Reeds bestaande T-celimmuniteit voor SARS-CoV-2 bij niet-blootgestelde gezonde controles in Ecuador, zoals gedetecteerd met een COVID{4}} Interferon-Gamma Release Assay

ABSTRACT

Achtergrond: Studies van T-cel immuunresponsen tegen SARS-CoV-2 zijn belangrijk voor het begrijpen van de immuunstatus van individuen of populaties. Hier gebruiken we een eenvoudige, goedkope en snelle volbloedstimulatietest - een Interferon-Gamma Release Assay (IGRA) - om de immuniteit van T-cellen tegen SARS-CoV-2 bij herstellende COVID-19-patiënten te bestuderen en niet-blootgestelde gezonde contacten uit Quito, Ecuador. Methoden: De productie van interferon-gamma (INF-g) werd gemeten in het gehepariniseerde bloed van herstellende en niet-blootgestelde personen na stimulatie gedurende 24 uur met het SARS-CoV-2 Spike S1-eiwit, het Receptor Binding Domain (RBD)-eiwit of respectievelijk het Nucleocapside (NP) eiwit. De aanwezigheid van IgG-RBD-eiwitantilichamen in beide onderzoeksgroepen werd bepaald met een "in-house" ELISA. Resultaten: zoals gemeten met INF-g-productie, had 80 procent van de herstellende COVID{20}}-patiënten, allemaal IgG-RBD-seropositief, een sterke T-celrespons.

Onverwacht vertoonde echter 44 procent van de niet-blootgestelde gezonde controlepersonen, allemaal IgG-RBD-seronegatief, een sterke virusspecifieke T-celrespons met de COVID{4}} IGRA, waarschijnlijk vanwege eerdere blootstelling aan verkoudheidsveroorzakende coronavirussen of andere virale of microbiële antigenen. Conclusie en discussie: Het hoge percentage niet-blootgestelde gezonde proefpersonen met een reeds bestaande immuniteit suggereert dat een deel van de Ecuadoriaanse bevolking waarschijnlijk SARS-CoV-2-reactieve T-cellen heeft. Aangezien de IGRA-techniek eenvoudig is en gemakkelijk kan worden opgeschaald voor onderzoeken waarbij grote aantallen patiënten nodig zijn, kan deze COVID{10}} IGRA dienen om te bepalen of de respons met alleen T-cellen een beschermende immuniteit tegen SARS-CoV vertegenwoordigt -2 infectie in een populatieonderzoek. © 2021 De auteurs. Uitgegeven door Elsevier Ltd namens de International Society for Infectious Diseases.

Tegelijkertijd, wanneer onze immuniteit laag is, zijn er veel manieren om de immuniteit te verbeteren, de inname van voedsel dat de immuniteit kan versterken, zoals cistanche, de polysacchariden, eiwitten, aminozuren en andere stoffen in cistanche kunnen vaak het lichaam reguleren.immune systeem.

Klik op cistanche tubulosa-extractpoederproduct

Invoering

De immuunrespons op SARS-CoV-2-infectie omvat niet alleen de productie van antilichamen, maar de infectie veroorzaakt ook een T-celreactie bij patiënten (Lipsitch et al., 2020, Ni et al., 2020). Over het algemeen wordt de aanwezigheid en omvang van een specifieke geheugen-T-celrespons op deze coronavirusinfectie uitgevoerd met een ELISPOT-assay door het aantal lymfocyten vast te stellen dat IFN-g produceert na stimulatie met ziektespecifieke antigenen of peptiden (Ni et al., 2020, Pai et al., 2014, Abate et al., 2013, Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al., 2020, Sekine et al., 2020).

Voor deze techniek worden perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's) geïsoleerd uit vers gehepariniseerd bloed door dichtheidsgradiëntcentrifugatie; de secretie van cytokines door individuele T-cellen wordt gekwantificeerd met een microscoop of met een speciaal apparaat – de ELISPOT-plaatlezer. De ELISPOT-assay is een "uitsluitend voor onderzoekslaboratoria"-techniek die zeer arbeidsintensief, technisch veeleisend, relatief duur is en niet gemakkelijk kan worden gebruikt in een klinisch laboratorium of wordt toegepast in populatiegebaseerde studies. Vanwege de kosten, infrastructuur en laboratoriumvereisten die nodig zijn om de test uit te voeren, kan het gebruik ervan in omgevingen met beperkte middelen, zoals Ecuador, minimaal zijn.

Cellulaire immuunresponsen kunnen ook worden bepaald met een eenvoudigere test: een interferon-gamma release assay (IGRA). Deze assay, een in vitro bloedtest, kwantificeert door T-cellen uitgescheiden cytokines (d.w.z. gamma-interferon (IFN-g); andere cytokines zoals TNF of IL-2 kunnen echter ook worden gekwantificeerd) na stimulatie van het volbloed (niet alleen de geïsoleerde lymfocyten) met specifieke antigenen (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013). Het uitgescheiden cytokine IFN-g wordt gemeten met een ELISA-assay, een gemakkelijk verkrijgbare techniek in de meeste laboratoria, en de resultaten worden uitgelezen met een ELISA-plaatlezer. IGRA's hebben een toepassing gevonden in het klinische laboratorium en worden gebruikt om een ​​latente infectie met Mycobacterium tuberculosis (MTB) vast te stellen, evenals om cytomegalovirus (CMV)-specifieke celgemedieerde immuniteit te meten en CMV-infectie te voorspellen bij ontvangers van transplantaties (Pai et al. , 2014, Abate et al., 2013). Deze IGRA-testen zijn uitgebreid geëvalueerd en hebben, vergeleken met de ELISPOT-assay, vergelijkbare mogelijkheden laten zien voor het voorspellen van MTB- of CMV-infectie. Bovendien zijn er verschillende commerciële en FDA- of CE-gemarkeerde assays beschikbaar om immuniteit tegen tbc of CMV te detecteren, die op grote schaal worden uitgevoerd.

In de huidige studie onderzoeken we het gebruik van een COVID-19 IGRA en beoordelen we de omvang van IFN-g-afgifte bij herstellende COVID-19-patiënten en gezonde COVID-19-naïeve controles als reactie op specifieke antigenen van het SARS-CoV-2-virus: het RBD-eiwit; het S1-deel van het Spike-eiwit; of het Nucleocapside (N) eiwit. Daarnaast bepalen we de aanwezigheid van SARS-CoV-2-specifieke IgG-antilichamen bij die deelnemers met een "in-house" ELISA (Amanat et al., 2020, Guevara et al., 2021). We laten zien dat een aanzienlijk percentage van niet-blootgestelde donoren SARS-CoV-2reactieve T-cellen bezit, en we bespreken deze resultaten.

Materiaal en methodes

Herstellende COVID-19-patiënten, gezonde controles en de setting

Dit onderzoek is uitgevoerd in Quito, Ecuador, in september 2020. Er zijn geen statistische methoden gebruikt om de steekproefomvang vooraf te bepalen. Tabel 1 toont de kenmerken van de 32 patiënten in dit onderzoek: dertien herstellende COVID-19-patiënten, allemaal met niet-ernstige COVID-19-symptomen/tekenen en een positieve RT-PCR-diagnose in juni 2020; en 17 niet-blootgestelde gezonde controles. Deze gezonde controles waren tijdens de pandemie uiterst voorzichtig geweest, vermeden contact met andere mensen en meldden zelf geen van de typische tekenen en symptomen van COVID-19 tijdens de pandemie, zoals koorts, een aanhoudende hoest, of verlies van reuk of smaak. Ook werden twee asymptomatische SARS-CoV-2-dragers in dit onderzoek opgenomen. Deze twee proefpersonen vertoonden nooit symptomen of tekenen van de ziekte van COVID{13}}; de RT-PCR-techniek werd echter in juni 2020 op hen uitgevoerd als vereiste voor een werkvergunning en resulteerde in positieve diagnoses.

serologie

Serologie en IGRA's voor alle patiënten en controles werden uitgevoerd tijdens de laatste twee weken van september 2020, drie maanden na de RT-PCR-diagnose van de herstellende patiënten. Om de aanwezigheid van coronavirus-specifieke IgG-antilichamen in onze onderzoeksgroep te bepalen, werd een "in-house" SARS-CoV-2 Receptor Binding Domain (RBD) IgG ELISA (9, 10) gebruikt.

Interferon Gamma Release Assay (IGRA)

Voor de IGRA werd een gehepariniseerd bloedmonster genomen (4 ml) en verdeeld in aliquots van 250 ml en gestimuleerd met respectievelijk 2 mg/ml van het RBD-eiwit (isolatieprocedure vanaf referentie 9) of 2 mg/ml van het in de handel verkrijgbare Nucleocapsid (N)-eiwit of Spike (S1)-eiwit (ViroGen, catalogusnummers: respectievelijk 00,221-V en 00,226-V). Een dosis-concentratie-responscurve met bloed van IGRA-positieve en IGRA-negatieve patiënten werd gebruikt om de optimale concentratie van de antigenen voor stimulatie in de IGRA te bepalen. Bij 2 ug/ml werd een maximale IFN-g-respons gevonden in het bloed van COVID{15}}-proefpersonen zonder stimulatie bij de niet-geïnfecteerde controles. Voor elke deelnemer was een niet-gestimuleerde controle (NIL) opgenomen en we hebben een bloedmonster van 250 ml getest met het mitogeen fytohemagglutinine (PHA), een positieve controle om de cytokine-responssnelheid van het bloedmonster te beoordelen. De stimulatie vond plaats in een 96-elisa-plaat met platte bodem met putjes bij 37 °C gedurende 24 uur. Er werd plasma geoogst en de productie van IFN-g werd bepaald met een menselijke IFN-g ELISA (MaxTM Standard Set Biolegend cat. nr. 430.101).

Resultaten

De RBD IgG ELISA toonde aan dat alle COVID{0}}-symptomatische patiënten (RT-PCR-positief) drie maanden na de RT-PCR-diagnose positief waren voor IgG-antilichamen tegen het RBD-eiwit. De twee asymptomatische RT-PCR-positieve patiënten en alle gezonde niet-blootgestelde controlepatiënten waren seronegatief met deze ELISA (zie tabel 1). De resultaten van volbloedstimulatie in de COVID-19 IGRA-test worden weergegeven in afbeelding 1. Sterke inductie van IFN-g-productie werd gevonden bij 80 procent van de COVID-19 symptomatische patiënten met alle drie de antigenen, maar het N-eiwit en het S-eiwit waren de krachtigste stimulatoren van een IFN-g-respons (Figuur 1 A, B, C). De twee asymptomatische maar RT-PCR-positieve patiënten (patiënt 14 en 15), beide zonder specifieke SAR-CoV-2-antilichamen, vertoonden ook een sterke induceerbare T-cel-immuniteitsrespons. Van de COVID{19}}-naïeve patiënten vertoonde 45 procent induceerbare T-celimmuniteit. De respons bij deze gezonde, niet-blootgestelde controles met een T-celrespons verschilde statistisch gezien niet significant in omvang van de herstellende COVID{23}}-patiënten voor een van de stimulerende antigenen (p-waarde=0.271, 0,437, en 0,719 voor respectievelijk RBD-, N- en S1-eiwitten).

Afbeelding 1. IFN-g-productie na stimulering van volbloed van herstellende COVID-19-patiënten en gezonde niet-blootgestelde controles met RBD-, N- of S1-eiwit.

De resultaten van stimulatie van herstellende patiënten en controles met respectievelijk het RBD-, N- of S1-eiwit worden getoond in Fig. 1A, B en C. In Fig. 1D zijn de INF-g-responsen van elke patiënt en op de drie antigenen zijn gegroepeerd. Patiënten met een bevestigde COVID{4}}-infectie zijn genummerd van 1 tot 15, waarvan patiënten 14 en 15 asymptomatisch waren. Proefpersonen 16-33 zijn COVID{11}}-naïeve patiënten.

Na 24 uur stimulatie werden de IFN-g-concentraties in plasma bepaald met behulp van een in de handel verkrijgbare, op humaan IFN-g-enzym gekoppelde immunosorbent-assay-gebaseerde kit (Biolegend cat. nr. 43{10}},101). De grootte van de stimulatie werd uitgedrukt als de optische dichtheid bij 450 nm (OD450) voor bloed gestimuleerd met antigeen minus de OD450 voor bloed zonder antigeenstimulatie. Een OD van 1,0 kwam overeen met ongeveer 400 pg/ml IFN-g. Fytohemagglutinine (PHA) werd gebruikt als het mitogeen in een eindconcentratie van 5 mg/ml in de IGRA om de kwaliteit en het reactievermogen van het bloed te beoordelen. Alle patiënten en controles vertoonden een maximale productie van het cytokine met dit mitogeen met een gemiddelde optische dichtheid (OD450) van 2,54 (SD=0.13), hetgeen overeenkomt met ongeveer 1000 pg/ml IFN-g. Er was geen verschil in de mediane IFN-g-spiegel in het ongestimuleerde bloed van herstellende patiënten en gezonde controles (OD450=0.38, SD=0.14 versus OD450=0.32. SD=0.16). Deze resultaten worden niet getoond. In elke grafiek is een horizontale lijn getekend om de afkapwaarde voor stimulatie weer te geven. Deze waarde werd bepaald door het gemiddelde plus twee standaarddeviaties te berekenen van de respons van negen proefpersonen (patiënten 16, 18, 19, 22, 27-31) van de controlegroep met de laagste INF-g-productie na stimulatie.

discussie en conclusies

Met behulp van een eenvoudig uit te voeren volbloedtest die T-celresponsen beoordeelt, ontdekten we dat de meeste herstellende patiënten en een aanzienlijk deel van gezonde niet-blootgestelde personen een specifieke en sterke T-celrespons hadden, bepaald met de productie van INF-g na stimulatie. met SARS-CoV-2-specifieke antigenen (Afbeelding 1). Verschillende studies, die allemaal gebruikmaken van de ELISPOT-assay, hebben de aanwezigheid van een T-celrespons gemeld bij de meeste of alle herstellende COVID{9}}-patiënten (Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al. , 2020, Sekine et al., 2020, Moderbacher et al., 2020, Mateus et al., 2020, Peng et al., 2020).

Met betrekking tot een T-celrespons bij gezonde, niet-blootgestelde controles zijn echter responspercentages tussen 28 en 50 procent gerapporteerd (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch et al., 2020, Sagar et al., 2020), en verschillende studies melden geen T-celrespons bij COVID{8}}-naïeve controlepatiënten (de Vries, 2020, Moderbacher et al., 2020, Schwarzkopf et al., 2021). De meeste van deze onderzoeken zijn uitgevoerd met de ELISPOT-assay, maar in Italië en de VS is ook een IGRA gebruikt om de SARS-CoV{13}} T-celrespons te detecteren (Petrone et al., 2020, Murugesan et al. ., 2020). In beide onderzoeken werd een specifieke T-celrespons gedetecteerd bij herstellende patiënten; de IGRA detecteerde echter geen INF-g-respons bij gezonde niet-blootgestelde proefpersonen.

Reeds bestaande T-celimmuniteit tegen SARS-CoV-2 bij COVID-19-naïeve proefpersonen is in verschillende publicaties beoordeeld (Altmann en Boyton, 2020, Dosho et al., 2020, de Vries, 2020, Sette en Crotty, 2020). De reden waarom een ​​specifieke COVID{9}}-T-celrespons kan worden gedetecteerd bij een gezonde, niet-blootgestelde proefpersoon blijft onduidelijk en er wordt over gespeculeerd. De meeste ELISPOT-onderzoeken met COVID{11}}-naïeve proefpersonen gebruikten menselijke bloedmonsters die waren verkregen voordat het SARS-CoV-2-virus in 2019 werd ontdekt, dus vóór enige kans op blootstelling. Om deze reden concludeerden deze ELISPOT-onderzoeken dat de T-celrespons bij niet-blootgestelde gezonde proefpersonen waarschijnlijk afkomstig is van eerder contact met circulerende "verkoudheid"-coronavirussen (Grifoni et al., 2020, Matheus et al., 2020) of eerdere blootstelling aan griep. en/of CMV-virussen (Mahajan et al., 2020) of andere virale of microbiële antigenen (Tan et al., 2020). Ons onderzoek maakte gebruik van bloed dat tijdens de pandemie was afgenomen van vrijwilligers die naar eigen zeggen geen contact hadden, seronegatief waren voor de COVID{21}}antigeen-RBD en nooit tekenen of symptomen van COVID-19 hadden vertoond.

Daarom kunnen we niet uitsluiten dat de T-celrespons bij sommige van onze -19 COVID{1}} "naïeve" gezonde controles afkomstig is van asymptomatische SARS-CoV-2 virusinfecties. Patiënten 14 en 15 van ons onderzoek zijn hier een voorbeeld van. Deze personen werden geclassificeerd als COVID-19-patiënten vanwege een positieve RT-PCR; ze waren echter asymptomatisch en ontwikkelden geen antilichaamrespons tegen het RBD-eiwit, maar beide vertoonden een sterke T-celrespons.

Het is mogelijk dat, na SARS-CoV-2-kolonisatie van de nasofarynx, het immuunsysteem van deze twee asymptomatische patiënten hen een geheugen-T-cellen-respons achterliet, en dat er geen SARS-CoV-2-specifieke antilichamen waren geïnduceerd. Een andere verklaring is dat de T-celrespons afkomstig is van een eerdere corona-achtige infectie en dat de reeds bestaande T-celimmuunrespons deze twee patiënten beschermde tegen de ontwikkeling van een meer invasief ziektepatroon. Reeds bestaande kruisreactieve T-cellen kunnen significant zijn bij het verklaren van enkele verschillen in infectiepercentages of pathologie (Le Bert et al., 2020; Sagar et al., 2020). Wat betreft het cohort van naïeve controles, hebben we uitgesloten dat deze groep een aanzienlijk aantal met SARSCoV-2 geïnfecteerde personen bevat met een niet-gedetecteerde asymptomatische infectie, voornamelijk omdat alle integranden van de controlegroep IgG-seronegatief zijn voor het RBD-antigeen.

Een andere reden is dat de infectieprevalentie in Ecuador relatief laag is. Ten tijde van dit onderzoek, in september 2020, had Ecuador ongeveer 200000 bevestigde COVID-19-gevallen gemeld (ongeveer 1,1 procent van de bevolking). Natuurlijk had de werkelijke infectieprevalentie vele malen hoger kunnen zijn, maar toch is het onwaarschijnlijk dat 45 procent van deze controlegroep geïnfecteerd raakte en dat we dus kijken naar een T-celrespons die specifiek is voor een SARS-CoV. {9}} infectie.

Concluderend, de bevinding van een hoog percentage niet-blootgestelde gezonde proefpersonen met reeds bestaande immuniteit in Quito, Ecuador, wekt de verwachting dat een aanzienlijk deel van onze bevolking waarschijnlijk SARS-CoV-2 reactieve T-cellen heeft omdat van eerdere blootstelling aan griep, CMV-virussen of verkoudheidsveroorzakende coronavirussen. Toekomstig onderzoek moet gericht zijn op het bepalen of de reeds bestaande immuunrespons beschermend is en/of een ernstigere COVID-19-ziekte kan overwinnen of bijdraagt ​​aan een sneller herstel.

Belang en beperking van deze studie

Ons onderzoek toonde aan dat de COVID{0}} IGRA een nuttige en gevoelige nieuwe tool is die blootstelling aan coronavirussen of kruisreactiviteit met vergelijkbare virussen kan beoordelen door de afgifte van IFN-g te bepalen na stimulatie met virusspecifieke antigenen. De techniek is eenvoudig, relatief goedkoop en toepasbaar in een klinisch laboratorium. Dit is zeker niet het geval met de ELISPOT-assay. Bovendien kan de IGRA-assay eenvoudig worden opgeschaald voor populatiegebaseerde studies en onderzoeken waarbij grote aantallen patiënten nodig zijn. Samen met serologie kan de IGRA worden gebruikt om zowel antilichaam- als T-celresponsen van individuele patiënten te screenen om de immuniteit op populatieniveau beter te begrijpen en reeds bestaande immuniteit bij seronegatieve individuen te bepalen.

Een belangrijke beperking van ons onderzoek is dat de onderzoekssteekproef niet representatief is voor de populatie. Er werden geen statistische methoden gebruikt om de steekproefomvang vooraf te bepalen. Bovendien maakte onze assay geen onderscheid tussen IFN-g-productie van CD4 plus- of CD8 plus-cellen, maar stimulatie met gedefinieerde CD8(plus)- en CD4(plus)-peptiden kan worden overwogen (Grifoni et al., 2020, Peng et al. , 2020) en is gebruikt in de IGRA's beschreven in Petrone et al., 2020 en Murugesan et al., 2020). Ook de inductie van andere cytokines kan met deze IGRA worden gemeten (Petrone et al., 2020). Evenzo kan de IGRA worden gebruikt voor follow-up van vaccinatie om de ontwikkeling van de T-celrespons bij gevaccineerde personen te bepalen of kan worden gebruikt om te bepalen of de aanwezigheid van kruisreactieve geheugen-T-cellen verband houdt met beschermende immuniteit en kan de ziektemanifestaties van SARS-CoV-2-infectie verminderen (Sagar et al., 2020).

Ethische goedkeuring en toestemming voor deelname

Bloed werd verzameld na geïnformeerde schriftelijke toestemming. De ethische commissie van het ministerie van Volksgezondheid van Ecuador heeft het studieprotocol 004–2020 goedgekeurd.

Belangenverstrengeling

De auteurs verklaren dat ze geen tegenstrijdige belangen hebben.

Auteur bijdragen

Studie ontwerp; JHW en GE; Gegevensverzameling en laboratoriumexperimenten: GE, AG, JC, AMR en MMV; Gegevensanalyse; JHW, GE en ET; Schrijven: JHW, GE en ET.

Dankbetuigingen

We betuigen onze dank aan alle donoren en medisch personeel dat bij dit werk betrokken is, in het bijzonder Sandra Vivero en Sandra Fonseca, voor hun hulp bij het verzamelen van monsters. Deze studie werd ondersteund door een onderzoeksfonds van de Universidad de las Américas. Het Sustainable Sciences Institute, San Francisco, Californië, VS, en de "Por Todos" Foundation in Ecuador leverden het RBD-eiwit en de "in-house" ELISA. Met dank aan Howard E. Takiff en Flor Pujol (IVIC, Venezuela), Paulina E. Andrade (USFQ, Ecuador) en Lilly Verhagen (UMC, Nederland) voor hun vruchtbare discussies.

Referenties

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. Vergelijking van cytomegalovirus (CMV) enzym-gekoppelde immunosorbentspot en CMV-kwantificeerder gamma-interferon-afgevende assays bij het beoordelen van het risico op CMV-infectie bij ontvangers van een niertransplantaat. J Clin Microbiol 2013;51(8):2501-7.

Altmann DM, Boyton RJ. SARS-CoV-2 T-celimmuniteit: specificiteit, functie, duurzaamheid en rol in bescherming. Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. Een serologische test om SARS-CoV-2-seroconversie bij mensen te detecteren. Nat Med 2020;26:1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F, et al. SARS-CoV-2- reactieve T-cellen bij gezonde donoren en patiënten met COVID-19. Natuur 2020;587:270–4.

de VriesRD. SARS-CoV-2-specifieke T-cellen bij niet-blootgestelde mensen: de aanwezigheid van kruisreactieve geheugencellen staat niet gelijk aan beschermende immuniteit. Sig Transduct Target Ther 2020;5:224.

Doshi P. Covid-19: hebben veel mensen reeds bestaande immuniteit? BMJ 2020;370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher CR, et al. Doelwitten van Tcell-reacties op het SARS-CoV-2-coronavirus bij mensen met de ziekte van COVID-19 en niet-blootgestelde personen. Cel 2020;181(7)1489-501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. Een goedkope SARS-CoV-2 rRBD ELISA om de serostatus op te sporen in Ecuadoriaanse populatie met COVID-19. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A, et al. SARS-CoV-2- specifieke Tcell-immuniteit in gevallen van COVID-19 en SARS, en niet-geïnfecteerde controles. Natuur 2020;584(7821):457-62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Kruisreactieve geheugen-T-cellen en groepsimmuniteit tegen SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M, et al. Immunodominante T-celepitopen van het SARS-CoV{2}} spike-antigeen onthullen robuuste reeds bestaande T-celimmuniteit bij niet-blootgestelde personen. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM, et al. Selectieve en kruisreactieve SARS-CoV-2 T-celepitopen bij niet-blootgestelde mensen. Wetenschap 2020;370 (6512):89-94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D, et al. Antigeenspecifieke adaptieve immuniteit tegen SARS-CoV-2 bij acute COVID-19 en associaties met leeftijd en ernst van de ziekte. Cel 2020; S0092-8674(20):31235–6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K, et al. Interferon-gamma-afgiftetest voor nauwkeurige detectie van SARS-CoV{2}} T-celrespons. Clin Infect Dis 2020;ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H, et al. Detectie van SARS-CoV-2--specifieke humorale en cellulaire immuniteit bij COVID{2}} herstellende personen. Immuniteit 2020;52(6)971–7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. Assays voor afgifte van gamma-interferonen voor de detectie van Mycobacterium tuberculosis-infectie. Clin Microbiol Rev 2014;27(1):3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D, et al. Breed en sterk geheugen CD4 plus en CD8 plus T-cellen geïnduceerd door SARS-CoV-2 bij herstellende personen in het VK na COVID-19. Nat Immunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T, et al. Een volbloedtest om de -2-specifieke SARS-CoV-respons bij COVID-19-patiënten te meten. Clin Microbiol Infecteren 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L, et al. Recente endemische coronavirusinfectie wordt in verband gebracht met minder ernstige COVID-19. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM, et al. Cellulaire immuniteit bij COVID{0}} Herstellende patiënten met PCR-bevestigde infectie maar met ondetecteerbaar SARS-CoV-2-Specifiek IgG. Emerg Infect Dis. 2021;27(1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A, et al. Robuuste T-celimmuniteit bij herstellende personen met asymptomatische of milde COVID-19. Cel 2020;183(1)158-68.

Sette A, Crotty S. Reeds bestaande immuniteit tegen SARS-CoV-2: de bekende en onbekende factoren. Nat Rev Immunol. 2020;20(8)457–8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Reeds bestaande door T-cellen gemedieerde kruisreactiviteit met SARS-CoV-2 kan niet uitsluitend worden verklaard door eerdere blootstelling aan endemische menselijke coronavirussen. bioRxiv 2020;2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com