Totaal glycosiden van stengels van cistanche tubulosa Verlichten depressie-achtig gedrag

Contact:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Fan, Ying Peng, Jingwen Wang, Ping Ma, Lijuan Zhao, Xiaobo Li *

ABSTRACT

Achtergrond:Als de meest gebruiktenier-yang ontgiftend kruidin de traditionele Chinese geneeskunde is aangetoond dat gedroogde, sappige stengels van Cistanche tubulosa (Schenk) Wight (CT) effectief zijn bij de behandeling van depressie. De antidepressiva componenten en hun onderliggende mechanisme blijven echter onduidelijk.

Doel:De actieve componenten van CT tegen depressie onderzoeken, evenals de mogelijke mechanismen. Onderzoeksopzet en methoden: er werden gedragswanhoopstests gebruikt om de antidepressieve activiteiten van polysachariden, oligosachariden en verschillende met glycoside verrijkte fracties gescheiden van CT te beoordelen, evenals de typische metabolieten van de darmmicrobiota, waaronder 3-hydroxyfenylpropionzuur ({{2 }}HPP) en hydroxytyrosol (HT). Verder werden de effecten van bioactieve fracties en metabolieten op chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) modellen onderzocht met meerdere farmacodynamische en biochemische analyses. Veranderingen in colonhistologie en de darmbarrière werden waargenomen door kleuring en immunohistochemische analyse. Darmmicrobiële kenmerken en tryptofaan-kynureninemetabolisme werden onderzocht met respectievelijk 16S rRNA-sequencing en western-blotting.

Resultaten:Totale glycosiden (TG) verlichtten dramatisch depressie-achtig gedrag in vergelijking met verschillende gescheiden fracties, wat weerspiegeld wordt in de synergetische effecten van fenylethanoïde en iridoïde glycosiden op de hyperactivering van de hypothalamus-hypofyse-bijnier (HPA) as, ernstige neuro- en perifere ontsteking, en tekortkomingen in 5-hydroxytryptamine (5-HT) en van de hersenen afgeleide neurotrofe factor in de hippocampus. Bovendien verzachtte TG laaggradige ontstekingen in de dikke darm en verstoring van de darmbarrière, en de abundanties van verschillende bacteriële geslachten waren sterk gecorreleerd met de HPA-as en ontsteking bij CUMS-ratten. Consistent was de expressie van indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1) in de dikke darm significant verminderd na toediening van TG, vergezeld van de onderdrukking van het tryptofaan-kynureninemetabolisme. Aan de andere kant oefende HT ook een duidelijk antidepressief effect uit door de HPA-asfunctie, pro-inflammatoire cytokineafgifte en tryptofaan-kynureninemetabolisme te verbeteren, terwijl het de verstoorde darmmicrobiota niet grotendeels kon aanpassen op dezelfde manier als TG. Verrassend genoeg zouden TG en HT, superieur aan fluoxetine, de disfunctie van de hypothalamus-hypofyse-gonadale as en abnormaal cyclisch nucleotidemetabolisme verder kunnen verbeteren.

Cistanche salsa voordelenzou verder kunnendisfunctie verbeteren.

Invoering

Depressie is een chronische, terugkerende en mogelijk levensbedreigende psychische stoornis die tot 20 procent van de wereldbevolking treft (Nabavi et al., 2017). Hoewel er op dit moment talloze antidepressiva zijn goedgekeurd, zijn de bijwerkingen zorgwekkend. Met name langdurige behandeling met selectieve serotonineheropnameremmers (SSRI's) zoals fluoxetine, het belangrijkste farmacologische middel voor depressie, verergerde problemen zoals chronische seksuele disfunctie (Bijlsma et al., 2014); dit heeft steeds meer aandacht getrokken voor de ontdekking van nieuwe antidepressiva uit natuurlijke kruiden (Wang et al., 2019). In de theorie van de traditionele Chinese geneeskunde (TCM) resulteert nier-yang-deficiëntie in prestatiekenmerken die vergelijkbaar zijn met de klinische symptomen van depressie, zoals zich in de put voelen, verlies van interesse en sentimentaliteit (Yang et al., 2020), het bevorderen van de gedachten om depressie-achtig gedrag te verlichten door nier-yang te versterken. Toevallig hebben veel nier-yang tonificerende kruiden het voordeel dat ze de seksuele functie verbeteren (Wu et al., 2015). Dergelijke studies doen ons aandacht besteden aan de mogelijke toepassing van Cistanches Herba, het meest gebruikte nier-yang-tonificerende kruid in TCM en effectief is bij de behandeling van seksuele disfunctie bij mannen (Wang et al., 2020), in termen van antidepressiva. Cistanches Herba, officieel geregistreerd als de gedroogde, sappige stengels van Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (CT) en Cistanche deserticola (YC Ma) in de Chinese Farmacopee (Wang et al., 2017), is gebruikt in China en andere Oost-Aziatische landen sinds de 15e eeuw om aandoeningen zoals nier-yang-tekort, impotentie en vrouwelijke onvruchtbaarheid te behandelen. Moderne farmacologische studies geven aan dat Cistanches Herba meerdere bio-activiteiten heeft, zoals immuniteitsversterking, neuroprotectie, antioxiderende, anti-aging en antivermoeidheidseffecten (Wang et al., 2017). De neuroprotectieve eigenschappen van Cistanches Herba suggereren het therapeutische potentieel ervan bij cognitieve gerelateerde ziekten zoals beroerte, depressie en de ziekte van Alzheimer (Wang et al., 2020). In onze vorige studie ontdekten we dat CT-extract het depressie-achtige gedrag van ratten met chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) verlichtte (Li et al., 2018). Tot op heden toonde chemische analyse van CT aan dat de belangrijkste bestanddelen fenylethanoïde glycosiden, iridoïde glycosiden, polysachariden en oligosachariden zijn (Jiang en Tu, 2009), maar het type verbinding dat een dominante rol speelt in het antidepressieve effect blijft onduidelijk.

Talrijke onderzoeken hebben bevestigd dat de fysiologische werking van de darm (met name de commensale microbiota) een belangrijke rol speelt bij de ontwikkeling van depressie en het neuro-endocriene, autonome zenuwstelsel en immuunsysteem kan reguleren (Yang et al., 2020). Bovendien heeft de relatie tussen tryptofaanmetabolisme, darmflora en depressie geleidelijk veel aandacht getrokken. Veranderde darmflora kan de tryptofaan-kynurenine-route activeren, waardoor de perifere en cerebrale beschikbaarheid van tryptofaan wordt verminderd, wat resulteert in 5-HT-deficiëntie (Agus et al., 2018). Onze eerdere studie toonde aan dat fenylethanoïde glycosiden in CT over het algemeen een lage biologische beschikbaarheid hebben en snel kunnen worden gemetaboliseerd tot 3-hydroxy-fenylpropionzuur (3-HPP) en hydroxytyrosol (HT) door de darmmicrobiota (Li et al., 2016). Bovendien werd gemeld dat CT-extract de homeostase van de darmmicrobiota bij CUMS-ratten herstelt (Li et al., 2018). Op basis van dergelijk onderzoek concludeerden we dat de bidirectionele interactie van de fytochemicaliën en de darmflora de antidepressieve effecten van specifieke bioactieve componenten van CT zou kunnen beheersen. In het bijzonder kunnen de verbindingen worden omgezet in absorbeerbare metabolieten (zoals 3-HPP en HT) in het maagdarmkanaal door de darmmicrobiota, en vervolgens antidepressieve effecten uitoefenen. Op hun beurt kunnen door bioactieve componenten geïnduceerde structurele veranderingen in de darmmicrobiota tegelijkertijd een vitale rol spelen bij de antidepressieve activiteit.

Materialen en methodes

Materialen

Alle standaarden die voor chemische analyse werden gebruikt, werden gekocht bij Durst (Sichuan, China). 3-HPP, HT, fluoxetine en imipramine werden gekocht bij Aladdin (Shanghai, China). De kwantitatieve kit voor BCA-eiwit werd gekocht bij Boster (Wuhan, China). Nanjing Jiancheng (Nanjing, China) leverde 5-HT, BDNF, tumornecrosefactor-alfa (TNF-), interleukine-1beta (IL-1) en interferon-gamma (IFN- ) kits voor enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA). Corticosteron (CORT), adrenocorticotroop hormoon (ACTH) en corticotrofine-releasing hormoon (CRH) ELISA-kits werden gekocht bij Multi Sciences (Hangzhou, China). Cyclisch adenosinemonofosfaat (cAMP), cyclisch guanosinemonofosfaat (cGMP), testosteron (T) en gonadotropine-releasing hormone (GnRH) ELISA-kits werden gekocht bij Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, China). Tryptofaan en kynurenine ELISA-kits werden verkregen van Small Molecule Antibodies (Bordeaux, Frankrijk). Primaire/secundaire antilichamen, waaronder zonula-occludens 1 (ZO-1), indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -actine en HRP-geit-anti-konijn-IgG (H plus L) werden gekocht bij Proteintech (Wuhan, China). Alle andere reagentia van analytische kwaliteit of hogere zuiverheid werden verkregen van commerciële leveranciers.

cistanche extract supplement

Bereiding van verschillende fracties gescheiden van CTE

CT werd in november 2015 verzameld in Hetian, Xinjiang, China, en geverifieerd door prof. Xiaobo Li. Het voucher-exemplaar (20151108) is gedeponeerd bij de School of Pharmacy van de Shanghai Jiao Tong University.

Verpletterde monsters werden drie keer geëxtraheerd met gedestilleerd water (1:10, w/v) gedurende 2 uur bij 80-90 ◦C om CTE te verkrijgen (de opbrengst was 57,1 procent). CTE werd opgelost in gedestilleerd water en vervolgens langzaam geroerd met ethanol (1:4, v/v) en 24 uur op 4 C geplaatst. Vervolgens werden het precipitaat en het supernatant verzameld door 20 minuten te centrifugeren bij 4000 rpm. Totale polysachariden (TP; de opbrengst was 5,7 procent) werden verkregen door wassen met 80 procent ethanol en driemaal deproteïnisatie met Sevage-reagens uit het verzamelde neerslag. Het overblijvende supernatant werd vervolgens gechromatografeerd over een D101 microporeuze harskolom en geëlueerd met gedestilleerd water en 40% ethanol. De geëlueerde water- en 40 procent ethanolfracties bevatten respectievelijk totale oligosachariden (TO; de opbrengst was 35,1 procent) en totale glycosiden (TG; de opbrengst was 12,1 procent). TG werd verder geëlueerd met gedestilleerd water en 5 procent, 10 procent en 40 procent ethanol opnieuw door D101 microporeuze hars, en de geëlueerde fracties van 5 procent en 40 procent ethanol waren totale iridoïde glycosiden (TG-IrG; de opbrengst was 2,7 procent) en totaal fenylethanoïde glycosiden (TG-PhG; de opbrengst was respectievelijk 8,7 procent).

Chemische analyse

Ten eerste werden de belangrijkste chemische bestanddelen van verschillende fracties gescheiden van CTE gekarakteriseerd door UPLC-QTOF-MS. Ten tweede werden de relatieve gehalten aan totale koolhydraten en glycosiden bepaald met de UV-Vis-methode. Ten derde werden de belangrijkste componenten (echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epigaanzuur en geniposidinezuur) gekwantificeerd met een gevalideerde HPLC-methode. De gedetailleerde parameters en methodevalidatie worden weergegeven in de aanvullende materialen.

Fig. 1. Stroomschema van dierproeven

Tabel 1 Onderwerpen en de dosering voor muizen of ratten in elke groep.

Dierproeven

De specifieke dierexperimentele schema's worden getoond in Fig. 1. Alle proefdieren werden gehuisvest en geacclimatiseerd gedurende 1 week voorafgaand aan de experimenten in het Laboratory Animal Center van Shanghai Jiao Tong University (Shanghai, China), onder gecontroleerde kamertemperatuur (25 ± 2 ◦C; 55 ± 10 procent relatieve vochtigheid) met een licht-donkercyclus van 12:12 uur. Dit onderzoek is uitgevoerd conform de Richtlijnen Verzorging en Gebruik Proefdieren van SJTU. De dierenfaciliteiten en -protocollen zijn goedgekeurd door de Animal Ethics Committee van SJTU (nr. A2019008).

Honderdvijftig mannelijke ICR-muizen (met een gewicht van 18-20 g, 6 weken oud) werden gekocht bij Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, China) en willekeurig verdeeld in 10 groepen (n=15 / groep). De proefpersonen en doses voor muizen met gedragswanhoop in elke groep worden weergegeven in Tabel 1. De doses CTE en de gescheiden fracties ervan werden berekend met de volgende formule: dosering=4,55 g/kg.d.bw × opbrengst, die werd bepaald volgens drie berekeningen voor menselijke equivalente doses op basis van het lichaamsoppervlak. De doses van het positieve medicijn imipramine en darmmicrobiota-metabolieten (3-HPP en HT) zijn opgesteld volgens de eerdere onderzoeken (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Na intragastrische toediening eenmaal daags gedurende 7 dagen werden de open veldtest (OFT), staartophangingstest (TST) en gedwongen zwemtest (FST) uitgevoerd op respectievelijk de 8e, 9e en 10e dag. De specifieke methoden van de gedragstests worden beschreven in de aanvullende materialen.

Tweeënzeventig mannelijke Sprague-Dawley-ratten (met een gewicht van 160-180 g, 6 weken oud) werden gekocht bij Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, China). Voorafgaand aan de formele experimenten werden alle ratten na de overeenkomstige training onderworpen aan de sucrose-voorkeurstest (SPT). De ratten werden verdeeld in 8 groepen (n=9 / groep) volgens hun sucrosevoorkeur (aanvullende figuur S1). De proefpersonen en doses voor de ratten in elke groep worden weergegeven in Tabel 1. De doses werden ingesteld volgens de conversiecoëfficiënt tussen muis en rat op basis van hun effectieve doses in de gedragswanhoopmuizen. En de dosis van het positieve controlegeneesmiddel fluoxetine was consistent met de vorige studie (Hou et al., 2017). Alle groepen kregen een reeks chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) behalve de controlegroep. Stressoren werden gedurende 4 weken continu en willekeurig toegepast (zie aanvullende tabel S1 voor meer informatie). Voedsel en water waren vrij beschikbaar voor de controleratten, die ongestoord in een andere kamer bleven, behalve de gedragstesten. De proefpersonen werden gedurende 4 weken 1 uur vóór de CUMS-procedure intragastrisch toegediend. Na 28 dagen continue stressoren en medicijntoediening werden de OFT, SPT en FST uitgevoerd op respectievelijk de 29e, 31e en 33e dag. De specifieke methoden van de gedragsexperimenten worden getoond in de aanvullende materialen.

Tabel 2 Inhoud van echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epilogaanzuur en geniposidinezuur in elke fractie.

Monsterafname en biochemische analyse

Na de gedragstests werden de nuchtere ratten verdoofd met pentobarbital-natrium en werd volbloed verzameld om serummonsters te verkrijgen. Na hartperfusie met zoutoplossing werd de inhoud van de hippocampus, de dikke darm en de blindedarm verzameld en bewaard bij -80 C. Distale colonsegmenten werden verwijderd en gefixeerd in 4% paraformaldehyde. De niveaus van CORT, CRH, ACTH, TNF-, IL-1, IFN-, cAMP, cGMP, T, GnRH, tryptofaan en kynurenine in het serum, 5-HT, BDNF en TNF- in de hippocampus en TNF- en IFN- in de dikke darm werden gemeten volgens de instructies die bij de overeenkomstige ELISA-kit werden geleverd.

Histologie, immunohistochemie en western-blotting-assay

Hematoxyline en eosine (H&E) en Alcian blauw-perjoodzuur-Schiff (AB-PAS) kleuring werden gebruikt om de pathologische veranderingen in colonweefsel te observeren. Bovendien werden immunohistochemische beoordelingen van deze secties uitgevoerd om ZO-1-eiwitexpressie in colonepitheelcellen te observeren (Ding et al., 2020). Details met betrekking tot monstervoorbereiding en western-blotting-assay om IDO1-eiwitexpressie in de dikke darm en hippocampus te bepalen, worden ook beschreven in de aanvullende materialen.

Samenstellingsprofielanalyse van darmmicrobiota

16S rRNA high-throughput sequencing werd uitgevoerd door MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, China), en de gedetailleerde methode en gegevensverwerking worden getoond in de aanvullende materialen.

statistische analyse

De gegevens worden uitgedrukt als het gemiddelde ± standaardfout van het gemiddelde (SEM). Eenrichtingsanalyse van variantie (ANOVA) werd gebruikt om meerdere groepen te vergelijken met behulp van SPSS 20.0-software. Een verschil werd als significant beschouwd bij p < 0,05.="" de="" correlaties="" tussen="" darmmicroben="" en="" bepaalde="" depressiegerelateerde="" fysiologische="" factoren="" werden="" geanalyseerd="" met="" behulp="" van="" de="" spearman-correlatiecoëfficiënt="" op="" basis="" van="">

Resultaten

Chemische analyse van verschillende fracties gescheiden van CTE

De belangrijkste componenten werden gekarakteriseerd met behulp van UPLC-QTOF-MS (aanvullende tabel S2 en Fig. S2), en in totaal werden 21 bestanddelen geïdentificeerd, waaronder 16 bestanddelen van fenylethanoïde glycosiden, 2 bestanddelen van fenolische glycosiden in CTE, TG en TG- PhG; en 3 bestanddelen van iridoïde glycosiden in CTE, TG en TG-IrG. Over het algemeen was het relatieve gehalte aan totale koolhydraten in TP en TO respectievelijk 60,3 procent en 80,8 procent. Het relatieve gehalte aan totale glycosiden in TG was 87,7 procent. Dienovereenkomstig waren fenylethanoïde en iridoïde glycosiden goed voor respectievelijk 86,7 procent en 53,4 procent van TG-PhG en TG-IrG. De inhoud van echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, 8-epilogaanzuur en geniposidinezuur in elke fractie wordt weergegeven in tabel 2 en het HPLC-chromatogram en de methodevalidatiegegevens worden vermeld in aanvullende tabel S3 en Fig. S3.

Fig. 2. De effecten van verschillende fracties gescheiden van CTE en de typische metabolieten door darmmicrobiota op de FST, TST, OFT bij muizen.

Effecten van verschillende fracties gescheiden van CTE en de typische metabolieten door darmmicrobiota op gedragswanhoopstests bij muizen

Zoals getoond in Fig. 2, vergeleken met de controlegroep, vertoonden muizen die werden onderworpen aan 7 dagen toediening van imipramine (positieve controle) significante reducties in de immobiliteitstijden in zowel FST als TST en vertoonden ze geen significant effect op de totale afgelegde afstand in de OFT . Soortgelijke veranderingen werden ook waargenomen in CTE-, TG- en HT-groepen, wat aangeeft dat CTE, TG en HT de antidepressieve activiteit uitoefenden en dat de effecten niet gerelateerd waren aan prikkelbaarheid. Daarom waren TG en HT de dominante bioactieve fractie gescheiden van CTE en typische metabolieten door respectievelijk de darmmicrobiota. Interessant genoeg werden er geen significante veranderingen in de immobiliteitstijden in de FST aangetoond na toediening van TG-PhG en TG-IrG vergeleken met die van de controles, of in de TST na toediening van TG-PhG, wat aangeeft dat de aanwezigheid van fenylethanoïde en iridoïde glycosiden mogelijk essentieel zijn in de antidepressieve activiteit van CTE.

Tabel 3 De effecten van verschillende met glycoside verrijkte fracties en HT op de FST, SPT en OFT in CUMS-ratten.

Farmacodynamische effecten en biochemische veranderingen van verschillende met glycoside verrijkte fracties en HT op CUMS-ratten

Zoals weergegeven in Tabel 3 vertoonden ratten die 28 dagen van het CUMS-paradigma waren onderworpen significante reducties (p < 0.001)="" in="" sucrosevoorkeur="" in="" de="" spt,="" totale="" afgelegde="" afstand,="" en="" opfokgetal="" in="" de="" oft,="" evenals="" een="" significante="" toename="" (p=""><0,01) van="" de="" totale="" immobiliteitstijd="" in="" de="" fst="" in="" vergelijking="" met="" de="" controles,="" wat="" de="" inductie="" van="" depressie-achtige="" fenotypes="" bij="" cums-ratten="" suggereert.="" de="" depressieve="" prestaties="" werden="" omgekeerd="" in="" de="" flx-groep="" (positieve="" controle).="" evenzo="" resulteerde="" cte-,="" tg-,="" tg-phg-,="" tg-irg-="" en="" ht-behandeling="" in="" het="" herstel="" van="" de="" sucrosevoorkeur="" tot="" normale="" niveaus="" bij="" cums-ratten,="" die="" 102,7="" procent,="" 94,1="" procent,="" 89,8="" procent,="" 91,9="" procent="" en="" 94,3="" procent="" van="" de="" controles="" resp.="" consistent="" in="" de="" fst-,="" cte-="" en="" tg-groepen="" vertoonden="" de="" meest="" voor="" de="" hand="" liggende="" effecten,="" en="" de="" immobiliteitstijden="" bereikten="" respectievelijk="" 103,3="" procent="" en="" 93,4="" procent="" van="" die="" van="" de="" controlegroep,="" terwijl="" de="" immobiliteitstijden="" van="" tg-phg-,="" tg-irg-="" en="" ht-groepen="" bereikte="" net="" 62,1="" procent,="" 73,2="" procent="" en="" 69,9="" procent="" van="" die="" van="" de="" controlegroep.="" vergelijkbare="" significante="" stijgingen="" (p=""><0,05) werden="" waargenomen="" in="" de="" totale="" afgelegde="" afstand="" en="" het="" aantal="" opfok="" in="" de="" oft="" na="" cte-,="" tg-="" en="" ht-toediening,="" en="" de="" behandeling="" met="" tg-phg="" en="" tg-irg="" neigde="" naar="" herziening="" van="" het="" aantal="" fokdieren="" bij="" cums-ratten.="" de="" resultaten="" gaven="" aan="" dat="" tg="" de="" dominante="" bioactieve="" antidepressieve="" fractie="" was,="" gescheiden="" van="" cte,="" en="" fenylethanoïde="" en="" iridoïde="" glycosiden="" waren="" onmisbaar="" bij="" het="" uitoefenen="" van="" het="" antidepressieve="" effect.="" bovendien="" werd="" aangetoond="" dat="" ht="" in="" vivo="" een="" van="" de="" actieve="" metabolieten="" van="" tg="">

Consequent verhoogde het lijden aan CUMS de niveaus van CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 en IFN- in het serum en TNF- in de hippocampus van ratten in vergelijking met die van de controlegroep (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte,="" tg,="" and="" ht,="" indicating="" that="" cte,="" tg,="" and="" ht="" showed="" ameliorative="" effects="" on="" the="" hyperactivation="" of="" hpa="" axis,="" severe="" peripheral="" and="" neural="" inflammation,="" and="" deficiencies="" in="" 5-ht="" and="" bdnf.="" likewise,="" tg-irg="" and="" tgphg="" treatment="" significantly="" reduced="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" ifn-γ,="" and="" hippocampal="" tnf-α,="" and="" increased="" the="" level="" of="" hippocampal="" 5-ht="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05).="" significant="" decreases="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" serum="" crf="" and="" acth="" were="" also="" observed="" in="" the="" tg-irg="" group="" compared="" with="" cums="" group.="" interestingly,="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" acth,="" and="" crf="" in="" tg-phg="" and="" tg-irg="" groups="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" in="" the="" tg="" group="" (p="" <="" 0.05),="" and="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" exhibited="" the="" opposite="" expression="" pattern="" (p="" <="" 0.05).="" these="" results="" showed="" that="" the="" effects="" of="" tg-phg="" and="" tg-irg="" on="" the="" hyperactivity="" of="" the="" hpa="" axis,="" peripheral="" and="" neural="" inflammation="" and="" shortage="" of="" 5-ht="" were="" clearly="" inferior="" to="" tg,="" indicating="" that="" phenylethanoid="" and="" iridoid="" glycosides="" might="" exert="" synergistic="" effects="" on="" the="" above-mentioned="" multiple="">

TG en HT reguleren de HPG-as en het metabolisme van cyclische nucleotiden bij CUMS-ratten

De niveaus van T, GnRH, cAMP en cGMP en de verhouding van cAMP en cGMP (cAMP/cGMP) in het aan CUMS onderworpen serum werden gemeten en de resultaten zijn weergegeven in Tabel 4. De concentraties van T, GnRH, cAMP, en cAMP/cGMP in het serum waren significant verlaagd en het niveau van cGMP was significant verhoogd (p < 0.05)="" in="" de="" cums-groep="" vergeleken="" met="" de="" controles,="" wat="" aangeeft="" dat="" onderworpen="" aan="" cums="" resulteerde="" in="" onderdrukking="" van="" de="" hpg-as="" en="" disfunctie="" van="" het="" cyclische="" nucleotidemetabolisme.="" vergeleken="" met="" de="" cums-groep="" waren="" er="" geen="" significante="" veranderingen="" in="" de="" flx-groep.="" verrassend="" genoeg="" werden="" na="" tg-="" en="" ht-behandeling="" significante="" verhogingen="" (p="">< 0,05)="" waargenomen="" in="" de="" serum-t-,="" gnrh-,="" camp-="" en="" camp/cgmp-spiegels,="" terwijl="" de="" serum-cgmp-spiegel="" significant="" was="" verlaagd="" (p="">< 0,05).="" deze="" resultaten="" gaven="" aan="" dat="" tg="" en="" ht="" de="" hpg-as="" en="" het="" cyclische="" nucleotidemetabolisme="" reguleerden,="" dat="" duidelijk="" superieur="" was="" aan="" de="" positieve="" controle="">

Fig. 3. Effecten van verschillende met glycoside verrijkte fracties en HT op de niveaus van CORT, ACTH, CRF, TNF-, IL-1 , IFN- in het serum en 5-HT, BDNF, TNF- in de hippocampus van CUMS-ratten.

TG en HT verlichten laaggradige ontsteking in de dikke darm en verstoring van de darmbarrière bij CUMS-ratten

H & E-kleuring werd gebruikt om morfologische schade aan de dikke darm te beoordelen en er werden geen significante verschillen in de dikke darm waargenomen tussen de experimentele groepen (figuur 4a). Verder werden ook de effecten van TG en HT op ontsteking in de dikke darm en verstoring van de darmbarrière geanalyseerd (Fig. 4b-d). Vergeleken met die van de controlegroep was het aantal slijmbekercellen en de dikte van de slijmlaag verminderd in de CUMS-groep. Consistent waren de eiwitexpressie van ZO-1 en de niveaus van IFN- en TNF- in de dikke darm significant verlaagd (p < 0.05)="" en="" verhoogd="" (p="">< {="" {13}}.05),="" wat="" suggereert="" dat="" hoewel="" er="" geen="" duidelijke="" histologische="" schade="" werd="" geïnduceerd,="" onderwerping="" aan="" cums="" resulteerde="" in="" een="" lichte="" ontsteking="" in="" de="" dikke="" darm="" en="" verstoring="" van="" de="" darmbarrière.="" na="" behandeling="" met="" fluoxetine,="" tg="" en="" ht="" waren="" het="" aantal="" slijmbekercellen="" en="" de="" dikte="" van="" de="" slijmlaag="" toegenomen="" en="" waren="" de="" niveaus="" van="" ifn-="" en="" tnf-="" in="" de="" dikke="" darm="" significant="" verminderd="" (p="">< 0,05).="" bovendien="" verhoogden="" tg="" en="" ht="" significant="" (p="">< 0,05)="" de="" eiwitexpressie="" van="" zo-1="" tot="" een="" niveau="" vergelijkbaar="" met="" dat="" van="" de="" controlegroep.="" deze="" resultaten="" toonden="" aan="" dat="" tg="" en="" ht="" laaggradige="" ontstekingen="" in="" de="" dikke="" darm="" en="" verstoring="" van="" de="" darmbarrière="" bij="" cums-ratten="" konden="">

Tabel 4 Effecten van TG, HT of fluoxetine op HPG-as-gerelateerde hormonen en nucleotidemetabolisme-gerelateerde indexen in het serum van CUMS-ratten.

Effecten van TG en HT op de samenstelling van de darmmicrobiota

Na het verwijderen van niet-gekwalificeerde sequenties werden in totaal 1.874.721 effectieve uitlezingen verkregen. De resultaten van de alfadiversiteit (Fig. 5a) en de bètadiversiteit (Fig. 5b) toonden aan dat hoewel de rijkdom (Chao) en diversiteit (Shannon) van de darmmicrobiota in de cecale inhoud niet verschilden, de algehele structuur van de darmmicrobiota in de hoofdcoördinatenanalyse (PCoA) plot gaf een opvallend verschil aan tussen controle- en CUMS-groepen. Bovendien verhoogde TG- en HT-behandeling de bacteriële rijkdom van CUMS-ratten aanzienlijk en veroorzaakte het duidelijke verschillen in de PCoA-plot in vergelijking met die van CUMS-ratten, wat duidelijke overeenkomsten vertoonde met de controles, vooral wanneer TG werd getest.

De taxonomische veranderingen in de microbiota bevestigden verder dat TG een dramatisch regulerend effect uitoefende op de samenstelling van de darmmicrobiota. Na toediening van TG was de abundantie van de meerderheid van de gewijzigde taxa bij CUMS-ratten omgekeerd tot een niveau dat vergelijkbaar was met dat van de controlegroep. Een significante reductie (14,2 procent, p < 0,05)="" en="" verrijking="" (53,6="" procent,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="" group="" compared="" with="" cums="" group="" (fig.="" 5c),="" respectively.="" consistently,="" at="" the="" family="" level="" (supplementary="" table="" s4),="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" and="" peptococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" by="" 33.9%="" and="" 82.9%,="" respectively,="" compared="" with="" cums="" group="" (p="" <="" 0.05).="" conversely,="" significant="" enrichments="" in="" the="" abundances="" of="" family="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78.4%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77.3%,="" p="" <="" 0.05)="" existed="" in="" tg="" group.="" consistently="" at="" the="" genus="" level="" (fig.="" 5d),="" the="" abundances="" of="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostridium_9,="" unclassified_f_ruminococcaceae="" (members="" of="" the="" family="" ruminococcaceae),="" and="" peptococcus="" (a="" member="" of="" the="" family="" peptococcaceae)="" were="" significantly="" decreased="" while="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allobaculum,="" dubosiella="" (members="" of="" the="" family="" erysipelotrichaceae)="" and="" norank_f_muribaculaceae="" (a="" member="" of="" the="" family="" muribaculaceae)="" displayed="" higher="" abundances="" in="" tg="" group="" than="" those="" of="" cums="" group="" (p="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Fig. 4. Effecten van TG, HT of fluoxetine op de morfologische veranderingen, ZO-1-eiwitexpressie, IFN- en TNF-concentraties in de dikke darm van CUMS-ratten.

Correlatieanalyse van veranderde microbiële geslachten beïnvloed door TG en HT, HPA-as-gerelateerde hormonen, pro-inflammatoire cytokines, 5-HT en BDNF

Om de associaties op te helderen tussen veranderingen in de samenstelling van de darmmicrobiota beïnvloed door TG en HT, en corresponderende depressiegerelateerde eigenschappen, werd Spearman's correlatieanalyse uitgevoerd. Zoals getoond in Fig. 6, waren de niveaus van 5-HT en BDNF in de hippocampus alleen significant positief gecorreleerd met norank_f_Muribaculaceae. Anders zouden duidelijke correlaties kunnen worden geïdentificeerd tussen de veranderde microbiële geslachten en HPA-as-gerelateerde hormonen. Vooral Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea en Peptococcus waren sterk gerelateerd aan de HPA-asfunctie. Serum CORT, CRF en ACTH hadden negatieve correlaties met Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, en norank_f_Erysipelotrichacea, en positieve associaties met Peptococcus. Verder vertoonden Dubosiella en norank_f_ Erysipelotrichacea negatieve associaties met colon IFN- en hippocampale TNF- , terwijl vergelijkbare relaties bestonden in Allobaculum, Harryfinita, en serum en hippocampus TNF- , evenals in norank _f_Lachnospiracea, en serum IFN- en TNF-. Daarentegen was Peptococcus positief geassocieerd met colon TNF- en serum TNF-. Evenzo was norank_f_Muribaculaceae positief gerelateerd aan serum IFN- en TNF-. Deze resultaten gaven aan dat de veranderde microbiële geslachten, met name bepaalde geslachten die behoren tot de familie Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae en Muribaculaceae, die specifiek werden aangetast door TG, sterke associaties vertoonden met HPA-as-gerelateerde hormonen en pro-inflammatoire cytokinen tegelijkertijd, wat de cruciale rol aantoont van de darmmicrobiota bij het reguleren van de HPA-asfunctie en ontsteking.

cistanche propiedades

TG en HT remmen het metabolisme van tryptofaan-kynurenine bij CUMS-ratten

De effecten van TG en HT op de niveaus van tryptofaan en kynurenine in het serum van ratten, evenals de expressie van IDO1 in de dikke darm en de hippocampus, werden bepaald. Zoals getoond in Fig. 7 en Fig. 8, was het niveau van tryptofaan in het serum, vergeleken met dat van de controlegroep, significant verlaagd in de CUMS-groep, in tegenstelling tot het verhoogde niveau van kynurenine en kynurenine-tot-tryptofaan-verhouding (Kyn /Trp) en IDO1-eiwitexpressie in de dikke darm en de hippocampus. Vergeleken met de CUMS-groep was serum Kyn/Trp in de FLX-groep significant verlaagd (p< 0.05).="" tg="" and="" ht="" treatment="" resulted="" in="" a="" significant="" increase="" in="" the="" serum="" tryptophan="" level="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" and="" a="" decrease="" in="" the="" levels="" of="" serum="" kynurenine="" and="" kyn/trp="" (p="" <="" 0.05).="" in="" addition,="" tg="" significantly="" inhibited="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" of="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" while="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" hippocampus="" was="" observed="" between="" cums="" and="" tg="" groups.="" however,="" the="" effect="" of="" ht="" on="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" was="" contrary="" to="" that="" of="" tg,="" indicating="" that="" tg="" and="" ht="" inhibited="" tryptophan-kynurenine="" metabolism="" by="" decreasing="" the="" expression="" of="" ido1="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" of="" cums="" rats,="">

Fig. 5. Analyse van de diversiteit, samenstelling en verschillen van darmmicrobiota in cecale monsters.

Discussie

In deze studie werden twee verschillende diermodellen gebruikt om te screenen op bioactieve stoffen in CT die voor het eerst depressie-achtig gedrag verlichten. TP en TO waren hoogstwaarschijnlijk ineffectieve ingrediënten in CTE, terwijl TG het meeste potentieel vertoonde bij de behandeling van depressie. Eerdere studies over CT en Cistanche-planten waren vooral gericht op de biologische activiteiten van fenylethanoïde glycosiden met de hoogste gehalten en verwaarloosden het belang van iridoïde glycosiden en andere minder overvloedige ingrediënten. Interessant genoeg toonde onze studie aan dat fenylethanoïde en iridoïde glycosiden synergetische effecten vertoonden op de hyperactiviteit van de HPA-as, ernstige perifere en neurale ontsteking en tekortkomingen in hippocampus 5-HT en BDNF, wat de kritieke reden kan zijn voor het gunstige antidepressivum effect van TG. Deze resultaten suggereren verder de multicomponent- en multitarget-kenmerken van kruidengeneeskunde en herinneren ons eraan dat de bestanddelen met lagere niveaus, zelfs sporenbestanddelen, ook een sleutelrol kunnen spelen bij farmacologische effecten.

Chronische stress induceert de hyperactiviteit van de HPA-as, wat het ontstaan ​​van depressie bevordert, evenals de onderdrukking van de HPG-as via verminderde GnRH-afgifte en/of hypofysegevoeligheid van GnRH (Kirby et al., 2009). Ondertussen zijn cAMP en cGMP belangrijke tussenknooppunten die op veel neurotransmitters en hormonen vertrouwden om hun fysiologische effecten uit te oefenen (Siawrys et al., 2002). Recente onderzoeken hebben consequent aangetoond dat het optreden van nier-yang-deficiëntie nauw verband houdt met disfunctie van de hypothalamus-hypofyse-doelklieras (Zhang et al., 2019). Bij het nier-yang-deficiëntiesyndroom zijn ook duidelijke verlagingen van de serum-cAMP- en cAMP/cGMP-spiegels waargenomen. In deze studie ontdekten we dat TG de niveaus van serum CORT, CRF en ACTH kon remmen en serum T- en GnRH-gehaltes bij CUMS-ratten kon verhogen, wat wijst op het herstel van HPA- en HPG-asdisfunctie na TG-toediening. Bovendien keerde TG een significante verlaging van het serum-cAMP/cGMP-gehalte bij ratten die aan CUMS werden onderworpen, om. Het mogelijke onderliggende mechanisme van CT bij de behandeling van depressie en nier-yang-deficiëntie kan dus gedeeltelijk vergelijkbaar zijn en verdient het om verder te worden onderzocht. Bovendien is de productie van seksueel verlangen en gedrag een complex neuraal reflexproces. Geslachtshormonen zijn belangrijke bronnen van centrale seksuele opwinding en gebrek aan geslachtshormonen kan minder seksueel verlangen of seksuele disfunctie veroorzaken (Holloway en Wylie, 2015). Vooral overmatige 5-HT remt de afgifte van GnRH, wat een dominante reden is voor het optreden van chronische seksuele disfunctie na langdurige behandeling met SSRI's (Prasad et al., 2015). In onze studie was fluoxetine (vertegenwoordiger van SSRI's) niet effectief bij de disfunctie van de HPG-as. Hoewel TG het niveau van 5-HT in de hippocampus significant verbeterde, werden echter ook vergelijkbare veranderingen in serum T- en GnRH-niveaus waargenomen, waardoor de onderdrukking van de HPG-as werd verbeterd. Deze resultaten tonen het duidelijke voordeel van CT bij de behandeling van depressie aan, en het intrinsieke mechanisme dat verantwoordelijk is voor deze effecten moet verder worden bestudeerd.

Toenemend bewijs heeft aangetoond dat de darm een ​​potentieel doelwit is voor de behandeling van chronische ziekten met behulp van natuurlijke verbindingen met een lage biologische beschikbaarheid (Zhou et al., 2020). Recent onderzoek (Wei et al., 2019) heeft aangetoond dat behandeling met CUMS fecale microbioomveranderingen en darmbarrièredefecten induceert, die bacteriële invasie in het colonslijmvlies vergemakkelijken en ontstekingsreacties in de dikke darm verergeren. In overeenstemming met dat rapport toonden onze resultaten aan dat 4 weken blootstelling aan CUMS een uitgebreide uitputting van het aantal slijmbekercellen en de dikte van de slijmlaag in de dikke darm van de rat veroorzaakte, evenals het begin van verstoring van de darmbarrière, vertegenwoordigd door een verhoogde darmpermeabiliteit, die werd bepaald door het meten van het ZO-1 eiwit. Bovendien werden verhoogde expressies van pro-inflammatoire factoren (zoals TNF- en IFN-) waargenomen in de dikke darm. Dienovereenkomstig gaven deze bevindingen aan dat hoewel er geen duidelijke histologische schade werd geïnduceerd, behandeling met CUMS de ontsteking van de dikke darm en verstoring van de darmbarrière veroorzaakte. Eerdere studies hebben gemeld dat CT een verbeterde werkzaamheid uitoefende bij het voorkomen van door DSS geïnduceerde colitis bij muizen (Jia et al., 2014). Inconsistent, TG bleek ook laaggradige ontstekingen in de dikke darm en de verstoring van de darmbarrière van CUMS-ratten te verlichten, wat het potentieel ervan voor de klinische behandeling van aan colonontsteking gerelateerde ziekten onderstreept.

Uitgebreide studies hebben ook aangetoond dat de relatie tussen de commensale darmmicrobiota, de HPA-as en ontsteking complex is en een cruciale rol speelt bij de ontwikkeling van depressie (Misiak, et al., 2020). Veranderingen in de samenstelling van de darmmicrobiota kunnen bijdragen aan de verhoogde afgifte van cytokinen en de synthese van kleine bioactieve moleculen (Du et al., 2020). Bepaalde cytokinen (zoals TNF-) kunnen door de bloed-hersenbarrière gaan en zijn krachtige activatoren van de HPA-as (Misiak et al., 2020). Op zijn beurt kan de hyperactivering van de HPA-as bijdragen aan dysbiose van de darmmicrobiota, chronische ontsteking in de dikke darm en veranderde darmpermeabiliteit (Misiak et al., 2020). In overeenstemming met eerdere studies, is TG-medicinale modificatie van de darmmicrobiota waarschijnlijk verantwoordelijk voor de verbeterende effecten op depressie. We hebben waargenomen dat TG de abundanties van microbiële taxa op verschillende niveaus bij ratten die aan CUMS werden onderworpen, omkeerde tot een niveau dat vergelijkbaar was met dat van de controles. Met name de belangrijkste veranderde geslachten die behoren tot de familie Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae en Muribaculaceae bleken sterk gecorreleerd te zijn met de HPA-as en ontsteking. In overeenstemming met onze resultaten is van de familie Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae en Muribaculaceae gemeld dat ze een belangrijke rol spelen bij het handhaven van de integriteit van de mucosale barrière en het optreden van ontstekingen (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Daarom vermoedden we dat TG de abundanties van sommige geslachten die zijn toegewezen aan de familie Erysipelotrichacea, Peptococcaceae en Muribaculaceae, zou kunnen matigen, en vervolgens de laaggradige ontsteking in de dikke darm, hyperactiviteit van de HPA-as en verstoring van de integriteit van de mucosale barrière zou verlichten. Interessant is dat in onze studie slechts één geslacht genaamd nor ank_f_Muribaculaceae gecorreleerd was met 5-HT en BDNF in de hippocampus. Het specifieke mechanisme van de relatie blijft onduidelijk en moet verder worden onderzocht. Anders suggereren de bevindingen ook dat het voor de meerderheid van de veranderde geslachten veroorzaakt door TG extreem moeilijk is om de niveaus van 5-HT in de hippocampus direct te beïnvloeden. Om uit te leggen hoe veranderingen in de samenstelling van de darmmicrobiota het niveau van hippocampale 5-HT na TG-behandeling beïnvloeden, trok de ingewikkelde relatie tussen tryptofaanmetabolisme, de HPA-as, inflammatoire cytokines en 5-HT onze aandacht. Tryptofaan is een essentieel aminozuur voor de mens en minder dan 1 procent wordt gebruikt bij de eiwitsynthese, waarbij de meerderheid (meer dan 90 procent) wordt omgezet door IDO1 en tryptofaan 2, 3-dioxygenase 2 (TDO2) in kynurenines, en ongeveer 5 procent wordt aangedreven door tryptofaanhydroxylase langs de serotonineroute (Duan, et al. 2018). Het niveau van 5-HT in de hersenen hangt grotendeels af van de beschikbaarheid van perifere tryptofaan, aangezien tryptofaan via neutrale aminozuurtransporters naar de hersenen wordt getransporteerd (Duan et al., 2018). IDO1, het snelheidsbeperkende enzym in de eerste stap van de kynurenine-route, wordt voornamelijk geïnduceerd door IFN- en andere pro-inflammatoire cytokines, zoals IL-1 en TNF- (Kennedy et al., 2017), waarvan in onze studie werd aangetoond dat ze geassocieerd zijn met de darmflora. Zoals gemeld, wordt meer tryptofaan gemetaboliseerd via de kynurenine-route, waardoor de omzetting van tryptofaan in 5-HT competitief wordt verminderd en gekoppeld aan de verminderde 5-HT die gewoonlijk wordt aangetroffen bij depressie (O'Mahony et al., 2015). Lagere tryptofaanspiegels en hogere Kyn/Trp komen dus vaak voor en vallen samen met een verhoogd risico op een depressieve stemming. Na toediening van TG werd de overexpressie van IDO1 in de dikke darm geremd, wat resulteerde in verhoogde serumtryptofaanspiegels en een verlaging van serum Kyn/Trp, wat de mogelijke koppeling tussen darmmicrobiota en hippocampus 5-HT-spiegel beïnvloed door TG aan het licht bracht. Ondertussen is BDNF, een lid van de neurotrofinefamilie, essentieel voor celdifferentiatie, neuronale overleving, synapsvorming en neuroplasticiteitsprocessen bij depressie (Greenberg et al., 2009). Recente studies hebben aangetoond dat BDNF nauw geassocieerd is met de darmslijmvliesbarrièrefunctie en darmmicrobiota (Maqsood en Stone, 2016). Ook is gemeld dat de veranderingen in de darmmicrobiota het potentieel hebben om de niveaus van BDNF-expressie te verhogen en zo de ontwikkeling van depressief-achtig gedrag te beïnvloeden (Du et al., 2020). Echter, vergelijkbaar met 5-HT-variatie, was het uiterst onmogelijk voor de meeste veranderde geslachten veroorzaakt door TG in onze studie om de niveaus van BDNF in de hippocampus direct te beïnvloeden, en de intrinsieke moleculaire verbinding en het mechanisme moeten verder worden onderzocht.

Daarentegen vertoonde HT, een metaboliet van de darmmicrobiota van TG, ook een antidepressief effect in de huidige studie, wat consistent is met zijn gunstige neuroprotectieve activiteit (Hu et al., 2014). Verontrustend is dat HT ook pro-inflammatoire cytokines, HPA- en HPG-as-gerelateerde hormonen en hippocampale 5-HT-concentraties zou kunnen matigen tot een niveau dat vergelijkbaar is met dat van de controles bij CUMS-ratten, terwijl de meeste van de gewijzigde microbiële geslachten beïnvloedden door HT had zwakke correlaties met de bovenstaande fysiologische indexen, wat suggereert dat de darmmicrobiota mogelijk niet het doelwit is van de antidepressieve activiteit van HT. Bovendien onderdrukte HT de overexpressie van IDO1 in de hippocampus maar niet in de dikke darm, vergezeld van de verhoogde serumtryptofaanspiegels. Het optreden van de schijnbare verschillen tussen TG en HT kan te wijten zijn aan de uitstekende absorptie van HT in de bloedbaan en het vermogen van HT om de bloed-hersenbarrière te passeren (Robles-Almazan et al., 2018), wat ook aangeeft dat de sterke metabolische capaciteit van de darmmicrobiota is vooral belangrijk bij de antidepressieve activiteit van TG, naast zijn fysiologische functies. Daarom hebben we voorlopig bewezen dat de bidirectionele interactie van de fytochemicaliën en de darmflora een cruciale rol speelt bij de behandeling van depressie met TG-toediening (zoals weergegeven in Fig. 9).

Cistanche voedingssupplementenspeel eencruciale rol bij de behandeling van depressie.

Voor meer informatie, klik a.u.b.

Conclusie

Samengevat was TG voornamelijk verantwoordelijk voor de antidepressieve activiteit van CT, wat weerspiegeld wordt in de synergetische effecten van fenylethanoïde en iridoïde glycosiden op de hyperactivering van de HPA-as, ernstige perifere en neurale ontsteking en tekortkomingen in 5-HT en BDNF in de hippocampus. Bovendien werd het potentiële moleculaire mechanisme van het antidepressieve effect van TG bereikt door de bidirectionele interactie van de fytochemicaliën en de darmmicrobiota. Bovendien duidde verbetering van de onderdrukte HPG-as en cyclische nucleotide-afwijking door TG en HT, die niet werden gereguleerd door behandeling met SSRI's weergegeven door fluoxetine, op het duidelijke voordeel van CT bij de behandeling van depressie. Dergelijke modulaties vertegenwoordigen een veelbelovende strategie voor de behandeling van depressie met behulp van CT en vergelijkbare traditionele kruidengeneesmiddelen.