Studies over chemische bestanddelen van Cistanche Tubulosa

Contactpersoon: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Intro

Cistanche tubulosa is een soort parasitaire plant die parasiteert op de wortels van meervertakte Tamarix vamosissma of andere woestijnplanten. Het wordt gedistribueerd in de zuidelijke regio van Xinjiang, China. Het geneeskrachtige deel is de droge vlezige stengel. De geneeskrachtige materialen zijn Cistanche, Grand-Rue of Inch-Rue. Het wordt vaak gebruikt voor niertonificatie en de Yang-versterkende geneeskunde in de traditionele Chinese geneeskunde. Moderne farmacologische studies geloven dat het anti-verouderingsfuncties heeft, zoals het verlengen van het leven, daarom wordt het ook "woestijn-ginseng" genoemd. Er zijn weinig studies over de chemische componenten ervan en sommige fenylethanoïde glycosiden werden geëxtraheerd door Kobayashi Hiromi et al. Zes monomere verbindingen I, IL, III, IV, V en VI werden geïsoleerd uit het extract en geïdentificeerd als D-Mannitol door chemische en spectrale methoden, - Sitosterol, daucosterol, 8-epibrucine, echinacoside en Cistanoside A. De laatste twee glycosiden zijn actieve componenten voor het versterken van de Yang en anti-aging. Verbindingen I, II, III, IV en VI zijn nog niet gemeld in Cistanche deserticola.

Experimenteel

1. materialen en instrumenten

De experimentele Cistanche deserticola werd gekocht van het farmaceutische bedrijf Hotan, Xinjiang. De macroporeuze hars was type AB-B, geproduceerd door Nankai University. Dextraangel LH-20 was het product van de Shanghai Long March farmaceutische fabriek. Type X4 microsmeltpuntinstrument werd gebruikt voor het meten van het smeltpunt en de thermometer was niet gekalibreerd. Het gebruikte IR-instrument was Shimadzu-440 en de modellen van H-NMR- en C-NMR-instrumenten waren Varian FT-80A.

2. extractie en scheiding

Neem 8 kg Cistanche deserticola, reflux en extraheer met 95 procent EtOH, plaats het extract een nacht, precipiteer verbinding I, concentreer de oplossing onder verminderde druk tot de extractiesituatie, voeg een geschikte hoeveelheid water voor suspensie toe en extraheer achtereenvolgens met EtOAc en n -BuOH om 3 delen te verkrijgen: EtOAc, n-BuOH en waterlagen. Verbindingen II en III werden verkregen door middel van silicagelkolomchromatografie en geëlueerd met CHC13MeOH (100: 1 -> 10: 1); De waterige laag werd geëlueerd met water en 50% EtOH door een geactiveerde koolstofkolom, en het 50% EtOH geëlueerde deel werd geëlueerd met silicagelkolomchromatografie en CHC13 EtOH (10:4) om verbinding IV te verkrijgen; Het deel van n-BuOH dat werd geëlueerd met respectievelijk water en methanol door de macroporeuze harskolom na decompressie en concentratie, verzamel het methanolelutiedeel en verkrijg vervolgens fenolische glycosiden door de polyamidekolomlaag. De fenolische glycosiden werden vervolgens gescheiden en gezuiverd door de silicagelkolom (CHCl3:MeOH: H2O 6:4:l elutie) en dextraangel LH-20 (MeOH:H20 was 1:1 geëlueerd), en de geelachtige amorfe poeder V en VI. waren verkregen.

3. Identificatie van componenten:

verbinding I: kleurloos naaldvormig kristal (EtOH), mp166 ~ 168 graden, [a] 15D plus 21,3 graden (gemeten in borax, 1g van deze component en 1,28g borax, voeg water toe aan 10ml), IR ( KBr) υ 3400, 3250, 1460, 1350, 1080, 1020cm-1. H-NMR(D2O) δ 3,4~4,0ppm. Kleurloze vierkante kristallen werden verkregen door acetylering met de conventionele methode, mp 121 ~ 122 graden, IR (KBr) υ 1735, 1450, 1370, 1370, 1215, 1085, 1030cm-1, de bovenstaande gegevens worden vergeleken metmannitolstandaard, en de resultaten zijn consistent.

Verbinding II: kleurloos naaldvormig kristal (EtOH), mp140 ~ 142 graden, IR (KBr) υ 3400, 2950, ​​1630, 1460, 1380, 1060cm-1. En het smeltpunt van het mengsel met - sitosterolstandaard neemt niet af. Dunnelaagchromatografie Rf-waarden zijn consistent, dus verbinding II wordt bepaald als:- sitosterol.

Verbinding III: wit amorf poeder, - Naftoltest was positief. mp282-284 graden, IR(KBr) υ3400, 2950, ​​1630, 1465, 1380, 1075, 1020cm-1. Vergeleken met de standaard direct, werd III bepaald als:daucosterol.

Verbinding IV: kleurloos naaldvormig kristal (EtOH), mp147 ~ 150 graden , IR (KBr) υ 340{{1{{105}}3}}, 2800~2400 , 1680, 1630, 1430cm-1. H-NMR(C5D5N) δ 1,16 (3H, D, j=7Hz, CH3), 2,1 ~ 2,6 (2u, m, H-6), 2,7 (1H, m, H{{26 }}), 3,25 (1H, m, H-9), 3,5 (1H, m, H-5), 4,3 ~ 5,2 (H-7, gemaskeerd door glycosylprotonsignaal), 5,4 (1H, D, j=7Hz, eindproton), 5,82 (1H, D, j=4Hz, h-1), 7,85 (1H, s, H{{52 }}) ppm. C-NMR(C5D5N) δ 15,8 (C-10), 29,6 (C-5), 43,2 (C-8), 44,2 (C-6), 47,3 (C -9), 63,0 (C-6',), 71,7 (C-4'), 74,3 (C-2'), 78,1 (C-7, C-3'), 78,5 (C-5}'), 95,0(Cl), 100,5(C-1'), 114,7(C-4), 150,4(C{ {98}}), 170,3 (C-11) ppm. Penta-acetylaat (IV A) van IV: 70 mg kristal IV werd opgelost in 0,7 ml pyridine en 0,7 ml azijnzuuranhydride en gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geplaatst. Het reactieproduct werd geëlueerd door middel van silicagelkolomchromatografie en CHC13MeOH (20:1) om 40 mg wit pentaacetylaat te verkrijgen. IR(KBr) 3350, 1750, 1675, 1630, 1365cm-1. H-NMR(CDC13) δ 0,99 (3H, d, j=7Hz, CH3), 1,96 (3H, s, OCH3), 2,02 (9H, s, OCOCH3 * 3), 2,10 (3H, s, OCOCH3), 2,15 ~ 2,50 (2H, m, H-6), 2,7 (1H, m, H-8), 2,95 (1H, m, H-9), 3,75 (1H , m, H-5), 4,2 ~ 5,3 (H-7 gemaskeerd door glycosylprotonsignaal), 5,35 (1H, D, J=2,5Hz, H-1) 7,43 (1H, s, H-3) dpm. Volgens de bovenstaande spectrale gegevens van IV en IVa, gecombineerd met de literatuurwaarden, werd IV geïdentificeerd als:8-epibrucine.

Verbinding V: amorf poeder, silicagel dunnelaagchromatografie Rf-waarde van {{0}},3 (CHCl3: MeOH: H2O voor 6: 4: l expansie, 1 procent FeCl3-spraydetectie), UV (H2O) λ 222 , 320nm. IR(KBr) υ 3350, 1690, 1625, 1596, 1515cm-1. H-NMR (D2O) δ 1.07 (3H, d, CH3), 2.86 (2H, t, AR-CH2-CH2 -) , 4,3, 4,37, 5,l6 (1H elk, glucose en rhamnosyl eindgroep protonen), 6,6 ~ 7,1 (6H, aryl H), 6,4 en 7,7 (1H elk, d, J=16Hz, caffeoyleen protonen) p.p.m. C-NMR (D2O plus DSS) δ 133,8, 119.{{80}}, 145.0, 146,5, 119,4, 123,8, 73,0, 37,0 (fenylethanolgroep hierboven), 129,3, 116,0 , 150,7, 147,1, 117,9, 125,3, 170,7, 116,0, 149,6 (cafeïnezuurgroep hierboven), 104,6, 76,8, 83,6, 71,8, 75,2, 70,3 (tussenproduct glucosegroep hierboven), 103,0, 73,5, 73,5, 74,5, 72,2 , 19,6 (rhamnosegroep hierboven), 105,0, 75,8, 78,3, 72,5, 78,3, 63,1 (eindstandige glucosegroep hierboven) ppm. In vergelijking met de literatuur wordt V geïdentificeerd alsechinacoside.

verbinding VI: amorf poeder, silicagel dunnelaagchromatografie RF 0.35 (de ontwikkelings- en detectieomstandigheden zijn dezelfde als hierboven), UV- en IR-spectra lijken sterk op die van echinacoside, en er is een δ 3,8{ {13}} piek in de H-NMR-spectra, er is een piek van δ 57,1 in het C-NMR-spectrum, bewezen dat er een OCH3-groep op zit. C-NMR(D2O plus DSS) δ 134.0, 116.0, 149.5, 146,4, 119,3, 123,9, 73.0, 37,2 (het bovenstaande is een fenylethanolgroep, δ 149,5 gaf de substitutiepositie aan van OCH3), 129,5, 116.0, 150,7, 147,2, 117,9, 125,4, 170,9, 116,5, 149,6 (caffeoyl hierboven), 104,6, 76,7, 83,2 , 71,8, 75,3, 70,3 (tussenproduct glucosyl hierboven), 104,0, 73,5, 73,5, 74,3, 72,3, 19,7 (rhamnosyl hierboven), 105,1, 75,9, 78,3, 72,5, 78,3, 63,0 (eindstandige glucosyl hierboven), 57,l (methoxy ) ppm. De bovenstaande gegevens zijn consistent met de spectrale gegevens vanCistanoside Ageïsoleerd uit hetzelfde geslacht Cistanche salsa.