Contact: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Klik hier voor deel 1

Discussie

In deze studie werden fenylethanoïde glycosiden verkregen uitCistanche tubulosa | had geen invloed op de levensvatbaarheid van de cel op RBL-2H3-cellen en KU812-cellen bij de behandelingen van 1,0-10,0 μg/ml. Maaracteosidewas cytotoxisch bij de behandelingen van 100,0 μg/ml (Fig. 2B), zoals is gemeld door Saracoglu et al. [30] die hebben aangetoond datacteosidegeïsoleerd vanPhlomic Armeniëcaen Scutellaria salviifolia toonden cytotoxische effecten op dRLh-84, S-180, P-388/D1 cellijnen met het IC₅₀30-221 μg/ml bij verschillende celnummers. Ons resultaat suggereerde dat het remmende effect vanacteosideop de levensvatbaarheid van de cel bij behandeling met 100 μg/ml, kan worden beïnvloed door de apoptotische activiteit.

De onmiddellijke allergische reactie is betrokken bij veel allergische ziekten zoals astma, allergische rhinitis en sinusitis. Mestcellen spelen een cruciale rol bij inflammatoire en onmiddellijke allergische reacties. Onze gegevens tonen aan dat het acteoside het hoogste remmende effect heeft op de β-hexosaminidaseafgifte van IgE-gesensibiliseerde, antigeen-gestimuleerde RBL-2H3-cellen in vergelijking met andere fenylethanoïde glycosiden bij 1,0 μg / ml behandeling (fig. 3). Het remmende effect van acteoside op β-hexosaminidaseafgifte bij behandeling met 10,0 μg/ml was lager dan dat bij behandeling met 1,0 μg/ml. Zoals Sugisawa et al. [31] hebben aangetoond, kan dit worden bijgedragen aan H₂O₂inductie bij hoge concentraties acteoside_,die kunnen worden gereguleerd calciumsignalen en degranulatie op de RBL-2H3-cellen [32], beïnvloed tot β-hexosaminidaseafgifte bij 10,0 μg / mlacteosidebehandeling.

Cistanche deserticola heeft vele effecten, klik hier om meer te weten

De degranulatie van mestcellen is nauw verwant aan [Ca²⁺]Ik. De remming van Ca²⁺instroom door anti-allergische geneesmiddelen speelt een cruciale rol bij de onderdrukking van degranulatie in mestcellen. [33-34]. Onze resultaten geven aan dat de intracellulaire [Ca²⁺]Ikhet niveau lager was in de met acteoside behandelde, DNP-BSA-gestimuleerde RBL-2H3-cellen (Fig. 4), wat consistent is met andere rapporten [34-35], en deze resultaten komen overeen met die van fig. 3. We concluderen uit deze observaties dat de afname van intracellulair [Ca²⁺]Ikis betrokken bij het remmende effect vanacteosideop β-hexosaminidase release. Stikstofmonoxide (NO) en H₂O₂zijn twee belangrijke reactieve zuurstofsoorten (ROS) die bekend zijn in de regulatie van calciumsignaal en degranulatie van mestcellen. ROS zijn noodzakelijk voor de afscheiding van β-hexosaminidase en calciuminstroom, en nicotinamide-adenine dinucleotidefosfaat (NADPH) oxidase is voornamelijk verantwoordelijk voor ROS-productie in de IgE-gemedieerde RBL-2H3-cellen [29, 32]. De aanhoudende verhoging van cytosolisch calcium door middel van calciuminvoer in de winkel werd volledig afgeschaft toen de ROS-productie werd geblokkeerd. Bovendien heeft ROS enige relatie met ß-hexosaminidase en histamineafgifte door eiwitkinase C (PKC) activering en IgE-stimulatie in RBL-2H3-cellen [34]. Bovendien vonden Suzuki et al. [36] dat er een significante correlatie was tussen remmingseffecten op histamineafgifte en 1, 1-difenyl-2-piraterij l-hydroxyl (DPPH) of superoxide-anion radicale opruimactiviteiten van curcumine-gerelateerde anti-oxidant verbindingen. Aan de andere kantacteosideheeft vrije radicalen opruimende eigenschappen op NO radicalen en DPPH radicalen [9, 37]. Ook heeft acteoside aaseteractiviteit aangetoond in geactiveerde menselijke leukocyten [38]. Een van de mogelijkheden is dat het remmende effect van acteoside op intracellulaire calciumafgifte kan worden beïnvloed door de vrije radicalen opruimende activiteiten van NADPH-oxidase-activiteiten.

Acteoside dosisafhankelijk remde histamineafgifte op A23187 plus PMA-gestimuleerde KU812-cel (fig. 4A).Acteosidegeremde glutamaat-geïnduceerde intracellulaire Ca²⁺instroom met als gevolg overproductie van NO en verminderde vorming van ROS [37]. Zowel PKC als Ca²⁺signaleringsroutes zijn nodig voor histamine- en leukotriënen die vrijkomen uit mestcellen en knaagdiersystemen [39]. We veronderstelden datacteosidekan een remmend effect hebben op de afgifte van histamine via Ca²⁺toevloed. Voor dit doel gebruikten we A21387 plus PMA om KU812-cellen te stimuleren en toonden we het histamineafgifteremmingseffect aan metacteoside. Dit resultaat ondersteunde onze hypothese dat acteoside de histamineafgifte uit KU812-cellen kan verminderen door remming van Ca²⁺instroom of PKC-activering.

Er wordt zonder twijfel aangenomen dat stimulatie van mestcellen met verbinding 48/80 de activering van een signaaltransductieroute initieert, die leidt tot histamineafgifte. Senyshyn et al. [40] identificeerden recombinante G-subeenheid duidelijk synergetische fosfolipase D-activering door verbinding 48/80 in gepermeabiliseerde basofiele cellen. Verbinding 48/80-geïnduceerde secretie is geassocieerd met een voorbijgaande toename van cytosolische Ca²⁺. Deze secretie werd geblokkeerd door de calciumchelator en PKC-remmer. In de huidige studie hebben we waargenomen datacteosideremde de verbinding 48/80-geïnduceerde degranulatie uit basofiele cellen. Maar het remmende effect van acteoside op histamineafgifte bij 0,1 μg / ml behandeling was hoger dan die behandeling van 1,0-10,0 μg / ml (fig. 4B). Zoals Lau et al. [41] hebben aangetoond, is het remmende effect vanacteosideop verbinding 48/80 geïnduceerde histamineafgifte kan betrokken zijn bij het anti-ontstekingseffect van acteoside tegen vasculaire permeabiliteit-geassocieerd oedeem. Mogelijk is deacteosidekan verschillende manieren hebben om de afgifte van chemische mediatoren uit basofiele cellen te remmen, wat de complexiteit van de werking ervan suggereert. Om echter het mechanisme van remming van de histamineafgifte van dit recept te onthullen, moeten verdere studies worden uitgevoerd.

Onder cytokines geproduceerd door basofiele cellen zijn TNF-α, IL-4, IL-13 en IL-5 de belangrijkste moleculen. De vermindering van pro-inflammatoire cytokines uit mestcellen of basofiele cellen is een van de belangrijkste indicatoren van verminderde allergische symptomen [42]. Met betrekking tot TNF-α wordt de productie voornamelijk gereguleerd door Ca²⁺instroom, maar het afgifteproces wordt gereguleerd door aanvullende mechanismen waarbij mogelijk PKC in KU812-cellen wordt geactiveerd. Remming van [Ca²⁺]Ikinflux is betrokken bij de expressie van cytokines in mestcellen en basofiele cellen [34, 43]. Ons resultaat toonde aan dat 1,0 en 10,0 μg / mlacteosideverminderde TNF-α en IL-4 productie van A23187 plus PMA stimuleerde KU812 cellen na behandeling gedurende 16 uur. Acteoside kan de productie van TNF-α en IL-4 remmen door de [Ca²⁺] I niveau in A23187 plus PMA gestimuleerde KU812 cellen. Bovendien suggereerden onze resultaten dat deacteosideheeft een anti-allergisch effect in de late fase. Bevestiging van het effect van acteoside met behulp van FcεRI die mestcellen of basofiele cellen tot expressie brengt, is noodzakelijk voor de toekomst.

Concluderend melden we voor het eerst dat acteoside, echinacoside encistanosideEen geëxtraheerde uitCistanche tubulosa | kan de afgifte van β-hexosaminidase uit IgE-gesensibiliseerde BSA-gestimuleerde RBL-2H3-cellen remmen. Bovendien kan acteoside de histamineafgifte, TNF-α en IL-4-productie remmen op een dosisafhankelijke manier op A23187 plus PMA-gestimuleerde KU812-cellen. Deze resultaten suggereren datacteosidezou een goede kandidaat kunnen zijn voor de therapeutische behandeling van verschillende allergische aandoeningen. Het gedetailleerde mechanisme achter het anti-allergische effect van acteoside is het onderwerp van een toekomstige studie.

Verwijzingen

1Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Fenylethanoïde aminoglycosiden en geacyleerde oligosugars met vasorelaxante activiteit vanCistanche tubulosa |. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475

2Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, Miyase T, Ueno A, Usmanghani K,Ahmad M. Nieuwe fenylethanoïde glycosiden vanCistanche tubulosa | (SCHRENK) HAAK. f. I. Chem Pharm Bull 1987; 35: 3309–3314

3Tanaka J, Su MH Sjida H. Effect vanCistanche tubulosa | extract op verschillende hersenziekten. Food Style 21 2008; 12: 24–26

4Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Anti-aging functies vanCistanche tubulosa |extract. Food Style 21 2008; 12: 27–29

5Tanaka J, Kikuchi M, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Schoonheid en haargroei functies van Cistanche tubulosa extract. Food Style 21 2008; 12: 29–32

6Tanaka J, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Vet metaboliserend effect vanCistanche tubulosa | extract. Food Style 21 2008; 12: 30–33

7Yoshizawa F, Deyama T, Takizawa N, Usmanghani K, Ahmad M. De bestanddelen van Cistanche tubulosaSchrenk (Hook) f. I I. Isolatie en structuur van een nieuw fenylethaanglycosiden en een nieuw neolignanglycosiden. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930

8Xiong Q, Tezuka Y, Kaneko T, Li H, Tran LQ, Hase K,Namba T, Kadota S. Remming van stikstofmonoxide door fenylethanoïden in geactiveerde macrofagen. Eur J Clin Pharmacol 2000; 14: 137–144

9Sahpaz S, Garbacki N, Tits M, Bailleul F. Isolatie en farmacologische activiteit van fenylpropanoïde esters uit Marrubium vulgare. J Ethnopharmacol 2002; 79: 389–392

10Hij WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ,TuPF. Echinacoside veroorzaakt endotheelafhankelijke ontspanning in aortaringen van ratten via een NO-cGMP-route. Planta Med 2009; 75: 1400–1404

11Zhang HQ,WengXJ, Chen LL, Li X. Effect van Cistanche tubulosa (Schenk) Whight acteoside op telomerase activiteit en immuniteit van ouder wordende muizen. Chinese J Pharmacol Toxicol 2008; 22: 270–273

12Lee JH, Lee JY, Kang HS, Jeong H, Moon CH, Whang WK,Kim SS, Sim C. Het effect van acteoside op histamine afgifte en arachidonzuur afgifte in RBL-2H3 mestcellen. J Arch Pharm Res 2006; 29: 508–513

13Diaz AM, Abad MJ, Fernandez L, Silvan AM, Santos JD, Bermejo P. Fenylpropanoïde glycosiden van Scrophularia scorodonia: in vitroontstekingsremmendactiviteit. Life Sci 2004; 74: 2515–2526

14Ma Beaven, Metzger H. Signaaltransductie door Fc-receptoren: de FcεRI-zaak. Immunol Vandaag 1993; 14: 222–226

15Srivastava D, Arora N, Singh BP.Huidige immunologische benaderingen voor de behandeling van allergische rhinitis en bronchiale astma. Inflamm Res 2009; 58: 523–536

16 Pelletier C, Guerin-Marchand B, Iannascoli F, Marchand B, David AW, Blank U. Specifieke signaalroutes in de regulatie van TNF-α mRNA-synthese en TNF-α secretie in RBL-2H3 mestcellen gestimuleerd door de hoge-affiniteit IgE receptor C. Inflamm Res 1998; 47: 493–500

17Schiwartz LB, Lewis RA, Seldin D, Austen KF. Zure hydrolasen en tryptase uit secretoire korrels van gedispergeerde menselijke longmestcellen. J Immunol 1981; 126: 1290–1294

18Cheong H, Choi EJ, Yoo GS, Kim KM, Ryu SY. Desacetylmatricarin, een anti-allergische component vanTaraxacum Platycerium. Planta Med 1998; 64: 577–578

19Ortega E, Schweitzer-Stenner R, Pecht I. Mogelijke oriëntatiebeperkingen bepalen secretoire signalen geïnduceerd door aggregatie van IgE-receptoren op mestcellen. EMBO J 1988; 7: 4101–4109

20Funaba M, Ikeda T, Abe M. Degranulatie in RBL-2H3 cellen: regulatie door calmoduline route. Cell Biol Int 2003; 27: 879–885

21Ohno Y, Tanno K, Yamauchi K, Takishima T. Genexpressie en productie van tumornecrosefactor door een basofiele leukemiecellijn van een rat (RBL-2H3) met IgE-receptor triggering. Immunologie 1990; 70: 88–93

22Butterfield JH, Weiler D, Dewald G, Gleich GJ. Oprichting van een onrijpe mestcellijn van een patiënt met mestcelleukemie. Leuk Res 1988; 12: 345–355

23Hosoda MYamaya ·M, SuzukiT,Yamada ·N, Kamanaka M, Sekizawa K, Butterfield JH,Watanabe T,Nishimura H, Sasaki H. Effecten van rhinovirusinfectie op histamine- en cytokineproductie door cellijnen van menselijke mestcellen en basofielen. J Immunol 2002; 169: 1482–1491

24Galli SJ, Kalesnikoff J, Grimbaldeston MA, Piliponsky AM, Williams CM, Tsai M. Mestcellen als "afstembare" effector en immunoregulerende cellen: recente ontwikkelingen. Annu Rev Immunol 2005; 23: 749–786

25Galli SJ, Gordon JR, Wershil BK. Cytokineproductie door mestcellen en basofielen. Huidige Opin Immunol 1991; 3: 865–872

26Yamada ·P,Isoda H, Han J,TaloretWC-PAPIERAbeY. Remmend effect van fulvinezuur geëxtraheerd uit CanadeesSphagnumturf op chemische mediator afgifte door RBL-2H3 en KU812 cellen. Biosci Biotechnol Biochem 2007; 71: 1294–1305

27Aase F, Arna, S. Dantrolene voorkomt glutamaat cytotoxiciteit en Ca⁺²afgifte uit intracellulaire winkels in gekweekte cerebrale corticale neuronen. J. Neurochemicus 1991; 56: 1075–1078

28Yamada P, Zarrouk M, Kawasaki K, Isoda H, Remmend effect van verschillende Tunesische olijfolie op de afgifte van chemische mediatoren en cytokineproductie door basofiele cellen. J Ethnopharmacol 2008; 116: 279–287

29Kim Y, Lee YS, Hahn JH, Choe J, Kwon HJ, Ro JY, Jeoung D.Hyaluronzuur richt zich op CD44 en remt FcεRI-signalering met PKCδ, Rac1, ROS en MAPK om een anti-allergisch effect uit te oefenen. Mol Immunol 2008; 45: 2537–2547

30Saracoglu I, Inoue M, Calis I, Ogiwara Y. Studies naar bestanddelen met cytotoxische en de cytostatische activiteit van twee Turkse medicinale plantenPhlomis ArmeniacaenScutellaria salviifolia |. Biol Pharm Bull 1995; 18: 1396–1400

31Sugisawa · Een Umegaki K. Fysiologische concentratie van (-)-epigallocatechine -3-O-gallate (EGCg) voorkomt chromosomale schade veroorzaakt door reactieve zuurstofsoorten in WIL2-NS-cellen. J Nutr 2002; 132: 1836–1839

32Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C. Fc epsilon RI signalering van mestcellen activeert intracellulaire productie van waterstofperoxide: rol in de regulatie van calciumsignalen. J Immunol 2003; 171: 6119–6127

33Oka T, Sato K, Hori M, Ozaki H, Karaki H. FcεRI cross-linking-geïnduceerde actineassemblage bemiddelt calciumsignalering in RBL-2H3 mestcellen. Br J Pharmacol 2002; 136: 837–846 34Tasaka K, Mio M, Okamoto M. Intracellulaire calciumafgifte geïnduceerd door histamine-releasers en de remming ervan door sommige anti-allergische geneesmiddelen. Ann Allergie 1986; 56: 464–469

35Horiuti TM Zaitsu · M, Lambert KC Grady JJ Estes DM Curran EM Brooks Bv, WatsonCS, Goldblum RM. Oestrogenen versterken de synthese en afgifte van mediatoren van allergie uit mestcellen door intracellulair calcium te verhogen. J Allergie Clin Immunol 2005; 115: 189

36Suzuki M, NakamuraT,Iyoki S, Fujiwara A,WatanabeY,Mohri K. Isobe K, Ono K,Yano S. Opheldering van anti-allergische activiteiten van curcumine-gerelateerde verbindingen met een speciale verwijzing naar hun anti-oxidatieve activiteiten. Biol Pharm Bull 2005; 28: 1438–1443

37Koo KA, Kim SH, Oh TH, Kim YC. Acteoside en zijn aglyconen beschermen primaire culturen van corticale cellen van ratten tegen glutamaat-geïnduceerde excitotoxiciteit. Life Sci 2006; 79: 709–716

38Lin LCWangYH, Hou YC, Chang S, LiouKTChou YCWangWYShen YC. Het remmende effect van fenylpropanoïde glycosiden en iridoïde glucosiden op de productie van vrije radicalen en b2-integrine-expressie in menselijke leukocyten. J Pharm Pharmacol 2006; 58: 129–135

39Kim M, Shichijo M, Miura T, Serizawa I, Inagaki N, Nagai H. Ca²⁺en eiwitkinase C signalering voor histamine en sulfidoleukotrienen vrijkomen uit door de mens gekweekte mestcellen. Biochem Biophys Res Commun 1999; 257: 895–900

40Senyshyn J, Baumgartner RA, Beaven MA. Quercetine sensibiliseert RBL-2H3 cellen voor polybasische mestcelsecretagogen door verhoogde expressie van G_IkGTP-bindende eiwitten gekoppeld aan een fosfolipase C-signaalroute. J Immunol 1998; 160: 5136–5144

41Lau CW, Chen ZY, Wong CM, Yao XQ, He ZD, Xu HX,Huang Y. Verzwakt endotheel-gemedieerde ontspanning door acteoside in rattenaorta: rol van endotheel [Ca²⁺] I en stikstofmonoxide/cyclische GMP-route. Life Sci 2004; 75: 1149–1157

42Paul WE, Seder RA, Plaut M. Lymfokine- en cytokineproductie door FcεRI-cellen. Adv Immunol 1993; 53: 1–29

43Jeong HJ, Hong SH, Lee DJ, Park JH, Kim KS, Kim HM. Rol van Ca²⁺op TNF-α en IL-6 secretie uit RBL-2H3 mestcellen. Cel Signaal 2002; 14: 633–639

Cistanche tubulosa extract