Moleculaire mechanismen van anti-melanogeen gedunine afgeleid van neemboom
Mar 28, 2022
Contactpersoon: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† en Sung-Eun Lee 1,2,*,†
Abstract:Melanogenese vertegenwoordigt een reeks processen die melanine produceren, een beschermend huidpigment (tegen ultraviolette stralen), en bepaalt de menselijke huidskleur. Chemicaliën die de melanineproductie verminderen, zijn altijd in trek geweest in de cosmetische markt vanwege interesse in huidverzorging, zoals bleken. Het belangrijkste mechanisme voor het remmen van de melanineproductie is de remming van tyrosinase (TYR), een sleutelenzym voor melanogenese. Hier hebben we echte (Ged), een representatieve limonoïde, geëvalueerd vanwege zijn anti-melanogenese-actie. De melanineproductie in vitro werd gestimuleerd door alfa-melanocyt-stimulerend hormoon (-MSH) in B16F10-muizenmelanoomcellen. Ged verminderde -MSH-gestimuleerde melanineproductie, remming van TYR-activiteit en eiwithoeveelheid. We hebben dit resultaat in vivo bevestigd in een zebravismodel voor melanogenese. Er waren geen tekenen van toxiciteit en misvorming van zebravisembryo's tijdens de ontwikkeling in alle behandelde concentraties. Ged verminderde het aantal geproduceerde pigmentstippen van zebravisembryo's en het melaninegehalte van embryo's. De zeer actieve concentratie van Ged (100 µM) was veel lager dan de positieve controle, kojiczuur (8 mM). Daarom zou Ged een fascinerende kandidaat kunnen zijn voor reagentia tegen melanogenese.
Trefwoorden: MITF; microftalmie-geassocieerde transcriptiefactor; TIR; tyrosinase; DQ; dopaquinon;TRP-1; tyrosinase-gerelateerd eiwit 1; TRP-2; tyrosinase-gerelateerd eiwit 2; MC1R; melanocortine-1-receptor; -MSH; -melanocyt-stimulerend hormoon; ACTH; adrenocorticotropische hormoon; ADDER; agoutisignalerend eiwit; kamp; cyclisch adenosinemonofosfaat; CREB; cAMP-antwoordelement
1. Inleiding
Melanine wordt gesynthetiseerd in het melanosoom, lysosoomachtige organellen van de melanocyt. In het melanosoom wordt melanine geproduceerd in twee pigmenten, eumelanine en pheomelanine, die respectievelijk bruinzwart en roodgeel vertegenwoordigen [1]. De synthese van deze melaninepigmenten begint bij de voorloper, L-tyrosine, met een oxidatiereactie van L-tyrosine tot een verbinding genaamd dopaquinon (DQ) en L-DOPA [2]. In deze oxidatiestap werkt tyrosinase (TYR) als een snelheidsbeperkend enzym van de algehele melaninebiosyntheseroute [2,3]. TRP-1en TRP-2, nauw verwant aan melanogenese-eiwitten, katalyseren de biosyntheseroute van eumelanine en stabiliseren en induceren TYR-activiteit [1]. Het proces van het produceren van melaninepigmenten (melanogenese genaamd) vindt plaats in het melanosoom van melanocyten, een plaats voor de synthese en opslag van formelanine [4]. In de melanogenese-signaleringsroute is de melanocortin1-receptor (MC1R) een lid van G-eiwit-gekoppelde receptoren. MCIR is een startpunt voor melanogenese-signalering en wordt geactiveerd door MC1R-agonisten zoals een -melanocyt-stimulerend hormoon (-MSH), adrenocorticotroop hormoon (ACTH) en agouti-signaleringseiwit (ASP) [1,2]. De activering van de -MSH-MC1R-signaleringsroute verhoogt de concentratie van cyclisch adenosinemonofosfaat (cAMP) en fosforyleert het cAMP-responselement (CREB). Gefosforyleerd CREB induceert het eiwitniveau van microftalmie-geassocieerde transcriptiefactor (MITF), een transcriptiefactor die melaninesynthese-gerelateerde genen, TYR, tyrosinase-gerelateerd eiwit-1 (TRP-1) en tyrosinase-gerelateerd eiwit reguleert -2 (TRP-2) door de M-box van deze genen te binden [1,5,6]. Van de vijf melanocortine-receptoren heeft MC1R de meest voorkomende melanocyten. Het reguleert voornamelijk de productie van eumelanine (zwartbruin pigment) door MC1R te activeren wanneer de agonisten van deze receptor, zoals a-MSH en ACTH, naar deze receptor worden overgeschakeld [2,4,7].
Hoewel er verschillen zijn tussen zoogdieren en vissen, hebben zebravissen een extracopie van MC5R en MC3R, die de kogelvissen niet hebben [7], en deze signaalroute bestaat nog steeds bij zebravissen en werkt precies zoals bij zoogdiermelanocyten [7]. het aantal onderzoeken naar de remming van melaninepigmentvorming is toegenomen vanwege de onderzoeksvoordelen, zoals snelle ontwikkeling in vroege embryo's en observatiegemak [8-11]. Bij deze verschijnselen hebben veel eerdere onderzoeken aangetoond dat de remming van deze signaalroute de melanineproductie vermindert en verschillende remmers opwekt, waaronder bisabolol-Angelone, 4-hydroxy-3-methoxy-kaneelaldehyde en difenyl-methyleen-hydrazine carbothiamine [12 –14].
Gedunin (Ged), een bekende heat-shock protein 90-remmer, is een limonoïde die voorkomt in de geslachten van de Meliaceae-plant. Deze limonoïde komt voornamelijk voor in de epicarp van jonge Indiase neemboom (Azadirachta indica) vruchten en heeft diverse biologische activiteiten, waaronder antikanker, antimalaria, ontstekingsremmend, antidiabetisch, antiallergisch, insecticide, herbicide en antischimmel [15-18]. Er is geen rapport over het mechanisme van het anti-melanogene effect van Ged.
Als kandidaat-medicijn of cosmetisch middel om melanine-gerelateerde ziekten of huidskleurveranderingen te behandelen, zou Ged voordelen kunnen hebben vanwege zijn veilige, natuurlijk voorkomende planteigenschappen [19]. Het anti-melanogene effect van Ged werd in vitro en in vivo geëvalueerd met behulp van respectievelijk B16F10-muismelanoomcellen en zebravisembryo's om een geschikte kandidaat voor wijting te vinden, een van de grootste delen van de commerciële cosmetische markt. Tegelijkertijd, via zebravissen, een acute toxiciteit er werd ook een test uitgevoerd om aan te tonen hoe Ged mogelijk dieren beïnvloedt.
2. Materiaal en methoden
2.1. Chemicaliën en reagentia
Ged werd gekocht bij Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, VS). Melanogenese-stimulator, -MSH, anti-melanogene verbinding en kojinezuur werden gekocht bij Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, VS). Alle andere reagentia waren hoger dan de moleculaire biologie.
2.2. Cel cultuur
De muizenmelanoom-carcinoomcellijn, B16F10, werd verkregen van de American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, VS) en gekweekt met 10 procent foetaal runderserum (v/v), en penicilline geleverd Dulbecco-gemodificeerde Eagle's media (GE Healthcare, Chicago,IL, USA) in een vochtige atmosfeer met 5 procent CO2. Cellen werden gekweekt tot confluentie 80 procent bereikte en driemaal per week verdeeld met een delingsverhouding van 1:8. Cellen werden elke 12 uur geobserveerd en morfologische veranderingen werden gecontroleerd. Het aantal passages van de gebruikte cellen werd klein gehouden.
2.3. Cel levensvatbaarheidstest
Om het proliferatieve effect van Ged op B16F1 0 muizenmelanoomcellijn te evalueren, werd de MTS-assay uitgevoerd volgens eerder gerapporteerd protocol [20] met behulp van CellTiter96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay-kit (Promega, Madison, WI, VS). In het kort werden 1 x 103 cellen gezaaid in elk putje van de 96-putjesplaat en 24 uur geïncubeerd voor herstel. Na incubatie werd Ged behandeld met verschillende concentraties: 0, 3,12, 6,25,12.5 25, 50 en 75 µM. Na 48 uur werd 20 µL MTS-assayoplossing toegevoegd aan elk putje dat 100-µL media met Ged en zonder Ged bevatte. Na een extra incubatie gedurende 4 uur werd de absorptie gemeten bij 490 nm met behulp van een Multiskan GO-spectrofotometer (ThermoScientific, Waltham, MA, VS). De absorptiegegevens werden genormaliseerd met de controle en weergegeven als een percentage remmingsverhouding.
2.4. Bepaling van het melaninegehalte
Extracellulaire en intracellulaire melaninegehaltes werden bepaald volgens een eerder gerapporteerde aangepaste methode [21]. -MSH (200 nM) voorbehandelde melanoomcellen werden 72 uur geïncubeerd met en zonder kojiczuur (200 µM) en Ged (25 en 50 µM). Na incubatie werden fenolroodvrije kweekmedia verzameld en gekweekte cellen werden geoogst met RIPA-lysisbuffer. Geoogste cellen werden 15 min gecentrifugeerd bij 4 ◦C, 13 000 rpm en pellets werden 2 uur bij 95 C opgelost in 1 M NaOH, 10% DMSO-oplossing. De absorptie van verzamelde media en opgeloste melanine werd gemeten bij 470 nm met behulp van een spectrofotometer. Alle monsters werden genormaliseerd met hun eiwitconcentratie bepaald volgens de BCA-methode.
2.5. Intracellulaire tyrosinase-activiteitstest
Cellulaire tyrosinase-activiteit werd bepaald door het meten van de oxidatiesnelheid van L-dihydroxyfenylalanine (L-DOPA) zoals eerder gerapporteerd, met kleine wijzigingen [22]. B16F10 muizenmelanoomcellen werden voorbehandeld met 200 nM -MSH gedurende 1 uur gevolgd door behandeling met 200 µM kojic zuur, met en zonder Ged (25 en 50 µM), en 72 uur geïncubeerd. Na incubatie werden de cellen geoogst met lysisbuffer die proteïnaseremmer bevatte, en het monster werd 15 minuten gecentrifugeerd bij 13,000x g, 4 ◦C. Het supernatant werd overgebracht naar een nieuwe buis. Elk monster (20 µL) en 80 µL van 40 mM L-DOPA werden gemengd in een 96-well-plaat en gedurende 2 uur bij 37 °C geïncubeerd. Absorptie bij 475 nm door geoxideerd L-DOPA werd bepaald met behulp van een microplaatlezer. De absorptiewaarde werd genormaliseerd met de eiwitconcentratie van elk monster.
Voordeel van cistanche-extract: remt de tyrosinase-expressie.
2.6. RNA-isolatie en qRT-PCR
Totale RNA-isolatie en qRT-PCR werden uitgevoerd volgens een methode die eerder is beschreven door [18]. Totaal RNA werd kort uit elk monster geëxtraheerd met behulp van Trizol-reagens (Ambion, Austin, TX, VS). De geëxtraheerde totale RNA-concentratie werd bepaald door absorptie bij 260 nm en de kwaliteit van totaal RNA werd gecontroleerd met een absorptieverhouding van 260:280 en 260:230 nm met behulp van een Multiskan GO-microplaatlezer (Thermo Scientific). TotalRNA (5 µg) werd gesynthetiseerd in cDNA met Maxima eerste-strengs cDNA-synthesekit (Thermo Scientific) en gesynthetiseerd cDNA. mRNA-expressieniveaus van Mitf, Tyr, Trp-1 en Trp-2 werden bepaald met behulp van Luna Universal qPCR Master Mix (New England Biolabs, Ipswich, MA, VS) en QuantStudio 3 Real-Time PCR-instrument ( Applied Biosystems, Foster City, CA, VS) volgens het protocol van de instructeur. Het expressieniveau van genen werd genormaliseerd met glyceraldehyde 3-fosfaatdehydrogenase (GAPDH).
2.7. Immunoblot-analyse
Immunoblot-analyse werd uitgevoerd volgens de eerder beschreven methoden [23]. Eiwitten van B16f10-cellen werden verzameld met behulp van Ceti-lysisbuffer (Translab, Daejeon, Korea) en de concentratie werd bepaald met een Pierce BCA-eiwittestkit (Thermo Scientific). Een gelijke hoeveelheid eiwitten (30 µg) van elk monster werd op een natriumdodecylsulfaat-polyacrylamidegel geladen en aan elektroforese onderworpen. Na scheiding werden eiwitten overgebracht naar een nitrocellulosemembraan en het membraan werd gedurende 2 uur geblokkeerd in 10% magere melkoplossing. Geblokkeerde membranen werden een nacht bij 4 C met primair antilichaam geïncubeerd, gevolgd door een tweede incubatie met secundair antilichaam gedurende 2 uur bij 26 ◦C. Primaire en secundaire antilichamen werden verdund in een verhouding van respectievelijk 1:1000 en 1:3000. Ten slotte werden geblotte membranen gedocumenteerd met behulp van ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA, VS) met ECL-reagens (SuperSignal, Thermo Scientific). Primaire en secundaire antilichamen werden gekocht bij Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, VS).
2.8. Zebravis Embryo Test
Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >80 procent bevruchtingspercentage en werden geselecteerd en gebruikt voor het experiment. Twaalf gezonde embryo's in elke behandelde groep bevonden zich in elk putje van een 96-putjesplaat met en zonder Ged (25, 50, 75 en 100 µM) en kojiczuur (8 mM) in E3-media in het schildstadium. 24 uur na de bevruchting (h/pf) werden de embryo's verwijderd en werd de afwijking elke 24 uur gecontroleerd tot 72 uur/pf. Het fenotype van de embryo's werd gefotografeerd in een lateraal en dorsaal zicht om verschillen tussen groepen te vergelijken met behulp van een BX53 rechtopstaande microscoop met DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, VS). Na het in beeld brengen werden embryo's gehomogeniseerd met Ceti-lysisbuffer (TransLab) en werd de melanineconcentratie bepaald, die gelijk was aan de bepaling van het melaninegehalte van B16F10-cellen.
2.9. Statistische analyse
Alle statistische analyses die in dit onderzoek worden gepresenteerd, zijn uitgevoerd met GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, VS). Eenrichtings-ANOVA met de test van Tukey werd gebruikt voor meerdere vergelijkingen. Alle gegevens worden weergegeven als het gemiddelde ± de standaarddeviaties. Significante verschillen werden als statistisch significant beschouwd bij p <>
3. Resultaten
3.1. Cytotoxisch effect van piperlongumine in B16F10-cellen
Voordat we het anti-melanogene effect van Ged onderzochten, hebben we een levensvatbaarheidstest uitgevoerd in de B16F10-cellijn om het dosisbereik in deze studie in te stellen. In het concentratiebereik van 3,12 tot 50 µM vertoonden cellen geen remmend effect op de groei, en hun relatieve proliferatie was van 91,0 procent tot 118,7 procent (Figuur 1). Daarentegen, hoewel er geen statistische significantie was, werd de groei van de met 75 µM behandelde groepen enigszins geremd (89,3 procent; Figuur 1). Daarom werd de hoogste concentratie ingesteld op 50 µM in de resterende cellijnexperimenten.
Figuur 1. Cytotoxiciteit van gedunin (Ged) in B16F10-cellen
3.2. Gedunin remt melanineproductie en intracellulaire tyrosinase-activiteit in B16F10-muismelanoomcellen
We evalueerden het anti-melanogene effect van Ged in B16F10-muizenmelanoomcellen. De MC1R-agonist, -MSH, induceerde effectief intracellulaire en extracellulaire melanineproductie (Figuur 2a-c). De kleur van de verzamelde media was donker met -MSH (Figuur 2a). De kleur was vervaagd met de toevoeging van Ged en het effect was dosisafhankelijk (Figuur 2a). In de resultaten van het totale melaninegehalte verhoogde -MSH de melanineproductie in melanocyten ongeveer zeven keer hoger dan de controlegroep en stimuleerde het de afname van melanine door toevoeging van kojiczuur, een bekende positieve controle bij melanogenese (Figuur 2d). Ged verkortte ook de stimuli-inducerende melanineproductie in melanocyten bij alle concentraties die in deze studie werden getest (Figuur 2d). Bovendien vertoonde Ged in de tyrosinase-activiteitstest een sterk remmend effect op het snelheidsbeperkende enzym, tyrosinase, bij melanogenese (Figuur 2e). De relatieve activiteit van tyrosinase in een met 50 µM Ged behandelde groep nam af met respectievelijk 20 procent en 12,24 procent in vergelijking met de controlegroep en de a-MSH-gestimuleerde groep.
Figuur 2. Anti-melanogeen effect van echt (Ged) op alfa-melanocyt-stimulerend hormoon (-MSH)-gestimuleerde melanineproductie in B16F10-cellen.
3.3. Gedunin vermindert -MSH-geïnduceerde melanogenese-gerelateerde genexpressie
-MSH (200nM) geïnduceerd mRNA-niveau van Mitf; een melanogenese-transcriptiefactor en doelgenen Tyr, Trp-1 en Trp-2 (Figuur 3). Behandeling van Ged verlaagde het mRNA-niveau van alle genen op een dosisafhankelijke manier bij een concentratie van 25 en 50 µM (Figuur 3). Vergeleken met de positieve controle, kojiczuur (200 µM), was Ged effectiever in het verminderen van het mRNA. niveau van melanogenese-gerelateerde genen in B16F10-cellen. Bovendien nam het niveau van Mitfand Tyr af met respectievelijk 0.10- en 0.26-voudig lager dan -MSH-geïnduceerde cellen, bij een concentratie van 50 M (Figuur 3a, b). Neerwaarts gereguleerde mRNA-niveaus van deze genen verlaagden het niveau van Tyr en verminderden de hoeveelheid TYR-productie van melanine minder dan de controlegroep.
Figuur 3. Effect van reductie op melanogenese-gerelateerde genen.
3.4. Gedunin Verlaagd TYR en TYR-1 bedrag
TYR speelt een cruciale rol bij melanogenese en het eiwitniveau van dit enzym beïnvloedt de melanogenese rechtstreeks. We hebben geprobeerd de wijziging van de hoeveelheid eiwit, TYR, veroorzaakt door een verlaagd mRNA-niveau te bevestigen door middel van immunoblot-analyse. TYR was merkbaar verminderd in vergelijking met controle en -MSH werd dosisafhankelijk behandeld (Figuur 4a). Bovendien was TRP -1, een essentiële transcriptiefactor van TYR, enigszins verlaagd (Figuur 4a). De resultaten waren duidelijker toen de band van elk eiwit werd genormaliseerd door het huishoudeiwit, GAPDH (Figuur 4b, c).
Figuur 4. Western blotting van alfa-melanocyt-stimulerend hormoon (-MSH) geïnduceerde B16F10-cellen met echte behandeling.
3.5. Toxiciteit van Gedunin tegen zebravissen in de vroege ontwikkelingsfase
Toxicologische evaluatie van Ged op de vroege ontwikkelingsfase van de zebravis werd uitgevoerd voordat een anti-melanogene test van Ged in vivo werd geëvalueerd. Morfologische afwijking van zebravisembryo's werd in geen enkele behandelde concentratie van Ged waargenomen (Figuur 5a). Ingeteste concentraties van Ged, 25, 50, 75 en 100 M, het overlevingspercentage van de met Ged behandelde groepen had geen significante verschillen na 72 uur van de met chemicaliën behandelde periode (Figuur 5b).
Figuur 5. Toxiciteit van echte (Ged) op de vroege ontwikkelingsfase van de zebravis.
3.6. Gedunin Verminderd melaninegehalte in zebravisembryo's
Omdat Ged geen ontwikkelingstoxiciteit heeft in zebravisembryo's, hebben we het anti-melanogene effect onderzocht bij een reeks concentraties van Ged, 25, 50, 75 en 100 µM. In theoptische observatie hebben we de stippen van pigmentzebravissen gecontroleerd; het bovenaanzicht van zebravisembryo's wordt getoond in figuur 5a. Kojiczuur heeft een remmend effect op de pigmentproductie van zebravisembryo's. Ged-behandelde zebravisembryo's hadden ook minder pigmentdots op het hoofd (Figuur 6a). Bovendien nam het totale melaninegehalte geëxtraheerd uit het hele lichaam van zebravisembryo's af na 72 uur blootstelling aan Ged in zowel kojiczuur, apositieve controle als met Ged behandelde groepen (Figuur 6b, c)
Figuur 6. Effect van echt op melanineproductie in vivo.
4. Discussie
In deze studie werden de remmende eigenschappen van Ged tegen de melanineproductie geëvalueerd. Op basis van onze bevindingen was het remmingsvermogen van Ged ongeveer 11,98-maal hoger dan dat van kojiczuur (Figuur 2) en de concentratie van Ged ( 50 µM) lager was dan die van kojiczuur (200 µM), de positieve controle. Het ging gepaard met een verzwakte intracellulaire tyrosinase-activiteit, een enzym dat L-Dopa omzet in DQ, de primaire voorloper van eumelanine en pheomelanine. Verminderde Tyr-activiteit brengt de vertraging van de volledige melanineproductieprocessen met zich mee en het tekort aan beide eindproducten, eumelanine en feomelanine [1-3]. De transcriptie- en TYR-niveaus werden gereguleerd door een reeks transcriptiefactoren: Mitf, Trp-1 en Trp-2 [1,2]. Een verminderde hoeveelheid eiwit- en mRNA-niveau betekent geactiveerde MC1R via -MSH-MC1R-PKA-CREB-signaleringsas door -MSH werd neerwaarts gereguleerd met de behandeling van Ged bij een concentratie van 25 en 50 M, dosisafhankelijk in zowel kwantitatieve PCR als Western-blotting. Zoals eerder beschreven, leidt het verlagen van de hoeveelheid MITF tot een tekort aan Tyr, Trp-1 en Trp-2 via minder binding aan het promotorgebied van deze genen [25-27]. Het verminderen van deze transcriptiefactoren leidt tot een lager TYR-niveau en remt de productie van melaninepigment in B16F10-cellen. Bovendien tonen de huidige resultaten het TYR-remmende effect van Ged aan, een ander kritisch punt van de melanineproductie in de melanocyt. Ged toonde ook een remmend effect op pigmentproductie tijdens de vroege ontwikkelingsfase van de zebravis in de in vitro en in vivo modellen. Onze resultaten toonden aan dat behandeling met Ged gedurende 72 uur de embryopigmentatie van de zebravis aanzienlijk verminderde. Het totale melaninegehalte en mRNA-niveaus van verwante genen waren verminderd met de aanwezigheid van Ged, en de tendens van deze resultaten ondersteunde sterk de in vitro anti-melanogenese-eigenschap van Ged.
Bovendien was het remmende vermogen van Ged veel sterker dan kojiczuur, een van de meest bekende verbindingen als bleekmiddel in de cosmetische industrie [6,28]. De concentratie waarbij Ged optrad was relatief lager dan die van kojiczuur. Bovendien toonde een eerder rapport aan dat een ander veelgebruikt bleekmiddel, arbutine, een vergelijkbaar anti-melanogeen effect had als kojiczuur [2]. Daarom moet Ged worden beschouwd als een bleekmiddel ter vervanging van het momenteel gebruikte arbutine of kojiczuur, en als een anti-melanomadrug met betrekking tot zijn veelbelovende eigenschappen.
Anti-melanogene eigenschappen van Ged werden eerder gesuggereerd [29,30], maar deze onderzoeken waren niet gericht op de specifieke mechanismen van het effect, en ze observeerden eenvoudigweg verandering van cytotoxische effecten en hoeveelheid melanineproductie in vitro, terwijl anti-proliferatieve activiteit en remmende effecten op HSP 90-expressie is gemarkeerd [31-33]. De mogelijkheid van Ged als een anti-melanogenetisch middel is gemeld; deze onderzoeken waren echter niet gericht op de specifieke mechanismen van het effect, en ze observeerden eenvoudigweg verandering van cytotoxische effecten en de hoeveelheid melanineproductie in vitro. We hebben geprobeerd het mechanisme op celniveau te bepalen door het mRNA-niveau en de eiwithoeveelheid van aan melanineproductie gerelateerde genen te bevestigen. Samen met eerdere rapporten toonde deze studie een nieuw perspectief van Gedas, een bestanddeel van cosmetische ingrediënten voor twee voordelen, uitstekende antikanker en anti-melanogenese, die tegelijkertijd kunnen worden toegepast op zowel UV-geïnduceerd melanoom als accumulatie van pigment.
cistanche extract poeder: vrije radicalen verwijderen
5. Conclusies
Samenvattend, al deze resultaten toonden aan dat een nieuwe verbinding, Ged, kan worden gebruikt als adepigmentatiereagens voor de biosynthese van melanine, die de stroomafwaartse eiwitten TYR, TRP-1 en TRP-2 met een verminderde hoeveelheid verkortte in vergelijking met de master regulatie-eiwit, MITF, in zowel in vitro als in vivo systemen van het zebravismodel.
cistanche tabletten
