen werden gehouden in een aquarium onder de volgende omstandigheden: 28,5 graden, met een 14/1{11}} uur licht/donker cyclus. Embryo's werden verkregen uit natuurlijke spawning die 's ochtends werd geïnduceerd door het licht aan te doen. Het verzamelen van embryo's was binnen 30 minuten voltooid. De op fenotype gebaseerde evaluatie werd uitgevoerd zoals eerder beschreven (Choi et al., 2007). In het kort werden gesynchroniseerde embryo's verzameld en gerangschikt met een pipet (3-4 embryo's per putje in 96-putjesplaten met 200 µl embryomedium). FGIN-1-27 en PTU werden opgelost in 0,1 procent DMSO en vervolgens toegevoegd aan het embryomedium gedurende 35 tot 60 uur (blootstelling van 25 uur). De effecten op de melanogenese van zebravissen werden waargenomen onder de stereomicroscoop.

UVB-geïnduceerde hyperpigmentatie caviamodel

Acht bruine cavia's (6 weken, ongeveer 300 g) werden verkregen van het Institute of Laboratory Animal Science (Beijing, China). De cavia's werden afzonderlijk gehuisvest in een kamer met temperatuurregeling onder standaard laboratoriumomstandigheden, met een cyclus van 12 uur licht/12 uur donker (lichten aan van 9:00 AM tot 9:00 PM) met constante temperatuur (23 ± 3 graden) en vochtigheid (50 ± 10 procent). De afzonderlijke gebieden (1 cm diametrale cirkel) van de rug van elk dier werden gedurende 1 week eenmaal per dag blootgesteld aan 500 mJ/cm2 UVB (Sigma SH-4, Shanghai, China (Fujimoto et al., 1988; Lee et al., 2013). Vervolgens werden het vehiculum (PEG400/EtOH 7:3) en FGIN-1-27 (1 procent) twee keer per dag gedurende 3 weken aan de hypergepigmenteerde gebieden gegeven (20 µl oplossing per cirkel). De mate van pigmentatie werd gemeten met de spectrofotometer (YS3010, 3nh, Shenzhen, China). De ΔL-waarde werd als volgt bepaald volgens de L-waarde gemeten door de spectrofotometer: ΔL L (op elke gemeten dag) -L (op dag 0). Alle dierprocedures voor deze studie werden uitgevoerd volgens de "NIH-gids voor de verzorging en het gebruik van laboratoriumdieren" en goedgekeurd door de dierenverzorgings- en gebruikscommissie van de Changzhou University.

Statistische analyse

RESULTATEN

FGIN-1-27 geremde -MSH, OAG of ET-1-geïnduceerde melaninesynthese in SK-MEL-2-cellen

Alvorens de effecten van FGIN-1-27 (Afbeelding 1A) op pigmentatie te onderzoeken, werd een cellevensvatbaarheidstest uitgevoerd om de effecten van FGIN-1-27 op SK-MEL-2 celgroei te onderzoeken. Zoals weergegeven in figuur 1B, had FGIN-1-27 geen effect op de groei van SK-MEL- 2-cellen bij een doseringsbereik van 1–16 μM na 48 uur. In de test op het melaninegehalte remde FGIN-1-27 de basale melanogenese (Afbeelding 1C). -MSH is een lift van intracellulaire cAMP, die melanogenese aanzienlijk induceert (Rzepka et al., 2016; Corre et al., 2004; Lee et al., 2013). FGIN-1-27 remde ook door MSH geïnduceerde melaninesynthese (Figuur 1C). Consequent gaf Masson-Fontana-ammoniumzilverkleuring aan dat FGIN-1-27 de melanineconcentratie in SK-MEL-2-cellen met of zonder -MSH significant verlaagde (Figuur 1D). Bovendien is OAG een lift van PKC en is ET-1 een activator van de MAPK-route, die beide melaninesynthese kunnen bevorderen (Kim et al., 2006; Park et al., 2015; Regazzetti et al., 2015). Zoals te zien is in de figuren 1E en 1F, remde FGIN-1-27 ook duidelijk OAG- of ET-1-geïnduceerde melanogenese.

FGIN-1-27 onderdrukte tyrosinase, TRP-1, TRP-2-expressie en verminderde de cellulaire tyrosinase-activiteit

Melanogenese wordt gecontroleerd door drie cruciale enzymen: tyrosinase, TRP-1 en TRP-2 (Zhu et al., 2015). -MSH en ET-1 bevorderden de melaninesynthese door de expressie van drie cruciale melanogene enzymen te verhogen (Regazzetti et al., 2015; Lee et al., 2013). Om te onderzoeken of de witmakende effecten van FGIN-1-27 verband houden met de expressie van deze eiwitten, hebben we het effect van FGIN-1-27 op de expressie van tyrosinase, TRP-1 en TRP{{10 bestudeerd. }} via western-blot-analyse. Zoals weergegeven in figuur 2A, onderdrukte FGIN-1-27 tyrosinase-, TRP-1- en TRP-2-expressie met of zonder -MSH. FGIN-1-27 keerde ook consequent de door ET-1- geïnduceerde tyrosinase-, TRP-1- en TRP{20}}-expressieverhoging om (Afbeelding 2B). In tegenstelling tot -MSH en ET-1, bevorderde OAG de melanogenese door de cellulaire tyrosinase-activiteit rechtstreeks te verhogen (D'Mello et al., 2016). Zoals weergegeven in figuren 2C en 2D, remde FGIN-1-27-behandeling gedurende 12 uur de door OAG geïnduceerde toename van cellulaire tyrosinase-activiteit en had geen invloed op de expressie van tyrosinase. Daarnaast werd een paddenstoelen-tyrosinase-activiteitstest uitgevoerd om de directe effecten van FGIN-1-27 op de tyrosinase-activiteit te onderzoeken. Zoals weergegeven in figuur 2E, had FGIN-1-27 geen invloed op de enzymatische activiteiten van paddestoeltyrosinase. Deze resultaten suggereerden dat FGIN-1-27 de expressie van tyrosinase, TRP-1 en TRP-2 onderdrukte en de cellulaire tyrosinase-activiteit verminderde, maar geen direct effect had op de enzymatische activiteiten van tyrosinase.

FGIN-1-27 De MITF-expressie verlaagd

MITF is de hoofdtranscriptiefactor die de expressie van tyrosinase, TRP-1 en TRP-2 induceert (Kawasaki et al., 2008; Levy en Fisher, 2011). Zoals weergegeven in figuur 3A remde FGIN-1-27 de MITF-transcriptie. We hebben ook de expressie van MITF gemeten nadat SK-MEL-2-cellen waren behandeld met -MSH in aan- of afwezigheid van FGIN-1-27. Zoals weergegeven in figuur 3B, heeft -MSH de expressie van MITF aanzienlijk bevorderd. Interessant is dat de expressie van MITF aanzienlijk afnam in de aanwezigheid van FGIN-1-27. FGIN-1-27 onderdrukte ook consequent de door ET-1-geïnduceerde toename van MITF-expressie (Afbeelding 3C). Deze resultaten suggereerden dat FGIN-1-27 de expressie van MITF remde.

FGIN-1-27 Verminderde de expressie van PKC-, p-PKA Cat, p-CREB, p-p38 en p-ERK

PKA, PKC en MAPK zijn kritische transductieroutes in melanogenese (D'Mello et al., 2016). De tweede boodschapper cAMP zou PKA kunnen activeren, dat CREB fosforyleert en uiteindelijk de expressie van MITF bevordert (Corre et al., 2004; Rzepka et al., 2016). De PKC{3}}afhankelijke route reguleert melanogenese door de activering van tyrosinase (Kim et al., 2006; Kawaguchi et al., 2012; Yuan en Jin, 2018). Van MAPK, waaronder p38, extracellulaire signaalgereguleerde proteïnekinase (ERK) en c-jun N-terminale kinase (JNK), werd gerapporteerd dat ze pigmentatie reguleren (Zhou et al., 2014). Om de moleculaire mechanismen van melanogeneseregulatie door FGIN-1-27 beter te begrijpen, hebben we de transductieroutes gemeten die betrokken zijn bij pigmentatie. Zoals weergegeven in figuur 4, verminderde FGIN-1-27 de expressie van PKC-, p-PKA cat, p-CREB, p-p38 en p-ERK aanzienlijk.

FGIN-1-27 Remde melanogenese in menselijke melanocyten

De remming van FGIN-1-27 op melanogenese werd beoordeeld in humane epidermismelanocyten (HEM). Zoals weergegeven in aanvullende figuur S1, had FGIN -1-27 geen effect op de groei van HEM bij een doseringsbereik van 1–16 μM na 48 uur. Zoals weergegeven in figuur 5A, remde FGIN-1-27 de melanogenese in HEM aanzienlijk. Western-blottinganalyse suggereerde dat FGIN-1-27 de expressieniveaus van tyrosinase, TRP-1 en TRP-2 in HEM verlaagde (Afbeelding 5B). Zoals weergegeven in aanvullende figuur S2, remde behandeling met FGIN - 1-27 12 uur door OAG geïnduceerde toename van cellulaire tyrosinase-activiteit in HEM. Daarnaast hebben we de expressie van MITF gemeten nadat HEM was behandeld met -MSH in aanwezigheid of afwezigheid van FGIN-1-27. Zoals getoond in figuur 5C, nam de expressie van MITF significant af in de aanwezigheid van FGIN-1-27. Bovendien werd, net als in SK-MEL-2-cellen, de betrokkenheid van PKC-, PKA en MAPK bij FGIN{23}}gemedieerde anti-melanogene eigenschappen ook bevestigd in HEM (Figuur 5D).

Voor meer informatie: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501