Neuroprotectieve eigenschappen van 4-Aminopyridine

Contactpersoon: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP en Philipp Albrecht, MD

Abstract

Als antagonist van spanningsafhankelijke kaliumkanalen (Kv), wordt 4-aminopyridine (4-AP) gebruikt als symptomatische therapie bij verschillende neurologische aandoeningen. De verbetering van de visuele functie en motorische vaardigheden en verlichting van vermoeidheid bij patiënten met MS zijn toegeschreven aan 4-AP. De formulering met verlengde afgifte (fampridine) is goedgekeurd voor de symptomatische behandeling van loopproblemen bij MS. De gunstige effecten werden verklaard door de blokkade van axonale Kv-kanalen, waardoor de geleiding langs gedemyeliniseerde axonen werd verbeterd. Een toenemend aantal bewijzen suggereert echter dat 4-AP aanvullende eigenschappen kan hebben die verder gaan dan het symptomatische werkingsmechanisme. In deze review vatten we preklinische en klinische gegevens samen over mogelijke neuroprotectieve kenmerken van 4-AP.

4-Aminopyridine bij neurologische aandoeningen

Aminopyridines zijn een groep monoamine- en diaminoderivaten van pyridine, die spanningsafhankelijke kaliumkanalen (Kv) remmen. Vooral de 2 breedspectrum kaliumkanaalblokkers 4-aminopyridine (4-AP) en 3,4-aminopyridine (3,4- DAP) zijn gebruikt als nieuwe onderzoeksstoffen bij verschillende neurologische aandoeningen. Hoewel 3,4-DAP een krachtigere antagonist van kaliumkanalen is, passeert 4-AP de bloed-hersenbarrière gemakkelijker1 en was het klinisch superieur bij patiënten met MS, met name voor het verbeteren van de visuele functie,2 vermoeidheid ,3 cognitie,4 en loopsnelheid.1 Bovendien is gemeld dat 4-AP neurale geleiding vergemakkelijkt bij andere neurologische aandoeningen dan MS.5,6

Effecten van cistanche: bescherm neuronen

In gezonde axonen zijn de kanalen Kv1.1 en Kv1.2 geclusterd in de buurt van de knooppunten van Ranvier.7 Deze kanalen worden blootgesteld na demyelinisatie en migreren door het gedemyeliniseerde segment. Tegelijkertijd wordt de expressie van deze kanalen meervoudig verhoogd.8 Deze verkeerd gerichte herverdeling van de Kv-kanalen belemmert de overdracht van actiepotentialen, wat leidt tot blijvende invaliditeit. 4-AP blokkeert deze blootgestelde kaliumkanalen en verbetert daardoor de signaaltransductie.9,10Het Kv1.3-kanaal werd ontdekt in menselijke T-cellen,11 bleek sterk tot expressie te komen op inflammatoire infiltraten in de MS-hersenen12 en is tot expressie gebracht op macrofagen, microglia en effectorgeheugen-T-cellen.13 Selectieve en niet-selectieve Kv1.3-kanaalblokkers kunnen daardoor immunomodulerende eigenschappen bieden door celproliferatie en pro-inflammatoire cytokinesecretie te remmen.14 Studies vóór 2009 konden 4-AP niet vaststellen als een symptomatische behandeling van MS omdat de bloedspiegels van geneesmiddelen bij patiënten onvoorspelbaar waren, waarbij te hoge doses geassocieerd werden met het risico op epileptische aanvallen en verminderd bewustzijn.15-18 Daarom werd fampridine, de formulering met verlengde afgifte van 4-AP, ontwikkeld en is vervolgens goedgekeurd voor de symptomatische behandeling van loopproblemen bij MS.19-23 Interessant is dat recentelijk steeds meer bewijs suggereert dat naast deze brede ely erkende symptomatische effecten, 4-AP kan aanvullende beschermende eigenschappen hebben.

Evaluatie van 4-AP met in-vitromodellen

In vitro zijn neuroprotectieve effecten van 4-AP waargenomen in tal van modellen. Toen motorneuronen (MN's) differentieerden van geïnduceerde pluripotente stamcellen van patiënten met amyotrofische laterale sclerose die mutaties van het FUS- en SOD1-gen droegen, werden blootgesteld aan 4-AP, werden ionkanaalonevenwichtigheden hersteld, neuronale activiteitsniveaus verhoogd, endoplasmatisch reticulum stress verminderd, en caspase activatie verzwakt. De mutante MN's vertoonden lagere natriumstromen en Na plus/K plus-verhoudingen, wat op zijn minst gedeeltelijk de reden kan zijn voor hun hyperexcitabiliteit. Dit werd omgekeerd na 4-AP-behandeling, wat leidde tot verminderde kaliumstromen en herstelde spontane activiteitspatronen en synaptische input in de MN's.24 4-AP-behandeling verminderde de afgifte van pro-inflammatoire mediatoren uit menselijke microglia die waren uitgedaagd met amyloïde- bèta en beschermde gekweekte hippocampusneuronen van ratten badend in supernatanten van met amyloïde-beta behandelde microglia.25 Een 4-AP-derivaat verminderde naar verluidt -synucleïneaccumulatie, oxidatie, ontsteking en Rho-kinase-activering in een in vitro model van de ziekte van Parkinson.26 Andere in vitro-onderzoeken meldden dat 4-AP de fosforylering van cAMP-responselement-bindend eiwit verhoogde, beschermd tegen cellulaire stress door glutamaat, NMDA en 3-nitropropionzuur uitgeoefend op neonatale cerebellaire granule-neuronen van ratten. Glutamaat leidt ook tot een verminderde levensvatbaarheid in cellen die zijn voorgeconditioneerd met 4-AP maar zonder significante activering van caspase-3. Deze waarnemingen suggereerden dat 4-AP voornamelijk effectief is tegen necrotische excitotoxiciteit.27 Er werd ook aangetoond dat het primaire neuronale culturen beschermt tegen zuurstofglucosedeprivatie of ouabaïne/DL-drie- -benzyloxyasparaginezuurtoxiciteit.28

neuroprotectief effect van Cistanche

Preklinische in vivo-onderzoeken op 4-AP

Verschillende onderzoeken hebben de beschermende effecten van 4-AP in verschillende ziektemodellen onderzocht (tabel 1). In zenuwcrush-modellen van perifere zenuwbeschadiging leidde profylactische en vroege 4-AP-behandeling tot herstel van de zenuwgeleidingssnelheid, bevorderde remyelinisatie en vergroting van het axonale gebied. De laatstgenoemde waarnemingen werden verklaard door effecten die vergelijkbaar waren met de effecten die optreden na elektrische stimulatie, bijvoorbeeld verhogingen van de niveaus van neuronale hersenafgeleide neurotrofe factor (BDNF).29 In een model van de ziekte van Alzheimer, injectie van amyloïde-bèta in de hippocampus van Sprague Dawley ratten veroorzaakten neuronale schade en verhoogde microgliale activatie. Dagelijkse toediening van 1 mg/kg 4-AP bleek microgliale activatie te onderdrukken en neuroprotectie te bieden. Dit werd toegeschreven aan het vermogen van 4-AP om de niet-inactiverende uiterlijk corrigerende K-plus-stroom in geactiveerde microglia te blokkeren en de cellulaire productie van pro-inflammatoire cytokines te verminderen. {11}}AP die kan worden opgeheven door de niet-competitieve NMDA-receptorantagonist MK-801 en de adenosine A1-antagonist 8-cyclopentyltheofylline. Deze waarnemingen suggereren dat NMDA-receptoren relevant zijn voor 4-AP-gemedieerde bescherming in dit model.30 In een diermodel van auto-immuunneuropathie bij Lewis-ratten verbeterde 4-AP de klinische ernst en pathologische elektrofysiologische bevindingen. De auteurs suggereerden dat axonale bescherming werd geboden door natrium-gemedieerde binnenwaartse stromen in de vroege fase te blokkeren, omdat hoge membraanpotentialen in de acute fase van ontsteking neurotoxisch kunnen zijn. In de chronische fase werd de zenuwgeleiding mogelijk verbeterd door de door kalium gemedieerde uitgaande stroom te blokkeren

Bij experimentele auto-immuun encefalomyelitis (EAE), een model van immuun-gemedieerde CZS-ontsteking die kardinale kenmerken van MS repliceert, is gemeld dat Kv-kanaalblokkade T-celactivering remt, mogelijk door het blokkeren van kanalen van de Kv1.3-subfamilie en verzwakte axonale demyelinisatie en degeneratie door in te werken op het K.3.1-kanaal op astroglia, waardoor mogelijk het BDNF-signaal wordt geïnduceerd. leng. In door proteolipide-eiwit geïnduceerde EAE in SJL-muizen verbeterde de behandeling met 4-AP significant de digitale scores die pathologisch werden bevestigd. Er werd waargenomen dat de expressie van gliaal fibrillair zuur eiwit werd gedownreguleerd in met 4-AP behandelde muizen, en T-celactivering en Th1/17-polarisatie werden verminderd. In het chronische, myeline-oligodendrocyt-glycoproteïne (MOG)-peptide-geïnduceerde EAE-model in C57BL/6-muizen veranderde 4-AP het EAE-verloop echter niet.5 Een andere studie onderzocht ook de effecten van {{19} }AP in een MOG-EAE-model in C57BL/6-muizen en rapporteerde symptomatische maar geen ziektemodificerende effecten. Noch een profylactische noch een therapeutische 4-AP-behandeling verminderde de ernst van het digitale EAE-beloop, terwijl met 4-AP behandelde dieren verbeterde mobiliteit vertoonden, beoordeeld door voetafdruk- en rotarod-analyse. Demyelinisatie van het ruggenmerg, neuronale schade en MRI-beeldvorming van veranderingen in het hersenvolume waren ongewijzigd. Proliferatie, IL17 of IFN-y-productie van CD4*-T-cellen werden ook niet beïnvloed.3

Meer recentelijk hebben we aangetoond dat 4-AP, afgezien van de symptomatische effecten op het verbeteren van de neurale geleiding, neurodegeneratie van het netvlies kan voorkomen tijdens door MOG-peptide geïnduceerde experimentele optische neuritis (EAEON) in C5BL6-muizen.'Gebruik van in vivo optische coherentietomografie( OCT)beeldvorming, visuele functietesten en histologische beoordeling, zagen we een vermindering van de mate van degeneratie van de binnenste retinale lagen in modellen van EAEON, zowel voor profylactische als therapeutische 4-AP-toediening. In dit model versterkte 4-AP de effecten van immunomodulerende behandeling met de sfingosine-1-fosfaatreceptormodulator fingolimod, wat onafhankelijke werkingsmechanismen suggereert. Het is redelijk om aan te nemen dat dit effect niet beperkt is tot alleen fingolimod en van toepassing is op 4-AP in combinatie met andere MS-immunomodulerende geneesmiddelen. In onze studie onthulde de histologie van de oogzenuw dat 4-AP, in tegenstelling tot fingolimod, geen significante invloed had op microgliale activatie en/of infiltratie van lymfocyten of macrofagen, wat suggereert dat de beschermende effecten niet gerelateerd waren aan een ontstekingsremmende modus. van de actie. In overeenstemming hiermee interfereerde behandeling met 4-AP niet met EAE-inductie, gevalideerd door een T-cel-restimulatietest. Verder zagen we significante bescherming tegen retinale neurodegeneratie onder behandeling met 4-AP, ook in het niet-inflammatoire oogzenuw crush-model, terwijl fingolimod hier geen effect had. Interessant is dat in vitro 4-AP-behandeling retinale ganglioncellen niet direct beschermde. In plaats daarvan wezen histologie en in vitro-experimenten op 4-AP-gemedieerde stabilisatie van myeline- en oligodendrocytprecursorcellen. Dit effect ging gepaard met een verhoogde calciuminstroom en nucleaire translocatie van de nucleaire factor van geactiveerde T-cellen (NFAT). Eerder is aangetoond dat 4-AP de calciumhomeostase reguleert door de inositoltrifosfaatspiegels te verhogen en daardoor calciumafgifte uit de intracellulaire calciumvoorraden te veroorzaken. Aanvullend onderzoek naar 4-AP in demyeliniserende modellen, bijvoorbeeld cuprizonbehandeling of transgene muismodellen met induceerbare oligodendrocytablatie, kan echter nuttig zijn om deze aandoeningen te bevestigen. Bestaande studies in diermodellen van demyelinisatie richten zich voornamelijk op het vermogen van 4-AP om de actiepotentiaal te herstellen, maar verder onderzoek van oligodendrogliale cellen ontbreekt (figuur).

Het is belangrijk te vermelden dat de doses die nodig zijn om deze effecten in vitro te verkrijgen, ongeveer 100-1,000x hoger zijn dan de concentratie die bij patiënten wordt bereikt. Daarom kunnen aanvullende of andere mechanismen relevant zijn voor de waarnemingen in vivo en in vitro. Deze omvatten, maar zijn niet beperkt tot, een verminderde energiedissipatie van gedemyeliniseerde axonen vanwege blokkering van kaliumlekkage en sterkere beschermende en herstellende capaciteiten in de hersenen, indirect als gevolg van verhoogde mobiliteit en meer inspanning.

Bovendien kunnen immunomodulerende mechanismen van 4-AP niet worden uitgesloten, vooral omdat verminderde T-celactivering en Th1/17-polarisatie zijn aangetoond in PLP-geïnduceerde EAE in SJL-muizen.3 Bovendien vonden preklinische studies van andere ziektemodellen een verzwakte activering en verminderde afgifte van pro-inflammatoire mediatoren door microglia. Deze controversiële resultaten benadrukken de diverse pathologische mechanismen van de verschillende diermodellen, waarbij immuuncellen min of meer vatbaar zijn voor behandelingsstrategieën. De discrepanties tussen onze resultaten en eerdere rapporten van alleen symptomatische effecten in MOG-peptide-geïnduceerde EAE in C57BL6-muizen" kunnen op zijn minst gedeeltelijk worden verklaard door (1) verschillen in dosering omdat anderen doses van 100 ug en 600 ug / muis / dag gebruikten, overwegende dat we 250 ug/muis/d hebben toegediend;(2) behandelingsduur (40,60 en 90 dagen door respectievelijk Göbel et al,* Moriguchi et al,3 en Dietrich et al, "respectievelijk); en (3) hoeveelheid MOG die werd gebruikt voor immunisatie omdat we 200 ug MOG per muis gebruikten, terwijl anderen slechts 100 ug MOG per muis gebruikten. Recent onderzoek richt zich op de rol van de darmflora bij het beïnvloeden van de inductie en ernst van EAE door de balans van effector- en regulerende T- en B-cellen te veranderen. Het microbioom van de knaagdieren kan verschillen tussen de dierenfaciliteiten, wat resulteert in verschillen in EAE-ernst, beloop en mogelijk zelfs respons op therapieën. Alles bij elkaar genomen, zouden deze factoren de heterogeniteit in onderzoeksresultaten kunnen verklaren.

neuroprotectief effect van Cistanche

Klinische benadering van 4-AP bij patiënten met MS

Verschillende klinische onderzoeken sinds de jaren tachtig suggereerden al de gunstige effecten van 4-AP bij mensen met MS. Ze identificeerden onder andere verbetering in motorische40-2 en visuele functies-44 en vermoeidheid.5-7 Onderzoeksbeperkingen, afwezigheid van een homogeen onderzoeksontwerp en kleine patiëntenaantallen verhinderden echter de goedkeuring van {{ 5}}AP door de reguliere autoriteiten en leidde tot een off-label gebruik gedurende meer dan 3 decennia.4 Aan de andere kant vergemakkelijkten sommige van deze onderzoeken de ontwikkeling van de formulering met aanhoudende afgifte (SR-4-AP of fampridine) ze vonden de plasmaspiegels van de oorspronkelijke verbinding met onmiddellijke afgifte inconsistent en onvoorspelbaar. De eerste klinische studie met SR-4-AP werd in 1997 uitgevoerd door Schwid et al.,49 en toonde een significante verbetering van de loopsnelheid en een trend in de richting van verbetering van de spierkracht aan.

Het technologiesysteem met verlengde afgifte is ontwikkeld door Elan Pharmaceuticals. Het gebruikte een zogenaamd matrix-geneesmiddelabsorptiesysteem, bestaande uit een gepatenteerde polymeermatrix die de afgifte door diffusie en erosie door gastro-intestinale enzymen regelt. Dit resulteerde in lagere piekplasmaspiegels van het geneesmiddel en een langere werkingsduur.1 Aanvankelijk werd SR-4-AP getest in 4 onderzoeken. In 2007 voerden Goodman et al.1 bij 36 patiënten met MS een doseringsbereik van 5 mg uit van 10 tot 40 mg tweemaal daags. In de Timed 25 Foot Walk Test (T25FW) werd geen significante verandering waargenomen, terwijl een post hoc analyse die de gegevens omzet in loopsnelheid (ft/s) significantie bereikte. Daarnaast werd een verbetering in zelfgerapporteerde vermoeidheid waargenomen. In een dosisvergelijkingsonderzoek in 2008 (gerandomiseerd, dubbelblind, placebogecontroleerd) wierven Goodman et al.2 206 patiënten aan die een placebo kregen of doses van 10,15 of 20 mg tweemaal daags. Nogmaals, post-hocanalyse die verbetering in loopsnelheid vergelijkt, vond significant betere resultaten voor alle behandelingsgroepen afzonderlijk en voor alle SR-4-AP-behandelde patiënten gepoold in vergelijking met placebo. De spierkracht was verbeterd voor de met 10-mg- en 15-mg-behandelde groepen, maar niet voor de 20 mg-behandelde groepen in vergelijking met de placebopatiënten. In de 2 daaropvolgende fase Ⅲ klinische onderzoeken (21-week dubbelblind placebogecontroleerd gerandomiseerd onderzoek, 301 patiënten en 14-week dubbelblind placebogecontroleerd onderzoek, 239 patiënten) met 10 mg tweemaal daags, de patiënten werden verdeeld in een respondergroep en een non-respondergroep, gedefinieerd door een consistente verbetering op T25FW. In beide onderzoeken was de toename in loopsnelheid significant in vergelijking met de non-responder- of placebogroep. Verder was er een verbetering in de 12-Item MS Walking Scale(MSWS-12) score voor de respondenten.2122

In een open-label verlengingsonderzoek van deze onderzoeken werd aangetoond dat de klinische verbetering verloren ging na stopzetting van het geneesmiddel, maar terugkeerde 2 weken na het hervatten van de behandeling met SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, de tabletformulering van SR{ {3}}AP kreeg in januari 2010 volledige goedkeuring van de Food and Drug Administration om het lopen bij patiënten met MS te verbeteren, maar slechts een voorwaardelijke vergunning voor het in de handel brengen in 2011 van het Europees Geneesmiddelenbureau (EMA). Op basis van de genoemde onderzoeken was de goedkeuring onderworpen aan de bepaling om meer gegevens over de werkzaamheid en veiligheid op de lange termijn te verstrekken. Daarom zijn een fase II verkennend (MOBILE) en een fase I bevestigend onderzoek (ENHANCE) gestart.

In de verkennende MOBLE-studie met 132 deelnemers werd een verbetering gevonden van de Patient Global Impression of Change (PGIC), MSWS-12 en Timed Up and Go (TUG)-snelheid23. Om de werkzaamheid en veiligheid op lange termijn van SR-4-AP, het bevestigende ENHANCE-onderzoek (10 mg tweemaal daags bij 646 MS-patiënten) werd uitgevoerd. Naast de verbeteringen die werden gerapporteerd in de MOBILE-studie, vonden de auteurs een significante verbetering van SR-4-AP-behandelde patiënten op de 29-Item MS Impact Scale.5 Het EMA verleende daarna onvoorwaardelijke goedkeuring van SR{ {11}}AP voor de behandeling van patiënten met MS met loopproblemen. De ENABLE-fase-observatiestudie met 901 patiënten toonde aan dat behandeling met SR-4-AP gunstig is voor patiënten met MS door middel van zelf-waargenomen fysiek functioneren en psychologische gezondheid in een reële setting2(tabel 2).

Op basis van de veelbelovende preklinische gegevens over bescherming tegen retinale neurodegeneratie die hierboven zijn beschreven, voerde onze groep een retrospectief, multicenter OCT-onderzoek uit om retinale neurodegeneratie longitudinaal te vergelijken tussen 52 patiënten op continue 4-AP-therapie en 51 controles die werden gematcht voor alle relevante covariaten met behulp van een vooraf gedefinieerd matching-algoritme. In overeenstemming met de experimentele gegevens was tijdens gelijktijdige 4-AP-therapie de degeneratie van de maculaire retinale zenuwvezellaag gedurende 2 jaar verminderd. Deze bevindingen moeten echter worden bevestigd in onafhankelijke en idealiter prospectieve cohortstudies, vooral omdat de effectgrootte laag was en de mate van verdunning van de peripapillaire retinale zenuwvezellaag en maculaire ganglioncel/binnenste plexiforme laag niet significant verschilde tussen de groepen. . Deze discrepanties van een beschermend effect van 4AP alleen op de mRNFL, maar noch in pRNFL noch in McGill, kunnen niet gemakkelijk worden verklaard. Het is belangrijk om te vermelden dat, omdat 4AP alleen is goedgekeurd voor het verbeteren van loopproblemen bij patiënten met EDSS 3.5-5, de geanalyseerde veranderingspercentages werden onderzocht in latere stadia van de ziekte en zonder acute optische neuritis. In een dergelijke setting treden alleen zeer subtiele veranderingen in het netvlies op en zijn grote cohorten nodig om behandeleffecten te detecteren. Daarom was de retrospectieve studie bij patiënten zeker niet voldoende krachtig om op betrouwbare wijze beschermende behandelingseffecten te detecteren, en het komt niet als een verrassing dat slechts één van de uitkomsten positief bleek. Mogelijk was de mRNFL de meest gevoelige laag voor de detectie van behandeleffecten.5"

Samenvattend: een groeiend aantal in-vivo-gegevens suggereert dat 4-AP, naast de bekende symptomatische effecten, door het voorkomen van neurodegeneratie het ziekteverloop van EAEON en mogelijk zelfs van patiënten met MS kan veranderen. Voorlopig in vitro bewijs impliceert de betrokkenheid van cellulaire calciumniveaus en de NFAT-route, maar verder onderzoek is nodig om de exacte moleculaire mechanismen op te helderen die ten grondslag liggen aan 4-AP's neuroprotectieve effect bij immuungemedieerde inflammatoire demyelinisatie. Deze bevindingen kunnen een duidelijke impact hebben op de behandelingsstrategieën voor MS, indien bevestigd in een prospectieve, gerandomiseerde, gecontroleerde klinische studie.

effect van Cistanche

Referenties

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Herstel van de axonale functie met 4-aminopyridine: klinische werkzaamheid bij multiple sclerose en daarbuiten. CNS-medicijnen 2018; 32: 637-651.

2. Horton L, Conger A, Conger D, et al. Effect van 4-aminopyridine op het gezichtsvermogen bij patiënten met multiple sclerose met optische neuropathie. Neurologie 2013; 80: 1862-1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. Het effect van Fampridine-SR op cognitieve vermoeidheid in een gerandomiseerde dubbelblinde cross-over studie bij patiënten met MS. Mult Scler Relat Disord 2017; 11: 4-9.

4. Broeder SD, Filli L, Geissler O, et al. Positieve effecten van fampridine op cognitie, vermoeidheid en depressie bij patiënten met multiple sclerose gedurende 2 jaar. JNeurol 2018; 265:1016-1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ, et al. Preklinische studie van 4-aminopyridine bij patiënten met chronisch ruggenmergletsel. Paraplegie 1993; 31: 216-224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z, et al. Dalfampridine verbetert de sensomotorische functie bij ratten met chronische tekorten na occlusie van de middelste hersenslagader. Beroerte 2013; 44: 1942-1950.

7. Trimmer JS, Rhodos KJ. Lokalisatie van spanningsafhankelijke ionenkanalen in de hersenen van zoogdieren. Annu Rev Physiol 2004;66:477-519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Structuur-activiteitsrelatiestudies van vier nieuwe 4-aminopyridine K(plus) kanaalblokkers. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. De effecten van 4-aminopyridine- en tetraethylammoniumionen op normale en gedemyeliniseerde zoogdierzenuwvezels. J Physiol 1981;313:301-315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J, et al. Effect van fampridine op axonale prikkelbaarheid bij multiple sclerose. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Spanningsafhankelijke K-plus-kanalen in menselijke T-lymfocyten: een rol bij mitogenese? Natuur 1984; 307: 465-468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. Het spanningsafhankelijke kaliumkanaal Kv1.3 komt sterk tot expressie op inflammatoire infiltraten in de hersenen van multiple sclerose. Proc Natl Acad Sci VS 2005; 102: 11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J, et al. Kv1.3-kanaal als een belangrijk therapeutisch doelwit voor neuro-inflammatoire ziekten: state-of-the-art en verder. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R, et al. Het voltage-gated Kv1.3 K(plus) kanaal in effector geheugen T-cellen als een nieuw doelwit voor MS. J Clin Invest 2003;111:1703-1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopyridine-toxiciteit met onbedoelde overdosering bij vier patiënten met multiple sclerose. Neurologie 2008;71: 1833-1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Een ongebruikelijk geval van 4-aminopyridine-toxiciteit. J Emerg Med 2006; 30: 175-177.

17. Schwam E. Ernstige accidentele overdosis 4-aminopyridine als gevolg van een fout in de bereidingsapotheek. J Emerg Med 2011;41:51-54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A, et al. Het effect van fampridine op het risico op aanvallen bij patiënten met multiple sclerose. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A, et al. Fampridine-SR bij multiple sclerose: een gerandomiseerde, dubbelblinde, placebo-gecontroleerde, dosis-variërende studie. Mult Scler 2007; 13:357-368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA, et al. Dosisvergelijkingsonderzoek van fampridine met aanhoudende afgifte bij multiple sclerose. Neurologie 2008; 71: 1134-1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Orale fampridine met aanhoudende afgifte bij multiple sclerose: een gerandomiseerde, dubbelblinde, gecontroleerde studie. Lancet 2009; 373: 732-738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR, et al. Een fase 3-onderzoek van oraal dalfampridine met verlengde afgifte bij multiple sclerose. Ann Neurol 2010; 68: 494-502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Fampridine met verlengde afgifte en lopen en evenwicht bij MS: gerandomiseerde gecontroleerde MOBILE-studie. Mult Scler 2016; 22: 212-221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S, et al. 4-Door aminopyridine geïnduceerde activiteit redt hypo-exciteerbare motorneuronen van amyotrofische laterale sclerose-patiënt-afgeleide pluripotente stamcellen. Stamcellen 2016; 34: 1563-1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Breedspectrumeffecten van 4-aminopyridine om amyloïde bèta te moduleren1-42-geïnduceerde celsignalering en functionele reacties in menselijke microglia. J Neurosci 2006;26:11652-11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z, et al. Ontwerp, synthese, immunocytochemische evaluatie en moleculair dockingonderzoek van verschillende 4-aminopyridinederivaten als potentiële neuroprotectieve middelen voor de behandeling van de ziekte van Parkinson. Bioorg Chem 2017;73:63-75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Preconditionering met 4-aminopyridine beschermt cerebellaire granule-neuronen tegen excitotoxiciteit. Hersenonderzoek 2009; 1294: 165-175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Falen en redden van preconditionering-geïnduceerde neuroprotectie bij ernstige beroerte-achtige beledigingen. Neurofarmycologie 2016; 105: 533-542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A, et al. 4-Aminopyridine bevordert functioneel herstel en remyelinisatie bij acute perifere zenuwbeschadiging. EMBO Mol Med 2016;8:1409-1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. In vivo behandeling met de K plus-kanaalblokker 4-aminopyridine beschermt tegen door kaïnaat geïnduceerde neuronale celdood door activering van NMDA-receptoren in muizen zeepaardje. Neurofarmacologie 2005;48:810-821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Aminopyridine verbetert experimentele auto-immuunneuritis bij Lewis-ratten. J Neuroimmunol 2017;305:72-74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB, et al. Identificatie van een nieuwe klasse remmers van het spanningsafhankelijke kaliumkanaal, Kv1.3, met immunosuppressieve eigenschappen. Biochemie 2002;41:7781-7794.

33. Varga Z, Bedrijf T, Papp F, et al. Kaliumkanaalexpressie in menselijke CD4 plus regulerende en naïeve T-cellen van gezonde proefpersonen en patiënten met multiple sclerose. Immunol Let 2009;124:95-101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Onderdrukking van inflammatoire demyelinisatie en axondegeneratie door remming van Kv3-kanalen. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Aminopyridine verbetert relapsing-remitting experimentele auto-immuun encefalomyelitis bij SJL/J-muizen. J Neuroimmunol 2018;323:131-135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM, et al. 4-Aminopyridine verbetert de mobiliteit, maar niet het ziekteverloop in een diermodel van multiple sclerose. Exp Neurol 2013; 248: 62-71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Beschermende effecten van 4-aminopyridine bij experimentele optische neuritis en multiple sclerose. Hersenen 2020;143: 1127-1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Mobilisatie van calcium uit intracellulaire voorraden, versterking van door neurotransmitters geïnduceerde calciumtransiënten en capacitieve calciuminvoer door 4-aminopyridine. J Neurosci 2001;21:3135-3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopyridine bij patiënten met multiple sclerose: dosering en serumspiegel gerelateerd aan werkzaamheid en veiligheid. Clin Neuropharmacol 1993;16:195-204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. Oraal toegediend 4-aminopyridine verbetert de klinische symptomen bij multiple sclerose. Ann Neurol 1990; 27: 186-192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Aminopyridine verbetert de klinische symptomen bij multiple sclerose. Ann Neurol 1987;21:71-77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopyridine bij multiple sclerose: langdurige toediening. Neurologie 1991; 41: 1344-1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Effecten van 4-aminopyridine bij patiënten met multiple sclerose. J Neurol Sci 1983; 60: 353-362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. De effecten van 4-aminopyridine op klinische symptomen bij multiple sclerose: een gerandomiseerde, placebo-gecontroleerde, dubbelblinde, cross-over studie. Ann Neurol 1992;32:123-130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopyridine bij de behandeling van patiënten met multiple sclerose. Werkzaamheid en veiligheid op lange termijn. Arch Neurol 1994; 51: 292-296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Vermoeidheid bij multiple sclerose: multidimensionale beoordeling en reactie op symptomatische behandeling. Mult Scler 2004;10:462-468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C, et al. Vermoeidheid bij progressieve multiple sclerose: resultaten van een gerandomiseerde, dubbelblinde, placebo-gecontroleerde, cross-over studie van oraal 4-aminopyridine. Mult Scler 2001;7:354-358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopyridine: nieuw leven voor een oud medicijn. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Kwantitatieve beoordeling van 4-aminopyridine met aanhoudende afgifte voor symptomatische behandeling van multiple sclerose. Neurologie 1997;48:817-821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR, et al. Veiligheid en werkzaamheid op lange termijn van dalfampridine voor loopstoornissen bij patiënten met multiple sclerose: resultaten van open-label verlengingen van twee klinische fase 3-onderzoeken. Mult Scler 2015;21:1322-1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P, et al. Beoordeling van klinisch betekenisvolle verbeteringen in zelfgerapporteerde loopvaardigheid bij deelnemers met multiple sclerose: resultaten van de gerandomiseerde, dubbelblinde, fase III ENHANCE-studie van fampridine met verlengde afgifte. CNS-medicijnen 2019;33:61-79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA, et al. Verbeterde door de patiënt gerapporteerde gezondheidsimpact van multiple sclerose: de ENABLE-studie van PR-fampridine. Mult Scler 2016; 22: 944-954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopyridine als een enkelvoudig middel voor diagnose en behandeling van ernstig zenuwletsel. Mil Med 2019;184(suppl 1):379-385.