Deel 2 | Acteoside onderdrukt RANKL-gemedieerde osteoclastogenesie door C-Fos-inductie en NF-kB-route te remmen en ros-productie te verzwakken
Mar 06, 2022
Voor meer informatie kunt u contact opnemen met ali.ma@wecistanche.com
Deel 2 | Hoe bevorderen Acteosides de botgroei?
Klik naar Cistanches met Acteoside
Discussie
Botremodellering wordt strak gereguleerd door de balans tussen botvorming door osteoblasten en botresorptie door osteoclasten. Langdurige en overmatige botresorptie veroorzaakt een onbalans van de skeletomzet, wat resulteert in botresorptieve ziekten. Om de effecten vanacteosideop osteoclastogenesie gebruikten we twee macrofagen, primair gekweekte BMM's en RAW264.7-cellen. Deze cellen werden met RANKL gestimuleerd om te differentiëren in osteoclasten in de aan- en afwezigheid vanacteoside. We lieten voor het eerst zien datacteosideremt osteoclastische differentiatie en vorming.Acteosidezelf bij de onderzochte concentraties geen afname van de levensvatbaarheid van de primaire gekweekte macrofagen veroorzaakte in zowel groei- als differentiatieomstandigheden.Acteosidebehandeling verminderde ook de resorptieactiviteit van volwassen osteoclasten. Deze resultaten suggereren dat acteoside de osteoclastische vorming van macrofagen en osteoclastische resorptieactiviteit onderdrukt. De resultaten van ons kweeksysteem, dat geen osteoblasten of stromale cellen omvatte, suggereren ook dat acteoside osteoclastenvorming voorkomt door direct in te werken op osteoclastenvoorlopers. RANKL activeert MAPK's, waaronder p38, ERK en JNK. Deze drie kinasen zijn betrokken bij vroege osteoclastische differentiatie en dus onderdrukt hun remming farmacologisch of met een dominant-negatieve JNK-transfectie RANKL-geïnduceerde osteoclastogenesie [29]. Uit onze resultaten bleek datacteosidevoorbehandeling remde al deze kinasen, wat wijst op een niet-specifieke down-regulatie van MAPK's. Dit resultaat verschilde gedeeltelijk van het vorige rapport dat EGCG, de belangrijkste ontstekingsremmende verbinding in groene T-shirts, specifiek JNK-activering verzwakte zonder de P38-activering in RANKL-gestimuleerde BMM's te beïnvloeden [7]. Van paeonol, een ontstekingsremmende verbinding afgeleid van een Chinees kruid, is ook gemeld dat het ERK en p38 remt, maar geen junk, fosforylering in RANKL-gestimuleerde RAW264.7-cellen [30]. Daarentegen verzwakte silibinine, een nieuwe remmer in bot, de door rangen geïnduceerde activering van p38, ERK en JNK [31]. Deze bevindingen suggereren dat de effecten van anti-resorptieve verbindingen op MAPK-activering door RANKL afhankelijk zijn van de verbinding, hoewel alle drie mapk's betrokken zijn bij vroege osteoclastogenesie. Gezien de waarneming dat acteoside p-JNK-niveaus in RANKL-gestimuleerde BMM's verzwakte, zelfs bij 1 mm, leek de blokkering van JNK in plaats van van p38 MAPK of ERK een meer specifieke gebeurtenis te zijn in deacteoside-gemedieerde anti-osteoclastopolenese in de cellen. Hoewel acteoside bij dezelfde concentratie het aantal osteoclasten in BMM's niet verminderde, was er een significante afname van de putvorming door behandeling met acteoside. We ontdekten ook dat voorbehandeling met SP600125, een farmacologische remmer specifiek voor JNK, de vorming van osteoclasten dramatisch voorkwam (gegevens niet getoond). Gezamenlijk suggereren deze bevindingen dat JNK-gemedieerde signalering nauw verwant is aan de acteoside-gemedieerde onderdrukking van osteoclastogenesie gestimuleerd door RANKL. NF-kB-signalering reguleert cellulaire gebeurtenissen, waaronder apoptose, celcyclusprogressie, celadhesie, cytokineproductie en overleving in macrofagen [32]. NF-kB-signalering is ook vereist voor de ontwikkeling van osteoclasten, wat is aangetoond door het optreden van osteopetrose bij NF-kB-knock-out muizen [33,34]. Daarom wordt voorgesteld om NF-kB te remmen als een effectief doelwit voor anti-resorptiemiddelen om de osteoclastische activiteit te reguleren en osteoporose te behandelen. Posttranslationele modificatie van NF-kB-subfamilie-eiwitten is cruciaal bij het moduleren van NF-kB-activiteit. Vooral fosforylering van de p65-subeenheid en IkB-kinase is van cruciaal belang voor NF-kB om osteoclastogenese te induceren [7]. Onze huidige bevindingen toonden aan dat RANKL-stimulatie de DNA-bindingsactiviteit van NF-kB en fosforylering van de p65-subeenheid en Ikea verhoogde in zowel BMM's als RAW264.7-cellen. Voorbehandeling met acteoside remde deze RANKL-geïnduceerde verhogingen, wat resulteerde in down-gereguleerde NF-kB-activiteit. Bijgevolg suggereren deze resultaten dat, naast MAPK's, NF-kB-signalering het belangrijkste doelwit is van acteoside bij het remmen van osteoclastendifferentiatie en -vorming van RANKL-gestimuleerde macrofagen. Naast NF-kB-signalering speelt de c-Fos/c-Jun/NFATc1pathway een sleutelrol in de ontwikkeling van osteoclasten, dus het ontbreken van een van deze eiwitten kan osteoclastopolenese stoppen [35,36]. In deze studie vonden we dat acteoside de RANKL-geïnduceerde c-Fos- en NFATc1-expressie op mRNA- en eiwitniveaus voorkwam. JNK is een upstream kinase van c-Jun, dat nodig is voor NFATc1expressie en osteoclastogenesie als reactie op RANKL [29]. Het blokkeren van de JNK/c-Jun-route met een JNK-remmer verminderde de door ARTL geïnduceerde osteoclastenvorming en c-Fos en NFATc1expressie [7]. Onze resultaten en eerdere bevindingen suggereren dat het remmen van JNK-gemedieerde signalering door acteoside nauw samenhangt met het voorkomen van RANKL-gemedieerde c-Fos en NFATc1
expressie, die osteoclastische differentiatie in macrofagen onderdrukt. Verschillen in de effecten vanacteosideop BMM's enRAW264.7 cellen zijn ten minste gedeeltelijk te wijten aan verschillen in de gevoeligheid voor JNK-remming. TNF-a kan osteoclastogenese induceren onafhankelijk van RANKL-RANK signalering [37]. IL-1 is een krachtige mediator van pathologische botvernietiging geïnduceerd door oestrogeendeficiëntie of ontsteking[7]. Het verstoren van de type I IL-1 receptor of IL-1 signalering kan botverlies geïnduceerd door ovariëctomie [38] of reumatoïde artritis [39] omkeren. Deze studie toonde het vermogen vanacteosideom de productie van inflammatoire cytokines zoals TNF-a, IL-1b en IL-6 in macrofagen te verminderen. Van acteoside wordt gedacht dat het de productie van inflammatoire cytokines remt door p38-kinase enERK-signalering te onderdrukken, omdat het activeren van ERK1/2, p38 MAPK of beide vereist is voor lipopolysaccharide-geïnduceerde productie van deze cytokines in macrofagen [40,41]. Van luteoline, een ontstekingsverbinding, was ook gemeld dat het de productie van ontstekingsmediatoren onderdrukte door de activering van p38 MAPK te remmen [42]. In deze studie vonden we ook dat acteoside botverlies verzwakte bij ovariectomie muizen, zoals blijkt uit de herstelde maximale fractuurkracht in de middenas van het rechterdijbeen en het verdwijnen van osteoporotisch corticale bot. Orale toediening van acteoside down-gereguleerde de ovariectomie-geïnduceerde verhogingen van serum IL-1b en IL-6 niveaus, maar niet ALP. De verhoogde serumspiegels van calcium, TRAP en OC in OVX werden ook geremd door orale behandeling met acteoside, wat suggereert dat acteoside de verandering van biomarkers specifiek voor botvorming en resorptie verzwakt. Aangezien osteoporose wordt gekenmerkt door een verminderde massadichtheid en verslechterde trabeculaire botmicroarchitectuur, werden OVX-geïnduceerd trabeculair botverlies en morfometrische parameterverandering significant geremd door orale acteoside-toediening. Deze bevindingen suggereren datacteosidekan worden gebruikt als een anti-resorptiemiddel voor de behandeling van osteoporose door het omkeren van onevenwichtige osteoclastenactivatie. Osteoblasten zijn echter de primaire factor die verantwoordelijk is voor nieuwe botvorming. Er is dus een middel nodig dat de proliferatie of differentiatie van osteoblasten kan verhogen om de botvorming te verbeteren [30]. Daarentegen vonden we dat acteoside geen invloed had op osteoblastdifferentiatie of mineralisatie in met DAG behandelde beenmergcellen. Alles bij elkaar suggereren onze resultaten dat acteoside een anti-resorptie-effect heeft, maar niet direct van invloed is op de botvorming. Meer gedetailleerde experimenten met het analyseren van botspecifieke parameters in vivo en in vitro zijn nodig om te verduidelijken of acteoside al dan niet voordelen heeft voor osteoblastogenese. De huidige studie benadrukt het remmende effect van acteoside op osteoclastische differentiatie en botresorptie door het onderdrukken van MAPKs en verschillende transcriptionele factoren zoals NF-kB, c-Fos en NFATc1. De gegevens suggereren twee mogelijke mechanismen waarmee acteoside deze voordelen heeft. Een mogelijkheid is datacteoside.
remt osteoclastogenesie vanwege het antioxiderende potentieel. Talrijke studies hebben aangetoond dat receptor-gemedieerdeROS-productie kan dienen als een stroomafwaartse signaalmediator[43-45]. Een paar kinasen en transcriptiefactoren zijn gevoelig voor de cellulaire redoxtoestand, die verschillende cellulaire gebeurtenissen beïnvloedt. RANKLstimuleert ros-productie, die RANKL-geïnduceerde cellulaire responsen bemiddelt voor osteoclastische differentiatie [24]. Voorbehandeling met antioxidanten, zoals N-acetylcysteïne en glutathion, voorkwam RANKL-gemedieerde ROS-generatie, wat aangeeft dat antioxidanten botverlies verminderen door rankl-geïnduceerde reproductie te verlagen [24]. In overeenstemming met deze bevindingen blijkt uit deze studie datacteosideverzwakt intracellulaire ROS geproduceerd inBMM's tijdens osteoclastische differentiatie op een dosisafhankelijke manier. Deze observatie suggereert dat de remming van osteoclastogenese op zijn minst gedeeltelijk te wijten is aan het antioxidantpotentieel van acteoside. We suggereren ook dat acteoside de instroom vanCa2 + kan reguleren, waardoor osteoclastopolenese wordt onderdrukt. Van acteoside werd onlangs gemeld dat het type I-allergieën remt door downregulerende / NFAT- en JNK-signalering in basofiele cellen [46]. De thecalcium-sensing receptor is nauw verwant aan de regulatie van osteoclastogenesie [47]. Deze relatie suggereert dat een calciumkanaal betrokken is bijacteoside-geïnduceerde remming van osteoclastendifferentiatie en -vorming. Verdere studies zijn echter nodig om de exacte mechanismen te onderzoeken waarmee acteoside werkt als een anti-resorptiemiddel door modulatie van Ca2 + homeostase.
Concluderend tonen onze huidige bevindingen aan dat acteoside DE DOORRANKL geïnduceerde osteoclastische differentiatie van BMM's enRAW264.7 macrofagen remt en botresorptie door volwassen osteoclasten onderdrukt.Acteosidevoorkomt ook RANKL-geïnduceerde activering van drie bekende MAPK's en transcriptiefactoren zoals NF-kB, c-Fos en NFATc1, evenals de productie van inflammatoire cytokines zoals TNF-a, IL-1b en IL-6. Bovendien verzwakt orale toediening van acteoside door ovariëctomie geïnduceerde osteoporose, hoewel het de osteoblastogenese van beenmergcellen niet beïnvloedt. Gezamenlijk suggereren deze bevindingen dat de CTE-kant een gunstige rol speelt bij het verminderen van osteoclastenvorming en -activiteit als een krachtig anti-resorptiemiddel.
Ondersteunende informatie
Figuur S1 Chemische structuur van acteoside.
(TIF) Figuur S2Acteosidevoorkomt RANKL-geïnduceerde putvorming in BMM's. Een BMM werd voorbehandeld met de aangegeven doses vanacteosidegedurende 2 uur in met been beklede 24-well platen en gestimuleerd met 50 ng/ml M-CSF en 100 ng/ml RANKL gedurende 7 dagen. Putvorming werd waargenomen onder optische microscopie. B, BMM's werden gekweekt met M-CSF en RANKL in aanwezigheid van verschillendeacteosideconcentraties (0-20 mM) en 7 dagen later werd het geresorbeerde gebied gekwantificeerd uit 3 onafhankelijke experimenten en uitgedrukt als een controlepercentage (n = 4 per experiment). *p,0,05, **p,0,01 en ***p,0,001 vs. cellen gekweekt met M-CSF en rang.
Figuur S3 Acteoside verzwakt de productie van inflammatoire cytokines in RANKL-gestimuleerde RAW264.7cells.
Cellen werden voorbehandeld met de toenemende concentraties (0-10 mM) vanacteosidegedurende 2 uur gevolgd door stimulatie met 100 ng/ml RANKL gedurende 48 uur. De niveaus van TNF-a, IL-1b en IL-6 werden bepaald met behulp van ELISA-kits. p,0,001 vs. cellen zonder RANKL en acteoside. #p,0.05 en ##p,0.01 vs. cellen gestimuleerd met alleen RANKL.
Bijdragen van de auteur
Bedacht en ontwierp de experimenten: S-YL J-CL. De experimenten uitgevoerd: S-YL K-SL S-HK SHY. Analyseerde de gegevens: K-SL S-YL J-CL. Bijgedragen reagentia/materialen/analysetools: S-YL SHY J-CL. Schreef het artikel: S-YL SHY J-CL.
Verwijzingen
1 Rho J, Takami M, Choi Y (2004) Osteoimmunologie: interacties van het immuunsysteem en het skelet. Moleculen en cellen 17: 1-9.
2. Del Fattore A, Capannolo M, Rucci N (2010) Been- en beenmerg: hetzelfde orgaan. Archives of Biochemistry Biophysics 503: 28-34.
3. Rachner TD, Khosla S, Hofbauer LC (2011) Osteoporose: nu en de toekomst. Lancet 377: 1276-1287.
4. Steur J, Caley MP, Waxman J (2011) Botmetastase bij prostaatkanker: opkomende therapeutische strategieën. Nature Reviews Klinische Oncologie 8: 357–368.
5. Goltzman D (2002) Ontdekkingen, drugs en skeletaandoeningen. Nature ReviewsDrug Discovery 1: 784-796.
6. Rodan GA, Martin TJ (2002) Therapeutische benaderingen van botziekten. Wetenschap289: 1508–1514.
7. Lee JH, Jin H, Shim HE, Kim HN, Ha H, et al. (2010) Epigallocatechin-3-gallate remt osteoclastogenesie door c-Fos-expressie te downreguleren en het nucleaire factor-kappaB-signaal te onderdrukken. Moleculaire Farmacologie 77: 17–25.
8. Kim HN, Lee JH, Jin WJ, Ko S, Jung K, et al. (2012) MS-275, een benzamide histon deacetylaseremmer, voorkomt osteoclastogenese door down-regulating-Fos expressie en onderdrukt botverlies bij muizen. European Journal of pharmacology 691: 69–76.
9. Kim T, Ha H, Shim KS, Cho WK, Ma JY (2013) Het anti-osteoporotische effect vanYijung-tang in een ovariectomie rattenmodel gemedieerd door remming van osteoclastendifferentiatie. Journal of Ethnopharmacology 146: 83-89.
10. Nakanishi A, Litsuka N, Tsukamoto J (2013) Visolie onderdrukt botresorptie door osteoclastogenesie te remmen door verminderde expressie van M-CSF, PU.1, MITF en RANK bij ovariectomie ratten. Molecular Medicine Reports 7:1896-1903.
11. Bar-Shavit Z (2007) De osteoclast: een multinucleated, hematopoietic-origine, botresorberende osteoimmune cel. Journal of Cellular Biochemistry 102: 1130-1139.
12. Takahashi N, Maeda K, Ishihara A, Uehara S, Kobayashi Y (2011) Regulatiemechanisme van osteoclastogenesie door RANKL- en Wnt-signalen. Grenzen in de biowetenschappen 16: 21–30.
13. Jules J, Zhang P, Ashley JW, Wei S, Shi Z, et al. (2012) Moleculaire basis van de behoefte van receptoractivator van nucleaire factor-kB signalering voor interleukine 1-gemedieerde osteoclastogenesie. The Journal of Biological Chemistry 287: 15728-15738.
14. Li C, Yang Z, Li Z, Ma Y, Zhang L, et al. (2011) Maslinezuur onderdrukt osteoclastogenesie en voorkomt door ovariëctomie geïnduceerd botverlies door ranggemedieerde NF-kB- en MAPK-signaleringsroutes te reguleren. Journal of Bone andMineral Research 26: 644-656.
15. Tomoda M, Miyamoto H, Shimizu N (1994) Structurele kenmerken en anti-complementaire activiteit van rehmannan SA, een polysaccharide uit de wortel van Rehmannia glutinosa. Chemisch en Farmaceutisch Bulletin (Tokio) 42: 1666–1668.
16. Kim H, Lee E, Lee S, Shin T, Kim Y, et al. (1998) Effect van Rehmannia glutinosa op een allergische reactie van het onmiddellijke type. International Journal of Immunopharmacology 20: 231-240.
17. Schapoval EE, Vargas MR, Chaves CG, Bridi R, Zuanazzi JA, et al. (1998)Ontstekingsremmende en antinociceptieve activiteiten van extracten en geïsoleerde verbindingen uit Stachytarpheta cayennensis. Journal of Ethnopharmacology 60:53–59.
18. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T, et al. (1998) Hepatoprotectieve activiteit van fenylethanoïden uitCistanche deserticola |. Planta Medica 64: 120-125.
19. Chun JC, Kim JC, Hwang IT, Kim SE (2002) Acteoside van Rehmannia gluten sanullificeert paraquat activiteit in Cucumis sativus. Pesticide Biochemie en fysiologie 72: 153-159.
20. Kim SS, Son YO, Chun JC, Kim SE, Chung GH, et al. (2005) Antioxiderende eigenschap van een actieve component gezuiverd uit de bladeren van paraquat-tolerantRehmannia glutinosa. Redox Verslag 10: 311–318.
21. Son YO, Lee SA, Kim SS, Jang YS, Chun JC, et al. (2011) Acteoside remt melanogenese in B16F10-cellen door ERK-activering en tyrosinase-downregulatie. The Journal of Pharmacy and Pharmacology 63: 1309-1319.
22. Yu JY, Lee SY, Son YO, Shi X, Park SS, et al. (2012) Continue aanwezigheid van H2O2 induceert mitochondriaal-gemedieerde, MAPK- en caspase-onafhankelijke groeiremming en cytotoxiciteit in menselijke gingivale fibroblasten. ToxicologieIn Vitro 26: 561–570.
23. Lu J, Yu JY, Lim SS, Son YO, Kim DH, et al. (2013) Cellulaire mechanismen van de cytotoxische effecten van de zearalenonmetabolieten a-zearalenon en b-zearalenon opRAW264.7 macrofagen. Toxicologie in vitro 27: 1007–1017.
24. Ha H, Kwak HB, Lee SW, Jin HM, Kim HM, et al. (2004) Reactieve zuurstofsoorten bemiddelen RANK-signalering in osteoclasten. Experimenteel celonderzoek301: 119–127.
25. Cho ES, Kim MK, Son YO, Lee KS, Park SM, et al. (2012) De effecten van rosiglitazon op osteoblastische differentiatie, osteoclastenvorming en botresorptie. Moleculen en cellen 33: 173–181.
26. Son YO, Jang YS, Heo JS, Chung WT, Choi KC, et al. (2009) Apoptosis-inducerende factor speelt een cruciale rol bij caspase-onafhankelijke, pyknotische celdood in aan waterstofperoxide blootgestelde cellen. Apoptose 14: 796–808.
27. Kook SH, Jeon YM, Park S, Lee JC (2013) Parodontale fibroblasten moduleren proliferatie en osteogene differentiatie van embryonale stamcellen door productie van fibroblastgroeifactoren. Tijdschrift voor Parodontologie In De Pers
28. Qi W, Yan YB, Lei W, Wu ZX, Zhang Y, et al. (2012) Preventie van osteoporose bij ratten door Cordyceps Sinensis-extract. Osteoporose International 23:2347–2357.
29. Ikeda F, Nishimura R, Matsubara T, Tanaka S, Inoue J, et al. (2004) Critical roles of c-Jun signaling in the regulation of NFAT family and RANKL-regulates osteoclast differentiation. The Journal of Clinical Investigation 114: 475-484.
30. Tsai HY, Lin HY, Fong YC, Wu JB, Chen YF, et al. (2008) Paeonol remtRANKL-geïnduceerde osteoclastogenesie door erk, p38 en NF-kappa B-route te remmen. European Journal of Pharmacology 588: 124-133.
31. Kim JH, Kim K, Jin HM, Song I, Youn BU, et al. (2009) Silibinine remt osteoblastdifferentiatie gemedieerd door TNF-familieleden. Moleculen en cellen 28: 201–207.
32. Napetschnig J, Wu H (2013) Moleculaire basis van NF-kB signalering. Jaaroverzicht van de biofysica 42: 443–468.
33. Franzoso G, Carlson L, Xing L, Poljak L, Shores EW, et al. (1997) Vereiste voor NF-kappaB bij de ontwikkeling van osteoclasten en B-cellen. Genen en ontwikkeling11: 3482–3496.
34. Iotsova V, Caamano J, Loy J, Yang Y, Lewin A, et al. (1997) Osteopetrose bij muizen zonder NF-kappaB1 en NF-kappaB2. Natuurgeneeskunde 3: 1285–1289.
35. Teitelbaum SL (2004) RANKing c-Jun in osteoclastische ontwikkeling. The Journal of Clinical Investigation 114: 463-465.
36. Takayanagi H (2005) Mechanistisch inzicht in osteoclastische differentiatie in osteoimmunologie. Journal of Molecular Medicine (Berl) 83: 170-179.
37. Cho ES, Lee KS, Son YO, Jang YS, Lee SY, et al. (2010) Compressieve mechanische kracht vergroot osteoclastogenese door beenmerg macrofagen door activering van c-Fms-gemedieerde signalering. Journal of Cellular Biochemistry 111: 1260-1269.
38. Lorenzo JA, Naprta A, Rao Y, Alander C, Glaccum M, et al. (1998) Muizen zonder de type I interleukine-1 receptor verliezen geen botmassa na ovariëctomie. Endocrinologie 139: 3022–3025.
39. Abramson SB, Amin A (2002) Het blokkeren van de effecten van IL-1 bij reumatoïde artritis beschermt bot en kraakbeen. Reumatologie (Oxford) 41: 972–980.
40. Hwang JM, Yu JY, Jang YO, Kim BT, Hwang KJ, et al. (2010) Een fenolzuurfenethylureumverbinding remt lipopolysaccharide-geïnduceerde productie van stikstofmonoxide en pro-inflammatoire cytokines in celkweek. InternationalImmunopharmacology 10: 526-532.
41. Fang M, Lee SY, Park SM, Choi KC, Lee YJ, et al. (2011) Anti-inflammatoir potentieel van Phaseolus calcaratus Roxburgh, een oosterse geneeskunde, op LPS-gesimuleerde ruwe 264.7 macrofagen. The Journal of Pharmacy and Pharmacology 63:120–128.
42. Lee JW, Ahn JY, Hasegawa S, Cha BY, Yonezawa T, et al. (2009) Remmend effect van luteoline op osteoclastendifferentiatie en -functie. Cytotechnologie 61:125–134.
43. Cosentino-Gomes D, Rocco-Machado N, Meyer-Fernandes JR (2012) Celsignalering door oxidatie en activering van eiwitkinase C. International Journal Molecular Sciences 13: 10697-10721.
44. Lee JC, Son YO, Pratheeshkumar P, Shi X (2012) Oxidatieve stress en metaalcarcinogenese. Vrije Radicalen Biologie en Geneeskunde 53: 742–757.
45. Nguyen Ngoc TD, Son YO, Lim SS, Shi X, Kim JG, et al. (2012) Natriumfluoride induceert apoptose in embryonale stamcellen van muizen via ROSdependent en caspase- en JNK-gemedieerde routes. Toxicologie en toegepaste farmacologie 259: 329–337.
46. Motojima H, Villareal MO, Iijima R, Han J, Isoda H (2013) Acteoside remt type I allergie door de down-regulatie van Ca/NFAT en JNK MAPKsignaling pathways in basofiele cellen. Journal of Natural Medicines In Press
47. Caudrillier A, Hurtel-Lemaire AS, Wattel A, Cournarie F, Godin C, et al. (2010)Strontiumranelaat vermindert receptoractivator van nucleaire factor-kB ligand-geïnduceerde osteoclastische differentiatie in vitro: betrokkenheid van de calciumgevoelige receptor. Moleculaire Farmacologie 78: 569–576.
