De studie van Cistanche Deserticola-plakken en het met stoom verwerkte wijnproduct van Cistanche Deserticola
Mar 10, 2022
Het verschil tussen chemische componenten en biologische activiteiten van de plakjes rauwe producten en het met stoom verwerkte wijnproduct van Cistanche
Contactpersoon: emily.li@wecistanche.com
Ying Zhang,1,2 Yuewu Wang,3 Song Yang,1 Yunfeng Xiao,3 Haibin Guan,2 Xin Yue,2 Xiaoqin Wang,2 en Xiangri Li 1
Abstract
Als een bekend Chinees kruidengeneesmiddel,Cistanche deserticolawordt al duizenden jaren gebruikt voor de behandeling van het nierdeficiëntiesyndroom in China. Zowel het ruwe product vanCistanche deserticola plakjes(RCD) en zijnStoomverwerkt wijnproduct(WSCD) worden klinisch gebruikt voor verschillende effecten. In deze studie zijn de invloeden van het stoomproces met wijn (SPW) vanCistanche deserticolaop chemische samenstellingen en biologische effecten werden onderzocht. De principale componentenanalyse (PCA) en kwantitatieve analyse werden gebruikt om de verschillen in de chemische samenstellingen te bestuderen. De effecten van voedende nieren werden ook onderzocht om de verschillen tussen de RCD (Cistanche deserticola plakjes)en de WSCD (Stoomverwerkt wijnproduct). De PCA-resultaten gaven aan dat de voor de hand liggende scheiding werd bereikt in de RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD (Stoomverwerkt wijnproduct). De resultaten van de kwantitatieve analyse toonden aan dat de WSCD hogere hoeveelheden totale polysachariden, totale PhG's, isoacteoside en osmanthuside B heeft dan RCD(Cistanche deserticola plakjes), terwijl het gehalte aan 2′-acetylacteoside en acteoside afnam na de SPW. De vergelijking van RCD en WSCD op biologische activiteiten toonde aan dat beide het niveau van geslachtshormoon in het model van nier-yang-deficiëntie konden herstellen en het antioxiderende effect konden verbeteren. de WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)was veel beter in het verhogen van het ingewandengewicht van denieren zaadblaasje. De resultaten gaven aan dat SPW zijn chemische componenten veranderde en zijn biologische activiteiten verbeterde.
1. Inleiding
Cistanche deserticolais een veel voorkomende traditionele Chinese geneeskunde en wordt in China en Japan al vele jaren als tonicum gebruikt, algemeen bekend als "Desert ginseng."Cistanche deserticolawerd voor het eerst geregistreerd als een topcijfer in "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" in ongeveer 100 v. , koud gevoel in de lendenen en knieën, en chronische constipatie bij ouderen [1]. Tot nu toe zijn verschillende hoofdbestanddelen geïsoleerd, zoals polysachariden [2, 3], fenylethanoïde glycosiden (PhG's) [1, 4], iridoïden [1] en lignanoïden [1, 5]. Onder hen is aangetoond dat PhG's en polysachariden de belangrijkste biologisch actieve componenten zijn inCistanche deserticola[6–9]. Moderne farmacologische experimenten hebben aangetoond dat Cistanche deserticola de productie van testosteron kan verhogen en sperma kan beschermen, celproliferatie kan stimuleren en de overlevingskans van cellen kan verhogen, door duidelijke activiteiten voor seksuele potentie te vertonen, het geheugen te verbeteren, veroudering tegen te gaan, het opruimen van vrije radicalen en neuroprotectie [10] –13].
Om de toxiciteit te verminderen en/of de effecten te versterken, moeten de meeste traditionele Chinese kruiden vóór het recept worden verwerkt. De traditionele processtappen omvatten reinigen, waterproces (malen in water, stomen en braden) en vuurproces (roerverwarmen met wijn, azijn, zout of honing) [14]. Tijdens het proces kunnen de chemische componenten worden gewijzigd: de relatieve inhoud van bepaalde componenten kan worden gewijzigd of er kunnen nieuwe componenten worden gevormd [15]. Het proces vanCistanche deserticolaheeft een lange geschiedenis enCistanche deserticolamoet worden verwerkt door in de rijstwijn te weken, te stomen zoals beschreven in Chinese farmacopee (editie 2015) [16]. Het is bewezen dat SPW hun effecten op de niermeridiaan beïnvloedt volgens de theorie van de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) [17]. WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)wordt voor het eerst gedocumenteerd in "Lei Gongs verhandeling over de voorbereiding en het koken van Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" in de noordelijke en zuidelijke dynastieën van China. WSCD wordt beter gebruikt om niertekorten te behandelen en sperma te beschermen, zoals vastgelegd in "Taiping Shenghui Fang" in de Song-dynastie van China. Er waren echter geen vergelijkende onderzoeken naar de chemische componenten tussen RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)dusver.
Moderne farmacologische onderzoeken hebben aangetoond dat WSCD de nier zou kunnen versterken om de essentie vast te stellen door de hypothalamus-hypofyse-gonaden-as in verschillende mate te stimuleren en wordt gebruikt voor de behandeling van een tekort aan de nier, zoals een tekort aan nier-yang [18]. Tot nu toe zijn de verschillen in biologische activiteiten tussen RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)zijn niet onderzocht. Om het experimentele onderzoek te vergemakkelijken, is onlangs het diermodel met nier-yang-deficiëntie gedupliceerd door ratten te injecteren met een hoge dosis hydrocortison, waarbij ratten symptomen zullen vertonen die sterk lijken op die beschreven in nier-yang-deficiëntie van TCM [19, 20] . Ratten met nier-yang-tekort hebben altijd enkele symptomen zoals gewichtsverlies, vermindering van de voedselconsumptie, zwakte, verhoogde wateropname en verminderde activiteit. Op basis van dit diermodel werden de verschillen in voedende niereffecten tussen RCD en WSCD gedetecteerd en onthulden ze zelfs de wetenschappelijke essentie van het traditionele Chinese proces.
Cistanche deserticola heeft vele functies
2. materialen en methoden
2.1. Materialen en chemicaliën
De standaardstof zoals acteoside, isoacteoside, echinacoside, cistanoside A en 2′-acetylacteoside werd gekocht bij Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Shanghai, China). Cistanoside F, cistanoside C, osmanthuside B en tubuloside B werden gekocht bij Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, China). De zuiverheid van alle normen was maar liefst 98 procent. Methanol en acetonitril van HPLC-kwaliteit werden gekocht bij Aladdin Chemistry Inc. (Shanghai, China). Gedeïoniseerd water werd verkregen met behulp van een MilliQ50 SP Reagent Water System (Bedford, MA, VS) voor het bereiden van monsters en mobiele oplossingen. Alle andere organische oplosmiddelen die in dit onderzoek werden gebruikt, waren van analytische kwaliteit en gekocht bij Shanghai Chemical Co. Ltd (Shanghai, China).
2.2. Monsters collectie
Al het rauweCistanche deserticola(7 batches monsters) werden verzameld door de Inner Mongolia Medical University uit de provincies Inner Mongolia en Ningxia. Allen werden geïdentificeerd als:cistanche deserticolaYC Ma door Xiao-qin Wang, de professor van de afdeling Farmacognosie van de Medische Universiteit van Binnen-Mongolië. Een exemplaar van een voucher werd gedeponeerd bij de School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University. Na het verzamelen worden de bloeiwijzen vanCistanche deserticolawerden verwijderd, de stengels werden in plakjes gesneden en bij kamertemperatuur met lucht gedroogd, en vervolgens werden de plakjes willekeurig verdeeld in twee groepen in elke batch: één is RCD(Cistanche deserticola plakjes)en de andere wordt gebruikt voor de voorbereiding van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct).
de WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werden in het laboratorium bereid volgens Chinese farmacopee (editie 2015) [16], wat betekent dat de gesneden RCD(Cistanche deserticola plakjes)werden gedurende 6 uur geweekt in rijstwijn met een gesloten container tot ze zacht waren, nog eens 12 uur in een waterbad gestoomd tot het oppervlak zwart werd en bij kamertemperatuur met lucht gedroogd.
2.3. Hoofdcomponentenanalyse (PCA)
Principale componentenanalyse (PCA) is een geavanceerde techniek die veel wordt gebruikt om de dimensies van multivariate problemen te verkleinen. Het vermindert de dimensionaliteit van de originele dataset door de correlatie tussen een groot aantal variabelen uit te leggen in termen van een kleiner aantal onderliggende factoren zonder significant verlies van informatie. In deze studie zijn de verschillen tussen RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werden uitgevoerd door PCA zonder toezicht met behulp van de SIMCA 13.0-software op basis van de relatieve piekgebieden in de HPLC-chromatografie. Met behulp van PCA werden de belangrijkste invloeden van chemicaliën op de classificatie tussen verschillende monsters gevonden.
2.4. Monstervoorbereiding
2.4.1. Extract Voorbereiding voor Dieren
de aardlekschakelaar(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werden geselecteerd uit de verzamelde en bereide monsters zoals beschreven in paragraaf 2.2.
Luchtgedroogde en gesneden aardlekschakelaar(Cistanche deserticola plakjes)werd verpoederd met een verpulveraar (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), nauwkeurig gewogen 1.0 kg, en 30 min geweekt in 50 procent ethanol, en de verhoudingen van plant/ethanol die werden gebruikt waren 1/ 10 (w/w). En vervolgens werd het elke keer tweemaal gedurende 1 uur onder reflux geëxtraheerd. De twee extracten werden gecombineerd en gefiltreerd en de ethanol werd onder verminderde druk bij 60 graden gewonnen. Het totale ruwe extract van PhG's werd in vacuüm gedroogd bij 60°C en gezuiverd met macroporeuze hars. Ten slotte werd het PhGs-extract van RCD verkregen en nauwkeurig gewogen.
Het PhG-extract van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werd verkregen volgens dezelfde procedure hierboven.
De sedimenten van de extractie van de PhG's werden aan de lucht gedroogd en tweemaal gedurende 1,5 uur afgekoeld met telkens 20 maal water. De twee extracten werden gecombineerd en gedurende 10 minuten bij 4000 rpm gecentrifugeerd en het supernatant werd geconcentreerd en geprecipiteerd met 95 procent ethanol. Na centrifugeren werd het neerslag bij 60 graden onder vacuüm gedroogd. Tot slot het polysacharide-extract van RCD(Cistanche deserticola plakjes)verkregen en nauwkeurig gewogen.
Het polysacharide-extract van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werd verkregen volgens dezelfde procedure hierboven.
De PhG's en polysacharide-extracten van RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)waren gemengde suspensies in water, respectievelijk, wanneer de ratten oraal werden behandeld.
2.4.2. Monstervoorbereiding voor de bepaling van PhG's
De PhG's-extracten in Sectie 2.4.1 werden nauwkeurig gewogen als 0.15 g en geëxtraheerd door ultrasone trillingen met 50mL 50 procent waterige methanoloplossing gedurende 40 minuten. Na afkoelen werd het gewichtsverlies aangevuld met 50 procent methanol. Alle monsters en oplosmiddelen werden vóór analyse door een membraan van 0,45 m gefiltreerd. De inhoud van vier PhG's in RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werd bepaald met behulp van HPLC en de totale PhG's werden bepaald met behulp van UV-spectrofotometrie.
2.4.3. Monstervoorbereiding voor de bepaling van polysacharide
De polysacharide-extracten in paragraaf 2.4.1 werden nauwkeurig gewogen als 0.10 g en geëxtraheerd door middel van ultrasone trillingen met 50 ml heet water gedurende 40 minuten; na afkoeling werd het gewichtsverlies aangevuld met water. Alle monsters en oplosmiddelen werden vóór analyse door een membraan van 0,45 m gefiltreerd.
2.5. Chromatografische toestand van HPLC en bepaling van de vier PhG's
De chromatografische scheiding werd uitgevoerd in een UltiMate 300{{4{0}} HPLC-systeem (Thermo Fisher Scientific, VS), uitgerust met een pomp met dubbele gradiënt, een kolomcompartiment en een DAD-detector. Gegevens werden verzameld en verwerkt met behulp van een ChromeLeon Chromatography Data System. De monsters werden gescheiden op een Agilent Zorbax SB-C18 (25 0 mm x 4,6 mm, 5 m) met een C18-beschermkolom (4,6 mm x 12,5 mm, 5 m). De mobiele fase bestond uit acetonitril (A) en 0,1 procent fosforzuuroplossing (B) met een stroomsnelheid van 1 ml/min. De gradiëntelutie is als volgt: aanvankelijke 0-13 min, lineaire verandering van AB (5:95, v/v) tot AB (15:85, v/v); 13–25 min, lineaire verandering naar AB (20:80, v/v); 25–43 min, lineaire verandering naar AB (25:75, v/v). De golflengte van de detector werd gevolgd bij 330 nm. De kolomtemperatuur was ingesteld op 30 graden en het geïnjecteerde monstervolume was 10 L [21]. De stockoplossing met vier referentiestandaarden werd bereid door de referentiestandaarden op te lossen in 50% methanol tot een eindconcentratie van 0,20 mg/ml voor 2-acetylacteoside, 0,20 mg/ml voor acteoside, 0,05 mg/ml voor osmanthuside B, en 0,10 mg/ml voor isoacteoside. De oplossing werd vervolgens verdund tot vijf verschillende concentraties met drie herhalingen om ijkkrommen vast te stellen. Het monstergehalte werd uitgedrukt in g/kg ruw gewicht.
De studie van plakjes Cistanche deserticola en het met stoom verwerkte wijnproduct van Cistanche deserticola
2.6. Bepaling van totale PhG's
De totale PhG's werden bepaald met behulp van de UV-spectrofotometriemethode bij de golflengte van 330nm in de UV1000-spectrofotometer (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). De voorraadoplossing werd bereid door echinacosidestandaarden op te lossen in 50% methanol tot een eindconcentratie van 0,10 mg/ml en vervolgens verdund tot vijf verschillende concentraties met drie herhalingen om ijkkrommen vast te stellen.
2.7. Bepaling van polysachariden
De bepaling van polysachariden werd uitgevoerd met behulp van de fenol-zwavelzuurmethode. 1 ml van de monsteroplossing werd in een reageerbuis van 2 0 ml met een glazen stop gedaan en 1 ml 6% fenoloplossing en 5 ml geconcentreerd zwavelzuur werden toegevoegd en 5 minuten geschud. Het mengsel werd gedurende 10 minuten overgebracht naar een kokend waterbad en afgekoeld tot kamertemperatuur voor ultravioletdetectie. De ultraviolet-absorptie werd gevolgd bij 480 nm in een UV1000-spectrofotometer. De referentiestandaard van watervrije D-glucose werd nauwkeurig gewogen en opgelost in gedestilleerd water tot een eindconcentratie van 0,10 mg/ml. Vervolgens werd de oplossing met drie herhalingen verdund tot vijf verschillende concentraties om ijkkrommen vast te stellen.
2.8. Dierproeven
2.8.1. Dieren en huisvesting
Mannelijke SD-ratten van geslachtsrijpheid (180-200 g) werden gekocht bij Xinglong (Beijing) Experimental Animal Farm (leeftijd: 6 weken oud) en de proefdiervergunning was SCXK (Jing):2016-0003. Alle dierprocedures zijn goedgekeurd door de Inner Mongolia Medical University Animals Research Committee en uitgevoerd volgens de richtlijnen van het National Institute of Health met betrekking tot de principes van dierenverzorging (2004). Alle dieren werden gehouden bij een barrièresysteem met een gereguleerde temperatuur van 21-23 graden en een relatieve vochtigheid van 40-65 procent en op een 12 uur durende donker/licht cyclus. De ratten kregen ad libitum voedsel en water en acclimatiseerden gedurende een week aan de bovengenoemde omgeving.
2.8.2. Dosering en bemonstering
De ratten werden overgebracht naar individuele metabole kooien en willekeurig verdeeld in 6 groepen (= 10 in elke groep). Ze kregen een intramusculaire injectie van 15 mg/kg hydrocortison-natriumsuccinaat (gekocht bij Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, China) gedurende 2 weken, behalve groep 1 die werd geïnjecteerd met een gelijk volume fysiologische zoutoplossing. Op de 14e dag werden het lichaamsgewicht, de voedselconsumptie, de wateropname, het urinevolume en de spontane activiteit binnen 5 minuten verzameld om er zeker van te zijn of het nier-yang-deficiëntiemodel met succes werd gemaakt. Vanaf de 15e dag werden 6 groepen als volgt behandeld: groep 1 en groep 2 (modelgroep, M) werd behandeld met een gelijk volume gedestilleerd water, groep 3 (PhGs-extract van RCD(Cistanche deserticola plakjes)groep, PR) werden behandeld met 0,42 g/kg PhGs-extract van RCD, wat gelijk was aan ongeveer 1,8 g/kg van het ruweCistanche deserticolaen de andere groepen waren hetzelfde, groep 4 (PhGs-extract van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)groep, PW) kregen een dosis van 0,49 g/kg PhGs-extract van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct), groep 5 (polysacharide-extract van RCD(Cistanche deserticola plakjes)groep, SR) werden behandeld met 0,18 g/kg het polysacharide-extract van RCD, en groep 6 was (polysacharide-extract van WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)groep, SW) kregen een dosis van 0,22 g/kg het polysacharide-extract van WSCD. Alle ratten werden per dag behandeld met maagperfusie. Na een behandeling van een maand kregen de ratten 12 uur geen voedsel voordat er bloed werd afgenomen. De volgende dag werden alle ratten verdoofd en opgeofferd. Tijdens het testen werden de ratten eenmaal per week gewogen om de dosering aan te passen en opnieuw gewogen voordat ze werden opgeofferd. Bloedmonsters werden verzameld in een Eppendorf-buisje met 10 procent EDTA-2Na-oplossing. Het serum werd gescheiden via centrifugatie bij 2000 rpm gedurende 15 minuten en bewaard bij -80 graden voor verder gebruik. Bovendien werden nieren, testikels, epididymis, prostaatklier en zaadblaasjes verwijderd en snel gewogen. Na weging werden de testikels ingevroren in vloeibare stikstof voor de bepaling van SOD en MDA.
2.9. Analyse van hormonen en antioxidanten
Het niveau van testosteron (T) en estradiol (E2) werd bepaald in het Qingdao Kechuang Quality Inspection Center door middel van radio-immuniteit en colorimetrische methode. De bevroren testikels werden gewogen en gemengd met 20 keer koude fysiologische zoutoplossing (W/W). Het testikelhomogenaat verkregen door weefselhomogenaat in het ijsbad werd gecentrifugeerd om het supernatant te verkrijgen. De inhoud van de SOD en MDA van de testikel werd bepaald met SOD- en MDA-kits volgens de instructies.
2.10. Statistische analyse
De significantie van verschillen tussen groepen werd vergeleken door middel van een one-way ANOVA-test gevolgd door Scheffe's test met een significantielimiet van 0.05 met behulp van de SPSS-software 25.0. Alle gegevens werden uitgedrukt als het gemiddelde ± standaarddeviatie (SD) (n=3).
3. Resultaten
3.1. De analyse van PhG-veranderingen na SPW met behulp van PCA
Om de PhG-veranderingen na SPW te vergelijken, werden 9 chromatografische pieken geselecteerd als karakteristieke pieken en geïdentificeerd. Hun structuren werden getoond in figuur 1, waarvan de relatieve piekgebieden werden berekend voor kwantitatieve expressie. Het HPLC-chromatogram zoals weergegeven in figuur 2, wat aangaf dat het relatieve gehalte van de belangrijkste PhG's tijdens SPW was veranderd. PCA-analyse op de relatieve piekgebieden van 9 componenten werd verkregen voor het onderscheiden van verschillende monsters. de aardlekschakelaar(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)waren ver van elkaar in de plot van de scores (Figuur 3 (a)), wat aangaf dat de monsters in twee clusters waren ingedeeld. Er wordt dus aangenomen dat de inhoud van de chemische bestanddelen anders was. Om de potentiële chemische markers voor de discriminatie verder te vinden, werd een uitgebreide statistische analyse uitgevoerd om de laad Bi-plot te genereren (Figuur 3 (b)). Pieken 2, 3, 4, 6 en 7 zullen afnemen na SPW, terwijl Pieken 5, 8 en 9 zullen toenemen, en ze waren allemaal de belangrijkste componenten om de RCD te onderscheiden(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct). De relatieve inhoud van piek 1 wordt niet veel gevarieerd na SPW.
Figuur 1 Chemische structuren van de PhG's inCistanche deserticolaYC Ma.
Figuur 2 HPLC-chromatogram van standaardstof (a), RCD(Cistanche deserticola plakjes)(b) en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)(c). Pieken: (1) cistanoside F, (2) echinacoside, (3) cistanoside A, (4) acteoside, (5) isoacteoside, (6) cistanoside C, (7) 2′-acetylacteoside, (8) osmanthuside B en (9) tubuloside B.
Figuur 3 PCA-scoreplot (a) en laden van Bi-plot (b) van RCD(Cistanche deserticola plakjes)(groene cirkel) en WSCD (rode cirkel). RCD en WSCD werden ingedeeld in twee clusters. Pieken 2, 3, 4, 6 en 7 zijn de belangrijkste componenten om RCD en WSCD te onderscheiden, die tijdens SPW afnemen; pieken 5, 8 en 9 zijn ook de belangrijkste componenten voor de verschillen tussen RCD en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct), die tijdens SPW zal toenemen.
3.2. De inhoud van totale polysachariden en PhG's veranderd na SPW
Zoals te zien is in figuur 3 (b), waren 8 componenten (5, 8 en 9 toegenomen en 2, 3, 4, 6 en 7 afgenomen) aanzienlijk veranderd en hadden ze een grote impact op de monsterclustering. Onder hen waren isoacteoside en osmanthuside B het meest gestegen, terwijl 2′-acetylacteoside en acteoside het meest waren afgenomen. Dus de inhoud van isoacteoside, Osmanthuside B, 2′-acetylacteoside en acteoside werd bepaald met HPLC. Zoals weergegeven in figuur 1, was piek 4 acteoside, piek 5 was isoacteoside, piek 7 was 2′-acetylacteoside en piek 8 was osmanthuside B. De totale PhG's in RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werden bepaald met behulp van de UV-methode en de totale polysacchariden werden uitgevoerd met behulp van de fenol-zwavelzuurmethode, de resultaten werden getoond in Tabel 1, isoacteoside, Osmanthuside B, totale polysacchariden en PhG's in WSCD waren significant toegenomen in vergelijking met RCD. 2′-acetylacteoside en acteoside waren significant afgenomen.
Tabel 1 Het gehalte aan polysachariden en PhG's in RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)(mg/g) (n=3).
Opmerking. Aanzienlijke verschillen met aardlekschakelaar(Cistanche deserticola plakjes)werden aangeduid als *p < 0.05.
3.3. Het hydrocortison-geïnduceerde nier-yang-deficiëntiemodel is gemaakt
Vergeleken met de normale groep waren het lichaamsgewicht, de voedselconsumptie en de spontane activiteit na 2 weken intramusculaire injectie van 15 mg/kg hydrocortisonnatriumsuccinaat significant verminderd (P<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">
Tabel 2 De indicatoren veranderden na intramusculaire injectie van hydrocortison-natriumsuccinaat (n=10).
Opmerking. Significante verschillen met de N-groep werden aangeduid als# p<>
Figuur 4 De niveaus van T en E2: (a) het niveau van T en (b) het niveau van E2. Significante verschillen met de M-groep werden aangeduid als:∗p < 0.05.="" significante="" verschillen="" met="" de="" n-groep="" werden="" aangeduid="">#p < 0.05.
3.4. De impact van extracten op het gemiddelde ingewandengewicht en -index
Alle ratten en hun ingewanden werden gewogen en vervolgens werd de gemiddelde ingewandenindex berekend.
Vergeleken met de N-groep had de M-groep de ingewandengewichten van nier, zaadblaasjes, epididymis en testikel significant verlaagd, wat ook aangaf dat het hydrocortison-geïnduceerde nier-yang-deficiëntiemodel met succes was gemaakt. Vergeleken met de M-groep waren alle waargenomen ingewandengewichten toegenomen in de PW- en SR-groep, de PR-groep had een verhoogd gewicht van de testikel, bijbal, zaadblaasje en prostaatklier, en de SW-groep had een verhoogd gewicht van nier, testikel, epididymis, en zaadblaasje. Vergeleken met de PR-groepen was de PW-groep beter in de nier, zaadblaasjes en prostaatklier. Er was geen significant verschil tussen de SR- en de SW-groepen in het gewicht van de testikel, bijbal, zaadblaasjes en prostaatklier. De resultaten werden getoond in Tabel 3.
Tabel 3 Het ingewandengewicht (g) (n=10).
Opmerking. Significante verschillen met de M-groep werden aangeduid als:∗p < 0.05.="" significante="" verschillen="" met="" de="" n-groep="" werden="" aangeduid="">#p < 0.05.
Vergeleken met de N-groep waren de ingewandenindexen van de nier, testikel, epididymis en zaadblaasje verlaagd in de M-groep. Vergeleken met de M-groep hadden de PW- en SR-groep de index van nier, testikel, prostaatklier en zaadblaasje verhoogd, hadden de PR-groepen de index van teelbal, prostaatklier en zaadblaasje verhoogd, en de SW-groep had verhoogde de index van nier, testikel en zaadblaasje. Vergeleken met de PR-groepen was de PW-groep beter in de nier, zaadblaasjes en prostaatklier. De SW- en SR-groepen hadden een vergelijkbare index van nier, testikel, zaadblaasje en epididymis. De resultaten werden getoond in Tabel 4.
Tabel 4 De gemiddelde ingewandenindex (g/100g) (n=10).
Opmerking. Significante verschillen met de M-groep werden aangeduid als:∗p < 0.05.="" significante="" verschillen="" met="" de="" n-groep="" werden="" aangeduid="">#p < 0.05.
3.5. De impact van extract op het hormoonniveau (T en )
Zoals weergegeven in figuur 4, waren de niveaus van T en E2 in alle behandelingsgroepen (PW-, PR-, SW- en SR-groep) aanzienlijk toegenomen (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">
3.6. De impact van extracten op het antioxidanteffect
SOD is een belangrijk antioxidant-enzym. MDA is het product van lipideperoxidatie, wat de indicator is van de mate van oxidatieve schade. De inhoud van SOD en MDA weerspiegelt de mate van oxidant en antioxiderend vermogen. Zoals weergegeven in figuur 5, was het antioxiderende effect in alle behandelingsgroepen (PW, PR, SW en SR) in vergelijking met de M-groep verbeterd. De SW-groep had de grootsteantioxidanteffect.
Figuur 5 De inhoud van MDA en SOD: (a) de inhoud van MDA en (b) de inhoud van SOD. Significante verschillen met de M-groep werden aangeduid als:∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>
4. Discussie
Vóór klinische toepassing moeten de ruwe materialen worden onderworpen aan traditionele Chinese procestechnieken. Stomen is een van de traditionele verwerkingsmethoden voor sommige Chinese geneeskrachtige kruiden, wat een zwarte kleur geeft die wordt geproduceerd door de Maillard-reactie [22], waardoor de hoeveelheden van sommige bioactieve componenten [23] en farmacologische activiteiten toenemen. WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)omdat een van de procesproducten beter is in termen van voedende nieren in vergelijking met RCD(Cistanche deserticola plakjes)zoals gedocumenteerd in de 2015-editie van Chinese farmacopee. In deze studie gaven de PCA-resultaten aan dat de SPW het chemische profiel van RCD . had veranderd(Cistanche deserticola plakjes). Bovendien waren 8 componenten in PhG's significant veranderd. Totale PhG's, totale polysacchariden, isoacteoside en Osmanthuside B waren het meest gestegen, terwijl 2′-acetylacteoside en acteoside waren afgenomen na SPW. De resultaten gaven aan dat SPW de chemische bestanddelen van RCD . zou kunnen veranderen(Cistanche deserticola plakjes). Het gehalte aan PhG's met 1,3,4-trigesubstitueerde glucopyranosylgroepen (zoals acteoside, 2′-acetylacteoside en cistanoside C) nam af in WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)de concentraties van hun isomeren met 1,3,5-trigesubstitueerde glucopyranosylgroep (zoals isoacteoside en tubuloside B) namen echter toe, wat erop wees dat de transformatie van chemische bestanddelen mogelijk plaatsvond tijdens SPW, en de hydrolysereactie zal er één zijn van de redenen. De voorgestelde transformatieroutes zijn weergegeven in figuur 6. De toename van polysachariden na SPW was ook gemeld bij ginseng [24].
Figuur 6 Voorgestelde transformatieroutes van de PhG's in Cistanche deserticola YC Ma tijdens SPW.
Cistanche deserticolawerd gedocumenteerd om de nieren te stimuleren en de verlaging van het testosteronniveau om te keren en een antioxiderende werking en ontstekingsremmende werking te hebben [25], en PhG's en polysacchariden waren de twee belangrijkste biologisch actieve componenten in Cistanche deserticola. Als PhG's hadden isoacteoside en osmanthuside B antioxidatie- en ontstekingsremmende effecten [26, 27]. Dus de vergelijking van farmacologische effecten op het testosteronniveau en het antioxiderende effect van RCD en WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)werd bestudeerd. In het model van hydrocortison-geïnduceerde nier-yang-deficiëntie, was het endocriene verstoord en was het niveau van geslachtshormoon in het bloed sterk verlaagd. In deze studie toonden de resultaten van geslachtshormoonanalyse aan dat zowel RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD kon het niveau van T en E2 aanzienlijk verhogen, en zowel PhG's als polysacchariden toonden de verbetering van geslachtshormonen. De WSCD was beter dan de RCD(Cistanche deserticola plakjes), vooral in PhGs-extractgroepen. De resultaten van de ingewandenindexen toonden aan dat zowel PhG's als polysachariden de ingewandengewichten en hun gewichtsindexen kunnen verbeteren. In PhG-extractgroepen, de WSCD(Stoomverwerkt wijnproduct)is beter dan RCD bij het verhogen van de gewichten en indexen van nier- en zaadblaasjes. In aanvulling,Cistanche deserticolaheeft een significant antioxiderend effect, vooral de polysacharidenextractgroepen met WSCD. Zoals hierboven besproken, zijn zowel RCD(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD zou het nier-yang-deficiëntiesyndroom kunnen verbeteren; WSCD is echter beter dan RCD bij het verhogen van het niveau van T, E2, de gewichten en indexen van bijbal en testikel. De resultaten van de studie van de farmacologische effecten gaven aan dat SPW de chemische componenten van PhG's had veranderd en het gehalte aan polysachariden had verhoogd, wat op zijn beurt de geslachtshormoonspiegel verhoogde en deantioxidanteffect.
5. Conclusie
De studie moest de verandering van PhG's, totale polysachariden en het farmacologische effect in RCD . ontdekken(Cistanche deserticola plakjes)en WSCD op de rat met nier-yang-deficiëntie, vooral op het hormoonniveau en het antioxiderende effect. Deze studie heeft aangetoond dat het proces van traditionele Chinese kruiden hun chemische bestanddelen kan veranderen en hun biologische activiteit kan beïnvloeden. Ook wordt ondersteund dat rauwe producten en bewerkte producten in de kliniek anders werden voorgeschreven.
Beschikbaarheid van data
De gegevens die worden gebruikt om de bevindingen van deze studie te ondersteunen, zijn op verzoek verkrijgbaar bij de corresponderende auteur.
Belangenverstrengeling
De auteurs verklaren dat ze geen belangenconflicten hebben.
Bijdragen van auteurs
Ying Zhang en Song Yang ontwierpen de experimenten. Ying Zhang, Yuewu Wang en Yunfeng Xiao hebben de monsters verzameld en voorbereid. Ying Zhang analyseerde de gegevens en stelde de paper op. Xiangri Li en Xiaoqin Wang waren verantwoordelijk voor de studiebegeleiding. Alle auteurs hebben deelgenomen aan het schrijven en het geven van feedback op het papier. Alle auteurs hebben het definitieve artikel gelezen en goedgekeurd.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door subsidies van de Processing Procedures for the Prepared Slices of Chinese Crude Drugs (nr. YP-PZ-2014). Speciale dank aan Wenjia Qu en Tianying Jia voor hun geweldige hulp bij het verzamelen vanCistanche deserticola.
Referenties
1. Y. Jiang en P.-F. Tu, "Analyse van chemische bestanddelen in Cistanche-soorten," Journal of Chromatography A, vol. 1216, nee. 11, blz. 1970-1979, 2009.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
2. W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. Liang, Y.-J. Zhang, en X.-Q. Jiao, "Structurele analyse van in water oplosbare polysacharide SPA geïsoleerd uit de stengel van de"Cistanche deserticolaMa," Chemical Journal of Chinese Universities, deel 26, nr. 3, blz. 461-463, 2005.
Bekijk op: Google Scholar
3. Q. Dong, J. Yao, J.-N. Fang en K. Ding, "Structurele karakterisering en immunologische activiteit van twee in koud water extraheerbare polysachariden uitCistanche deserticolaYC Ma," Carbohydrate Research, vol. 342, nr. 10, blz. 1343-1349, 2007.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
4. X.-M. Wu en P.-F. Tu, "Isolatie en karakterisering van -(1→6)-glucanen uitCistanche deserticola, "Journal of Asian Natural Products Research, vol. 7, nr. 6, blz. 823-828, 2005.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
5. B. Košíková, A. Ebringerová en R. Naran, "Karakterisering van lignine-koolhydraatfracties geïsoleerd uit de houtparasietCistanche deserticolaYC Ma." Holzforschung, deel 53, nr. 1, blz. 33-38, 1999.
Bekijk op: Google Scholar
6. G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu en C. Li, "Tubuloside B van Cistanche salsa redt de PC12-neuroncellen van door 1-methyl-4-fenylpyridinium-ionen geïnduceerd apoptose en oxidatieve stress," Planta Medica, vol. 68, nee. 11, blz. 966-970, 2002.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
7. M. Deng, J.-Y. Zhao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang en Z.-B. Li, "Beschermend effect van tubuloside B op door TNF alfa geïnduceerde apoptose in neuronale cellen", Acta Pharmacologica Sinica, vol. 25, nee. 10, blz. 1276-1284, 2004.
Bekijk op: Google Scholar
8. X. Geng, L. Song, X. Pu en P. Tu, "Neuroprotectieve effecten van fenylethanoïde glycosiden van Cistanches salsa tegen 1-methyl-4-fenyl-1,2,3 ,6-tetrahydropyridine (MPTP)-geïnduceerde dopaminerge toxiciteit bij C57-muizen," Biological & Pharmaceutical Bulletin, vol. 27, nee. 6, blz. 797-801, 2004.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
9. H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng en ZH Wang, "Echinacoside voorkomt dat de striatale extracellulaire niveaus van monoamine-neurotransmitters afnemen bij 6-hydroxydopamine-laesieratten," Journal of Ethnopharmacology, vol . 114, nee. 3, blz. 285-289, 2007.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
10 J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia en R. Zheng, "Farmacologische activiteiten en mechanismen van natuurlijke fenylpropanoïde glycosiden", Die Pharmazie, vol. 58, nee. 11, blz. 767-775, 2003.
Bekijk op: Google Scholar
11. G. Fu, H. Pang en YH Wong, "Natuurlijk voorkomende fenylethanoïde glycosiden: potentiële aanknopingspunten voor nieuwe therapieën", Current Medicinal Chemistry, vol. 15, nee. 25, blz. 2592-2613, 2008.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
12. X.-W. Wang, X.-F. Wang, en L.-Y. Wu, "Verbetering van de herinnering van muizen van fenylethanoïde glycosiden vanCistanche deserticola," Chinees farmacologisch Bulletin, nr. 19, blz. 41-42, 2002.
Bekijk op: Google Scholar
13. J.-X. Xie en C.-F. Wu, "Effect van ethanolisch extract vanCistanche deserticolaover de inhoud van monoamine-neurotransmitters in de hersenen van ratten," Chinese traditionele en kruidengeneesmiddelen, nr. 24, pp. 417-419, 1993.
Bekijk op: Google Scholar
14. H. Wu en C.-J. Hu, Discipline Chinese geneeskunde, People's Medical Publishing House, Beijing, China, 2012.
15. ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., "Een uniek probleem in de standaardisatie van Chinese materia medica: verwerking," Planta Medica, vol. 76, nee. 17, blz. 1975-1986, 2010.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
16. Chinese Farmacopee Commissie, Farmacopee van de Volksrepubliek China 2015, vol. IV, Farmacopee van de Volksrepubliek China, Peking, China, 2015.
17. J.-M. Chen, Enlightening Primer of Materia Medical, Traditional Chinese Medicine Ancient Books Press, Beijing, China, 2009.
18. B.-R. Li en Y.-C. Zij, "Effecten van tonificerende niermedicijnen op de hypothalamus-hypofyse-gonad (HPG) as," Journal of Traditional Chinese Medicine, nee. 7, blz. 63-65, 1984.
Bekijk op: Google Scholar
19. M. Chen, L. Zhao en W. Jia, "Metabonomic study on the biochemische profielen van een hydrocortison-geïnduceerd diermodel," Journal of Proteome Research, vol. 4, nee. 6, blz. 2391-2396, 2005.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
20. Q. Chen en N.-Y. Yi, "De diermodellen en medicijnen voor Yin-deficiëntie en Yang-deficiëntie", in experimentele methodologie van farmacologisch onderzoek in traditionele Chinese geneeskunde, People's Health Publishing House, Beijing, China, 1993.
Bekijk op: Google Scholar
21. Z.-G. Ma, Z.-L. Yang, P. Li en C.-H. Li, "Gelijktijdige bepaling van acht fenylethanoïde glycosiden in verschillende soorten van het geslacht Cistanche door high-performance vloeistofchromatografie," Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, vol. 31, nee. 18, blz. 2838-2850, 2008.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
22. Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song en A. Lu, "Maillard-reactie betrokken bij het stoomproces van de wortel van Polygonum multiflorum," Planta Medica, vol. 75, nee. 1, blz. 84-88, 2009.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
23. W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "Traditionele verwerking heeft een sterke invloed op de samenstelling van metabolieten door hydrolyse in Rehmannia glutinosa-wortels," Chemical & Pharmaceutical Bulletin, vol. 59, nee. 5, blz. 546-552, 2011.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
24. Y. Jin, Y.-J. Kim, J.-N. Jeon et al., "Effect van witte, rode en zwarte ginseng op fysisch-chemische eigenschappen en ginsenosiden," Plant Foods for Human Nutrition, vol. 70, nee. 2, blz. 141-145, 2015.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
25. T. Wang, X.-Y. Zhang, en W.-Y. Xie, "Cistanche deserticolaYC Ma, 'desert Ginseng': A review," American Journal of Chinese Medicine, vol. 40, nr. 6, blz. 1123-1141, 2012.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
26. S.-Y. Nam, H.-Y. Kim, M.-S. Yoou et al., "Anti-inflammatoire effecten van isoacteoside van Abeliophyllum distichum," Immunopharmacology and Immunotoxicology, vol. 37, nee. 3, blz. 258-264, 2015.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
27. S. Chae, JS Kim, KA Kang, et al., "Antioxidant activiteit van isoacteoside van Clerodendron trichotomum," Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. Current Issues, vol. 68, nee. 5, blz. 389-400, 2005.
Bekijk op: Uitgeverssite|Google geleerde
Van: Evidence-based complementaire en alternatieve geneeskunde / 2019 / Artikel
Jaargang 2019 |Artikel-ID 2167947|https://doi.org/10.1155/2019/2167947
