Type 1 dendritische cellen (DC's) bij nierziekten

voor meer informatie:ali.ma@wecistanche.com

Conventionele type 1 dendritische cellen (cDC1) bij menselijke nierziekten: klinisch-pathologische correlaties

Titi Chen, Qi Cao & et al.

ABSTRACT

Achtergrond: Type 1 dendritische cellen(cDC1) is een subset van conventionele DC's, waarvan de meest herkenbare functie kruispresentatie aan CD8 plus T-cellen is. We hebben dit onderzoek uitgevoerd om het aantal en de locatie vanType 1 dendritische cellen(cDC1s) in verschillende menselijkenierziektenevenals hun correlatie met klinisch-pathologische kenmerken en CD8 T-cellen.

Methoden: we analyseerden 135nierbiopsieën monsters.Nierziekteninbegrepen: acute tubulaire necrose (ATN), acute interstitiële nefritis (AIN), proliferatieve glomerulonefritis (GN) (IgA-nefropathie, lupus-nefritis, pauci-immune GN, anti-GBM-ziekte), niet-proliferatieve GN (minimal change disease, membraneuze nefropathie) ) en diabetische nefropathie. Indirecte immunofluorescentiekleuring werd gebruikt om cDC1's te kwantificeren (Type 1 dendritische cellen), CD1ct DC's en CD8 plus T-cellen.

Resultaten:Type 1 dendritische cellen(cDC1's) waren zelden aanwezig in normaalnieren. Hun aantal nam significant toe in ATN en proliferatieve GN, verhoudingsgewijs veel meer dan CD1ct DC's. cDC1s (Type 1 dendritische cellen)werden voornamelijk gevonden in het interstitium, behalve bij lupus nefritis, pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte, waar ze prominent aanwezig waren in glomeruli en periglomerulaire regio's. Het aantal cDC1's (Type 1 dendritische cellen)gecorreleerd met de ernst van de ziekte bij ATN, het aantal halve maantjes bij pauci-immune GN, interstitiële fibrose bij IgA-nefropathie en lupus-nefritis, evenals de prognose bij IgA-nefropathie. Het aantal CD8 plus T-cellen nam ook aanzienlijk toe in deze omstandigheden en de cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal gecorreleerd met CD8 plus Tcel-nummer in lupus nefritis en pauci-immune GN, met veel van hen nauw co-gelokaliseerd. Conclusies: cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal correleerde met verschillende klinisch-pathologische kenmerken en prognose die een mogelijke rol in deze aandoeningen weerspiegelen. Hun associatie met CD8 plus T-cellen suggereert een gecombineerd mechanisme in overeenstemming met de resultaten in diermodellen.

INVOERING

Dendritische cellen(DC's) zijn de centrale orkestrators van effectieve immuniteit. Deze cellen zijn heterogeen en kunnen worden onderverdeeld in verschillende subsets op basis van hun fenotype en functie. Dendritische cellen kunnen grofweg worden onderverdeeld in plasmacytoïde DC's (Dendritische cellen)(pDC) en conventionele DC's (Dendritische cellen)(cDC).cDC bestaat uit twee grote subsets: cDC1 (Type 1 dendritische cellen)(CD141* DC's (Dendritische cellen) bij mensen en CD103t- of CD8ot-DC's bij knaagdieren) en cDC2 (CD1c-DC's bij mensen en CD1 lbt-DC's bij knaagdieren) (1).cDC1 (Type 1 dendritische cellen)werden eerst ontdekt bij muizen en vervolgens bij mensen en worden gekenmerkt door hun superieure vermogen om necrotische cellen te fagocyteren door middel van schade-geassocieerde moleculaire patroon (DAMP) receptor Clec9A en om te kruisen naar CD8 plus T-cellen. Daarentegen zijn cDC2's effectieve CD4*-T-celactivatoren, maar inferieur bij CD8t-T-celactivering (2).

DC's (Dendritische cellen)zijn bestudeerd bij mensennierziekteen hun aantal bleek verhoogd te zijn bij glomerulonefritis (GN) (3, 4). Na de ontdekking van cDCl hebben zich opstapelende dierstudies aangetoond dat ze een cruciale rol spelen innierziekten, zoals bij adriamycine-nefropathie en sikkelvormige GN, door interactie met T-cellen (5-8). Dergelijke studies ontbreken echter bij mensennierziekte, met slechts één onderzoek dat een verhoogd aantal cDC's aantoont (GebruikelijkeDendritische cellen)in GN (9). We hebben deze studie uitgevoerd om de belangrijkste cDC-subsets, cDC1 ., te analyseren (Type 1 dendritische cellen), en cDC2, in een breed scala van menselijkenierziektenwaaronder niet-glomerulaire ziekten [acute tubulaire necrose (ATN), acute interstitiële nefritis (AIN)], proliferatieve GN (IgA-nefropathie, lupus-nefritis, pauci-immune GN, anti-GBM-ziekte), niet-proliferatieve GN (minimale veranderingsziekte ( MCD), membraneuze nefropathie) en diabetische nefropathie. We ontdekten dat cDC significant gecorreleerd is met pathologische kenmerken, waaronder de ernst van ATN, sikkelvorming bij pauci-immuun GN en interstitiële fibrose bij immuungemedieerde GN. Bovendien, consistent met hun gespecialiseerde vermogen om CD8 plus T-cellen bij dieren te activeren modellen, hebben we ook hun correlatie met CD8t T-cellen in deze monsters aangetoond. Deze bevindingen geven een impuls om nieuwe therapeutische doelen te onderzoeken die deze cellen manipuleren voor de behandeling vannierziekten.

Klik om Cistanche-stam voor nierziekte

MATERIAAL EN METHODEN

Patiënten en weefselmonsters

De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de principes van de Verklaring van Helsinki en werd goedgekeurd door de Human Research Ethics Committee van het Western Sydney Local Health District. De geïnformeerde toestemming van de patiënt werd verkregen. We analyseerden 176 bevroren diagnosenierbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 jaar oud) tussen 18 juni 2016 tot 30* juni 2017 in Westmead Hospital, Sydney, Australië.Nierweefsels werden snel ingevroren in OCTcompound (Tissue-Tek Sakura, VS) en bewaard bij -80 graden. Eenenveertig (41) monsters hadden een slechte weefselkwaliteit en werden uitgesloten van het onderzoek. Patiëntengegevens op baseline, waaronder leeftijd, geslacht, geschatte glomerulaire filtratiesnelheid (eGFR) en mate van proteïnurie, werden verzameld op het moment vannierbiopsie.eGFR werd berekend met behulp van de CKD-EPI-formule. De diagnose werd gesteld door een nierpatholoog, op basis van licht, immunofluorescentie (IF) en elektronenmicroscopie, evenals klinische geschiedenis.

Een verscheidenheid aan ziekten werd geanalyseerd, waaronder niet-glomerulaire ziekten (ATN, AIN), proliferatieve GN (IgA-nefropathie, lupus-nefritis, pauci-immune GN, anti-GBM-ziekte), niet-proliferatieve GN (MCD, membraneuze nefropathie) en diabetische nefropathie. Voor ATN hebben we alleen niet-septische gevallen opgenomen, aangezien septische ATN een verschillende pathofysiologie heeft. ATN werd verder onderverdeeld in milde tot matige ziekte (gedefinieerd als:<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 procent corticale tubuli met letsel). IgA-nefropathie werd geclassificeerd volgens de Oxford MEST-score (M mesangiale hypercellulariteit, E endocapillaire hypercellulariteit, S-segmentale glomerulosclerose, T-tubulaire atrofie/interstitiële fibrose). We analyseerden ook de correlatie tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Lupus-nefritis werd verder ingedeeld in 2 groepen op basis van het niveau van interstitiële fibrose (<25%,>=25 procent corticale interstitiële betrokkenheid). Pauci-immune GN werd ingedeeld in 2 groepen volgens het percentage glomeruli met halve maantjes (<40%,>=40 procent ).

Zoals normaalniercontroles, we gebruikten 5 normale niercortices van nefrectomiemonsters en 2 donornierenniet geschikt voor transplantatie. Voor tumornefrectomieën werden monsters genomen van de pool tegenover de tumor en ten minste 5 cm van de tumorrand. Deze weefsels hadden een normaal macroscopisch uiterlijk. Microscopisch, geen van dezeniermonsters hadden bewijs van significante glomerulaire of tubulo-interstitiële ontsteking of letsel. We gebruikten normaal miltweefsel van een volwassen donor als positieve controle voor het testen van antilichamen.

Immunofluorescentiekleuring

Seriële cryostaatsecties werden gesneden op 5 μm en op Superfrost Ultra Plus-glasplaatjes geplaatst (Thermo Scientific, VS). Dia's werden opgeslagen op -80 graden. Weefselsecties werden 10 minuten gefixeerd met 100 procent methanol bij -20 graden en vervolgens aan de lucht gedroogd. Indirecte immunofluorescentiekleuring werd uitgevoerd met behulp van de volgende methode: weefselcoupes werden gewassen in DPBS (Lonza, VS) en geblokkeerd met 2 procent Bovine Serum Albumine (Sigma-Aldrich, VS) gedurende 15 minuten; daarna werden ze 's nachts gekleurd met primair antilichaam bij 4 graden gevolgd door secundaire antilichamen gedurende 40 minuten bij kamertemperatuur. Tabel 1 is een lijst van gebruikte primaire en secundaire antilichamen en hun verdunningen. Kernen werden gekleurd met DAPI (1: 250, 000, ThermoFisher, VS) voordat monsters op dekglaasjes werden gemonteerd met fluorescentie-montagemedium (Dako, VS). Niet-specifieke kleuring en kruisreactiviteit tussen verschillende primaire en secundaire antilichamen werden gecontroleerd en uitgesloten.

TABEL 1|Primaire en secundaire antilichamen die in het onderzoek zijn gebruikt

cDCl's werden geïdentificeerd door kleuring voor marker Clec9A. Bij mensen is de expressie van Clec9A sterk beperkt tot cDCl's in bloed en weefsels (10, 11). Om dit te bevestigen in denieren, hebben we dubbele kleuring van Clec9A en HLA-DRB1 evenals Clec9A en CD1lc uitgevoerd in geselecteerde normale en zieke aandoeningen. De meeste, zo niet alle Clec9A overlapten met HLA-DRB1 (aanvullende figuur 1) en CD1lc (aanvullende figuur 2).

AFBEELDING 1|Normale nier cDC1 (Type 1 dendritische cellen), cDC2 en CD8 plus T-cellen.

DC's (Dendritische cellen)waren zelden aanwezig in normaalnierenen cDC2-aantallen waren ongeveer 7 keer het aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen). (Staat=100 mm).

RESULTATEN

Basislijnkenmerken van de patiënt.De baselinekenmerken van patiënten in controle- en ziektecohorten zijn samengevat in Tabel 2. In totaal werden 135 patiënten in het onderzoek opgenomen. Een breed scala aannierziektenwerden geanalyseerd, waaronder niet-glomerulaire ziekten [ATN (22), AIN (10)], proliferatieve GN [gA-nefropathie (44), lupus-nefritis (12), pauci-immune GN (12), anti-GBM-ziekte (4)] , niet-proliferatieve GN[MCD(5), membraneuze nefropathie(5)]en diabetische nefropathie (21). Er waren meer vrouwen in de lupus-nefritisgroep en hun leeftijd was meestal jonger in vergelijking met anderenierziekten, wat consistent is met de literatuur (12). Patiënten met pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte hadden de laagste eGFR. Het proteïnurieniveau was het hoogst bij MCD en membraneuze nefropathie.

TABEL 2|Basiskenmerken.

Aantal en locatie van DC's (Dendritische cellen)in Controle en Ziekte.cDCls waren zelden aanwezig in normaalnieren(Figuur 1) en cDC2-nummers waren ongeveer 7 keer het aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen).Het aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen)significant toegenomen in ATN en proliferatieve GN (Figuur 2A), terwijl hun aantal onveranderd bleef in vergelijking met controle in AIN, membraneuze nefropathie, MCD en diabetische nefropathie (aanvullende figuur 3). Het aantal cDC2 nam ook significant toe in ATN en proliferatieve GN (Figuur 2B). Er was een verlaging van de cDC2 (Type 2 dendritische cellen)/cDC1 (Type 1 dendritische cellen)verhouding die cDCl . aangeeft (Type 1 dendritische cellen)nam proportioneel meer toe dan cDC2 (Figuur 2C).

AFBEELDING 2|Aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en cDC2, cDC2/cDC1-ratio en CD8 plus T-cel bij controle en geselecteerde ziekten.

De P-waarde wordt berekend voor elke ziekte versus controle. Beide cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en cDC2 nam significant toe bij ATN, IgA, lupus nefritis, pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte (A, B)

met cDC1 (Type 1 dendritische cellen)nam proportioneel meer toe dan cDC2 in ATN, lupus nefritis, pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte (C).

CD8 plus T-cellen waren significant verhoogd in ATN, IgA, lupus nefritis, pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte (D).

De meeste cDCl's bevonden zich in het interstitium, behalve bij lupus nefritis, pauci-immune GN en anti-GBM-ziekte, waar ze ook werden gevonden in periglomerulaire en intra-glomerulaire regio's (Figuur 3A). Bovendien vonden we ook een significante aantal CD8t T-cellen in peri-glomerulaire en intra-glomerulaire regio's (Figuur 3A), en veel van hen co-gelokaliseerd met cDCls (Figuur 3B). Aan de andere kant werden cDC2s zelden gevonden in intra-glomerulaire regio's en er was minimale co-lokalisatie met CD8 plus T-cellen.

AFBEELDING 3|(A) cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en CD8 plus T-cellen in intra-glomerulaire regio's. (B) cDC1 co-lokalisatie met CD8 plus T-cellen. (Staat=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Associatie tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen)Met klinisch-pathologische kenmerken en CD8 plus T-cellen analyseerden we de correlatie tussen cDCl (Type 1 dendritische cellen)en klinisch-pathologische kenmerken evenals CD8 plus T-cellen. Er waren 22 gevallen van ATN (mild-mod disease n=12, ernstige ziekte n=10). Ernstigere ziekte was geassocieerd met een hoger aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen)(p=0.032), maar niet cDC2(Figuur 4A).cDC1 (Type 1 dendritische cellen)nam proportioneel meer toe dan cDC2(cDC2/cDC1-ratio 2,5, p=0.019). Het aantal CD8 plus T-cellen nam ook significant toe in ATN(p=00,005) (Tabel3,Figuur2D). Het aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen)correleerde niet met het aantal CD8*-T-cellen in ATN.

TABEL 3|CD8 plus T-celaantal en correlatiecoëfficiënt tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en CD8 plus T-cellen aantallen in controle en zieke nieren.

Vierenveertig gevallen van IgA-nefropathie werden geanalyseerd. Met behulp van de Oxford-classificatie MEST-score (M mesangiale hypercellulariteit, E endocapillaire hypercellulariteit, S-segmentale glomerulosclerose, T-tubulaire atrofie/interstitiële fibrose), een hoger aantal cDC1 (Type 1 dendritische cellen)werd geassocieerd met een hogere T-score (p=0.008), maar niet met MES-scores (Figuur 4B). Er waren 7 gevallen met sikkels en het aantal cCD1 was niet geassocieerd met het aantal sikkels. Het aantalnierCD8*-T-cellen waren significant hoger bij IgA-nefropathie dan bij controle (p<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Type 1 dendritische cellen) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>20 procent reductie in eGFR. Patiënten in 2 groepen verdelen volgens cDCl (Type 1 dendritische cellen) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), hoe hoger cDC1 (Type 1 dendritische cellen)nummergroep werd geassocieerd met slechtere resultaten (Figuur 4E).

AFBEELDING 4|Correlatie tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen), cDC2 en CD8 plus het aantal T-cellen en de ernst van de ziekte (A-D).

Kaplan Meier-curve van overleving van IgA-nefropathie (E). T-score 0 verwijst naar het percentage van het gebied dat tubulaire atrofie/interstitiële fibrose vertoont <=25>

T-score 1 verwijst naar het percentage van het gebied dat tubulaire atrofie/interstitiële fibrose vertoont 26 - 50 procent, T-score 2 verwijst naar het percentage van het gebied dat tubulaire atrofie/interstitiële fibrose > 50 procent vertoont.

Overleving werd gedefinieerd als > 20 procent reductie in eGFR op of vóór 31 december 2019. NS, niet significant.

Er waren 12 gevallen van lupus nefritis. Net als bij IgA-nefropathie was een hoger cDCl-getal geassocieerd met ernstigere fibrose (p=0.020) (Figuur 4C). Bovendien nam het aantal CD8 plus T-cellen ook significant toe (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Type 1 dendritische cellen)en CD8t T-cellen werden gevonden in zowel peri-glomerulaire als intra-glomerulaire, wat aangeeft dat ze een rol kunnen spelen bij deze aandoening. (Type 1 dendritische cellen)aantal correleerde met de ernst van fibrose, evenals met de prognose bij IgA-nefropathie, terwijl een dergelijke correlatie niet werd gevonden bij niet-immuun-gemedieerde fibrotische ziekte (diabetische nefropathie). Ten derde was er een sterke correlatie tussen het aantal cDCl en de vorming van een halve maan in pauci-immune GN, en cDCl was in grote aantallen aanwezig in periglomerulaire en intraglomerulaire regio's, wat hun mogelijke rol in een halvemaanvorming aangeeft. Ten vierde correleerde het aantal cDC1 met CD8 plus T-celaantallen bij lupus nefritis en pauci-immune GN, waarbij talrijke cDCl's co-gelokaliseerd met CD8 plus T-cellen, wat hun mogelijke interactie suggereert. Dit komt overeen met onze bevindingen in diermodellen vannierziektedie muizenhomologen van cDC1 . vertonen (Type 1 dendritische cellen)cellen activeren bij voorkeur CD8t T-cellen. Samengevat suggereren deze bevindingen dat cDCl een belangrijke rol speelt in een reeks vannierziektenwaaronder ATN, interstitiële fibrose bij immuungemedieerde ziekten en sikkelvorming en dat ze mogelijk kunnen werken door activering van CD8t-T-cellen.

cDC1 (Type 1 dendritische cellen)Nummer gecorreleerd met ziekte-ernst in ATN. In niet-septische ATN toonden we voor het eerst een significant verhoogd aantal DC's (Dendritische cellen), vooral cDCls vergeleken met cDC2s. Belangrijk is dat de cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal gecorreleerd met de ernst van de ziekte. Daarnaast werd ook het aantal CD8 plus T-cellen verhoogd. ATN wordt meestal veroorzaakt door ischemie-reperfusieschade (IRI), nefrotoxinen of sepsis. Traditioneel veroorzaken IRI en toxines steriele ontstekingen en werd aangenomen dat aangeboren immuniteit, waar DC's en T-cellen minder belangrijk zijn, een dominante rol spelen. Echter, toenemend bewijs uit dierstudies heeft aangetoond dat zowel cDCl als CD8 plus T-cellen belangrijke spelers zijn. Eerdere onderzoeken naar IRI bij dieren en cisplatine-nefrotoxiciteit vonden dat het totale aantal DC- en T-cellen toenam (13-17). Onze eerdere onderzoeken toonden aan dat bij Adriamycine-nefropathie de cDCl-aantallen significant toenamen (5). In IRI vertoont een subset van geactiveerde dendritische cellen een verhoogde capaciteit om het antigeen aan CD8t-T-cellen te kruisen (18). Bij Adriamycine-nefropathie vonden we ook dat cDCls een CD8 plus T-celrespons opwekten die tot letsel leidde (5). Het ontbreken van een correlatie tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en CD8* T-cellen in humaan ATN, in tegenstelling tot de bevindingen in diermodellen, kunnen verschillende niet-immunologische routes van schade in humaan ATN weerspiegelen in vergelijking met de IRI in muismodellen waar cDCl's een significante rol spelen via CD8* T-cellen. Bovendien is bij knaagdieren aangetoond dat cDCl in het weefsel wordt gerekruteerd door chemoattractant XCLl, geproduceerd door natuurlijke killercellen (19). Daarom kan het de moeite waard zijn om dit nader te onderzoeken innierziekte.

cDC1 (Type 1 dendritische cellen)Nummer gecorreleerd met immuungemedieerde interstitiële fibrose. De tweede significante bevinding in deze studie is dat het cDCl-getal correleerde met de ernst van interstitiële fibrose geassocieerd met immuun-gemedieerde ziekte (IgA-nefropathie en lupus-nefritis), maar niet bij niet-immuun-gemedieerde fibrotische ziekte (diabetische nefropathie). verhoogd aantal cDCls en cDC2s bij interstitiële fibrose (9). We hebben voor het eerst aangetoond dat dit alleen geldt voor immuungemedieerde ziekten en cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal nam proportioneel meer toe dan cDC2s. Daarnaast hebben we ook aangetoond dat cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal correleerde met prognose en het aantal CD8* T-cellen nam ook significant toe bij IgA-nefropathie. Dit wordt ondersteund door dierstudies die DC's laten zien (Dendritische cellen)direct bijdragen aan fibrose. Van DC afgeleid amfireguline bevorderde bijvoorbeeld fibrose (20). Het is ook mogelijk dat cDCl's hebben bijgedragen aan fibrose via CD8 plus T-cellen, waarvan bekend is dat ze bijdragen aan fibrose in andere organen (21-23). Aangezien interstitiële fibrose verband houdt met de progressie van chronischenierziekte, is het niet verwonderlijk dat we de cDC1 . vonden (Type 1 dendritische cellen)aantal als een goede prognostische marker in IgA-nefropathie. Andere studies hebben aangetoond dat CD8t-T-cellen correleerden met de prognose van IgA-nefropathie (24), wat het resultaat kan zijn van kruispresentatie van cDCl's. Bij lupus nefritis hebben we een correlatie aangetoond tussen cDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal en interstitiële fibrose, evenals het aantal CD8t-T-cellen. Eerdere studies hebben ook een verhoogdeniercDC1 (Type 1 dendritische cellen)aantal bij lupus nefritis(25), vooral klasse III en VI lupus nefritis, met een overeenkomstige vermindering van hun circulerende aantallen (26). We hebben deze bevindingen uitgebreid door aan te tonen dat ze ook correleerden met chronische veranderingen. Het is algemeen bekend dat interstitiële ontsteking, die bestaat uit T-cellen, B-cellen, dendritische cellen en macrofagen, een dominante rol speelt in de progressie van lupus nefritis (27).cDCls kunnen bijdragen aan de progressie van lupus nefritis in een verscheidenheid van van manieren. Ten eerste speelt activering van interferon een sleutelrol in de pathogenese van lupus nefritis(28-30) en cDCls zijn een prominente producent van IFN-入.（31）Second, cDC1 (Type 1 dendritische cellen)kan bijdragen aan de progressie van lupus nefritis door CD8t T-cellen (32-37) en onze bevinding van een correlatie tussen cDCls en CD8 plus T ondersteunt verder hun mogelijke interactie. De rol van CD8 plus T-cellen bij lupus nefritis is eerder aangetoond. CD8 plus T-cellen regelen de autoreactieve immuniteit door de afgifte van cytotoxische moleculen. CD8 plus T-cellen bij lupus nefritis bleken de cytotoxische functie te hebben gedempt, wat auto-immuniteit kan veroorzaken (38). Bovendien kunnen deze cellen ook lupus-auto-antigenen genereren (39). Er is overvloedig bewijs dat CD8* T-cellen in beidenier(32,33) en urine (34-36) correleren met ziekteactiviteit en histologisch letsel bij lupus nefritis. Bovendien bleek CD8*-T-celuitputting een gunstige prognose te voorspellen(37).

cDC1 (Type 1 dendritische cellen)Aantal gecorreleerd met het aantal halve manen in Pauci-Immune GN. In pauci-immune GN vonden we cDCl's geaggregeerd in de periglomerulaire en intra-glomerulaire regio's, en hun aantal correleerde met het aantal halve maantjes en CD8 plus T-cellen. Eerdere studies toonden aan dat DC's (Dendritische cellen)zijn zelden aanwezig in de glomerulus(3,4,9) of slechts in zeer kleine aantallen(40). Aan de andere kant waren T-cellen prominent aanwezig in de interstitium-, peri-glomerulaire en intra-glomerulaire regio's ({{6} }). We ontdekten dat zowel cDCl's als CD8* T-cellen prominent aanwezig zijn in de peri-glomerulaire en intra-glomerulaire regio's, waarvan veel co-gelokaliseerd. Bovendien is de cDC1 (Type 1 dendritische cellen)nummer gecorreleerd met halve maan en CD8 plus T-celaantallen. Al deze bevindingen suggereren een rol voor cDCl bij de vorming van een halve maan door interactie met CD8* T-cellen. De pathogene rol van CD8t-T-cellen in pauci-immune GN- en halvemaanvorming is al aangetoond in diermodellen (45,46). In overeenstemming met onze bevindingen bij mensen, in crescentic GN van dieren, cDC1 (Type 1 dendritische cellen)en CD8* T-cellen werden vooral gevonden in het periglomerulaire gebied (47,48). Het is aangetoond dat het kapsel van Bowman een beschermde immunologische niche biedt door de toegang van DC's en cytotoxische CD8 plus T-cellen tot de ruimte van Bowman en daarmee tot podocyten te voorkomen (45,47). Toen echter het kapsel van Bowman werd doorbroken, kregen deze ontstekingscellen toegang en vernietigden ze podocyten, wat resulteerde in snel progressieve GN (47).

Een beperking van deze studie is dat de IF-kleuringstechniek het gebruik van slechts een beperkt aantal markers mogelijk maakt. Het zou gunstig zijn om onze bevindingen uit te breiden met behulp van technologie zoals flowcytometrie, die meerdere markers kan combineren om het fenotype van deze DC's verder te analyseren (Dendritische cellen)en hun relevante cytokine- en chemokineprofielen. Locatiegegevens gaan echter verloren. Andere technieken zoals multiplex immunohistochemie en Nanostring kunnen in toekomstige studies ook overwogen worden om deze cellen verder te onderzoekennierziekte. Bovendien kan er bij het kleuren van cDC2's met behulp van CD1c, HLA-DRB1 en CD1lc een klein percentage B-cellen zijn die deze markers ook tot expressie brengen, wat niet is uitgesloten.

CONCLUSIES

Hoewel cDC1 (Type 1 dendritische cellen)bestaat uit een kleine subset van DC's (Dendritische cellen)onder homeostatische omstandigheden toont deze studie een significante correlatie aan tussen deze celpopulatie en klinisch-pathologische kenmerken bij mensennierziekte. Dit weerspiegelt hun waarschijnlijke belang bij ziekteprocessen zoals ATN, sikkelvorming bij proliferatieve GN en interstitiële fibrose bij immuungemedieerde GN. Bovendien kan hun co-lokalisatie en correlatie met CD8t T-cellen een verklaring bieden voor hun werkingsmechanisme, wat gegevens van diermodellen bevestigt. Deze bevindingen geven een impuls om nieuwe therapeutische doelen te onderzoeken die deze cellen manipuleren voor de behandeling vannierziekten, zoals we hebben gedaan in dierstudies (6), en om hun gebruik als prognostische marker te onderzoeken. Verdere studies bij zowel mensen als dieren zijn nodig om de rol van cDC1s te ondervragen (Type 1 dendritische cellen), hun werkingsmechanisme en hoe ze het beste therapeutisch kunnen worden aangepakt.

REFERENTIES

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Weefselspecifieke diversiteit en functies van conventionele dendritische cellen. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. De afstamming van dendritische cellen: ontogenie en functie van dendritische cellen en hun subsets in de stabiele toestand en de ontstoken omgeving. Jaaroverzicht Immunol (2013)31:563-604.doi: 10.1146/jaarlijks immunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. Compartimentspecifieke expressie van dendritische celmarkers bij menselijke glomerulonefritis.NierInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. Kwantificering van dendritische celsubsets in menselijk nierweefsel onder normale en pathologische omstandigheden.NierInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW, et al. Cd103 plus dendritische cellen lokken Cd8 plus T-celreacties uit om te versnellenNierBlessurebij Adriamycine Nefropathie. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q, et al. Flt3-remming verlichtchronischNierZiektedoor CD103 plus dendritische celgemedieerde T-celactivering te onderdrukken. Nephrol-kiestransplantatie (2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C, et al Cd103 plusNierDendritische cellen beschermen tegen Crescentic GN door het in stand houden van -10-regulerende T-cellen. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Keuken AR, Ooi JD. Renale dendritische cellen: de lange en bochtige weg. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Verhoogde tubulo-interstitiële rekrutering van menselijke CD141 (hi) CLEC9A (plus) en CD1c (plus) subsets van myeloïde dendritische cellen in nierfibrose en BNierB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi: 10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, et al. Ongecontroleerde hoogdimensionale analyse lijnt dendritische cellen uit over weefsels en soorten. Immuniteit (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, et al. Single-Cell RNA-seq onthult nieuwe soorten dendritische cellen, monocyten en voorlopers van menselijk bloed. Wetenschap(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Update over lupus nefritis. Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Opmerking:het bovenstaande is geen volledige referentielijst