Deel 2 Het fenylethanolglycoside-liposoom remt door PDGF geïnduceerde HSC-activering via regulatie van de FAKPI3KAkt-signaleringsroute
Mar 06, 2022
Contactpersoon: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materialen en methoden
4.1. Materialen
CPhG's (fenylethanoïde glycoside uit cistanche)werden gekocht bij Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, China). De inhoud van deechinaceawas meer dan 35 procent, en die van de acteoside was meer dan 16 procent. Lecithine werd gekocht van Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, China). 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycerol-3-fosfocholine (DPPC) en cholesterol werden geleverd door Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, VS). Een vereeuwigde rattenleverstellaatcel werd geleverd door Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, China). Dulbecco's gemodificeerde Eagle's medium (DMEM) werd gekocht van Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, VS). Foetaal runderserum (FBS) werd gekocht bij Gibco Life Technologies (Waltham, MA, VS). Penicilline (100 g/ml) en streptomycine (100 g/ml) waren producten van Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl){ {13}},5-difenyltetrazoliumbromide] (5 mg / ml) werd gekocht bij Sigma (Oakville, ON, Canada). LDH-activiteit werd beoordeeld met behulp van een LDH-assaykit van Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Beijing, China). De FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I en propidiumjodide (PI) / RNase Staining Buffer werden allemaal gekocht bij BD Biosciences (San Diego, CA, VS) en rrPDGF-BB werd geleverd door R&D Systems (Minneapolis, MN, VS). Het TRIzol-reagens werd gekocht van Thermo Fisher Scientific, Inc. De RevertAid First Strand cDNA-synthesekit was het product van Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Litouwen). TB Green Premix Ex Taq TM II werd gekocht bij Takara (Dalian, China). Ripa-pyrolyse-oplossing werd geleverd door Thermo Fisher Scientific, Inc. Proteaseremmer fenylmethylsulfonylfluoride en het breedspectrumfosfataseremmermengsel werden gekocht bij Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, China). Eiwitbanden werden gevisualiseerd door een Pierce ™ ECL Western Blotting-substraat, dat werd geleverd door Invitrogen (Carlsbad, CA, VS). Het mierikswortelenzym dat geit anti-konijn IgG labelt, werd gekocht bij Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, China). De Super Signal West Femto Trial Kit is geleverd door Thermo Fisher Scientific, Inc. Konijnen-anti-p-actine, a-SMA, collageen-1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt en het fosfo-Akt-antilichaam werden allemaal gekocht bij Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Beijing, China). De X-3-FAK en X-3-NC werden gekocht van Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, China). De Lipofectamine 2000 werd geleverd door Invitrogen.
4.2. Bereiding van de CPhG-liposomen
Lecithine, DPPC en cholesterol (1:2:2, m/m/m) werden opgelost in een mengsel van chloroform en methanol (2:1 v/v), geroteerd om een film te vormen bij 49-50 graden, enCPhG's(fenylethanoïde glycoside uit cistanche)(250 g/ml) werden vervolgens toegevoegd. De reactieve oplossing werd continu geroteerd en gehydrateerd, en het fosfolipidemembraan werd overgebracht naar het water om CPG-liposomen te vormen. Het ingekapselde liposoomproces werd herhaald volgens de bovenstaande methoden. Om een uniform liposoom te verkrijgen, werd het ingekapselde liposoom 5 keer geëxtrudeerd met een 0,45 m microporeus membraan en 18-20 keer gefiltreerd met een 0,22 m membraan. De CPG-liposomen werden bij 4 graden bewaard. De deeltjesgrootteverdeling werd gemeten door een laserdeeltjesgrootte-analysator, de deeltjesvorm werd waargenomen door transmissie-elektronenmicroscopie en de geneesmiddelbelading en inkapselingsefficiëntie werden bepaald door HPLC.
4.3. In vitro-afgifte van het CPG-liposoom en CPhG's(fenylethanoïde glycoside uit cistanche)
Het in vitro afgifteprofiel van de CPG-liposomen enCPhG's(fenylethanoïde glycoside uit cistanche) werd uitgevoerd met behulp van de dialysemembraanmethode. Een totaal van 5 ml van elk monster werd overgebracht in een dialysezak met een molecuulgewicht van 14,000 Da. De dialysezak werd ondergedompeld in 20{{10 }} ml PBS-bufferoplossing (pH=6.0) trilde bij 37 graden . Het afgiftemedium (3 ml) werd verwijderd en vervangen door een isopycnische PBS-bufferoplossing (pH=6,0) met geplande tijdsintervallen (0,5,1, 2, 4, 8,12,16, 24 en 48). h). De concentraties van het echinacoside in de CPG-liposomen enCPhG'sin het afgiftemedium werden bepaald door
HPLC. De cumulatieve afgifte (percentage) van de CPG-liposomen enCPhG's(fenylethanoïde glycoside uit cistanche) werd berekend met behulp van de volgende vergelijking (1):
waarbij Cn de geneesmiddelconcentratie in het afgiftemedium op het n-de bemonsteringspunt is, V het volume van het afgegeven medium en W de totale dosis is.
Om de vitro-afgiftekarakteristiek van de beter te begrijpenCPhG(fenylethanoïde glycoside uit cistanche) liposoom enCPhG's, werden drie verschillende modellen toegepast om te passen bij de verkregen afgiftegegevens: (a) het nulde-orde kinetiekmodel, (b) het eerste-orde kinetiekmodel, en (c) het Higuchi-model gegeven in vergelijkingen (2)-(4) :
waarbij Mt/Mo de fractie curcumine is die vrijkomt uit het monster op tijdstip t, en k de afgifteconstante van de verschillende modellen is. De correlatiecoëfficiënt wordt berekend om de mate van passendheid tussen het afgiftemodel en de gegevens te illustreren.
4.4. cytotoxiciteit
Voor de HSC's werd een dichtheid van 1 x 105 cellen/ml uitgeplaat in 96-putjesplaten en men liet ze een nacht groeien bij 37 graden in een 5 procent CO2-incubator. De celvitaliteit is getest op een breed scala aanCPhGliposoomconcentraties (117,79,58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68,1,84, 0,92 en 0,46 g/mL) om de vitaliteit van de testcellen te detecteren en de IC50-waarden te berekenen. Vervolgens werden de cellen gedurende 4 uur bij 37 graden geïncubeerd met 20 L MTT (5 mg / ml in PBS-oplossing). Het paarse MTT-productproduct werd opgelost in een 150 L DMSO en een Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, VS) werd gebruikt om de absorber bij 490 nm te meten. De volgende formule (vergelijking (5)) werd gebruikt om het percentage levensvatbaarheid van de cellen te berekenen:
4.5. Celtoxiciteit van de CPhG-liposomen op HSC's
Cellen werden uitgezaaid in 6-putjesplaten en de toxiciteit van de HSC's werd gemeten met behulp van een LDH-detectiekit. Cellen werden uitgeplaat met een dichtheid van 2 x 105 cellen/putje in 6-putjesplaten bij 37 graden in een incubator met 5 procent CO2. Na een nacht groei werden de cellen behandeld metCPhGliposomen (29,45, 14,72 en 7,36 g/ml). Een blanco (DEME-media) controle werd tegelijkertijd gehandhaafd. Na 24 uur werden de cellen verzameld door trypsine en centrifugeren. Elke groep cellen werd strikt volgens de instructies van de kit toegediend. Vervolgens werd de LDH-leksnelheid van de celkweekvloeistof berekend.
4.6. Apoptose-analyse
Cellen werden gekweekt in 6-putjesplaten met een dichtheid van 2 x 105 cellen/putje bij 37 graden in een incubator met 5 procent CO2. Na een nacht groei werden de cellen behandeld metCPhGliposomen (29,45, 14,72 en 7,36 g/ml), en vervolgens werd de apoptose van HSC's gemeten met behulp van de FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit. De concentraties waren gebaseerd op de IC50 bepaald uit de cytotoxiciteitstest. Een blanco (DEME-media) controle werd tegelijkertijd gehandhaafd. Na 24 uur werden de cellen verzameld door trypsine en centrifugeren en gewassen met PBS en gesuspendeerd in een bindingsbuffer van 500 L. Vervolgens werden de cellen gekleurd met 5 L Annexine V-FITC en 5 卩L PE. Cellen werden 30 minuten in het donker bij kamertemperatuur geïncubeerd en de apoptotische snelheid werd gemeten met behulp van een FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, VS).
4.7. Analyse celcyclus arrestatie
HSC's (2 x 105 cellen / 2 ml / putje) werden 24 uur behandeld metCPhGliposomen bij 29,45, 14,72 en 7,36 ^g/ml in 6-well platen. Een blanco (DEME-media) controle werd tegelijkertijd gehandhaafd. De cellen werden geoogst en gewassen met 1 ml PBS en overnacht gefixeerd met 75 procent ethanol bij 4 graden. De cellen werden vervolgens gecentrifugeerd en opnieuw gesuspendeerd in 500 oplossingen van propidiumjodide (PI)/RNase-kleuringsbuffer bij 37°C gedurende 30 minuten in het donker. Ten slotte werden de cellen gemeten met behulp van een FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson). De verhoudingen van de cellen in de G0/G1-, S- en G2/M-fasen van de celcyclus werden geanalyseerd door de FACS Diva-software (Becton Dickinson).
4.8. Effect van deCPhG(fenylethanoïde glycoside uit cistanche) Liposoom op de PDGF-gemedieerde FAK- en PI3K/Akt-signaleringsroute
4.8.1. Proliferatietest
De HSC-lijnen (1 x 105 cellen/ml) werden uitgeplaat in 96-putjesplaten en men liet ze een nacht groeien bij 37°C in een 5 procent CO2-incubator. Na 24 uur celkweek werden de cellen willekeurig verdeeld in de volgende vijf groepen: een blanco controle (gekweekt in DMEM met alleen 10 procent FBS), PDGF-BB (gekweekt in DMEM met 50 g/L PDGF-BB), aCPhGliposoominterventie (gestimuleerd met medium met 50 昭/mL PDGF-BB 24 uur). Vervolgens werden de cellen behandeld met 29,45, 14,72 en 7,36 Rg/ml CPhG-liposomen. De cellen werden gedurende 24 uur, 48 uur en 72 uur continu gekweekt in de incubator bij 37 graden gedurende 4 uur met 20 rL MTT (5 mg/ml in PBS-oplossing). Het paarse MTT-formazanproduct werd opgelost in 150 rL DMSO en geschat door de absorptie bij 490 nm te meten in een Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Thermo Fisher Scientific, Inc.), en de IC50 werd berekend. Viervoudige monsters werden uitgevoerd voor elke concentratie in vier onafhankelijke experimenten. De volgende formule (vergelijking (6)) berekende het percentage levensvatbaarheid van de cellen:
4.8.2. Kwantitatieve realtime polymerasekettingreactie (qRT-PCR)
Cellen werden gezaaid in {{0}}putjesplaten met een dichtheid van 1 x 105 cellen/ml. Deze groeperingsmethode is hetzelfde als de vorige. Na 24 uur werd het totale RNA uit de gekweekte cellen geëxtraheerd met een TRIzol-reagens. De concentratie en zuiverheid van het RNA werden gemeten bij 260/280 nm met behulp van een ultraviolet-spectrofotometer volgens de standaard OD260/OD280-verhouding van 1.8-2.0. De reverse transcriptiereacties werden omgekeerd getranscribeerd van het RNA met behulp van de RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit. Een TB Green Premix Ex TaqTM II werd gebruikt om genexpressie te meten. De qRT-PCR werd uitgevoerd met behulp van een ABI QuantStudio ™ 6 Flex Real-Time PCR-systeem (Applied Biosystems, Foster City, CA, VS). Primersequenties werden gesynthetiseerd door Sangon Biotech (Shanghai, China) (Tabel 4).
4.8.3. Western Blot-analyse
De totale eiwitten geëxtraheerd uit HSC's in verschillende groepen werden bereid zoals eerder beschreven. In het kort werden de vergelijkbare eiwitten gescheiden via 10% natriumdodecylsulfaat-polyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) en vervolgens overgebracht naar polyvinylideenfluoride (PVDF) membranen (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Duitsland). Vervolgens werden de PVDF-membranen geblokkeerd in 3 procent BSA en een nacht bij 4 C geïncubeerd met de primaire antilichamen. De volgende dag werd HRP-gelabeld geit-anti-konijnen-IgG (1:25, 000 verdunning; 1 uur) toegevoegd. Eiwitbanden werden gevisualiseerd via een Pierce ™ ECL Western Blotting-substraat en afgebeeld met behulp van het FluorChem E Imaging System (Protein Simple, San Francisco, CA, VS), die werden genormaliseerd met -actine als interne controle.
4.8.4. FAK-experimenten met overexpressie
De cellen werden verdeeld in de normale mediumcontrolegroep, de PDGF-BB-stimulatiegroep, de PDGF-BB-stimulatie plus X-3-FAK-groep, de PDGF-BB-stimulatie plus X-3-NC-groep, de PDGF -BB-stimulatie plus X-3-FAK plusCPhGliposoomgroep en de rrPDGF-BB-stimulatie plus X-3-NC plusCPhGliposoom groep. De HSC-lijnen (1 x 105 cellen/ml) werden uitgeplaat in 6-putjesplaten en men liet ze een nacht groeien bij 37 ◦C in een 5 procent CO2-incubator. De volgende dag werden PDGF-BB (gekweekt in DMEM met 50 µg/L PDGF-BB) cellen toegevoegd en gekweekt. Op de derde dag werden pEX-3-FAK en X-3-NC verdund in een antibioticumvrij medium, goed gemengd met lipofectamine 2000, en men liet ze 20 minuten staan bij 37 ◦C voordat ze werden toegevoegd. aan elk putje van de cellen bij 37 ◦C. Na 5 uur te zijn geïncubeerd, werd het medium dat 10% serum bevatte gedurende 48 uur vervangen en op de vijfde dag werd het medium gedurende 24 uur vervangen door de concentratie van 29,45 µg/ml CPhG-liposoom. Vervolgens werd elk putje verzameld op de tweede, derde, vijfde en zesde dag en werden de expressies van de FAK-, PI3K-, Akt-, p-PI3K- en p-Akt-geneiwitten gedetecteerd.
4.9. Statistische analyse
Gegevens werden uitgedrukt als de gemiddelden ± standaarddeviatie (SD). De software SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, VS) werd gebruikt voor statistische analyses. De significantie van het verschil werd berekend met een one-way ANOVA-test en gevolgd door een LSD-test. De vergelijking voor het oplossen van het geneesmiddel werd aangepast door Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, VS).
5. Conclusies
Concluderend tonen onze resultaten aan dat:CPhG(fenylethanoïde glycoside uit cistanche) liposomen remmen de activering van HSC's aanzienlijk, waardoor de ontwikkeling van leverfibrose aanzienlijk wordt afgezwakt door apoptose te verhogen en de celcyclus in HSC's te reguleren. Het remmen van de activering van FAK/PI3K/Akt-signaleringsroutes kan het onderliggende mechanisme zijn waardoor deCPhGliposomen beschermen tegen chronische leverziekte geassocieerd met fibrose. Deze bevindingen bieden nieuwe inzichten in de mechanismen van deze nieuwe geneesmiddelformulering als een antifibrogene kandidaat voor de toekomstige behandeling van leverfibrose. De onderliggende mechanismen zijn echter complexer dan wat hier wordt beschreven, en onze resultaten sluiten de mogelijke betrokkenheid van andere apparaten veroorzaakt door deCPhGliposomen om leverfibrose te behandelen.
Auteursbijdragen:TL, JZ, S.-PY, LM en S.-LZ bedachten en ontwierpen de experimenten. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM en X.-YY analyseerden de gegevens. S.-LZ en JZ schreven het manuscript. TL, LM en JZ hebben het manuscript beoordeeld. Alle auteurs hebben het definitieve manuscript gelezen en goedgekeurd.
Financiering:Dit onderzoek werd gefinancierd door de National Natural Science Foundation of China, subsidienummer 81560628.
Dankbetuigingen:Dit werk werd financieel ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nr. 8156140127). De auteurs willen Jun Zhao en Xin Wang oprecht bedanken voor hun verbetering van het schrijven van dit artikel.
Belangenverstrengeling:De auteurs melden geen belangenverklaringen.
Referenties
1. Zhang, H.; Zon, D.; Wang, G.; Cui, S.; Veld, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptine verlicht leverfibrose door onderdrukking van geactiveerde leverstellaatcellen. Biochem. Biofysica. Onderzoek gemeenschappelijk 2019,511, 387-393. [Kruisref]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Leverfibrose: pathofysiologie, pathogenetische doelen en klinische problemen. Mol. Aspecten Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Herstellende effecten van astaxanthine-hyaluronan-nanoaggregaten tegen retrorsine-CCl (4)-geïnduceerde leverfibrose en necrose. Moleculen 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Zon, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla bevordert door hoge glucose en PDGF geïnduceerde activering van hepatische stellaatcellen door autofagie te induceren via de CaMKKp / ERK-signaleringsroute. Toxicol. Let. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE De rol van de hepatische stellaatcel (HSC)-afgeleide cytokines bij leverontsteking en immuniteit. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosafenylethanoïde glycosiden induceren apoptose in Eca-109-cellen via de mitochondria-afhankelijke route. Oncol. Let. 2019,17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Jij, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Fenylethanol Glycosiden van:Cistanche tubulosaOnderdruk hepatische stellaatcelactivering en blokkeer de geleiding van signaalroutes in TGF-beta1/smad als potentiële middelen tegen leverfibrose. Moleculen 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Jij, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Preventieve effecten van fenylethanoïde glycosiden vanCistanche tubulosaop door runderserumalbumine geïnduceerde leverfibrose bij ratten. DARU J. Pharm. Wetenschap. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. De valefficiëntie en de absorptie van vier soorten proliposomen. J. Xin Jiang Med. universiteit 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bio-adhesief medicijnafgiftesysteem en de toepassing ervan in de traditionele Chinese geneeskunde. Kin. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Lang, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Nitroimidazolderivaat opgenomen liposomen voor door hypoxie veroorzaakte medicijnafgifte en verbeterde therapeutische werkzaamheid in van de patiënt afgeleide tumorxenotransplantaten. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Lever-targeting liposoom medicijnafgiftesysteem en de voortgang van het onderzoek bij leverziekten. Wereld kin. J. Digest. 2016, 24.4238. [Kruisref]
13. Zhou, BH; Bruin, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, HW Betrokkenheid van de PI3K / AKT-signaleringsroute bij door fluoride geïnduceerde apoptose in C2C12-cellen. Chemosfeer 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinacoside stimuleert celproliferatie en voorkomt celapoptose in intestinale epitheliale MODE-K-cellen door opwaartse regulering van transformerende groeifactor-p1-expressie. J. Farm. Wetenschap. 2012, 118, 99-108. [Kruisref]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Anti-nociceptieve en ontstekingsremmende activiteit veroorzaakt door:Cistanche deserticolabij knaagdieren. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [Kruisref]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Zo, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaextract verhoogt de botvorming in osteoblasten. J. Farm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. Effect vanCistanches HerbaWaterig extract op botverlies bij ovariëctomie ratten. Int. J. Mol. Wetenschap. 2011, 12, 5060-5069. [Kruisref]
18. Lu, M.-C. Studies naar het kalmerende effect vanCistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [Kruisref]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Antivermoeidheidsactiviteit van fenylethanoïde-rijk extract vanCistanche deserticola. fytother. Onderzoek 2010, 24, 313-315. [Kruisref]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Neuroprotectieve effecten van echinacoside in het muis MPTP-model van de ziekte van Parkinson. EUR. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [Kruisref]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Geacyleerde fenylethanoïde aminoglycosiden met hepatoprotectieve activiteit van de woestijnplant Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Preventie van Cistanche salsa-extract op leverfibrose geïnduceerd door koolstoftetrachloride bij ratten. Kin. Kruiden Med. 2013, 5.199-204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. De bereiding van Cistanche fenylethanoïde glycosiden vloeibare prolipo somes: geoptimaliseerde formulering, karakterisering en prolipo enkele druppelende pillen in vitro en in vivo evaluatie. EUR. J. Farm. Wetenschap. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Leverfibrose beïnvloedt de targeting-eigenschappen van medicijnafgiftesystemen naar macrofaagsubsets in vivo. Biomaterialen 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Zon, H.; Li, S.; JEP.; Gallons, H. Samenstellingsontwerp en medische toepassing van liposomen. EUR. J. Med. Chem. 2019,164, 640-653. [Kruisref]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofen-geladen ethanolische liposoomdeeltjes voor biomedische toepassingen. J. Microbiol. Methoden 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Effect van oppervlaktelading op de grootte-afhankelijke cellulaire internalisatie van liposomen. Chem. Fys. Lipiden 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Zon, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Met galangine geladen, levergerichte liposomen: optimalisatie en hepatoprotectieve werkzaamheid. J. Drugslevering. Wetenschap. technologie. 2018, 46, 339-347. [Kruisref]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Leverfibrose: het is tijd om te gaan met hepatische stellaatcel-specifieke therapeutische doelen. Hepatobiliaire pancreasdis. Int. 2018,17,192-197. [Kruisref]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Bruin, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Stamcelspecifieke mechanismen zorgen voor genomische trouw binnen HSC's en bij veroudering van HSC's. Celvertegenwoordiger 2015,13, 2412-2424. [Kruisref]
31. Brea, R.; Beweging, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 induceert apoptose van hepatische stellaatcellen en vermindert leverfibrose bij muizen door miR-23a-5p en miR-28a-5p te verlagen. Biochim. Biofysica. Acta Biophys. Incl. Fotosynthese. 2018,1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Verschillen in celcyclusstatus liggen ten grondslag aan transcriptionele heterogeniteit in het HSC-compartiment. Celvertegenwoordiger 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohammed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Rosmarinezuur verzwakt hepatische fibrogenese via onderdrukking van hepatische stellaatcelactivatie / proliferatie en inductie van apoptose. Aziatische Pac. J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Effecten van endotheliale voorlopercellen op proliferatie en biologische functie van hepatische stellaatcellen onder schuifspanning. Kin. J. Appl. Fysiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Geactiveerde hepatische stellaatcellen bevorderen de progressie van resterend hepatocellulair carcinoom na verhitting van autofagische overleving naar proliferatie. Int. J. Hyperthermie 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Gezongen, Kentucky; Choi, DH; Cho, EH-succinaat induceert hepatische fibrogenese door activering, proliferatie en migratie te bevorderen en apoptose van hepatische stellaatcellen te remmen. Biochem. Biofysica. Onderzoek gemeenschappelijk 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mechanismen van leverfibrose. clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [Kruisref]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16 - Mechanismen van leverfibrose. In Comprehensive Toxicology, 3e druk; McQueen, CA, red.; Elsevier: Oxford, VK, 2018; blz. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, ik.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Expressiepatronen van PDGF-A, -B, -C en -D en de PDGF-receptoren a en |3 in geactiveerde leverstellaatcellen (HSC) van ratten. Cytokine 2005, 31, 349-357. [Kruisref]
