Optimaal recept en kwaliteitsevaluatie van Cistanche Whitening Cream

Abstract:

Doelstelling: Het selecteren van het beste recept vanCistanche bleekcrèmeen de kwaliteitsnorm bepalen.

Methoden: Orthogonalex periment is ontworpen om het beste recept te screenen; de fysische en chemische eigenschappen vanCistanche bleekcrèmewerden getest, decistanche in de bleekcrèmewerd kwalitatief geïdentificeerd door de TLC-methode en de Verbascum-glycosiden in de bleekcrème werden bepaald door HPLC.

Resultaten: Door middel van orthogonale experimenten werd vastgesteld dat het optimale recept voor bleekcrème {{0}}.3g stearylalcohol,1.0g Tween60,0.25gSpan60 en 0.09 was. g carbomeerU30. De TLC-spots vanCistanche bleekcrèmezijn duidelijk en specifiek. De concentratie van verbascoside in het bereik van 6,25~200ug/ml vertoonde een goede lineaire relatie met het piekoppervlak.

Het gemiddelde gehalte aan verbascoside inCistanchewas respectievelijk {{0}},142 mg/g,0,143 mg/g, 0,146 mg/g.

Conclusie: de voorbereideCistanche bleekcrèmeheeft een goede uitstraling en is de basis voor multi's redelijk; de methode van inhoudsbepaling is eenvoudig en uitvoerbaar, met goede reproduceerbaarheid, hoge precisie en betrouwbare resultaten. Het kan worden gebruikt om het gehalte aan verbascoside inCistanche bleekcrème.

trefwoorden:Cistanche; Whitening Crème; Voorschriftoptimalisatie; Voorbereidingsmethode; Kwaliteitsevaluatie

Huidskleur is gerelateerd aan de aanwezigheid van verschillende biologische pigmenten die helpen beschermen tegen zonnestraling, maar het belangrijkste pigment bij het bepalen van de huidskleur is melanine [1]. Melanine wordt geproduceerd in melanocyten, die een lysosomaal organel hebben, melanosomen genaamd, die melanine synthetiseren en opslaan [2]. De synthese van melanine wordt geïnitieerd door L-tyrosine en onder de katalyse van tyrosinase wordt melanine gegenereerd door een reeks complexe processen zoals dopachroom, dopaquinon en dopa. Onder hen is de inhoudsverhouding van 5,6-dihydroxyindol (5,6-dihydroxyindol, DHI) en 5,6-dihydroxyindol-2-carbonzuur (5,{{11} }dihydroxyindol-2-carboxylicacid, DHICA) bepaalt de veranderingen in huidskleur van zwart naar bruin [3-4].

Klik hier voor een GRATIS MONSTER VANCistanche bleekcrème.

Op dit moment zijn de meeste whitening-cosmetica op de markt gericht op tyrosinase, en door de activiteit van tyrosinase te beheersen, kan de productie van melanine worden verminderd om een ​​witmakend effect te bereiken [5]. Veelgebruikte additieven voor het bleken van de huid zijn onder meer kojiczuur en zijn derivaten, fruitzuur, vitamine C, enz., maar deze additieven hebben allemaal enkele bijwerkingen.

Cistancheis een traditioneel Chinees medicijn, dat sinds de oudheid voornamelijk wordt gebruikt voor de behandeling van mannelijke ziekten. Het belangrijkste actieve ingrediënt is fenylethanoïde [6]. Bij modern onderzoekCistanche-extractomvat verbetering van de seksuele functie, anti-aging, anti-oxidatie [7], verbetering van het leer- en geheugenvermogen, neuroprotectie, immuunregulatie, anti-vermoeidheid, anti-deficiëntie. Bloed- en leverbescherming en andere functies.

Bovendien hebben extracten van traditionele Chinese geneeskunde als productadditieven de voordelen van een goede huidaffiniteit, veiligheid en betrouwbaarheid in vergelijking met chemische additieven in moderne bleekproducten. Experimenten hebben aangetoond datfenethylosidekan de activiteit van tyrosinase aanzienlijk verlagen [8]. Daarom werd in deze studie Cistanche deserticola gebruikt als het belangrijkste ingrediënt om een ​​bleekcrème te bereiden, en het recept werd geoptimaliseerd en de kwaliteit ervan werd geëvalueerd, om een ​​referentie te bieden voor de ontwikkeling van witmakende ingrediënten in Cistanche deserticola.

1 materiaal vanCistanche bleekcrème

1.1 Experimentele reagentia

Stearylalcohol; Glycerylmonostearaat; PEG100 stearaat; Cetearyl alcohol; Shea boter; synthetische squalaan; Propyleenglycol; Tween 60; Span 60; Glycerine; Carbomer U30 (allemaal gekocht bij Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.); Cistanche deserticola (afkomstig uit Binnen-Mongolië, als authentiek geïdentificeerd door professor Xu Liang van de Liaoning University of Traditional Chinese Medicine); Verbasin Standard (batchnummer: 111530-201007, China Food and Drug Testing Research)

Ziekenhuis); chloroform, n-butanol, methanol, mierenzuur, acetonitril, zwavelzuur, watervrije ethanol, fosforzuur zijn allemaal analytische reagentia en water is zuiver water.

1.2 Experimentele apparatuur

FA1004 elektronische balans (Shanghai Yueping Scientific Instrument Co., Ltd.); DZKW-S-4 Elektrische verwarming Waterbad met constante temperatuur (Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. Medical Instrument No. 5 Factory); SG3300H ultrasone reiniger (Shanghai Guante Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); Siliconen geprefabriceerde plaat G (batchnummer: 20110905, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); C18 chromatografische kolom (Yuexu Technology Co., Ltd.).

2 Methoden en conclusies vanCistanche bleekcrème

2.1 Bereiding van bleekcrème

2.1.1 Whitening cream formule: Stearylalcohol 0.3g, glycerolmonostearaat 0.5g, PEG10{{10}} stearaat 0.25g, cetearylalcohol 0.1 g, sheaboter 0,75 g, synthetisch squalaan 1,25 g, span 600,25 g,

Carbomer U300.09g, Cistanche deserticola-extract 0,5g, glycerine 2,0g, propyleenglycol 1,25g, Tween 601,0g, triethanolamine 0,07g.

2.1.2 Methode voor het bleken van crème

Stearylalcohol, glycerylmonostearaat, PEG100-stearaat, cetearylalcohol, sheaboter, synthetisch squalaan en Span 60 werden verwarmd en gesmolten op een waterbad bij 80 graden en uniform gemengd als olie. Fase, carbomeer U30 werd toegevoegd aan water en op een waterbad van 80 graden geplaatst om te verwarmen om te zwellen en op te lossen, voeg Cistanche deserticola-extract toe, voeg vervolgens glycerine, propyleenglycol, Tween 60 toe en meng goed als de waterfase, voeg de oliefase toe aan de waterfase, roer continu en emulgeer, en voeg triethanolamine toe, roer gelijkmatig en laat het afkoelen om Cistanche-bleekcrème te verkrijgen.

2.2 Voorkeursrecept voor bleekcrème

Het optimale voorschrift van Cistanche deserticola-bleekcrème werd gescreend door middel van een orthogonale test. Op basis van de fijnheid, glans, viscositeit, hydratatiegraad en andere aspecten van de bleekcrème, werd een uitgebreide score uitgevoerd, werd de gemiddelde waarde genomen en werd het optimale voorschrift van de bleekcrème geselecteerd op basis van de resultaten.

Het optimale recept voor bleekcrème is A2B1C2D3, namelijk stearylalcohol 0.3g, Tween 601.0g, Span 00.25g,

Carbomeer U300.09g. Uit tabel 3 kan worden afgeleid dat de factor die de grootste invloed heeft op de bleekcrème carbomeer U30 is, dat een significant verschil heeft.

2.3 Fysische en chemische eigenschappen testen

Door de eigenschappen en fijnheid van Cistanche-bleekcrème te observeren, werd de pH bepaald en werden centrifugatie-, lage temperatuur- en stabiliteitstests uitgevoerd. Plaats het voorbereide monster op -20 graad voor 1 d, en kijk of er een is

Het fenomeen van gelaagdheid en deeltjesneerslag [9]. Het werd gedurende 30 dagen continu op kamertemperatuur geplaatst om te zien of het stabiel was, of er delaminatie, kleurveranderingen en andere verschijnselen waren. Cistanche bleekcrème bereid volgens de methode van "2.1.2" is bruin

Kleurcrème met een mooie uitstraling, fijn en glad, niet vet op de huid. De gemeten pH was (6,90±0,05), wat voldeed aan de vereisten van de Farmacopee van de Volksrepubliek China, en er verscheen geen olie-waterstratificatie in de monsters na centrifugatie. Er trad geen delaminatie en kleurverandering op na plaatsing op -20 graad gedurende 1 dag en bij kamertemperatuur gedurende 30 dagen. De bleekcrème van Cistanche deserticola vertoonde een goede stabiliteit.

2.4 TLC-identificatie

Weeg nauwkeurig 1 g Cistanche deserticola-extract af, voeg een geschikte hoeveelheid methanol toe, ultrasoon in een ultrasone reiniger gedurende 15 minuten, filter, verdamp het water tot bijna droge toestand en los op in methanol om de oplossing van het medicinale referentiemateriaal te verkrijgen. Neem 0,5 g blanco matrix en Cistanche-bleekcrème, voeg methanol toe, los ultrasoon op, centrifugeer en neem het supernatant als respectievelijk de negatieve oplossing en de testoplossing.

Pipetteer 10 L van elk van de bovenstaande 3 oplossingen, richt ze op dezelfde dunne laagplaat en gebruik een ontwikkelmiddel in de verhouding van chloroform 6: n-butanol 1: methanol 2: mierenzuur 2 [10], neem het uit en droog het, spuit het met 10 procent ethanolsulfaat, verwarmd tot 105 graden totdat de vlekken helder zijn. In figuur 1 is te zien dat de TLC-vlekken van Cistanche-bleekcrème helder en specifiek zijn en dat de blanco matrix geen interferentie vertoont.

2.5 Bepaling van het gehalte aan verbascoside

2.5.1 Chromatografische omstandigheden [11] De chromatografische kolom is een C18-kolom (250 mm × 4,6 mm, 5 m); mobiele fase: acetonitril-0,1 procent fosforzuuroplossing (20:80); stroomsnelheid: 1,0 ml/min; detectiegolflengte: 330nm; kolom temperatuur:

30 graden; injectievolume: 20 L.

2.5.2 Voorbereiding van de oplossing

①De voorbereiding van de testoplossing. Weeg 0,5 g van de bleekcrème, bereid uit Cistanche deserticola, nauwkeurig af, voeg een geschikte hoeveelheid methanol toe, los gedurende 15 min (40 kHz) ultrasoon op en filtreer het tot constant volume in een maatkolf van 10 ml om de testoplossing verkrijgen. ②Voorbereiding van referentieoplossing. Weeg 4,13 mg Verbasin-referentiestof nauwkeurig af, doe het in een maatkolf van 100 ml, verdun tot het volume met 50 procent methanol en schud goed om de oplossing van de referentiestof te verkrijgen.

③Negatieve opmerking: 1. Controle medicinaal materiaal; 2. Blanco matrix; 3, 4, 5 Cistanche bleekcrème.

Oplossing voorbereiding. Weeg nauwkeurig {{0}},5 g van de bereide blanco matrix, voeg een geschikte hoeveelheid methanol toe, los ultrasoon op en filtreer tot een volume van 10 ml in een maatkolf om een ​​negatieve oplossing te verkrijgen. De bovenstaande oplossingen werden gefiltreerd door een microporeus membraan van 0,45 m.

2.5.3 Onderzoek naar het aanpassingsvermogen van het systeem

Neem respectievelijk de teststof, de referentiestof en de negatieve oplossing en voer de bepaling uit volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.5.1".

De piektijd van verbascoside in de teststof en de referentiestof was vergelijkbaar, en de piek werd niet gezien in de negatieve oplossing, wat aangeeft dat de specificiteit goed was en dat de negatieve oplossing er geen invloed op had.

2.5.4 Onderzoek naar lineaire relaties

Absorbeer de referentiestofoplossing van Verbasidin om een ​​standaardoplossing van 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200 ug/ml te bereiden en meet onder de chromatografische omstandigheden onder "2.5.1", waarbij de concentratie wordt genomen als de abscis en het piekgebied als de verticale coördinaten, werd de lineaire regressievergelijking y=28483x plus 54316 (R2=0,9994) verkregen, wat aangaf dat de lineaire relatie tussen verbascoside en piekoppervlak goed was in het bereik van 6,25~ 200 ug/ml.

2.5.5 Precisietest

Teken nauwkeurig de referentieoplossing en meet deze volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.5.1", de RSD van het piekgebied van verbascoside is 1,58 procent (n=6), wat aangeeft dat de precisie van het instrument goed is .

2.5.6 Herhaalbaarheidstest

Trek nauwkeurig de oplossing van het testmonster en meet deze volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.5.1", de RSD van het piekgebied van verbascoside is 1,81 procent (n=6), wat aangeeft dat de methode een goede herhaalbaarheid heeft .

2.5.7 Stabiliteitstest

Teken nauwkeurig de testoplossing die 0, 4, 8, 12, 20 en 24 uur op kamertemperatuur is geplaatst en meet deze. De RSD van het piekoppervlak van verbascoside is 1,04 procent, wat aangeeft dat de testoplossing binnen 24 uur een goede stabiliteit heeft.

2.5.8 Hersteltest voor monstertoevoeging

Trek nauwkeurig 9 delen van de testoplossing met bekende inhoud, voeg dezelfde hoeveelheid Verbasin-referentiestof toe om op te lossen

vloeistof, en meet volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.5.1". Elke 0.5g, volgens de "2.5.2 ①"-methode om de testoplossing te bereiden, volgens "2.5.1" onder de chromatografische omstandigheden voor monsterinjectie en -bepaling.

3 Bespreking vanCistanche bleekcrème

Hoewel veel enzymen betrokken zijn bij de productie van melanine, tyrosinase en tyrosinase-gerelateerd eiwit-1 (TRP-1) en tyrosinase-gerelateerd eiwit-2 (Tyrosinase-gerelateerd eiwit-2 ) speelt TRP-2) een belangrijke rol bij de melaninesynthese. Specifiek speelt tyrosinase een snelheidsbeperkende rol bij het katalyseren van melaninesynthese en is het de belangrijkste manier voor de ontwikkeling van melaninesyntheseremmers. Van melanose is bekend dat het wordt gereguleerd door meer dan 125 verschillende genen [12]. Deze genen reguleren enkele belangrijke biologische functies van melanocyten, zoals celdifferentiatie en regulatie van pigmentatie of melanogenese. Onder hen is Microftamia-transcriptiefactor (MITF) het belangrijkste lid van bekende transcriptiefactoren voor de ontwikkeling van melanocyten [13]. MITF reguleert het transcriptieproces door te binden aan de promotorregio's van TYR-, TRP-1- en TRP-2-genexpressie [14]. Cistanche deserticola fenylethanoïde kan het melaninegehalte verlagen, de transcriptieniveaus van TYR- en TRP-1-genen aanzienlijk remmen en de eiwitexpressies van TYR, TRP-1 en TRP-2 neerwaarts reguleren. Bovendien kan fenylglycoside van Cistanche deserticola ook het MITF-mRNA-transcriptieniveau remmen en de eiwitexpressie van MITF verlagen [15].

De vraag naar whitening-cosmetica in China en Azië neemt jaar na jaar toe, maar de actieve ingrediënten in de meeste cosmetica bevatten meestal schadelijke ingrediënten. mijn land is rijk aan traditionele Chinese geneeswijzen en heeft een hoge veiligheid. Daarom gebruikte deze studieCistancheals grondstof voor het bereiden van bleekcrème. De bereide bleekcrème heeft een goed uiterlijk, delicate en gladde, stabiele eigenschappen, geen vettig gevoel bij het uitsmeren op de huid en een sterke huidaffiniteit; de fysische en chemische eigenschappen ervan worden getest en de testresultaten tonen aan dat het een goede stabiliteit heeft. Het orthogonale testontwerp heeft de voordelen van een wetenschappelijke methode, een eenvoudige bediening en een opmerkelijk effect. Daarom werd de orthogonale test gebruikt om het optimale voorschrift van te screenenCistanche bleekcrème. 600.25g, Carbomeer U300.09g. De factor met de grootste invloed op de bleekcrème werd door ANOVA bepaald als carbomeer U30. De bepaling van het verbascosidegehalte door middel van hoogwaardige vloeistofchromatografie is eenvoudig en haalbaar, met goede reproduceerbaarheid, hoge precisie en betrouwbare resultaten.

If you have any questions, please send us Email at: wallencesuen@wecistanche.com