Het effect van humusrijke stoffen in de voeding op de cellulaire immuniteit en bloedkenmerken bij biggen

Abstract: Het doel van deze studie was om de impact van humussubstanties in de voeding op de immuunrespons en bloedprofielen bij biggen te bepalen. Een totaal van 24 gekruiste biggen (Slowaaks wit x landras; 35 dagen oud; gemiddeld lichaamsgewicht 11,67 kg) werd toegewezen aan twee voedingsgroepen met (experimenteel; 5 g·kg−1 ) of zonder (controle; 0 g·kg−1 ) aanvulling van natuurlijke humusstoffen. In deze studie hebben we een significante toename waargenomen in het aandeel CD4+CD8- lymfocyten (p < {{10}}.001) in de experimentele groep. De resultaten toonden ook een tendens aan voor een toename van de fagocytische activiteit en het opslorpende vermogen van fagocyten en de aantallen van de andere bewaakte lymfocytsubpopulaties (CD3+, CD21+, CD4-D 8+, CD4+CD8+, CD4+CD25+) bij biggen in de experimentele groep vergeleken met de controlegroep. Suppletie van humusstoffen verhoogde de alkalische fosfatase in serum vergeleken met de controlegroep (p < 0,05). Andere gecontroleerde bloedparameters werden niet significant beïnvloed door een dieetbehandeling. Het concludeerde dat de opname van humusstoffen in de voeding van biggen een stimulerend effect zou kunnen hebben op de cellulaire immuniteit, zonder een negatief effect op hematologische en biochemische parameters.

Trefwoorden: humusstoffen; fagocytose; lymfocyt; bloed biochemie; hematologie; biggen

voordelen van cistanchesupplement - hoe het immuunsysteem te versterken

1. Inleiding

Humusstoffen (HS) zijn een klasse van niet-voedzame natuurlijke organische bioactieve verbindingen die in de bodem worden gevormd [1]. Het zijn belangrijke humusbestanddelen waarvan de primaire functie het overbrengen van voedingsstoffen uit de bodem naar levende organismen is. HS omvat specifiek humuszuur, fulvinezuur en humine als hun hoofdbestanddelen [2]. Deze componenten zijn essentieel voor de plantengroei [3] en kunnen een efficiënt gebruik van voedingsstoffen door de plant bevorderen [4]. Door het verbod op het gebruik van antibiotica als groeibevorderaar in de Europese Unie is de belangstelling voor alternatieve diervoederadditieven voor de dierlijke productie toegenomen [5]. In de afgelopen twintig jaar is de belangstelling voor het gebruik van HS in diervoeding toegenomen [2,6]. Veel auteurs hebben tijdens hun onderzoek een verbetering van de productieparameters waargenomen na toevoeging van HS aan voer. De afgelopen jaren is aangetoond dat HS toegevoegd aan het voer van dieren met één maag, zoals varkens, pluimvee en konijnen, de groei bevordert [7–10]. Bovendien wordt HS in veterinaire praktijken gebruikt als immunostimulerend, diarree-, pijnstillend en antimicrobieel middel [11-13]. De toevoeging van biologisch actieve supplementen van humusachtige aard aan de voeding van dieren stimuleerde metabolische processen en de verteerbaarheid van voedingsstoffen en activeerde ook de opname van sommige minerale elementen [14]. Uit andere onderzoeken is gebleken dat HS de uitscheiding van ammoniak uit mest helpt verminderen en het relatieve aantal bloedlymfocyten verbetert. De bovengenoemde wijzigingen bevorderen de immuniteit van de dieren [2,8,15]. Vanwege de verschillende bronnen en soorten HS-preparaten en het feit dat er geen enkele standaard bestaat voor het meten van echte HS-effecten, hangt hun bio-effect echter af van de specificatie. Gebaseerd op onze eerdere resultaten en ervaringen uit pluimveestudies (vleeskuikens en leghennen) naar het effect van humusstoffen (in concentraties van respectievelijk 0.8% en 0.5%) op de immuunstatus en immuunrespons, besloten we dit effect bij biggen te verifiëren. We hebben een significante toename in fagocytactiviteit en B-celrespons waargenomen, evenals een significante toename in de CD4+:CD8+-lymfocytenverhouding [16,17]. Over het algemeen is suppletie als voeradditief bij varkens niet goed gerapporteerd in vergelijking met pluimvee, en wetenschappelijke onderzoeken naar de invloed van HS-suppletie in de diëten van varkens op de immuniteit en het metabolisme zijn nog steeds relatief beperkt. Daarom werd deze studie, als pilotproef, uitgevoerd om het effect van 0,5% HS-suppletie op de immuunindicatoren te beoordelen, evenals op biochemische en hematologische variabelen in het bloed van biggen.

voordelen van cistanchesupplement - hoe het immuunsysteem te versterken

Klik hier om de producten van Cistanche Enhance Immunity te bekijken

【Vraag om meer】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats-app: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. materialen en methoden

2.1. Experimenteel ontwerp

Het experiment werd uitgevoerd in overeenstemming met de "Europese richtlijn inzake de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt" [18]. De dieren werden gehuisvest in erkende stallen van de afdeling Diervoeding en Veehouderij van de Universiteit voor Diergeneeskunde in Košice, Slowakije, onder de vereiste zoöhygiënische omstandigheden. Tijdens het experiment was de gemiddelde temperatuur in de stal 20.2 ± 1,5 ◦C en de relatieve vochtigheid 68,5 ± 4,8%. Het onderzoek werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van de Universiteit voor Diergeneeskunde en Farmacie in Košice (protocol nr. EKV/2022-11). In totaal werden 24 gekruiste (Slowaakse witte x Landrace) 35-eendagsbiggen verdeeld in twee groepen (n=12; 50% mannelijk en 50% vrouwelijk in beide groepen). Voorafgaand aan de start van het experiment werd een aanvankelijk gemiddeld lichaamsgewicht van het dier van 11,68 ± 1,35 kg in de controlegroep en 11,65 ± 1,34 kg in de experimentele groep geregistreerd. De volgende experimentele groepen werden bij het onderzoek betrokken: de controlegroep en de experimentele groep, waarbij het dieet van de experimentele groep werd aangevuld met een HS-supplement van 0,5%. Het experiment duurde 4 weken. In het experiment werden voor beide groepen dezelfde diëten gebruikt (Tabel 1). De introductie van het HS-supplement in de voeding ging in de experimentele groep ten koste van gerst. De varkens werden tweemaal daags gevoerd met volledige voermengsels. Drinkwater was gedurende de gehele experimentele periode ad libitum beschikbaar voor de dieren. De volledige voermengsels in het experiment werden door Šimeˇcek et al. samengesteld volgens de voedingsbehoeften. [19]. Het natuurlijke voedingssupplement (HUMAC® Natur AFM; Humac, Ltd., Košice, Slowakije) werd gemalen en fysiek gezuiverd met Leonardite zonder chemische behandeling. De volledige voermengsels werden geanalyseerd op droge stof, ruw eiwit, ruwe celstof, totaal as, zetmeel en totaal fosfor volgens Verordening 152/2009 van de Europese Commissie [20]. Het calcium- en natriumgehalte in de voeding werd geanalyseerd met behulp van de vlammethode van een atomaire absorptiespectrometer (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, VK). De metaboliseerbare energiewaarden van volledige voermengsels werden berekend met de formule volgens Šimeˇcek et al. [19].

2.2. Bemonstering en metingen

In week 4, 's ochtends op de laatste dag van het experiment, werden bloedmonsters genomen door middel van de orbitale sinuspunctie van alle varkens afzonderlijk in beide groepen voor daaropvolgende analyse. Serum werd verkregen door centrifugatie (3000 rpm gedurende 30 minuten) en bewaard bij -20 ◦C tot analyse. Gehepariniseerd bloed werd gebruikt om hematologische parameters te bepalen, fagocytactiviteit te testen en lymfocytsubpopulaties te identificeren.

Tabel 1. Formule en chemische samenstelling van voermengsels voor varkens (zoals gevoerd).

2.2.1. Hematologische en serumbiochemische parameters

Een volledig bloedbeeld werd uitgevoerd met een geautomatiseerde hematologieanalysator (scil Vet ABC™ Hematology Analyzer, Duitsland). De variabelen die in ons onderzoek werden geëvalueerd, waren de hematocrietwaarde (HCT), de hemoglobineconcentratie (Hb), het aantal rode bloedcellen (RBC), het gemiddelde corpusculaire volume (MCV) en het totale aantal witte bloedcellen (WBC). Biochemische serumparameters - totaal eiwit, albumine, glucose, ureum, triglyceriden, cholesterol, creatinine, aspartaataminotransferase (AST), alkalische fosfatase (ALP) en fosfor werden gemeten met behulp van een volledig automatische random access benchtop-analysator (Ellipse, Italië). De calciumconcentratie in serum werd bepaald met behulp van een vlamatoomabsorptiespectrometer (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, VK).

2.2.2. Biomarker van de lipideperoxidatie

De concentraties van lipideperoxidatieproducten (malondialdehydeniveaus, MDA) in serum werden gemeten als thiobarbituurzuurreactieve stoffen (TBAR's) volgens de spectrofotometrische modificatiemethode beschreven door Costa et al. [21]. In het kort werden serummonsters gemengd met een oplossing bestaande uit trichloorazijnzuur (15%; Merck, Darmstadt, Duitsland), thiobarbituurzuur (0.38%; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, VS) en zoutzuur (0.25 N; Mikrochem, Pezinok, Slowakije) en gedurende 30 minuten verwarmd in een kokend waterbad. Na afkoelen in ijswater en centrifugeren werd de absorptie van de bovenstaande vloeistof gemeten bij 535 nm. De concentratie TBAR's werd bepaald aan de hand van de standaardcurve opgesteld met behulp van 1,1,3,3-tetramethoxypropaan (malondialdehyde-bis (dimethylacetaal); Acros Organics, Geel, België). De resultaten werden uitgedrukt als nmol MDA/ml serum.

cistanche plantverhogend immuunsysteem

2.2.3. Testen van fagocytactiviteit en identificatie van subpopulaties van lymfocyten

Een commerciële Phagotest®-test (Celonic, München, Duitsland) werd gebruikt om de fagocytische activiteit en het overspoelingsvermogen van de fagocyten te bepalen. Bij het uitvoeren van de test zijn de instructies van de fabrikant gevolgd. Er werd een directe immunokleuringstest toegepast om geselecteerde subpopulaties van lymfocyten te identificeren. Twee combinaties van geconjugeerde monoklonale antilichamen tegen varkens: CD3e/CD21 en CD4/CD8a/CD25 werden gebruikt volgens de specificaties in Tabel 2. Gehepariniseerd bloed in een hoeveelheid van 50 µl werd gedurende 15 minuten in het donker met monoklonale antilichamen geïncubeerd. bij laboratoriumtemperatuur. Na incubatie werd 1 ml BD FACS-lyseoplossing aan de buizen toegevoegd. De buizen werden nog eens 20 minuten in het donker bij laboratoriumtemperatuur geïncubeerd en vervolgens gecentrifugeerd (300 x g gedurende 5 minuten). Celpellets werden vervolgens gewassen en tweemaal 5 minuten bij 300 x g gecentrifugeerd met 1 ml fosfaatbufferzoutoplossing (PBS; MP Biomedicals, Illkirch-Graffenstaden, Frankrijk). Ten slotte werden de cellen opnieuw gesuspendeerd in 200 µl PBS voor daaropvolgende cytometrische analyse.

Tabel 2. Specificatie en hoeveelheden gebruikte monoklonale antilichamen tegen muizen.

Analyse van fagocytische activiteit en de identificatie van subpopulaties van lymfocyten werd uitgevoerd op een zeskleuren BD FACSCantoTM flowcytometer (Becton Dickinson Biosciences, San Jose, CA, VS) met behulp van BD FACS DivaTM-software. De positie van de geanalyseerde cellen werd vastgelegd in FSC versus SSC-puntdiagrammen. Granulocyten, monocyten en beide celpopulaties samen werden respectievelijk afgesloten voor analyse van fagocytische activiteit. Op basis van het lage DNA-gehalte in het rode fluorescentiehistogram (FL-2) werden bacteriële aggregaten uitgesloten van verdere analyse. Het percentage actieve fagocyten en de gemiddelde fluorescentie-intensiteit werden bepaald in het groene fluorescentiehistogram (FL-1). Gated lymfocyten (Figuur la, b) werden gebruikt voor de identificatie van subpopulaties van lymfocyten. CD3+-lymfocyten vertegenwoordigen T-lymfocyten en CD21+ B-lymfocyten (Figuur 1c). De CD4+CD8--subpopulatie werd geëvalueerd als T-helperlymfocyten, CD4-CD8+ als cytotoxische lymfocyten, CD4+CD8+ als dubbele positieve T-lymfocyten (Figuur 1d) en CD4+CD25+ als regulerende T-lymfocyten (Figuur 1e). De verhoudingen van lymfocyten worden uitgedrukt in procenten.

2.3. Statistische analyse

De resultaten werden statistisch geëvalueerd door een ongepaarde t-test met de statistische software GraphPad Prism 8.0. Een waarde van p < 0.05 werd als statistisch significant beschouwd. De bij dit experiment verkregen resultaten werden uitgedrukt als gemiddelde ± standaardfout van de gemiddelden (SEM).

Figuur 1. Gating-strategie: (a) bepaling van de positie van lymfocyten (rood) op de basispuntgrafiek (FSC-A versus SSC-A); (b) het verwijderen van doubletten en agglomeraten uit de analyse; (c) analyse van de representatie van CD3+- en CD21+-lymfocyten; (d) analyse van de representatie van CD4+- en CD8+-lymfocyten; (e) bepaling van de weergave van CD4+CD25+-lymfocyten op histogram van CD4+-positieve cellen (gepoort met groen).

3. Resultaten

3.1. Hematologische en serumbiochemische parameters

De effecten van HS op hematologische en biochemische bloedprofielen worden weergegeven in Tabel 3. De bepaalde bloedparameters, waaronder het gehalte aan rode bloedcellen, witte bloedcellen, hemoglobine, hematocriet, gemiddeld corpusculair volume, totaal eiwit, albumine, glucose, ureum, triglyceriden , cholesterol, creatinine, AST, Ca en P werden niet beïnvloed door de HS-dieetbehandeling. Voedingssuppletie met HS verhoogde echter de activiteit van ALP (p < 0.05).

Tabel 3. Effect van humusstoffen op enkele hematologische en serumbiochemische parameters bij biggen

Het serum-TBAR-niveau, secundaire producten van lipideperoxidatie (die een belangrijke parameter zijn die wordt gebruikt bij de bepaling van lipideperoxidatie), werd niet beïnvloed door de toevoeging van HS.

3.2. Cellulaire immuunrespons

De toevoeging van HS aan het voer van biggen had geen significant effect op het percentage actieve fagocyten (Tabel 4) en het opnamevermogen van de fagocyten (Tabel 5). De hogere waarden van deze aangeboren immuunresponsparameters werden gevonden in de experimentele groep vergeleken met de controlegroep.

Tabel 4. Effect van humusstoffen op de fagocytactiviteit in het bloed van biggen, beoordeeld als percentage actieve fagocyten – fagocytische activiteit

Tabel 5. Effect van humussubstanties op het verzwelgende vermogen van de fagocyten, uitgedrukt als gemiddelde fluorescentie-intensiteit (MFI).

Figuur 2. Vervolg.

Figuur 2. Effect van humusstoffen op het percentage lymfocyten: (a) CD3+; (b) CD21+; (c)CD4+CD8-; (d)CD4-CD8+; (e)CD4+CD8+; (f) CD4+CD{{10}}; en (g) verhouding van CD4:CD8-lymfocyten in het bloed van de biggen. De kolom die is gelabeld met een asterisk verschilt significant van de controle (*** p < 0,001).

4. Discussie

4.1. Cellulaire immuunrespons

Het belangrijkste doel van ons onderzoek was om na te gaan hoe humussubstanties (HS) een aantal verschillende cellulaire immuniteitsindicatoren beïnvloedden. Het percentage actieve fagocyten en hun overspoelende capaciteit werden geselecteerd als indicatoren voor het monitoren van het effect op de aangeboren cellulaire immuniteit. In onze vorige studie werd gevonden dat de toevoeging van HS aan de diëten ({0}},8%) van vleeskuikens de fagocytische activiteit en de gemiddelde fluorescentie-intensiteit aanzienlijk verhoogde [16]. Bovendien observeerden ELnaggar en El-Kelawy [22] een toename in fagocytische activiteit en fagocytische index na suppletie met humuszuur aan het dieet (0.1, 0.2, en 0. 4%) Sacco-kippen. Soortgelijke bevindingen werden verkregen bij legkippen [17]. In de huidige studie had de suppletie van HS aan het dieet van biggen geen significant effect op fagocytose. Het percentage actieve fagocyten en hun opnamecapaciteit waren echter numeriek hoger bij biggen aangevuld met HS dan bij biggen in de controlegroep. Volgens Sanmiguel en Rondón [23] is het effect van HS op fagocyten tijdsafhankelijk. Ze ontdekten dat de toevoeging van HS aan de diëten (0.1 en 0.2%) van legkippen de fagocytische index verhoogde op dag 8 en 30 van toediening, maar vergeleken met met die van Wang et al. [2], die ontdekten dat varkens aan wie het voer 10% HS had toegevoegd, een hoger relatief aantal lymfocyten hadden. Soortgelijke resultaten werden verkregen bij pluimvee, dat een dieet kreeg aangevuld met 0,15% humaat [24], of werd aangevuld met 20 mg humuszuur/kg lichaamsgewicht in drinkwater [25]. Volgens Cetin et al. [24], de aanvulling van het voer van legkippen met humusverbindingen resulteert in een significante toename van het aantal lymfocyten, wat kan worden toegeschreven aan een verhoogde productie van IL-2, evenals aan de expressie van de IL{{29} } receptor op lymfocyten. Humusstoffen lijken de activiteit van IL-2-producerende cellen te versterken. Andere auteurs hebben echter geen significant effect op het aantal lymfocyten waargenomen bij varkens die gevoed werden met humuszuursupplementen [26] en ook niet bij kippen die humuszuren via hun drinkwater [27] of hun dieet kregen [22]. . Onze resultaten zijn vergelijkbaar met de observaties van Mudro ˇnová et al. [16], die ontdekten dat het percentage CD4-lymfocyten significant verhoogd was bij vleeskuikens die HS-suppletie kregen (0,8%) vergeleken met de controlegroep. Ze merkten ook een significante afname van het aantal CD8+-lymfocyten (T-cytotoxische lymfocyten) op, wat resulteerde in een statistisch hogere CD4:CD8-ratio, die wordt gebruikt als een marker voor immuunstimulatie. Aan de andere kant verhoogde het voeren van legkippen met een dieet van 0,5% HS significant het aandeel IgM+-lymfocyten die een subpopulatie van B-lymfocyten vertegenwoordigen en verminderde het aandeel CD3+-lymfocyten die de totale T-lymfocyten vertegenwoordigen aanzienlijk. Het aandeel T-helper- en T-cytotoxische lymfocyten werd niet beïnvloed [17]. Op basis van onze resultaten en diverse onderzoeken volgt hieruit dat HS een immuunstimulerend effect kan hebben dat kan worden beïnvloed door de samenstelling en hoeveelheid van de gebruikte humaten, de wijze van toediening ervan, de diersoort en, volgens ELnaggar en El -Kelawy [22], door het fokken van dieren in verschillende delen van de wereld, met verschillende klimaten. De immunomodulatie van HS zou theoretisch kunnen bestaan ​​uit de vorming van complexen van humaten met sacchariden. Deze complexen binden zich aan het oppervlak van T-lymfocyten en NK-cellen en beïnvloeden hun functie, inclusief de productie van cytokines, die andere cellen van het immuunsysteem verder beïnvloeden [28].

cistanche tubulosa-verbetering van het immuunsysteem

4.2. Hematologische en serumbiochemische parameter

Een ander doel van deze studie was het evalueren van geselecteerde hematologische en biochemische bloedparameters van biggengevoerde diëten aangevuld met HS. Er werd geen significant verschil gevonden in geselecteerde variabelen van het eiwit-, energie- en mineraalmetabolisme, evenals in hematologische indices, tussen de experimentele groep dieren met HS-supplementen in de voeding en de controlegroep, behalve de ALP-activiteit in het huidige onderzoek. Volgens Doubek et al. lagen de biochemische indicatoren in ons onderzoek bij alle biggen binnen het referentiebereik. [29] en Kraft en Dürr [30]. Onze bevindingen komen overeen met eerder werk van Wang et al. [2], die tijdens de proef geen significante veranderingen in de rode en witte bloedcellen vonden in hun onderzoek naar de effecten van HS op bloedvariabelen bij vleesvarkens. Na behandeling met een HS-bevattend dieet, concludeerden Herzig et al. [31], en ook Šamudovská en Demeterová [32], observeerden een niet-significant verhoogde ALP-activiteit bij kippen. In ons onderzoek ontdekten we dat de experimentele groep een significant hogere ALP-activiteit had dan de controlegroep. Hun waarden bleven ondertussen binnen het referentiebereik voor ALP-niveaus bij varkens (2–17 kat·L −1 ) [29,30]. Aan de andere kant, Jad'uttová et al. [33] en Rath et al. [34] merkte een significante vermindering van de ALP-activiteit op bij kippen na het voeren met HS. Volgens deze auteurs daalden de bloedspiegels van ALP bij vleeskuikens die een HS-voersupplement van 1,00% kregen. Hoewel de verlaagde waarden van ALP-activiteit in de Rath et al. [34] studie waren statistisch verschillend van de controles, ze weerspiegelden geen enkel toxisch effect van HS op selectieve organen (spieren, nieren, hart of lever). De hoeveelheid HS die door de voeding wordt geleverd, kan de concentratie van mineralen in het bloed beïnvloeden. De calcium- en fosforwaarden in het bloedserum van de biggen werden niet beïnvloed door de toediening van HS in een concentratie van 0,5%. Het vermogen van HS om metalen te cheleren, dat wordt beïnvloed door een aanzienlijke hoeveelheid carbonzuurzijketens, zou de reden kunnen zijn voor de afname van de mineraalserumconcentraties [34]. In ons onderzoek werden de concentraties calcium en fosfor in het bloed van biggen niet verlaagd tot onder de referentiewaarden door toevoeging van HS aan het voermengsel van de experimentele groep. MDA is het product van lipideperoxidatie veroorzaakt door vrije zuurstofradicalen, dat kan worden gebruikt als marker om de antioxidantstatus en lipideperoxidatie te beoordelen [35]. MDA werd bepaald als biomarker voor oxidatieve stress door het meten van de niveaus van thiobarbituurzuurreactieve stoffen (TBAR's) in het bloed. Een afname van oxidatieve stress wordt gekenmerkt door een verlaging van de MDA-niveaus. Eerder onderzoek heeft aangetoond dat HS mogelijk antioxiderende eigenschappen heeft en beschermt tegen een verscheidenheid aan aandoeningen die verband houden met de oxidatieve stress die vrije radicalen doorgaans veroorzaken. Wang et al. [15] ontdekten dat voedingssuppletie van natriumhumaat (2000 mg·kg−1 ) de antioxidantstatus van gespeende biggen zou kunnen verbeteren. Ze observeerden een significante vermindering van het MDA-gehalte in het serum, evenals een significante toename van de totale antioxidantcapaciteit. HS zijn echter natuurlijke materialen met een variabele samenstelling, die een verschillende effectiviteit kunnen veroorzaken, die ook kan afhangen van de toegediende hoeveelheid. In het huidige experiment werd geen variatie waargenomen in serum-MDA (TBARs)-niveaus van biggen die HS kregen toegediend in vergelijking met de controlegroep. Onze resultaten komen overeen met die van Zhang et al. [36], die ontdekten dat de toevoeging van natriumhumaat aan de diëten (0,1, 0,3 en 0,5%) van legkippen geen effect had op de totale antioxidantcapaciteit in serum en de MDA-waarden.

voordelen van cistanchesupplement - hoe het immuunsysteem te versterken

5. Conclusies

Op basis van de resultaten uit dit onderzoek kan geconcludeerd worden dat een voedingssuppletie met 0,5% humusstoffen een stimulerend effect zou kunnen hebben op sommige immuuncellen bij biggen. Er was een significante toename van het aandeel CD4+CD8--lymfocyten in het bloed. Suppletie met humusstoffen verhoogde serum-ALP. Deze waarden lagen echter nog steeds binnen het referentiebereik. De resultaten toonden aan dat zelfs zo’n lage concentratie HS de cellulaire immuniteit bij biggen positief kan beïnvloeden. Vanwege het feit dat de door ons gekozen concentratie van humusstoffen slechts een significant effect had op enkele indicatoren van cellulaire immuniteit, zullen verdere onderzoeken nodig zijn om een ​​geschikte concentratie te kiezen en het stimulerende effect op de immuniteit bij deze categorie dieren te bevestigen.

Referenties

1. Peña-Méndez, EM; Havel, J.; Patoˇcka, J. Humusstoffen-verbindingen met een nog onbekende structuur: toepassingen in de landbouw, industrie, milieu en biogeneeskunde. J. Appl. Biomedisch. 2005, 3, 13–24. [Kruisref]

2. Wang, Q.; Chen, YJ; Yoo, JS; Kim, HJ; Cho, JH; Kim, IH Effecten van aanvullende humusstoffen op groeiprestaties, bloedeigenschappen en vleeskwaliteit bij vleesvarkens. Leef. Wetenschap 2008, 117, 270–274. [Kruisref]

3. Visser, SA Effect van humusverbindingen op hogere dieren en mensen, het mogelijke gebruik van humusverbindingen bij medische behandelingen. In Proceedings of the International Humic Acid Society Meeting, Sevilla, Spanje, 1988; P. 27.

4. Stevenson, FJ Humuschemie: Genesis, samenstelling, reacties; Wiley-Inter-Science: New York, NY, VS, 1994; blz. 34–41.

5. Hassan, HMA; Mohamed, MA; Youssef, AW; Hassan, ER Effect van het gebruik van organische zuren ter vervanging van antibioticagroeibevorderaars op de prestaties en de darmmicroflora van vleeskuikens. Aziatisch-Aust. J. Anim. Wetenschap 23, 2010, 1348–1353. [Kruisref]

6. Galik, B.; Hrnˇcár, C.; Gašparoviˇc, M.; Rolinec, M.; Hanušovský, O.; Juráˇcek, M.; Šimko, M.; Zábranský, L.; Kovacik, A. Het effect van humusstoffen op de vleeskwaliteit bij het vetmesten van boerderijfazanten (Phasianus colchicus). Landbouw 2023, 13, 295. [Kruisref]

7. Karaoglu, M.; Macit, M.; Esenbuga, N.; Durdag, H.; Turgut, L.; Bilgin, OC Effect van aanvullend humaat op verschillende niveaus op de groeiprestaties, slacht- en karkaseigenschappen van vleeskuikens. Int. J. Poult. Wetenschap 2004, 3, 406–410.

8. Ji, F.; McGlone, JJ; Kim, SW Effecten van humussubstanties in de voeding op de groeiprestaties van varkens, karkaskenmerken en ammoniakemissie. J. Anim. Wetenschap 2006, 84, 2482–2490. [Kruisref]

9. Lacková, Z.; Zigo, F.; Farkašová, Z.; Ondrašoviˇcová, S. Het effect van humusstoffen als organisch supplement op de vetmestingsprestaties, de kwaliteit van het vlees en geselecteerde biochemische parameters van konijnen. Leven 2022, 12, 1016. [Kruisref]

10. Kaevska, M.; Lorencova, A.; Videnska, P.; Sedlar, K.; Provaznik, ik.; Trckova, M. Effect van natriumhumaat en zinkoxide gebruikt bij de profylaxe van diarree na het spenen op de samenstelling van de fecale microbiota bij gespeende biggen. Dierenarts. Med. 2016, 61, 328-336. [Kruisref]

11. Trckova, M.; Matlova, L.; Hoedcova, H.; Martin, F.; Zraly, Z.; Dvorska, L.; Beran, V.; Pavlik, I. Turf als voedingssupplement voor dieren: een overzicht. Dierenarts. Med. -Tsjechisch. 2005, 50, 361–377. [Kruisref]

12. Weber, TE; van Sambeek, DM; Gabler, NK; Kerr, BJ; Moreland, S.; Johal, S.; Edmonds, MS Effecten van humus- en boterzuur in de voeding op de groeiprestaties en reactie op lipopolysacharide bij jonge varkens. J. Anim. Wetenschap 2014, 92, 4172–4179. [Kruisref]

13. Mao, Y. Modulatie van de groeiprestaties, vleessamenstelling, oxidatieve status en immuniteit van vleeskuikens door fulvinezuren in de voeding. Kuiken. Wetenschap 2019, 98, 4509–4513. [Kruisref] [PubMed]

14. Stepchenko, LM De rol van humuspreparaten bij het beheer van metabolische processen bij de vorming van biologische producten van landbouwdieren. In prestaties en vooruitzichten voor het gebruik van humushoudende stoffen in de landbouw; Uitgeverij van het Landbouwinstituut: Dnepropetrovsk, Oekraïne, 2008; blz. 70–74. (In het Russisch)

15. Wang, Q.; Ying, J.; Zou, P.; Zhou, Y.; Wang, B.; Yu, D.; Li, W.; Zhan, X. Effecten van voedingssuppletie van humuszuurnatrium en zinkoxide op de groeiprestaties, de immuunstatus en het antioxidantvermogen van gespeende biggen. Dieren 2020, 10, 2104. [CrossRef] [PubMed]

16. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V.; Pešulová, T.; Košˇcová, J.; Marušˇcáková, IC; Bartkovský, M.; Marcinˇcáková, D.; Ševˇcíková, Z.; Marcinˇcák, S. Het effect van humusstoffen op de darmmicrobiota en de immuunrespons van vleeskuikens. Voedsel Landbouw. Immunol. 31, 137–149 2020. [Kruisref]

17. Mudro ˇnová, D.; Karaffová, V.; Semjon, B.; Nad', P.; Košˇcová, J.; Bartkovský, M.; Makiš, A.; Buj ˇnák, L.; Nagy, J.; Mojžišová, J.; et al. Effecten van voedingssuppletie van humusstoffen op productieparameters, immuunstatus en darmmicrobiota van leghennen. Landbouw 2021, 11, 744. [Kruisref]

18. Europese Commissie. Richtlijn 2010/63/EU van het Europees Parlement en de Raad van 22 september 2010 betreffende de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt. Uit. J.Eur. Unie 2010, 276, 33-79.

19. Šimeˇcek, K.; Zeman, L.; Heger, J. Nutriëntenbehoefte en tabellen met voedingswaarden van varkensvoer, 3e editie; Tsjechische Academie voor Landbouwwetenschappen: Brno, Tsjechië, 2000; 125p. (In het Tsjechisch)

20. Europese Commissie. Verordening (EG) nr. 152/2009 van de Commissie van 27 januari 2009 tot vaststelling van de bemonsterings- en analysemethoden voor de officiële controle van diervoeders. Uit. J.Eur. Unie. 2009, 54, 2-54.

21. Costa, CM; Santos, RCC; Lima, ES Een eenvoudige geautomatiseerde procedure voor thiolmeting in menselijke serummonsters. J. Bras. Patol. Med. Laboratorium. 2006, 42, 345-350. [Kruisref]

22. ELnaggar, AS; El-Kelawy, MI Effect van humuszuursuppletie op productieve prestaties, bloedbestanddelen, immuunrespons en karkaskenmerken van Sasso-kip. Egypte. J. Anim. Prod. 2018, 55, 75–84.

23. Sanmiguel, PR; Rondón, BI Suppletie met humusstoffen beïnvloedt de aangeboren immuniteit bij leghennen in de nuchtere fase. Rev. MVZ Córdoba 2016, 21, 5198–5210. [Kruisref]

24. Cetin, E.; Guclu, BK; Cetin, N. Effect van suppletie met humaat- en organisch zuur op sociale stress veroorzaakt door een hoge bezettingsdichtheid bij legkippen. J. Anim. Dierenarts. Gev. 2011, 10, 2402–2407.

25. Salah, H.; Mansour, E.; Reham, RR; Abd El Hamid, ES Onderzoek naar het effect van humuszuur op de groeiprestaties, immunologisch, enkele bloedparameters en controle van darmclostridium bij vleeskuikens. Zag. Dierenarts. J. 2015, 43, 102–109. [Kruisref]

26. Kim, K.; Bae, ik.; Cho, J.; Choi, Y.; Ha, J.; Choi, J. Effecten van suppletie met humuszuur en bosbessenbladpoeder in voer op de productiviteit, bloed- en vleeskwaliteit van vleesvarkens. Voedsel wetenschap. Animatie Resour. 2019, 39, 276–285. [Kruisref] [PubMed]

27. Lala, AO; Okwelum, N.; Irekhore, OT; Ogunlade, BA; Adigun, AA; Elegbede, LA; Oyedeji, MM Hematologische en biochemische parameters van vleeskuikens aangevuld met humuszuur in het drinkwater. Appl. Trop. Landbouw. 2016, 21, 74-78.

28. Terratol, LLC Effecten van humuszuur op dieren en mensen. Online beschikbaar: https://fulvic.info/wp-content/uploads/2019 /01/M-Terratrol_Artikel-1.pdf (geraadpleegd op 10 augustus 2022).

29. Doubek, J.; Šlosárková, S.; ˇReháková, K.; Bouda, J.; Scheer, P.; Piperisová, I.; Tomenendálová, J.; Matalová, E. Interpretatie van fundamentele biochemische en hematologische bevindingen bij dieren, 2e ed.; Noviko: Brno, Tsjechië, 2010; P. 102. (In het Tsjechisch)

30. Kraft, W.; Dürr, UM Klinická Laboratórna Diagnostika vo Veterinárnej Medicíne, 1e druk; Hajko & Hajková: Bratislava, Slowakije, 2001; blz. 1–380. (In het Slowaaks)

31. Herzig, I.; Navrátilová, M.; Totušek, J.; Suchý, P.; Veˇcerek, V.; Blahová, J.; Zralý, Z. Het effect van humuszuur op zinkophoping in vleeskuikenweefsels. Tsjechische J. Anim. Wetenschap 2009, 54, 121–127. [Kruisref]

32. Šamudovská, A.; Demeterová, M. Effect van voeding aangevuld met natuurlijke humusverbindingen en natriumhumaat op de prestaties en geselecteerde metabolische variabelen bij vleeskuikens. Acta Dierenarts. Brno 2010, 79, 385-393. [Kruisref]

33. Jad'uttová, I.; Marcinˇcáková, D.; Bartkovský, M.; Semjon, B.; Harˇcárová, M.; Nagyová, A.; Váczi, P.; Marcinˇcák, S. Het effect van humussubstanties in de voeding op de mestprestaties, de karkasopbrengst, bloedbiochemische parameters en het botmineraalprofiel van vleeskuikens. Acta Dierenarts. Brno 2019, 88, 307–313. [Kruisref]

34. Rath, NC; Huff, WIJ; Huff, GR Effecten van humuszuur op vleeskuikens. Kuiken. Wetenschap 2006, 85, 410–414. [Kruisref]

35. Sumida, S.; Tanaka, K.; Kitao, H.; Nakadomo, F. Door inspanning geïnduceerde lipideperoxidatie en lekkage van enzymen voor en na vitamine E-suppletie. Int. J. Biochem. 1989, 21, 835-838. [Kruisref]

36. Zhang, AR; Pirzado, SA; Liu, GH; Chen, ZM; Chang, WH; Cai, HY; Bryden, WL; Zheng, AJ Voedingssuppletie met natriumhumaat verbetert de eikwaliteit en de immuunfunctie van legkippen. J. Appl. Animatie Nutr. 8, 93–99 2020. [Kruisref]