Niosomale nanodragers voor verbeterde huidafgifte van quercetine met functies van anti-tyrosinase en antioxidant

Abstract:

Deze studie was gericht op het screenen van een effectieve flavonoïde met veelbelovende witmakende en antioxiderende eigenschappen, en het ontwerpen van met flavonoïde beladen niosomen om de oplosbaarheid, stabiliteit en penetratie ervan te verbeteren. In vitro anti-tyrosinase en 1,1-difenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) vrije radicalen wegvangende experimenten werden uitgevoerd om de witmakende en antioxiderende eigenschappen van verschillende flavonoïden te onderzoeken, waaronder quercetine, morin, festin, myricetin, rutine en breviscapine.

De geleidbaarheid, viscositeit en deeltjesgrootte van de op Span{0}}RH40-gebaseerde formulering van niet-ionische oppervlakteactieve blaasjes (niosomen) met verschillende massaverhoudingen werden bestudeerd om de meest geschikte formulering te bepalen. Met medicijnen beladen niosomen werden gekarakteriseerd op grootte, zeta-potentieel, morfologie en beknellingsefficiëntie. De fotostabiliteit, oplosbaarheid, afgiftegedrag, ex vivo geneesmiddelpenetratie en huidretentie werden ook bestudeerd. De resultaten toonden aan dat quercetine aanzienlijke witmakende en antioxiderende eigenschappen heeft en dat Span{3}RH40 bij een massaverhouding van 9:11 sferische of ovale niosomen vormt van 97,6 ± 3,1 nm met een zeta-potentiaalbereik van 31,1 ± 0,9 mV, en geneesmiddel beknellingsefficiëntie zo hoog als 87,3 ± 1,6 procent. Niosomen verbeterden opmerkelijk de oplosbaarheid en fotostabiliteit van quercetine.

Bovendien hadden quercetine-liposomen, vergeleken met quercetine-oplossing, de voordelen van langdurige afgifte en verbeterde transdermale penetratie, met huidretentie die 2,95 keer hoger was dan die van quercetine-oplossing.

Een antioxidant is elke stof die de oxidatiereactie van vrije radicalen bij lage concentraties effectief kan remmen. Het werkingsmechanisme kan zijn om direct in te werken op vrije radicalen, of om indirect stoffen te consumeren die gemakkelijk vrije radicalen genereren om verdere reacties te voorkomen. Hoewel het menselijk lichaam onvermijdelijk vrije radicalen produceert, produceert het van nature ook antioxidanten die vrije radicalen weerstaan ​​om de oxidatieve aanvallen van vrije radicalen op menselijke cellen tegen te gaan. Studies hebben aangetoond dat het antioxidantsysteem van het menselijk lichaam een ​​systeem is met complete en complexe functies die vergelijkbaar zijn met het immuunsysteem. Hoe sterker het antioxiderende vermogen van het lichaam, hoe gezonder het is en hoe langer het leeft. In ons onderzoek ontdekten we dat Cistanche deserticola ook een antioxiderende werking heeft. Cistanche deserticola is rijk aan polysacchariden, flavonoïden, alkaloïden, flavonoïde glycosiden, flavonzuren en andere componenten, en deze stoffen hebben sterke antioxiderende effecten. Ze kunnen oxidatieve stress weerstaan ​​en celbeschadiging verminderen door vrije radicalen op te vangen, oxidatiereacties te verminderen en de antioxiderende enzymactiviteit te verhogen, waardoor ze een antioxiderende rol spelen.

Klik op cistanche deserticola supplementproduct

Trefwoorden:

anti-tyrosinase; antioxidant; niosomen; fotostabiliteit; transdermale levering.

1. Inleiding

Flavonoïden zijn wijd verspreid in fruit, groenten en kruiden en hebben uitgebreide biologische activiteiten, waaronder antivirale, ontstekingsremmende, kankerbestrijdende, antioxidante en anti-tyrosinase [1,2]. Onlangs heeft de zoektocht naar een veilige nieuwe tyrosinaseremmer veel aandacht gekregen op het gebied van cosmetica, omdat sommige van de bekende remmers, zoals kojinezuur, hydrochinon en corticosteroïden, gezondheidsproblemen kunnen veroorzaken, zoals dermatitis en huidirritatie , ochronose, cytotoxiciteit en huidkanker [3]. Vanwege hun lage toxiciteit en hun aanzienlijke antioxiderende en anti-tyrosinase-activiteiten, hebben flavonoïden grote belangstelling gewekt als potentiële natuurlijke bleekmiddelen en antioxidanten voor gebruik in huidverzorgingsproducten [4-6].

Flavonoïden hebben echter veel verschillende structuren, waaronder verschillende configuraties met dezelfde moederkern, maar het is nog steeds onduidelijk welke soorten structuren zowel krachtige anti-tyrosinase- als antioxiderende eigenschappen hebben. Bovendien hebben de meeste flavonoïden een slechte oplosbaarheid in water en lipo-oplosbaarheid, en matige lipofiliciteit en een laag molecuulgewicht zijn factoren waarvan bekend is dat ze een betere penetratie bevorderen. Een andere belangrijke factor die de effectiviteit van componenten beïnvloedt, zijn de biologische barrières van de huid zelf, zoals het stratum corneum. Hoewel fysisch-chemische methoden, waaronder iontoforese, ultrageluid, injectiesystemen met micronaald, injectie zonder naald en penetratiebevorderende middelen, de penetratie van actieve ingrediënten door het stratum corneum kunnen bevorderen, kunnen deze methoden invasief zijn, de huid irriteren en duur zijn.

Aan de andere kant zijn er enkele nieuwe door een drager gemedieerde systemen voor het afleveren van actieve ingrediënten op de markt gekomen, waaronder emulsie, micellen, blaasjes en cyclodextrine, om de werkzaamheid van bestaande ingrediënten te verbeteren, vooral die met een slechte oplosbaarheid en biologische beschikbaarheid. Blaasjes hebben meer aandacht gekregen voor transdermale toediening. Onder blaasjes zijn transfersomen goed vervormbare liposomen met verbeterde percutane permeabiliteit en kunnen de oplosbaarheid en stabiliteit van geneesmiddelen verbeteren. Transfersomen zijn samengesteld uit een specifieke verhouding van fosfolipiden en oppervlakteactieve stoffen, terwijl fosfolipiden duur en gemakkelijk te oxideren zijn.

Daarom is het zoeken naar andere stabiele en vervangbare blaasjes een interessant onderzoeksobject. Niosomen zijn niet-ionische oppervlakteactieve vesiculaire systemen, voor het eerst gerapporteerd in 1979 toen ze werden toegepast in de cosmetica-industrie [7], maar zijn sindsdien bestudeerd als een medicijnafgiftesysteem in de farmacie [8-13]. De fysische eigenschappen, bereidingstechnieken en structuren van niosomen lijken sterk op die van liposomen. Niosomen hebben echter ook voordelen bij transdermale medicijnafgifte, zoals langdurige medicijnafgifte, betere penetratie en hogere huidretentie [14], zijn minder duur om te bereiden en zijn stabieler [15]. Daarom kunnen niosomen worden toegepast in de cosmetica-industrie [16–18].

De vroege oppervlakteactieve blaasjes werden bereid met behulp van ionische oppervlakteactieve stoffen [19-22]. De uitgebreide toxiciteitsstudies met oppervlakteactieve stoffen hebben aangetoond dat kationische oppervlakteactieve stoffen het meest toxisch zijn, gevolgd door anionische oppervlakteactieve stoffen, terwijl niet-ionische oppervlakteactieve stoffen het minst toxisch zijn. Daarom is, rekening houdend met veiligheid en industriële toepassing, het gebruik van liposomen die niet-ionische oppervlakteactieve stoffen bevatten een betere optie voor transdermale toediening. Vanwege de structuur van de amfifiele dubbellagen, zal een hydrofiel-lipofiel evenwicht (HLB) schaalbereik van 4 tot 8 gemakkelijker zijn om niosomen te vormen van [14,23,24].

Daarom zullen geformuleerde, niet-ionische oppervlakteactieve stoffen met verschillende HLB-waarden gemakkelijker voor de vorming van niosomen zijn. Span, Tween en Brij zijn veelgebruikte niet-ionische oppervlakteactieve stoffen die worden gebruikt om liposomen te bereiden [15,25-34]. Niet-ionische oppervlakteactieve stoffen met lange koolwaterstofketens zonder dubbele bindingen komen in aanmerking omdat er stabiele niosomen kunnen worden gevormd met het potentieel voor verhoogde geneesmiddelbelading. Span60, met een lage HLB-waarde, wordt veel gebruikt om niosomen te vormen [15,29,31,33,34]. Niet-ionische oppervlakteactieve stoffen met hoge HLB-waarden, zoals Tween20, Tween60, Tween80, Brij35 en Brij58, vormen niet gemakkelijk niosomen alleen of zonder een optimale hoeveelheid cholesterol [28,35,36], vanwege hun omvangrijke hydrofiele koppen en korte koolwaterstofketens. Daarom kunnen ze alleen niosomen vormen met toevoeging van cholesterol of wanneer ze zijn geformuleerd met andere oppervlakteactieve stoffen [10,27,31,37-39]. Cremophor RH40 is zeer hydrofiel en heeft een lage toxiciteit, en wordt veel gebruikt in formuleringen van orale geneesmiddelen, maar er zijn geen rapporten die wijzen op het gebruik van Cremophor RH40 bij de formulering van liposomen.

In dit onderzoek hebben we gescreend op flavonoïden met goede witmakende en antioxiderende effecten en hebben we Span60-RH40 onderzocht, een niet-ionisch oppervlakteactief systeem met verschillende lipidenverhoudingen om niosomen te vormen. Met quercetine geladen niosomen werden gekarakteriseerd op blaasjesgrootte, zeta-potentiaal, inkapselingsefficiëntie en transmissie-elektronenmicroscopie (TEM), en hun oplosbaarheid en fotostabiliteit werden ook onderzocht. Bovendien werden ratten gebruikt om de transdermale penetratie van met quercetine beladen niosomen te onderzoeken.

2. Resultaten

2.1. Tyrosinase remming van flavonoïden

Het is algemeen bekend dat flavonoïden meerdere hydroxylgroepen bezitten (Figuur 1) die belangrijk zijn voor anti-tyrosinase-activiteit. Er is gemeld dat het aantal en de positie van hydroxylgroepen evenals de aanwezigheid van suikergroepen verband houden met tyrosinaseremming. In Tabel 1 vertoonde Myricetin geen anti-tyrosinase-activiteit omdat het gemakkelijk sterke intermoleculaire waterstofbruggen vormt die chelatie met tyrosinase kunnen belemmeren. Rutine en breviscapine vertoonden geen veelbelovende anti-tyrosinase-activiteit, terwijl quercetine, morin en festin aanzienlijk meer anti-tyrosinase-activiteit vertoonden dan arbutine, een veelgebruikt bleekmiddel dat in cosmetica wordt gebruikt.

2.2. Antioxiderende activiteit van flavonoïden

Flavonoids can scavenge free radicals as antioxidants by donating a hydrogen atom. The antioxidant activity of flavonoids is related to the number of hydroxyl groups and their structure. This includes (i) the presence of an ortho-hydroxyl group in the B ring; (ii) the presence of a C2-C3 double bond in the C ring; (iii) or the presence of a C-3 hydroxyl group [40–42]. As shown in Table 2, the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of the six compounds is in the following order: quercetin = fest in>myricetin=morin > rutine > BHT ≈ breviscapine. Quercetine en festin hadden het krachtigste vermogen om radicalen op te ruimen.

2.3. Formulering van niosomen

2.3.1. Geleidbaarheid van het Span60-RH40-systeem

Transfersomes zijn onstabiel omdat ze voornamelijk zijn samengesteld uit fosfolipiden die gemakkelijk kunnen worden geoxideerd, waardoor medicijnlekkage ontstaat. Niosomen werden geïdentificeerd als een alternatief voor transfersomen bij transdermale toediening. Hoewel veel niet-ionische oppervlakteactieve stoffen niosomen kunnen vormen [15,26,28], zijn niet-ionische oppervlakteactieve stoffen met onverzadigde koolwaterstofketens minder stabiel dan niet-ionische oppervlakteactieve stoffen met verzadigde koolwaterstofketens [37]. Daarom hebben we in deze studie gekozen voor Span60 en RH40, die beide geen dubbele bindingen hebben, om niosomen te vormen om hun stabiliteit te verbeteren.

Geleidbaarheidsmetingen werden uitgevoerd om het aggregatiegedrag van niet-ionische oppervlakteactieve stoffen in een waterige oplossing te bepalen. De geleidbaarheid van Span60-RH40 gedispergeerd in water nam geleidelijk toe van een massaverhouding van 4:16 tot 9:11, bereikte vervolgens een plateau tussen de massaverhoudingen van 9:11 tot 13:7 en nam af van 13:7 tot 16 :4 (Figuur 2a). Twee breekpunten kunnen wijzen op veranderingen in de microstructuur van de aggregaten. Zoals weergegeven in figuur 3, begonnen zich bij een massaverhouding van 9:11 niosomen te vormen.

2.3.2. Grootte van het span60-RH40-systeem

Deeltjesgrootte is de belangrijke index van de evaluatie van nanometerdeeltjes. Het meten van de grootte van het Span60-RH40-systeem met verschillende massaverhoudingen van oppervlakteactieve stof zou de verandering in de microstructuur van aggregaten in het systeem verder kunnen weerspiegelen. Zoals weergegeven in figuur 2b, was de aggregaatgrootte aanvankelijk relatief klein en constant bij de massaverhouding van 4:16 tot 9:11. Daarna nam de aggregaatgrootte enorm toe bij de massaverhouding van 9:11 tot 13:7, en nam vervolgens voortdurend scherp toe bij de massaverhouding van 13:7 tot 16:4, wat zelfs tot ~1 µm was. De spontane structurele overgang van Span60/RH40-aggregaten werd verder bevestigd door de aggregaatgrootte in combinatie met de geleidbaarheid en viscositeit.

2.3.3. Viscositeit van het Span60-RH40-systeem

De viscositeit van het Span60-RH40-systeem weergegeven in afbeelding 2c vertoonde overeenkomstige veranderingen. Ten eerste was de viscositeit van het Span{3}}RH40-systeem laag en constant bij een massaverhouding van 4:16 tot 9:11. Vervolgens, bij de massaverhouding van 9:11 tot 13:7, veranderde de viscositeit aanzienlijk, waarbij de viscositeit toenam en daarna afnam. De hierboven besproken geleidbaarheid en grootte kwamen ook voor in overeenstemming met veranderingen in dit massaverhoudingsbereik van Span60-RH40. Vervolgens nam bij de massaverhouding van 13:7 tot 16:4 de viscositeit sterk toe.

2.4. Grootte, Zeta-potentieel, morfologie en beknellingsefficiëntie van quercetine-niosomen

Quercetine werd geladen door Span60-RH40-niosomen en vervolgens gehomogeniseerd met een druk van 1500 bar. Zoals blijkt uit Tabel 3, was de hydrodynamische diameter van blanco niosomen en quercetine-liposomen respectievelijk 146,4 ± 5,4 nm en 97,6 ± 3,1 nm.

Zeta-potentiaal werd bestudeerd om de oppervlakteladingen van niosomen te begrijpen. Het zeta-potentieel van blanco niosomen en quercetine-niosomen was respectievelijk -41,2 ± 0,6 mV en -31,1 ± 0,9 mV (tabel 3). Het TEM-beeld in figuur 4b toonde aan dat quercetine-niosomen bolvormig of ovaal waren. De insluitingsefficiëntie van quercetine-liposomen was 87,3 ± 1,6 procent, wat hoger was dan die in het bereik van 48,4 procent tot 78,4 procent in eerdere werken [37,43,44]. De verhoogde efficiëntie van het insluiten van geneesmiddelen kan worden toegeschreven aan de affiniteit tussen geneesmiddelen en de dubbellagen van niosomen [45].

2.5. Oplosbaarheid in water en evenwichtsoplosbaarheid van quercetine

Zoals weergegeven in figuur 5, was de oplosbaarheid van quercetine in water extreem laag. De oplosbaarheid ervan had geen significant verschil (P > 0.05) in fosfaatbuffer met een andere pH vergeleken met die in water. Het resultaat van de evenwichtsoplosbaarheid van quercetine toonde aan dat quercetine een zeer in vet oplosbare component was. Zoals te zien is in figuren 6 en 7, bleef de evenwichtsoplosbaarheid van quercetine stabiel in verschillende verhoudingen van water/n-octanol, maar nam af bij pH 8,0 omdat de structuur van quercetine onder basische omstandigheden veranderde, waardoor de oplosbaarheid in water toenam.

De slechte oplosbaarheid in water van quercetine bleef echter beperkt tot de toepassing ervan. Op basis van tabel 4 verbeterde de oplosbaarheid van quercetine in oppervlakteactieve stoffen die hieronder worden besproken, vooral in 0.6 procent Tween80 (P < 0.05). De oplosbaarheid ervan werd echter verder verbeterd door het in niosomen te laden. Quercetine (300 µg/ml) was geladen in niosomen en de hoge inkapseling van Span60-RH40 noisome was 87,3 ± 1,6 procent, daarom was de oplosbaarheid van quercetine in niosomen 261,9 ± 4,8 µg/ml, wat {{ 17}}voudig hoger dan die in water (P < 0,05).

2.6. Fotostabiliteit van quercetine-niosomen

Quercetine heeft een slechte fotostabiliteit en wordt snel afgebroken bij blootstelling aan zonlicht of UV-straling [46-48], mogelijk omdat quercetine foto-oxidatie ondergaat bij UV-straling [49]. Fotostabiliteit is echter noodzakelijk voor quercetine om zijn activiteiten te tonen. Zoals weergegeven in figuur 8, verbeterden niosomen effectief de fotostabiliteit van quercetine en bleven ze op 88,06 procent na 10 dagen blootstelling aan sterke verlichting. Quercetine werd beschermd tegen UV-straling omdat het was ingekapseld in de dubbellagen van niosomen. Molecules 2019, 24, x VOOR PEER REVIEW 8 van 18 van blootstelling aan sterke verlichting. Quercetine werd beschermd tegen UV-straling omdat het was ingekapseld in de dubbellagen van niosomen.

2.7. In vitro afgiftegedrag van quercetine-niosomen

Het juiste afgiftemedium werd gescreend om de zinkcondities te behouden, daarom werd de oplosbaarheid van quercetine in de verschillende media beoordeeld. De resultaten in tabel 5 laten zien dat quercetine een hogere oplosbaarheid had in Tween80 waterig en dat de oplosbaarheid ervan geleidelijk toenam met toenemende concentratie van Tween80. De oplosbaarheid van quercetine nam toe tot 76,07 ± 3,11 µg/ml in zure omstandigheden. Daarom werd, rekening houdend met de pH van de menselijke huid, 0,8 procent Tween80 (pH 5,0) gekozen als het afgiftemedium om het afgiftegedrag van vrij quercetine en quercetine-niosomen te bestuderen.

Zoals te zien is in figuur 9, kwam vrij quercetine, vergeleken met quercetine-niosomen, veel sneller vrij in het afgiftemedium, wat aantoont dat niosomen een langdurig afgifte-effect hadden. Langdurige afgifte verkort de applicatietijd, vermindert de toxiciteit en handhaaft een effectieve geneesmiddelconcentratie.

2.8. Ex vivo permeatie- en huidretentiestudies

Een {{0}}.6 procent Tween80-oplossing werd gebruikt als het penetratievrijgavemedium in dit onderzoek. In onze exvivo-penetratiestudie kon quercetine niet worden bepaald in het penetratieafgiftemedium, wat illustreerde dat quercetine niet de dermis binnendrong en het afgiftemedium bereikte, maar dat niosomen de huidretentie van quercetine opmerkelijk verbeterden (P < 0.{ {20}}5). Zoals weergegeven in tabel 6, is de huidretentie van quercetine-niosomen (1,92 plus 0.74 ug/cm?), quercetine-niosoom-1 procent propaandiol (2,34 plus 0.40 ug /cm?), en quercetine-transfersomen (2,53 plus 0,40 ug/cm-) waren significant hoger in vergelijking met die van quercetine-propaandiol (0,65 plus 0,10 ug/cm2) (P < 0,05).

3. Discussie

Eerdere studies hebben vastgesteld dat de vrije hydroxylgroep op de C-3-positie een belangrijke rol speelde bij de remming van tyrosinase [50-52]. Omgekeerd kunnen 3-O-glycosiden hun binding aan de actieve plaatsen van tyrosinase belemmeren en dit kan de reden zijn waarom rutine geen anti-tyrosinase-activiteit vertoonde. Daarentegen had de suikergroep op de C-7-positie weinig effect op de anti-tyrosinase-activiteit en blokkeerde de chelatie met tyrosinase niet [51].

De aanwezigheid van een extra hydroxylgroep op de C-30-positie van de B-ring verhoogde echter de tyrosinaseremming [53,54]. Breviscapine vertoonde geen anti-tyrosinase-activiteit omdat het de C-3-hydroxylgroep en de C-30-hydroxylgroep miste, die mogelijk een effect hadden op de anti-tyrosinase-activiteit in plaats van de aanwezigheid van 7- O-glycosiden. Bij het analyseren van de structuur-activiteitsrelatie van quercetine en morine, zagen we dat de IC50-waarde van morine ongeveer 1/3 van die van quercetine is en het enige verschil tussen de structuur van quercetine en morine is de positie van hydroxylgroepen in de B-ring.

Daarom verhoogde de aanwezigheid van o-dihydroxylgroepen in de B-ring de anti-tyrosinase-activiteit. De IC50-waarde van festin was ongeveer 1/20 van die van quercetine en het enige verschil tussen de structuur van quercetine en festin is dat festin de afwezigheid is van een C-5-hydroxylgroep in de A-ring. De hydroxylgroep op de C-5-positie speelt ook een belangrijke rol bij het verhogen van de tyrosinase-remmingsactiviteit, aangezien het Cu2 plus op de actieve plaats van tyrosinase kan cheleren met een carbonylgroep op de C-4-positie [50 ]. Quercetine bezit vrije hydroxylgroepen, niet alleen op de posities C-3 en C-5 van de C-ring, maar ook op de C-30-positie van de B-ring. Quercetine vertoont dus een veel krachtigere remming van tyrosinase in vergelijking met de andere flavonoïden.

Flavonoïden hebben niet alleen een veelbelovende anti-tyrosinase-activiteit, maar hebben ook een krachtige antioxiderende werking. Quercetine heeft een extra C-5-hydroxylgroep; zowel quercetine als fisetine hadden echter dezelfde antioxidantcapaciteit, wat suggereert dat de C-5-hydroxylgroep weinig invloed had op het opruimen van radicalen. Myricetin bezit meer hydroxylgroepen in de B-ring, maar vertoonde geen sterkere antioxidantactiviteit dan quercetine of fisetine. Dit kan zijn omdat myricetin sterke intermoleculaire waterstofbindingen en lagere waterstofatoomdonatie kan vormen.

Evenzo vertoonde morin een lager antioxidantvermogen dan quercetine en festin vanwege de B-ring-hydroxylconfiguratie, wat illustreerde dat o-dihydroxyl in de B-ring belangrijk is voor het vergroten van het vermogen om radicalen op te vangen. Rutine en breviscapine hadden echter significant lagere antioxidantcapaciteiten omdat rutine glycosiden op de C-3-positie heeft die sterische hinder veroorzaken. Breviscapine heeft een enkele hydroxylgroep aan de B-ring en heeft minder vrije hydroxylgroepen. Bijgevolg geven de resultaten in dit artikel aan dat de hydroxylconfiguratie van de B-ring significant was voor het antioxiderende vermogen van flavonoïden, terwijl de A-ring weinig invloed had op het vermogen om radicalen op te ruimen. Bovendien kan het blokkeren of verwijderen van de hydroxylgroep op de C-3-positie het radicalenvangend vermogen van flavonoïden verminderen.

Span60 en RH40 zijn niet in staat tot ionisatie. Daarom lijken de ladingen afkomstig te zijn van de interactie tussen de hydrofiele hoofdgroepen van Span60 en RH40 die waterstofbruggen vormen [55], wanneer zich geladen aggregaten vormen tussen de lipofiele Span60 en hydrofiele RH40.

Daarom kan de geleidbaarheid te wijten zijn aan de combinatie van Span60 en RH40. De geleidbaarheid nam aanvankelijk toe, mogelijk omdat de toevoeging van Span60, dat associeert met RH40, geladen gemengde micellen vormt. Toenemende Span60 verhoogde ook het aantal geladen aggregaten en de geleidbaarheid nam geleidelijk toe. Een breekpunt trad op bij de massaverhouding van 9:11. De plotselinge verandering suggereert dat de microstructuur van aggregaten kan veranderen en niosomen kunnen vormen. De geleidbaarheid nam vervolgens iets af en bleef relatief constant, wat kan wijzen op de vorming van niosomen, aangezien de ladingen ingesloten waren. Een ander breekpunt deed zich voor bij de massaverhouding van 13:7 en de geleidbaarheid nam sterk af, maar de grootte van de aggregaten nam toe met de toename van Span60, mogelijk als gevolg van dichte clusters van de grotere multilamellaire niosomen die zich vormden en het optreden van witte neerslag [56 ,57], waardoor de gratis geladen aggregaten afnemen.

De spontane structurele overgang van Span60-RH40-aggregaten werd verder bevestigd door de aggregaatgrootte in combinatie met geleidbaarheid en viscositeit. Wanneer de massafractie van RH40 dominant was, was de aggregaatgrootte relatief constant en klein. Het systeem had een waterachtige viscositeit en er kunnen zich gemengde micellen vormen. Met een toenemende massafractie van Span60 nam de hydrofobiciteit van het systeem toe en namen de viscositeit en aggregaatgrootte toe. De toenemende Span60 kan de vorming van niosomen veroorzaken. Met een verdere toename van Span60 namen de viscositeit en grootte echter ook sterk toe vanwege de aanwezigheid van overvloedige grotere multilamellaire niosomen, die neerslagvorming veroorzaakten. De vorming van niosomen werd ook geverifieerd door TEM (Figuur 3).

Wanneer de concentratie van Span60 laag was, had het Span60-RH40-systeem een ​​waterachtige viscositeit en was de aggregaatgrootte relatief klein, wat wijst op de vorming van gemengde micellen. Van de massaverhouding van 9:11 tot 13:7 namen gelijktijdig de viscositeit en troebelheid van het systeem toe. De voor de hand liggende verandering in viscositeit kan verband houden met de overgang van de micel naar een stijve en stroperige ruis, aangezien oppervlakteactieve stoffen dicht op elkaar gepakt zijn en zich dubbellagen vormen; deze observatie kwam overeen met de literatuur [57,58]. Tussen de massaverhoudingen van 13:7 en 16:4 nam de viscositeit aanzienlijk toe, mogelijk vanwege de aanwezigheid van overvloedige grotere multilamellaire niosomen die neerslagvorming veroorzaakten.

Interessant is dat quercetine-niosomen kleinere afmetingen hadden dan blanco niosomen, wat bleek uit eerder gepubliceerde onderzoeken [43]. Er is aangetoond dat als moleculen die een goede affiniteit vertonen met de samenstellende oppervlakteactieve stoffen van niosomen, in de dubbellagen zouden worden opgenomen, dit een verkleining van de blaasjes zou veroorzaken. Deze waarneming kan te wijten zijn aan het effect van een sterke affiniteit voor geneesmiddelen en niosomen op het bij elkaar houden van verschillende lamellen, waardoor het membraan stijver wordt [14]. De absolute waarde van het zeta-potentieel voor quercetine-liposomen was lager dan die van lege liposomen (Tabel 3). Dit kan te wijten zijn aan de interactie van quercetine met de kopgroep van oppervlakteactieve stoffen die de negatieve ladingen op het oppervlak van niosomen neutraliseren. Deze waarneming is ook eerder gemeld; dat medicijnen de negatieve oppervlakteladingen zouden kunnen verminderen [59].

We hebben vastgesteld dat quercetine onoplosbaar was in water en fosfaatbuffer. In eerdere onderzoeken werden vaak hulpoplosmiddelen, waaronder alcoholen en oppervlakteactieve stoffen, gebruikt om slecht oplosbare geneesmiddelen in een penetratie-afgiftemedium te houden [14], daarom werd een 0,6 procent Tween80-oplossing gebruikt als een penetratie release medium om de conditie van de gootsteen te behouden.

Gezien de werkzaamheid is het voor huidverzorging en de behandeling van huidziekten echter effectiever en veiliger om componenten of medicijnen diep in de huid vast te houden dan in de bloedsomloop terecht te komen. In onze studie, hoewel quercetine niet door de dermis in het medium doordrong, toonden de huidretentie-experimenten aan dat niosomen in vergelijking met vrij quercetine de penetratie van quercetine in de epidermis verbeterden.

Daarom kunnen niosomen een veelbelovend toedieningssysteem zijn voor cosmetische doeleinden en de behandeling van huidziekten. Quercetine is zeer vetoplosbaar en de lage oplosbaarheid in water heeft de ontwikkeling en toepassing ervan beperkt. Met quercetine beladen niosomen hebben niet alleen de oplosbaarheid in water verbeterd, maar ook de transdermale absorptie van quercetine. Quercetine-niosomen hadden een 3-voudige toename in huidretentie ten opzichte van de quercetine-propaandiol-oplossing. Na toevoeging van 1 procent propaandiol, een penetratieversterker, aan de oorspronkelijke formulering van Span60-RH40 niosomen, verbeterde de transdermale absorptie, vergelijkbaar met die van quercetine-transfersomen.

4. Materialen en methoden

4.1. Materialen

Quercetine, morin, festin, myricetin, rutine en breviscapine werden gekocht van DATIAN Biology Co (Shanxi, China), -arbutine van Beijing Brilliance Biochemical Co, Ltd (Beijing, China), en 1,1-difenyl{{ 3}}picrylhydrazyl (DPPH) van Guangzhou Qiyun Bio-technology Co (Guangzhou, China). Natriumdiwaterstoffosfaat, dinatriumwaterstoffosfaat, dimethylsulfoxide (DMSO) en absolute ethylalcohol werden gekocht bij DAMAO CHEMICAL REAGENT FACTORY (Tianjin, China). Span60 werd gekocht van Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co, Ltd (Tianjin, China) en Cremophor RH40 van Guangzhou Jiefu Trading Co, Ltd (Guangzhou, China). Mannelijke Sprague-Dawley-ratten (200 ± 20 g) werden gebruikt en geleverd door het Guangdong Animal Experiment Center (Guangzhou, China). Ratten werden gehouden onder standaard temperatuur-, vochtigheids- en lichtomstandigheden, met een standaard knaagdierdieet en water. Het onderzoek werd goedgekeurd door de Guangdong Pharmaceutical University Experimental Animal Ethics Committee (NO. SPF2017120, Guangzhou, China).

4.2. In vitro tyrosinase-remmingsactiviteit van flavonoïden

De tyrosinase-remmingstest werd uitgevoerd op basis van een eerdere studie met kleine aanpassingen [2]. De activiteit van tyrosinaseremming werd bepaald met behulp van een spectrofotometer door dopachromevorming bij 493 nm te volgen. Het reactiesysteem, zoals weergegeven in tabel 7, bevatte 0,5 ml verschillende concentraties flavonoïden, waaronder arbutine, quercetine, morin, festin, rutine en breviscapine, en 0,5 ml tyrosinase (120 eenheden/ml in fosfaatbuffer, pH 6,8), die werden gecombineerd met 1,5 ml fosfaatbuffer (pH 6,8). Na incubatie bij 30 ◦C gedurende 10 min werd 0,5 ml l-tyrosine aan de systemen toegevoegd. De reactiesystemen werden gedurende 20 minuten bij 30 °C geïncubeerd en de absorptie werd bepaald bij 493 nm. Arbutine werd gebruikt als een positieve controle. De mate van remming van het monster werd uitgedrukt als een remmingsconcentratie van 50 procent (IC50).

4.3. In vitro antioxiderende activiteit van flavonoïden

De antioxidantactiviteit van flavonoïden werd gemeten aan de hand van de blekingssnelheid van DPPH, gerapporteerd door Blois [60]. In zijn radicale vorm absorbeert DPPH bij een golflengte van 515 nm, maar de absorptie neemt af bij reductie door een antioxidant of een radicale verbinding. De DPPH-radicalenvangende activiteit van flavonoïden werd geëvalueerd volgens de methode beschreven door Rui Yang, met enkele aanpassingen [61]. In het kort werd 5 ml DPPH (30 µg/ml) gemengd met 0,1 ml absolute ethylalcohol en 0,1 ml monsters met verschillende concentraties. Vervolgens werd de absorptie van de mengsels bepaald bij 515 nm. De DPPH-radicalenvangende activiteit werd als volgt berekend:

4.4. Formulering van niosomen

Op basis van eerder onderzoek en gepubliceerde artikelen waaruit bleek dat Span60 een veelgebruikte oppervlakteactieve stof is die wordt gebruikt om niosomen te vormen [15,27,31], hebben we een formuleringssysteem van niet-ionische oppervlakteactieve stoffen ontworpen door Span60 en RH40 in verschillende massaverhoudingen te gebruiken. De geleidbaarheid, viscositeit en grootte als indexen werden onderzocht om de juiste verhouding van niet-ionische oppervlakteactieve stoffen die liposomen vormen te bepalen.

De onderzochte massaverhoudingen van Span60 en RH40 waren 4:16, 6:14, 8:12, 9:11, 10:10, 12:8, 13:7, 14:6 , 15:5 en 16:4 (totaal gewicht: 2 g). Span60 werd gesmolten bij 80 ◦C en vervolgens gemengd met RH40 door middel van een roerder gedurende 2 minuten. Vervolgens werden de mengsels respectievelijk 10 minuten gehydrateerd met 100 ml water bij 80 °C. De geleidbaarheid (DDS{{30}A conductometer, Shanghai Ridao Scientific Instruments Co., Ltd., Shanghai, China), viscositeit (Ubbelode viscometer, 0,4–0,5 mm, Shanghai Liangjing Glass Instrument Factory, Shanghai, China) en grootte (Nano-ZS90, Malvern, Malvern, VK) van niet-ionische oppervlakteactieve systemen werden gemeten bij kamertemperatuur.

4.5. Voorbereiding en evaluatie van met quercetine geladen niosomen

4.5.1. Bereiding van met quercetine geladen niosomen

Gebaseerd op het TEM-beeld van het Span{{0}}RH40-systeem (Figuur 3), Span60 en RH40 bij een massaverhouding van 9:11, lijken zich bolvormige of ovale niosomen te vormen. Daarom werden met quercetine beladen niosomen bereid met de Span60/RH40-massaverhouding van 9:11 met behulp van een magnetisch roerapparaat. Span60 (0,9 g), RH40 (1,1 g) en quercetine (30 mg) werden samengesmolten. Vervolgens werd 100 ml gezuiverd water van 80 °C aan het mengsel toegevoegd en gedurende 10 minuten gehydrateerd. De met quercetine beladen niosomen werden gevormd en vervolgens afgekoeld tot kamertemperatuur. Heldere niosomen werden verkregen door verwerking met hogedrukhomogenisatie bij 1500 bar.

4.5.2. Grootte, Zeta-potentieel en morfologie van met quercetine geladen niosomen

De grootte en het zeta-potentieel van lege niosomen en met quercetine beladen niosomen werden gemeten met Malvern Zetasizer (ZS90 plus MPT-2, Malvern, Malvern, VK). De morfologie van met quercetine beladen niosomen werd gekenmerkt door transmissie-elektronenmicroscopie. De monsters van quercetine-niosomen werden afgezet op een koperen rooster en na 1 minuut werd het overtollige monster verwijderd met filtreerpapier. Een TEM werd gebruikt om de monsters te observeren na negatieve kleuring door fosfowolfraamzuur.

4.5.3. Efficiëntie van insluiting van geneesmiddelen

De efficiëntie van het insluiten van geneesmiddelen van met quercetine beladen niosomen werd bepaald met behulp van de minicolumn centrifugatietechniek. Minicolumn werd bereid met behulp van gehydrateerde Sephadex G50-dispersie in een injectiespuit van 5 ml, die gedurende 30 seconden bij 900 rpm werd gecentrifugeerd. Een aliquot van met quercetine beladen niosomen (400 µl) werd in de minikolom gebracht en de eluenten werden verzameld door gedurende 3 minuten te centrifugeren bij 1500 rpm. De eluenten werden verdund tot 10 ml met methanol en gevortext, en 10 µl van de gefilterde monsters werd geïnjecteerd in hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC). Vervolgens werd vrij quercetine geëlueerd door centrifugatie met 25 ml 80 procent methanol, en het gehalte aan quercetine werd bepaald met HPLC.

4.6. Oplosbaarheid in water en evenwichtsoplosbaarheid van quercetine

De wateroplosbaarheid van quercetine werd gemeten met 15 ml gezuiverd water, fosfaatbuffers met verschillende pH-waarden (pH 5.0, 6.0, 6.8, 7.4, 8.0) , en overtollige quercetine, en in flesjes geplaatst. De flesjes werden gedurende 24 uur geschud in een waterbad van 37 °C en het supernatant werd bepaald met HPLC na centrifugatie.

De evenwichtsoplosbaarheid van quercetine werd uitgevoerd met behulp van een n-octanol-watersysteem met verhoudingen van n-octanol/water van 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1: 7 en 1:8. Vervolgens werd 70 µg/ml quercetine-oplossing bereid door met water verzadigde n-octanol-oplossing en werd 1 ml van 70 µg/ml quercetine-oplossing in acht flesjes ingenomen en vervolgens 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml , 6 ml, 7 ml en 8 ml gezuiverd water werden aan de respectievelijke flesjes toegevoegd.

De evenwichtsoplosbaarheid van quercetine in n-octanol-buffersystemen bij verschillende pH-waarden werd ook bestudeerd. De verhouding n-octanol-buffer werd gekozen op 1:2 op basis van het resultaat van de evenwichtsoplosbaarheid van quercetine in het n-octanol-watersysteem. Een volume van 2 ml van 70 µg/ml quercetine-oplossing en 4 ml n-octanol-verzadigde fosfaatbufferoplossingen bij verschillende pH-waarden werden toegevoegd aan flesjes en de flesjes werden 24 uur geschud in een 37 ◦C waterbad. Vervolgens werd 0,2 ml quercetine-oplossing in de n-octanollaag genomen en verdund tot 5 ml (ongeveer 2,8 µg/ml) met behulp van mobiele fase (methanol-1 procent fosforzuur=60:40). Monsters werden bepaald met HPLC. Standaard quercetine n-octanol-oplossing (70 µg/ml) werd verdund en bepaald zoals hierboven beschreven.

4.7. Fotostabiliteit van quercetine-niosomen

Quercetine-methanoloplossing (300 µg/ml) werd toegevoegd aan transparante flesjes en in het zonlicht geplaatst. Vervolgens werd het quercetinegehalte bepaald met HPLC op 0, 12, 24, 36, 48, 60 en 72 uur. Quercetine-niosomen werden in doorzichtige flesjes verdeeld en gedurende 10 dagen in de lichtstabiliteitstestkamer (PTOP-500B, Zhejiang TOP Instrument Co., Ltd., Zhejiang, China) geplaatst met een verlichtingssterkte van 4500 ± 500 LX. Op dag 0, 5 en 10 werd een monster van 0,2 g quercetine-liposomen genomen en opgelost in 10 ml ethanol. Monsters werden bepaald door middel van HPLC na centrifugatie en filtratie met een 0,22 urn Millipore filtermembraan. De fotostabiliteit werd beoordeeld aan de hand van het percentage achtergebleven quercetine bij verschillende bestralingstijden, in vergelijking met onbelichte monsters.

4.8. In vitro-afgifteonderzoek

4.8.1. De oplosbaarheid van quercetine in verschillende afgiftemedia

De oplosbaarheid van quercetine werd onderzocht in verschillende afgiftemedia, waaronder {{0}}.1 procent, 0.2 procent, 0.3 procent, 0.4 procent , {{10}}.6 procent en 0.8 procent Tween80 waterige oplossing, evenals 0.2 procent , 0.4 procent en 0,6 procent SDS waterige oplossing. Een waterige oplossing van 15 ml Tween80 en SDS in verschillende concentraties en overmaat quercetine werd in elk van de flesjes gedaan. Flesjes werden gedurende 24 uur geschud in een waterbad van 32 °C. Na 24 uur werd 5 ml suspensie gecentrifugeerd bij 3000 RMP gedurende 15 minuten en 0,2 ml van het supernatant werd verdund tot 2 ml en bepaald met behulp van HPLC.

4.8.2. Geneesmiddelafgifte door dialyse

Het oplosbaarheidsonderzoek van quercetine weergegeven in tabel 5 illustreerde dat 0,8 procent Tween80 (pH 5.0) waterige oplossing voldeed aan de gootsteencondities en overeenkwam met de pH-waarde van de menselijke huid. Daarom werd het afgiftegedrag van vrij quercetine en quercetine-liposomen onderzocht in de 0,8 procent Tween80 (pH 5,0) waterige oplossing.

Dialysaatzak (8000–14,000 molecuulgewichtgrenswaarde) werd verwerkt met 2 procent NaHCO3 en 1 mmol/ml EDTA-oplossingen. Een 10 ml (300 µg/ml) quercetine-niosomen en quercetine-propaandiol-oplossing werden toegevoegd aan dialysaatzakken en in oplosvaten geplaatst die 1000 ml 0,8 procent Tween80 (pH 5,0) waterige oplossing bij 32 °C bevatten. De oplosvaten werden op een magnetische roerder geplaatst met een snelheid van 100 rpm. Het afgiftemedium (2 ml) werd onttrokken na 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 en 24 uur en vervangen door een blanco afgiftemedium (2 ml). De onttrokken 2 ml afgiftemedium werd gedurende 15 minuten bij 3000 omwentelingen per minuut gecentrifugeerd en gefiltreerd. Het afgegeven quercetine werd gekwantificeerd door middel van HPLC.

4.9. Ex Vivo Geneesmiddelenpermeatie en huidbehoudstudies

Ratten werden opgeofferd door cervicale dislocatie, haar op de buik werd geschoren en vervolgens werd de buikhuid gescheiden en in fysiologische zoutoplossing geplaatst. Daarna werd onderhuids weefsel (spier, vet en bloedvaten) verwijderd met een chirurgische schaar en een hemostatische pincet en vervolgens bewaard bij 4 ◦C met fysiologische zoutoplossing voor verder onderzoek.

De permeatie- en medicijnhuidretentiestudies van quercetine-niosomen, quercetine-niosomen -1 procent propaandiol, quercetine-transfersomen (samengesteld uit fosfolipide en Tween80 in een massaverhouding van 9:11) en vrij quercetine -propaandiol-oplossing werden uitgevoerd om hun transdermale toediening te onderzoeken met behulp van het TK{8}}B transdermale diffusie-apparaat met een effectief diffusiegebied van 2,99 cm2. Vervolgens werd 0,6 procent Tween80-oplossing geselecteerd als medium voor het vrijgeven van penetratie. Huidweefsels werden tussen de diffusiecel en de receptorcel geplaatst en 0,4 ml quercetinepreparaten (overeenkomend met 120 µg quercetine) werden op de huid aangebracht. Penetratiemedium (0,5 ml) werd onttrokken aan de receptorcel op 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 en 24 uur met de vervanging van vers penetratiemedium (0,5 ml). Penetratiemediums die op verschillende tijdstippen werden onttrokken, werden verdund tot 7 ml met methanol en bepaald met HPLC na centrifugatie en filtratie.

Na het permeatie-experiment werden experimenten met retentie van geneesmiddelhuid uitgevoerd. Na 24 uur werden de huidweefsels geïsoleerd, vervolgens volledig afgeschoven in 7 ml methanol na het wegwassen van quercetine op het oppervlak met gedestilleerd water en gedurende 40 min ultrasoon geëxtraheerd. Vervolgens werden monsters gevortext en gecentrifugeerd, en het supernatant werd geanalyseerd met behulp van HPLC na filtratie door een 0,22 urn Millipore filtermembraan.

4.10. HPLC-methode

De analytische kolom was Dimark C18 (150 mm x 4,6, 5 µm). De mobiele fase bestond uit methanol en 1 procent H3PO4 (60:40, v/v). De stroomsnelheid was ingesteld op 1 ml/min bij 30 ◦C en een injectievolume van 10 µL. De quercetinepiek werd gedetecteerd bij 363 nm.

4.11. Statistische analyse

Gegevens worden uitgedrukt als het gemiddelde van experimenten ± de standaarddeviatie (SD) en werden geanalyseerd met behulp van one-way variantieanalyse (ANOVA), gevolgd door Tukey's meervoudige vergelijking na de test. Statistische verschillen die P < 0.05 opleveren, worden als statistisch significant beschouwd.

5. Conclusies

We screenden quercetine, een natuurlijke flavonoïde met krachtige witmakende en antioxiderende eigenschappen, en formuleerden liposomen met behulp van een niet-ionisch oppervlakteactief systeem om de oplosbaarheid, fotostabiliteit en huidpenetratie van quercetine te verbeteren.

Bijdragen van auteurs:

Conceptualisatie, WC en XL; methodiek, WC; software, YH; validatie, BL, YH en ZC; formele analyse, BL; onderzoek, JY; middelen, HX; gegevensbeheer, BL; schrijven - originele conceptvoorbereiding, BL; schrijven - beoordelen en bewerken, XL; visualisatie, toilet; toezicht, XL; financiering acquisitie, XL

Financiering:

Dit onderzoek ontving geen externe financiering.

Belangenconflicten:

De auteurs verklaren geen belangenverstrengeling.

Referenties

1. Chhikara, N.; Kaur, R.; Jaglan, S.; Sharma, R.; Gat, Y.; Panghal, A. Bioactieve stoffen en farmacologische en voedseltoepassingen van Syzygium cumini - Een overzicht. Voedselfunctie. 2018, 9, 6096. [KruisRef] [PubMed]

2. Carol López de Dicastillo Carol López Bustos, F.; Valenzuela, X.; López-Carballo, G.; Vilariño, JM; Galotto,MJ Chileense bes, Ugni molinae, Turcz. Vruchten- en bladerenextract met interessante antioxiderende, antimicrobiële en tyrosinaseremmende eigenschappen. Voedsel Res. Int. 2017, 102, 119-128.

3. Chiari, ME; Vera, DM; Palacios, SM; Carpinella, MC Tyrosinase-remmende activiteit van een 6-isoprenoïde-gesubstitueerde flavanon geïsoleerd uit Dalea elegans. Bioorg. Med. Chem. 2011, 19, 3474-3482. [Kruisreferentie] [PubMed]

4. Sirat, HM; Rezali, MF; Ujang, Z. Isolatie en identificatie van radicale scavenging en tyrosinase-remming van polyfenolen uit Tibouchina semidecandra. J. Agric. Voedsel Chem. 2010, 58, 10404-10409. [Kruisreferentie] [PubMed]

5. Xiong, Z.; Liu, W.; Zhou, L.; Chen, J. Mushroom (Agaricus bisporus) polyfenoloxidase geremd door apigenine: multispectroscopische analyses en computationele docking-simulatie. Voedsel Chem. 2016, 203, 430-439. [Kruisreferentie] [PubMed]

6. Yan-Zhen, Z.; Da-Fu, C.; Geng, D.; Guo, R. Het substituenteffect op de radicale wegvangende activiteit van apigenine. Moleculen 2018, 23, 1989.

7. Handjani-Vila, RM; Ribier, A.; Rondot, B.; Vanlerberghie, B. Dispersies van lamellaire fasen van niet-ionische lipiden in cosmetische producten. Int. J. Cosmet. Wetenschap. 1979, 1, 303-314. [Kruisreferentie] [PubMed]

8. Yoshida, H.; Lehr, CM; Kok, W.; Junginger, HM; Verhoef, JC; Bouwstra, JA Niosomes voor orale toediening van peptidegeneesmiddelen. J. Controle. Uitgave 1992, 21, 145-153. [KruisRef]

9. Uchegbu, IF; Dubbel, JA; Kelland, LR; Turton, JA; Florence, AT De activiteit van doxorubicine-niosomen tegen een eierstokkankercellijn en drie in vivo muistumormodellen. J. Drugsdoelwit. 1996, 3, 399-409. [KruisRef]

10. Alsarra, IA; Bosela, AA; Ahmed, SM; Mahrous, GM Proniosomen als medicijndrager voor transdermale toediening van ketorolac. EUR. J. Pharm. biopharm. 2005, 59, 485-490. [KruisRef]

11. Hong, M.; Zhu, S.; Jiang, Y.; Tang, G.; Pei, Y. Efficiënte tumortargeting van met hydroxycamptothecine beladen gePEGyleerde liposomen gemodificeerd met transferrine. J. Controle. Uitgave 2009, 133, 96-102. [Kruisreferentie] [PubMed]

12. Tavano, L.; Muzzalupo, R.; Picci, N.; de Cindio, B. Co-inkapseling van antioxidanten in liposomale dragers: onderzoeken naar gastro-intestinale afgifte voor nutraceutische toepassingen. Colloïde branding. B Bio-interface 2014, 114, 82-88. [Kruisreferentie] [PubMed]

13. Sohrabi, S.; Haeri, A.; Mahboubi, A.; Mortazavi, A.; Dadashzadeh, S. Chitosan gel-ingebedde moxifloxacine-niosomen: een efficiënt antimicrobieel hybride systeem voor brandwondeninfectie. Int. J. Biol. macromol. 2016, 85, 625-633. [Kruisreferentie] [PubMed]

14. Kumar, N.; Goindi, S. Statistisch ontworpen niet-ionische oppervlakteactieve blaasjes voor dermale afgifte van itraconazol: karakterisering en in vivo evaluatie met behulp van een gestandaardiseerd Tinea pedis-infectiemodel. Int. J. Pharm. 2014, 472, 224-240. [Kruisreferentie] [PubMed]

15. Cerqueira-Coutinho, C.; Dos Santos, EP; Mansur, CR Niosomes als nano-afgiftesystemen op farmaceutisch gebied. Crit. Ds. Ther. Drug Carr. Systeem 2016, 33, 195. [KruisRef]

16. Ja, MI; Huang, HC; Liaw, JH; Huang, MC; Huang, KF; Hsu, FL Huidafgifte door niosomen van zwarte thee-extract als zonnebrandmiddel. Int. J. Dermatol. 2013, 52, 239-245. [Kruisreferentie] [PubMed]

17. Manconi, M.; Sinico, C.; Valentin, D.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomes als dragers voor tretinoïne. I. Bereiding en eigenschappen. Int. J. Pharm. 2002, 234, 237-248. [KruisRef] 18. Manconi, M.; Valentin, D.; Sinico, C.; Lai, F.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomes als dragers voor tretinoïne: II. Invloed van vesiculaire opname op de fotostabiliteit van tretinoïne. Int. J. Pharm. 2003, 260, 261-272. [KruisRef]

19. Kunitake, T.; Takahata, Y. Een synthetisch dubbellaags membraan. J. Am. Chem. Soc. 1977, 99, 3860-3861. [KruisRef]

20. Brady, JE; Evans, DF; Kachar, B.; Ninham, BM Spontane blaasjes. J. Am. Chem. Soc. 1984, 106, 4279-4280. [KruisRef]

21. Kaler, E.; Murthy, A.; Rodriguez, B.; Zasadzinski, J. Spontane blaasjesvorming in waterige mengsels van enkelzijdige oppervlakteactieve stoffen. Wetenschap 1989, 245, 1371-1374. [Kruisreferentie] [PubMed]

22. Kaler, EW; Herrington, KL; Murthy, AK; Zasadzinski, JAN Fasegedrag en structuren van mengsels van anionische en kationische oppervlakteactieve stoffen. J. Fysiek. Chem. 1992, 96, 6698-6707. [KruisRef]

23. Uchegbu, IF; Vyas, SP Niet-ionische oppervlakteactieve blaasjes (niosomen) bij medicijnafgifte. Int. J. Pharm. 1998, 172, 33-70. [KruisRef]

24. Mahale, NB; Thakkar, PD; Mali, RG; Walunj, DR; Chaudhari, SR Niosomes: Nieuwe niet-ionische stabiele vesiculaire systemen met aanhoudende afgifte - Een overzicht. Adv. Colloïde Interface Sci. 2012, 183-184, 46-54. [Kruisreferentie] [PubMed]

25. Udupa, N.; Chandraprakash, KS; Umadevi, P.; Pillai, GK Formulering en evaluatie van methotrexaat-niosomen. Geneesmiddelenontwikkelaar gemeenschappelijk. 1993, 19, 12. [KruisRef]

26. Uchegbu, IF; Florence, AT Niet-ionische oppervlakteactieve blaasjes (niosomen): fysische en farmaceutische chemie. Adv. Colloïde Interface Sci. 1995, 58, 1-55. [KruisRef]

27. Yoshioka, T.; Sternberg, B.; Florence, AT Bereiding en eigenschappen van blaasjes (niosomen) van sorbitanmonoesters (Span 20, 40, 60 en 80) en een sorbitantriester (Span 85). Int. J. Pharm. 1994, 105, 1–6. [KruisRef]

28. Manosroi, A.; Wongtrakul, P.; Manosroi, J.; Sakai, H.; Sugawara, F.; Yuasa, M.; Abe, M. Karakterisering van blaasjes bereid met verschillende niet-ionische oppervlakteactieve stoffen gemengd met cholesterol. Colloïde branding. B Bio-interface 2003, 30, 129-138. [KruisRef]

29. Alsarra, IA Evaluatie van proteasomen als een alternatieve strategie om de transdermale toediening van piroxicam te optimaliseren. J. Micro-capsule. 2009, 26, 272-278. [KruisRef]

30. Sharma, S.; Das, A.; Dasgupta, A.; Lee, WM; Kim, JO; Oh, DH; Kim, DD; Kim, JS; Joehoe, DOOR; Choi, HG; et al. Formulering en in vitro beoordeling van minoxidil-niosomen voor een betere afgifte van de huid. Int. J. Pharm. 2009, 377, 1–8.

31. Junyaprasert, VB; Singh, P.; Suksiriworapong, J.; Chantasart, D. Fysisch-chemische eigenschappen en huidpermeatie van Span 60/Tween 60 niosomen van ellaginezuur. Int. J. Pharm. 2012, 423, 303. [CrossRef] [PubMed]

32. Manosroi, A.; Khanrin, P.; Lohcharoenkal, W.; Gotz, F.; Manosroi, W.; Manosroi, J. Transdermale absorptieverbetering door rattenhuid van gallidermine geladen in liposomen. Int. J. Pharm. 2010, 392, 304-310. [Kruisreferentie] [PubMed]

33. Auda, SH; Fathalla, D.; Fetih, G.; El-Badry, M.; Shakeel, F. Niosomes als transdermaal medicijnafgiftesysteem voor celecoxib: in vitro- en in vivo-onderzoeken. Polym. Stier. 2016, 73, 1229-1245. [KruisRef]

34. Manosroi, A.; Jantrawut, P.; Manosroi, J. Ontstekingsremmende activiteit van gel die nieuwe elastische niosomen bevat die zijn ingesloten met diclofenac-diethylammonium. Int. J. Pharm. 2008, 360, 156-163. [Kruisreferentie] [PubMed]

35. Shahiwala, A.; Misra, A. Studies naar plaatselijke toepassing van normaal ingesloten nimesulide. J. Pharm. Pharm. Wetenschap. 2002, 5, 220-225. [PubMed]

36. Pardakhty, A.; Varshosaz, J.; Rouholamini, A. In vitro onderzoek van polyoxyethyleenalkyletherniosomen voor toediening van insuline. Int. J. Pharm. 2007, 328, 130-141. [CrossRef] 37. Abdelbary, G.; El-Gendy, N. Niosome-ingekapselde gentamicine voor oogheelkundige gecontroleerde toediening. Aaps Pharmscitech 2008, 9, 740-747. [Kruisreferentie] [PubMed]

38. Wadda Abbad, S.; Yu, F.; Munyendo, WLL; Wang, J.; Lv, H.; Zhou, J. Formulering, karakterisering en farmacokinetiek van Morin-hydraatniosomen bereid uit verschillende niet-ionische oppervlakteactieve stoffen. Int. J. Pharm. 2013, 456, 446-458. [KruisRef]

39. Mishra, J.; Swain, J.; Mishra, AK Onderzoek naar de temperatuurafhankelijke veranderingen van de grensvlakhydratie en viscositeit van Tween20: Cholesterol (1: 1) Niosome-membraan met behulp van Fisetin als een fluorescerende moleculaire sonde. Fysiek. Chem. Chem. Fysiek. 2018, 20, 13279–13289. [KruisRef]

40. Procházková, D.; Boušová, I.; Wilhelmová, N. Antioxidant en pro-oxidant eigenschappen van flavonoïden. Fitotherapie 2011, 82, 513-523. [KruisRef]

41. Cherrak, SA; Mokhtari-Soulimane, N.; Berroukeche, F.; Bensenane, B.; Cherbonnel, A.; Merzouk, H.; Elhabiri, M. In vitro antioxidant versus metaalionchelaterende eigenschappen van flavonoïden: een onderzoek naar structuur-activiteit. PLoS ONE 2016, 11, e0165575. [Kruisreferentie] [PubMed]

42. Amic, D.; Davidovic-Amic, D.; Beslo, D.; Rastija, V.; Lucic, B.; Trinajstic, N. SAR en QSAR van de antioxidantactiviteit van flavonoïden. Curr. Med. Chem. 2007, 14, 827-845. [Kruisreferentie] [PubMed]

43. Machado, ND; Fernando, DUS; De Rossi, RH; Fernandez, MA Cyclodextrine gemodificeerde niosomen om hydrofiele verbindingen in te kapselen. RSC Adv. 2018, 8, 29909–29916. [KruisRef]

44. Imran, M.; Sjah, MR; Ullah, F.; Ullah, S.; Elhissi, AMA; Nawaz, W.; Ahmad, F.; Sadiq, A.; Ali, I. Op glycoside gebaseerde liposomale nanodrager voor de verbeterde in-vivo-prestaties van Cefixime. Int. J. Pharm. 2016, 505, 122-132. [Kruisreferentie] [PubMed]

45. Hao, Y.; Zhao, F.; Li, N.; Yang, Y.; Li, K. Studies naar een hoge inkapseling van colchicine door een schadelijk systeem. Int. J. Pharm. 2002, 244, 73-80. [KruisRef]

46. ​​Anandam, S.; Selvamuthukumar, S. Fabricage van cyclodextrine nanosponzen voor levering van quercetine: fysisch-chemische karakterisering, fotostabiliteit en antioxiderende effecten. J. Mater. Wetenschap. 2014, 49, 8140-8153. [KruisRef]

47. Lv, X.; Liu, T.; Moeder, H.; Tian, ​​Y.; Li, L.; Li, Z.; Gao, M.; Zhang, J.; Tang, Z. Bereiding van op etherische olie gebaseerde micro-emulsies voor het verbeteren van de oplosbaarheid, pH-stabiliteit, fotostabiliteit en huidpermeatie van quercetine. AAPS PharmSciTech 2017, 18, 3097-3104. [KruisRef]

48. Azzi, J.; Jraij, A.; Auezova, L.; Fourmentin, S.; Greige-Gerges, H. Nieuwe bevindingen voor inkapseling en conservering van quercetine met cyclodextrine, liposomen en geneesmiddel-in-cyclodextrine-in-liposomen. Voedsel HydroColloid 2018, 81, 328-340. [KruisRef]

49. Smit, GJ; Thomsen, SJ; Markham, KR; Andary, C.; Cardon, D. De fotostabiliteit van natuurlijk voorkomende 5-hydroxyflavonen, flavonolen, hun glycosiden en hun aluminiumcomplexen. J. Fotochem. Fotobiol. Een Chem. 2000, 136, 87-91. [KruisRef]

50. Kubo, ik.; Kinsthori, I. Flavonolen van de saffraanbloem: tyrosinase-remmende activiteit en remmingsmechanisme. J. Agric. Voedsel Chem. 1999, 47, 4121-4125. [KruisRef]

51. Kim, YJ; Uyama, H. Tyrosinaseremmers uit natuurlijke en synthetische bronnen: structuur, remmingsmechanisme en perspectief voor de toekomst. Cel. mol. Levenswetenschappen. 2005, 62, 1707-1723. [Kruisreferentie] [PubMed]

52. Kim, D.; Park, J.; Kim, J.; Han, C.; Yoon, J.; Kim, N.; SEO, J.; Lee, C. Flavonoïden als paddenstoeltyrosinaseremmers: een fluorescentiedovende studie. J. Agric. Voedsel Chem. 2006, 54, 935-941. [Kruisreferentie] [PubMed]

53. Ventilator, M.; Zhang, G.; Hu, X.; Xu, X.; Gong, D. Quercetine als een tyrosinaseremmer: remmende activiteit, conformatieverandering en mechanisme. Voedsel Res. Int. 2017, 100, 226-233. [Kruisreferentie] [PubMed]

54. Didem ¸Söhreto ˘glu Suat, S.; Burak, B.; Özel, A. Tyrosinase-remming door sommige flavonoïden: remmende activiteit, het mechanisme door in vitro- en silico-onderzoeken. Bioorg. Chem. 2018, 81, 168-174. [Kruisreferentie] [PubMed]

55. Gopinath, D.; Ravi, D.; Karwa, R.; Rao, B.; Shashank, A.; Rambhau, D. Farmacokinetiek van zidovudine na intraveneuze bolustoediening van een nieuw niosoompreparaat zonder cholesterol. Arzneimittelforschung 2011, 51, 924-930. [Kruisreferentie] [PubMed]

56. Ghosh, S.; Ghatak, C.; Banerjee, C.; Mandal, S.; Kuchlyan, J.; Sarkar, N. Spontane overgang van micel-vesikel-micelle in een mengsel van kationische oppervlakteactieve stof en anionische oppervlakteactieve stofachtige ionische vloeistof: een zuivere niet-lipide kleine unilamellaire vesiculaire sjabloon die wordt gebruikt voor onderzoek naar oplosmiddel- en rotatierelaxatie. Langmuir 2013, 29, 10066-10076. [KruisRef]

57. Sakai, T.; Ikoshi, R.; Toshida, N.; Kagaya, M. Thermodynamisch stabiele vesikelvorming en vesikel-naar-micelle-overgang van enkelzijdige anionische oppervlakteactieve stof in water. J. Fysiek. Chem. B 2013, 117, 5081. [Kruisreferentie]

58. Ghosh, S.; Mondal, S.; Pan, A.; Mitra, RK; Ghosh, S. Ionische vloeistof gemedieerde micel-naar-vesikel-overgang van een kationische gemini-surfactant: een spectroscopisch onderzoek. Zachte materie 2018, 14, 4185-4193.

59. Mukherjee, B.; Patra, B.; Layek, B.; Mukherjee, A. Aanhoudende afgifte van aciclovir uit nano-liposomen en nano-liposomen: een in vitro-onderzoek. Int. J. Nanomed. 2007, 2, 213-225.

60. Blois, MS Antioxidant-bepalingen door het gebruik van een stabiele vrije radicaal. Natuur 1958, 181, 1199-1200. [KruisRef]

61. Rui, Y.; Ying, G.; Weixin, W.; Chen, H.; Hij, Z.; Jia, A.-Q. Antioxiderende capaciteit van fenolen in Camellia nitidissima Chi-bloemen en hun identificatie door HPLC Triple TOF MS/MS. PLoS ONE 2018, 13, e0195508.

Voorbeeldbeschikbaarheid:

Monsters van de verbindingen zijn niet verkrijgbaar bij de auteurs.

© 2019 door de auteurs. Licentiehouder MDPI, Bazel, Zwitserland. Dit artikel is een vrij toegankelijk artikel dat wordt verspreid onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution (CC BY)-licentie (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Ontvangen: 2 april 2019; Geaccepteerd: 21 juni 2019; Gepubliceerd: 24 juni 2019

For more information:1950477648nn@gmail.com