Studie van de antiverouderingseffecten van calcitriol op menselijke natuurlijke killercellen in vitro Ⅱ

3. Resultaten

Deze studie richtte zich op de anti-verouderingseffecten van calcitriol op NK-cellen. De resultaten toonden aan dat Calcitriolverminderde de expressie van verouderingsgerelateerde biomarkers, waaronder CD16, TIM3, PD-1, KIR enverhoogde de expressie van NKG2A van NK-cellen. het ookremde de proliferatie van NK-cellenEnarresteer ze in de G1-fase. Calcitriolverminderde de afgifte van ontstekingsfactorenzoals IL-5, IL-13, IFN- en TNF- en had bepaaldeantioxiderende effecten, die daaraan zou kunnen bijdragenanti-aging effecten.

Klik hier om de antioxidatie-effecten van Cistanche te kennen en een monster te krijgen

3.1 Calcitriol keerde de expressie van de oppervlakteverouderingsmarkers om, vertraagde de NK-celamplificatie en handhaafde NK-cellen in de G1-fase.

Senescente NK-cellen vertoonden een hoge expressie van verouderingsgerelateerde biomarkers, zoals CD16, PD-1, TIM3 en KIR, en een lage expressie van NKG2A. We ontdekten dat de expressieniveaus van de verouderingsgerelateerde biomarkers NKG2A (Figuur 1a) (*P < 0.05) toenamen, terwijl de expressie van CD16 (Figuur 1b), TIM3 (Figuur 1c ), PD-1 (Figuur 1d) en KIR (Figuur 1e) (*P < 0,05) waren verlaagd na behandeling met calcitriol gedurende 72 uur. De omkeringseffecten waren positief gecorreleerd met de concentratie van calcitriol (aanvullend figuur 1).

We hebben cellen uit de menselijke perifere bloedmonsters in vitro geëxpandeerd. Daarna isoleerden we de NK-cellen (CD{{0}}CD56 plus) door middel van magnetische parelsortering (figuur 1f). De gesorteerde NK-cellen werden vervolgens gedurende 72 uur gekweekt met verschillende concentraties calcitriol of rapamycine. CCK8-kleuringsresultaten toonden aan dat de groeisnelheid van de met calcitriol behandelde NK-cellen met hoge concentratie (10- [7] M) langzamer was dan die van de negatieve controlegroep (NC) (*P < {{17 }}.05) (Afbeelding 1g). Bovendien reguleerde calcitriol de NK-celcyclus. Na behandeling met calcitriol gedurende 48 uur vertoonden NK-cellen een hoge calcitriolconcentratie-afhankelijke verschuiving naar de G1-fase (*P < 0,05), terwijl het aandeel cellen in de G2-fase (# P < 0,05) afnam. Het aandeel met calcitriol behandelde NK-cellen in de S-fase vertoonde geen verandering, ongeacht de concentratie van calcitriol (figuur 1h, aanvullende figuur 2). Vervolgens hebben we getest of deze van calcitriol afgeleide G1-fase-arrestatie NK-celapoptose induceerde en ontdekten dat de NK-cel-apoptotische biomarker, T-celimmunoglobuline en immunoreceptor-tyrosine-gebaseerd remmend motief (ITIM) -domein (TIGIT) geen significante verandering vertoonde ( P> 0, 05 , NS) (Figuur 1i). Deze resultaten impliceerden dat de toevoeging van calcitriol de groeisnelheid van NK-cellen verminderde, hun proliferatie verminderde en G1-fase-arrestatie van de NK-cellen induceerde in plaats van apoptose te veroorzaken.

3.2 Calcitriol verminderde de afgifte van inflammatoire cytokines in NK-cellen en remde de cytotoxiciteit van NK-cellen

Ontsteking is een chronische laaggradige ontsteking. Het versnelt de veroudering van NK-cellen, aangezien NK-cellen deelnemen aan deze chronische ontsteking. Figuur 2a laat zien dat de niveaus van IL-5, IL-13, IFN- en TNF- significant afnamen in alle groepen dan in de negatieve controle (*P < 0.05). IFN- en TNF- zijn bekende pro-inflammatoire cytokines, maar sommige onderzoeken hebben ook de pro-inflammatoire eigenschappen van IL-5 aangetoond. Van IL-13 is gemeld dat het bijdraagt ​​aan verschillende soorten slijmvliesontsteking, zoals allergische astma, colitis ulcerosa, eosinofiele oesofagitis en verschillende ziekten die verband houden met fibrose.

De cytotoxiciteit van NK-cellen omvat echter voornamelijk het vrijkomen van inflammatoire cytokines en degranulatie van cellen. We labelden K562-cellen met DIO en kweekten de DIO-K562-cellen samen met met calcitriol behandelde NK-cellen gedurende 4 uur. Het percentage DIO plus PI plus cellen was lager in alle effector (E)/target (T) ratio groepen dan in de negatieve controle (*P < 0.05) (Afbeelding 2b, C). De afgeleide uitdrukking van cluster van differentiatie 107 (CD107) duidde op lagere degranulatie (* P <0, 05) (Figuur 2d). Deze resultaten tonen de remming van de NK-dodende functie door calcitriol.

3.3 Calcitriol activeerde de expressie van SIRT1- ∆Exon8 en anti-verouderingsgerelateerde SIRT1/pERK-route

Om de anti-verouderingseffecten van calcitriol op NK-cellen te onderzoeken, hebben we de verouderingsgerelateerde signaalroutes gedetecteerd door middel van immunoblotting. Western-blotting-analyse werd uitgevoerd om de expressieniveaus van VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1 en PERK in de met calcitriol behandelde NK-cellen te beoordelen. Statistische analyse toonde aan dat calcitriol de VDR/SIRT1/pERK-as bij hoge concentraties activeerde. Ondertussen activeerde calcitriol de expressie van SIRT1-∆Exon8 (*P < 0.05). (Figuur 3a).

Figuur 1. Verouderingsgerelateerd fenotype, celexpansie en celcyclusanalyse van NK-cellen. ( ae ) De menselijke NK-cellen die 72 uur met calcitriol of rapamycine werden behandeld, vertoonden de volgende celbiomarkers: natural killer groep 2 lid A (NKG2A), differentiatiecluster 16 (CD16), T-celimmunoglobuline en mucine-domeinbevattend eiwit 3 ( TIM3) geprogrammeerde celdood-1 (PD-1) en killer immunoglobuline-like receptor (KIR), die gerelateerd waren aan veroudering. 50 nM rapamycine (RAPA) werd gebruikt als de positieve controle. n=3 voor elke groep. *P < 0.05 en **P < 0.01 werden vergeleken met de negatieve controlegroep (NC). (f) NK-cellen (rechts) geïsoleerd uit menselijke perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's, links) door middel van magnetische korrelsortering. ( g ) Analyse van celproliferatie gemeten met kit voor het tellen van cellen 8 (CCK8). (h) Effect van calcitriol of rapamycine op de celcyclus in gesorteerde nk-cellen na behandeling gedurende 72 uur, wp 0.0, 0.05 en fp < 0.05 wezen op de significante verschillen in respectievelijk de G1-, S- en G2-fasen. Alle groepen werden respectievelijk vergeleken met NC. n=3. ) Het percentage T-celimmunoglobuline en immunoreceptor-tyrosine-gebaseerd remmend motief (M)-domein (TGI)-positieve NK-cellen na behandeling met calcitriol of rapamycine gedurende 72 uur. *p < 0,05 en **p < 0,01 werden vergeleken met NC. n=3.

3.4 Calcitriol weerstond de veroudering van NK-cellen veroorzaakt door oxidatieve stress in vitro

Het is algemeen aanvaard dat veroudering wordt veroorzaakt door accumulatie van oxidatieve schade vanwege de grote hoeveelheid bewijs die in de loop der jaren is gevonden [31]. We kweekten de NK-cellen met verschillende concentraties H2O2 gedurende 24 uur en ontdekten dat 1{{1{{20}}}0 μM de concentratie was die het dichtst bij de mediane dodelijke dosis (LD50) lag (Figuur 3b) . De expressie van TIM3 in de NK-celpopulatie nam toe door toevoeging van H2O2, terwijl de expressie afnam na behandeling met calcitriol (*P < 0,05) (Figuur 3c). Bovendien werden verouderende NK-cellen blauw gekleurd in aanwezigheid van -galactosidase. Deze blauwe kleur van de cellen is een specifiek kenmerk van senescente cellen. Statistische analyse toonde aan dat onbehandelde NK-cellen minder cellulaire galactosidase-activiteit hebben, terwijl de NK-cellen blootgesteld aan H2O2 verhoogde galactosidase-activiteit vertoonden. Calcitriol verminderde de galactosidase-positieve populatie, wat wijst op de aanwezigheid van minder verouderende cellen (*P < 0,05) (Figuur 3d). Een verminderd mitochondriaal membraanpotentieel is ook waargenomen in verschillende verouderende cellen van verschillende zoogdiersoorten. We evalueerden het mitochondriale membraanpotentieel van de NK-cellen in deze studie. De statistische resultaten toonden aan dat H202 de cellulaire activiteit van NK-cellen significant verlaagde in vergelijking met die van de onbehandelde cellen, terwijl calcitriol de schade veroorzaakt door H202 verhoogde (*P < 0,05) (Figuur 3e).

Figuur 2. Effecten van calcitriol op de functies van NK-cellen. ( a ) Analyse van het cytokine dat vrijkomt door de met calcitriol behandelde NK-cellen in 48 uur. b) Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) resultaten toonden dode K562-cellen gelabeld door 3,3 -octadecyl-oxacarbocyanineDlO) en propidiumjodide (P). K562-cellen werden samen gekweekt met verschillende verhoudingen van met calcitriol behandelde Nk-cellen gedurende 4 uur. (C) FACSalyse van dode K562-cellen in dodingstesten. ( d ) De degranulatie-effecten van behandelde Nk-cellen bij dodingstesten. n=3 voor elke groep. *p < 0.05 en **p < 0,01 werden vergeleken met NC

3.5 Calcitriol weerstond de apoptose van NK-cellen geïnduceerd door oxidatieve stress in vitro

Vervolgens hebben we het aantal apoptotische cellen gemeten. De resultaten van de flowcytometrie toonden aan dat behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur leidde tot significante apoptose van de NK-cellen. Behandeling met calcitriol verminderde echter de apoptotische ratio (* P <0,05) (Figuur 4a). Alle bovenstaande resultaten toonden de resistentie aan van calcitriol tegen oxidatieve stress veroorzaakt door H2O2. We hebben echter apoptotische eiwitten gedetecteerd in NK-cellen onder oxidatieve stress. Voor behandeling met H2O2 werd 10- [7] M calcitriol gedurende 24 uur aan de NK-cellen toegevoegd. De niveaus van apoptose-gerelateerde eiwitten, caspase-3 p17 en caspase-3 p20, namen significant toe na behandeling met H2O2. Calcitriol verlaagde H2O2-afgeleide apoptose en verlaagde de expressie van caspase-3, p17 en caspase-3 p20 (*P < 0,05) (Figuur 4b). Deze resultaten gaven aan dat calcitriol bestand was tegen apoptose geïnduceerd door H2O2.

Figuur 3. Deanti-aging effectenvan calcitriol op NK-cellen. (a) De expressie van de vitamine D-receptor (VDR), sirtuin 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8 en proteïnekinase R-achtig endoplasmatisch reticulumkinase (pERK) in NK-cellen werd gedetecteerd door Western-blottinganalyse na behandeling met calcitriol gedurende 48 uur. Glyceraldehyde-3-fosfaatdehydrogenase (GAPDH) werd gebruikt als laadcontrole. Staafdiagram dat de resultaten van Western-blotting illustreert (n=3). *P < 0.{{10}}5 en **P < 0.01 werden vergeleken met NC (n=3). (b) Doseringssterftecurve van NK-cellen na behandeling met waterstofperoxide (H2O2) gedurende 24 uur. ( c ) Percentage TIM3-cellen dat een hoge expressie vertoont na behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur. (d) De senescentie-geassocieerde galactosidasekleuring en analyseresultaten. De senescente cellen werden blauw gekleurd en aangegeven met rode pijlen. Schaalbalk, 50 μm. ( e ) NK-cellen werden gekleurd met Hoechst en Chloromethyl-X-Rosamine (CMXRos) om de cellocatie en het mitochondriale membraanpotentieel te bepalen. De verouderende en apoptotische cellen waren Hoechst plus CMXRos- en aangegeven met witte pijlen. Schaalbalk, 50 μm. Statistische analyse toonde relatieve fluorescentie-intensiteit. *P < 0,05 en **P < 0,01 werden vergeleken met de H2O2-groep in figuren C, D en E (n=3).

Figuur 4. De anti-apoptotische effecten van calcitriol op NK-cellen. (a) Anti-apoptotische effecten van calcitriol bij H2O{4}}geïnduceerd letsel. FACS-analyse toonde het percentage apoptotische NK-cellen na behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur. (b) De expressieniveaus van caspase -3 p20 en caspase -3 p17 in NK-cellen werden gedetecteerd door Western-blotting-analyse na behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur. GAPDH werd gebruikt als laadcontrole. Staafdiagram dat de resultaten van Western-blotting illustreert (n=3). *P < 0,05 werd vergeleken met de H2O2-groep.

4. Discussie

De langdurige interactie tussen ontsteking en oxidatieve stress is een belangrijke factor bij veroudering. Bovendien zijn ontsteking en oxidatieve stress synergetisch [32]. Overtollige ROS gegenereerd door oxidatieve stress vallen de lichaamscellen aan. Tijdens dit proces worden ontstekingsfactoren vrijgegeven door het geactiveerde immuunsysteem om de abnormale cellen te doden, wat leidt tot verdere ROS-generatie. Gebrek aan calcitriol kan auto-immuunziekten, chronische stofwisselingsziekten en tumoren veroorzaken. Er is echter weinig bekend over de anti-verouderingseffecten van calcitriol op het immuunsysteem, met name op NK-cellen.

In deze studie hebben we de anti-verouderingseffecten van calcitriol op NK-cellen onderzocht. We ontdekten dat calcitriol de expressie van NKG2A verhoogde, terwijl de expressie van KIR in vitro afnam. De CD56-CD16 plus-subpopulatie van NK-cellen, waarvan bekend is dat deze verband houdt met chronische ontsteking, is significant verhoogd bij ouderen [33]. Daarom kan de door calcitriol geïnduceerde vermindering van CD16-expressie worden toegeschreven aan het ontstekingsremmende effect ervan. TIM-3 en PD-1 zijn naar verluidt de remmende en uitputtingsreceptoren van NK-cellen. Onze studie toonde aan dat cal citriol de expressieniveaus van TIM-3 en PD-1 verlaagde en apoptose van NK-cellen voorkwam.

Bovendien remde calcitriol de expansie van NK-cellen en handhaafde het de NK-celpopulatie in de G1-fase in vitro. De cellen in de S-fase werden echter niet aangetast. TIGIT, dat bekend staat als een controlepuntfactor van NK-cellen, bleef ongewijzigd. Deze resultaten gaven aan dat Figuur 4. De anti-apoptotische effecten van calcitriol op NK-cellen. (a) Anti-apoptotische effecten van calcitriol bij door H2O2-geïnduceerd letsel. FACS-analyse toonde het percentage apoptotische NK-cellen na behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur. (b) De expressieniveaus van caspase -3 p20 en caspase -3 p17 in NK-cellen werden gedetecteerd door Western-blotting-analyse na behandeling met 100 μM H2O2 gedurende 24 uur. GAPDH werd gebruikt als laadcontrole. Staafdiagram dat de resultaten van Western-blotting illustreert (n=3). *P < 0,05 werd vergeleken met de H2O2-groep. BIOENGINEERED 6851calcitriol leidde niet tot de dood van NK-cellen, maar het vertraagde alleen de snelheid van NK-celexpansie.

Het is algemeen bekend dat ontsteking leidt tot immunosenescentie [34,35]. Verder ontdekten we dat calcitriol de niveaus van IL-5, IL-13, IFN- en TNF- in NK-cellen verlaagde. De cytotoxiciteit van NK-cellen wordt gedeeltelijk gemedieerd door het vrijkomen van ontstekingsfactoren [36]. Bovendien was er een afname van de mortaliteit van K562-tumorcellen en degranulatie van NK-cellen. Deze resultaten waren in lijn met onze verwachtingen. Rapamycine is een bekend medicijn dat de stofwisseling verlaagt om veroudering te voorkomen [37], dat in dit onderzoek als positieve controle wordt gebruikt. Het resulteert in immunosuppressie en verhoogt het potentiële risico op tumoren en tumorbelasting. Deze belasting is bevestigd in muismodellen van borstkanker [38]. Of calcitriol vergelijkbare effecten vertoont als rapamycine, blijft onbekend. Er moeten meer dier- en klinische studies worden uitgevoerd om hun effecten in het menselijk lichaam te verifiëren.

Ten slotte bestudeerden we de effecten van calcitriol op veroudering van antioxidanten. Resveratrol, een bekend middel tegen veroudering, kan de NF-KB-route downreguleren door de SIRT1/PERK-as te activeren. Deze downregulatie is ook gunstig gebleken bij neurodegeneratieve aandoeningen en hart- en vaatziekten [39]. SIRT1-deacetylering wordt geassocieerd met metabole controle en mitochondriale biogenese. Bij dit type regulatie kunnen verhoogde SIRT1-spiegels de accumulatie van peroxisoom proliferator-geactiveerde receptor gamma-coactivator-1 alfa (PGC-1) in de kern bevorderen, wat resulteert in de transcriptie van genen die nodig zijn voor mitochondriale functie [40]. Bovendien onderdrukt SIRT1 het zoogdierdoelwit van de rapamycine (mTOR)-signaalroute, die de zenuwen kan beschermen en hersenveroudering bij muizen kan tegengaan [41]. In deze studie hebben we een vergelijkbare reguleringsroute voor calcitriol geïdentificeerd. Calcitriol activeerde SIRT1 via VDR en verhoogde de SIRT1/pERK-as.

Bovendien ontdekten we dat calcitriol de expressie van SIRT1-∆Exon8 verhoogde. Spanningen staan ​​bekend als een omhoog regulerende factor van SIRT1-∆Exon8. Hoewel SIRT1-∆Exon8 zelf verminderde p53-deacetyleringsactiviteit vertoont, oefent het een additief deacetyleringseffect uit op p53 wanneer het samen met SIRT1 over de volledige lengte tot expressie wordt gebracht [42]. Dit effect duidde op de anti-apoptotische functie van calcitriol op NK-cellen. De rol van SIRT1-∆Exon8 in leeftijdsgerelateerde routes moet echter nog beter worden begrepen. Omdat de achteruitgang van SIRT1 mogelijk te wijten is aan oxidatieve schade [43], hebben we in vitro een acuut verouderend NK-celmodel opgezet met behulp van H2O2. De oxidatieve veroudering geïnduceerd door H2O2 verhoogde de expressie van TIM3 evenals de activiteit van -galactosidase in NK-cellen. We ontdekten dat calcitriol oxidatieve schade weerstond en de mitochondriale activiteit en cellevensvatbaarheid van NK-cellen handhaafde terwijl celapoptose werd voorkomen. Calcitriol is echter nog niet geïdentificeerd als een anti-verouderingsmedicijn in de klinische geneeskunde, aangezien er meer bewijs nodig is met betrekking tot de anti-verouderingseffecten van dit medicijn in vivo. Samenvattend hebben we voorlopig bewijs geleverd om de anti-verouderingseffecten van calcitriol op NK-cellen in vitro te impliceren. Wij zijn van mening dat de effecten van dit medicijn verder moeten worden onderzocht in toekomstige dier- en klinische studies.

5. Conclusie

In deze studie hebben we aangetoond dat deanti-aging effectenvan calcitriol op NK-cellen. Calcitriol keerde de uitdrukking van omveroudering biomarkersop NK-cellen. Het vertraagde de NK-versterking en hield ze in de G1-fase. Bovendien remde calcitriol de afgifte van inflammatoire cytokines en neerwaarts gereguleerde degranulatie van NK-cellen. Activering van de SIRT1-∆Exon8- en VDR/SIRT1/pERK-as door calcitriol is mogelijk het belangrijkste mechanisme van het antiverouderingseffect van calcitriol op basis van al het bovenstaande. Ten slotte weerstond calcitriol de oxidatieve veroudering van NK-cellen in vitro. Verdere studies moeten zich richten op dier- en klinisch onderzoek.

Hoogtepunten

(1) Calcitriol verminderde de expressie van verouderingsgerelateerde biomarkers, waaronder CD16, TIM3, PD-1, KIR, en verhoogde de expressie van NKG2A van NK-cellen. (2) Calcitriol was in staat de proliferatie van NK-cellen te remmen en ze in de G1-fase te stoppen. (3) Calcitriol verminderde de afgifte van belangrijke ontstekingsfactoren zoals IL-5, IL-13, IFN- en TNF- van NK-cellen.(4) Het anti-verouderingseffect van calcitriol op NK-cellen kan worden bereikt via het Sirt{15}} pERK-signaalpad.

Dankbetuiging We willen graag alle personeelsleden in onze groep bedanken voor hun steun en de Shenzhen Science and Technology Innovation Committee voor hun financiële steun voor deze studie.

Financiering Dit werk werd financieel ondersteund door de Shenzhen Science and Technology Innovation Committee (JCYJ20170412155231633), Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund (nr. SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech en het Sanming Project of Medicine in Shenzhen (nr. SZSM202011010); Shenzhen Science and Technology Innovation Committee [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund [Nr. SZXK062]; Sanming-geneeskundig project in Shenzhen [nr. SZSM202011010].

Ethische goedkeuring Alle procedures zijn goedgekeurd door de ethische commissie van het Shenzhen Luohu People's Hospital (ZLNK 12/2019, Shenzhen, China). Geïnformeerde toestemming werd verkregen voor experimenten met menselijke monsters.

Openbaarmakingsverklaring Alle auteurs keurden de indiening van dit manuscript goed. De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen of persoonlijke relaties hebben die het werk dat in dit artikel wordt gerapporteerd, zouden kunnen hebben beïnvloed.

Referenties

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H, et al. Verminderde immuunbewaking versnelt de accumulatie van senescente cellen en veroudering. Nat gemeenschappelijk. 2018;9 (1):5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et al. De kenmerken van ouder worden. Cel. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM, et al. Killers 2.0: NK-celtherapieën in de voorhoede van kankerbestrijding. J Clin Invest. 2019;129(9):3499-3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R, et al. Pluripotente stamcel-afgeleide NK-cellen met niet-splitsbare CD16a met hoge affiniteit mediëren verbeterde antitumoractiviteit. Bloed. 2020;135(6):399-410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Natural killer-cellen: bij gezondheid en ziekte. Hematol Oncol Stamcel Ther. 2015;8(2):47-55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et al. Menselijke NK-cellen vertonen grote fenotypische en functionele veranderingen gedurende de levensduur. Verouderende cel. 2010;9(4):527-535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J, et al. Expressiepatronen van NKG2A, KIR en CD57 definiëren een proces van CD56dim NK-celdifferentiatie losgekoppeld van NK-celeducatie. Bloed. 2010; 116 (19): 3853-3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Leeftijdsgerelateerde veranderingen in het repertoire van natural killer-cellen: impact op de NK-celfunctie en immuunbewaking. Kanker Immunol Immunother. 2016;65(4):417-426. [9] Bi J, Tian Z. NK-celuitputting. Front Immunol. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E, et al. Chronische ontsteking in de etiologie van ziekte gedurende de hele levensduur. Nat Med. 2019;25(12):1822-1832.

[11] Liu Y, et al. Een cytomegalovirus-peptide-specifiek antilichaam verandert de homeostase van natuurlijke killercellen en wordt gedeeld in verschillende auto-immuunziekten. Cel Gastheer Microbe. 2016;19(3):400-408.

[12] Campus X, Pera A, Solana R, et al. NK-cellen bij gezond ouder worden en ouderdomsziekten. J Biomed Biotechnol. 2012;2012:195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP, et al. Effect van veroudering op de nk-celpopulatie en hun proliferatie bij ex vivo kweekomstandigheden. Anale celpathol (Amst). 2018;2018:7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A, et al. Farmacologische effecten van vitamine D en zijn analogen: recente ontwikkelingen. Drug Ontdek vandaag. 2014; 19 (11): 1769-1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J, et al. Verzwakking van constitutieve DNA-schadesignalering door

Vraag voor meer:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950