4. Materialen en methoden

4.1. Plantaardig materiaal

Afrikaanse S. aurea-zaden die voor dit onderzoek werden gebruikt, werden gekocht bij een speciaalzaak in Italië. De zaailingen werden gekweekt in het Laboratorium voor Plantenbiologie en Farmaceutische Plantkunde van de Universiteit van Cagliari (UNICA). Na 5 weken werden ze in een "Planta Medica"-kas geplaatst, volgens de ecofysiologische behoeften van de soort. De planten werden vervolgens verzameld na twee jaar groei in hun bloeiperiode. De bovengrondse delen werden onmiddellijk in een heteluchtoven (FD 115, BINDER) geplaatst totdat ze volledig gedroogd waren (wanneer ze een constant gewicht hadden bereikt). Een exemplaar van een voucher werd gedeponeerd bij Herbarium Karalitanum (CAG) van de Universiteit van Cagliari, Italië, met vouchernummer (6/23.8/V1).

Glycoside van cistanche kan ook de activiteit van SOD in hart- en leverweefsels verhogen en het gehalte aan lipofuscine en MDA in elk weefsel aanzienlijk verminderen, waardoor verschillende reactieve zuurstofradicalen (OH-, H₂O₂, enz.) door OH-radicalen. Cistanche-fenylethanoïdeglycosiden hebben een sterk wegvangend vermogen van vrije radicalen, een hoger reducerend vermogen dan vitamine C, verbeteren de activiteit van SOD in spermasuspensie, verminderen het gehalte aan MDA en hebben een zeker beschermend effect op de functie van het spermamembraan. Cistanche-polysacchariden kunnen de activiteit van SOD en GSH-Px in erytrocyten en longweefsels van experimenteel senescente muizen veroorzaakt door D-galactose verbeteren, evenals het gehalte aan MDA en collageen in long en plasma verminderen en het gehalte aan elastine verhogen, hebben een goed wegvangend effect op DPPH, verlengt de tijd van hypoxie bij senescente muizen, verbetert de activiteit van SOD in serum en vertraagt ​​de fysiologische degeneratie van de longen bij experimenteel senescente muizen Met cellulaire morfologische degeneratie hebben experimenten aangetoond dat Cistanche het goede antioxiderende vermogen heeft en heeft het potentieel om een ​​medicijn te zijn om huidverouderingsziekten te voorkomen en te behandelen. Tegelijkertijd heeft echinacoside in Cistanche een aanzienlijk vermogen om DPPH-vrije radicalen op te vangen en heeft het het vermogen om reactieve zuurstofsoorten op te vangen en door vrije radicalen veroorzaakte collageenafbraak te voorkomen, en heeft het ook een goed herstellend effect op schade door anionen door vrije radicalen van thymine.

Klik op Cistanche Tubulosa-supplement

【Voor meer info: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.2. Etherische olie analyse

De etherische olie werd verkregen door 3 uur hydrodestillatie met behulp van een Clevenger-type apparaat, volgens de richtlijnen van de Europese Farmacopee [89]. De daaropvolgende analyse door middel van gaschromatografie met vlamionisatiedetectie (GC-FID) en gaschromatografie/massaspectrometrie (GC-MS) werden uitgevoerd volgens [13]. In het kort, voor de GC-analyse werd een HP 5 capillaire kolom gebruikt, met een experimentele procedure van 82 min bij verschillende temperaturen, respectievelijk van 60 ◦C tot 246 ◦C met een snelheid van 3 ◦C/min, die vervolgens op 246 ◦C gedurende 20 min. Helium (zuiverheid groter dan of gelijk aan 99,9999 procent) werd gebruikt als draaggas bij een stroomsnelheid van 1 ml/min. Een totaal van 1 µL van het verdunde monster (1:100 in n-hexaan, w/w) werd geïnjecteerd door een autosampler met een 1:20 split ratio. Wat de MS-omstandigheden betreft, werden een 240 ◦C overdrachtslijn, 200 ◦C EI-ionenbron en 150 ◦C quadrupooltemperatuur gebruikt, met ionisatie-energie van 70 eV en 3,2 scans s-1 bij m/z van scan bereik (van 30 tot 480). MSD ChemStation-software (Agilent, rev. E.01.00.237, Santa Clara, CA, VS) werd gebruikt om chromatogrammen en massaspectra te beheren en uit te werken. Ten slotte werden de verkregen verbindingen geïdentificeerd door vergelijking van NIST02 en Adams-bibliotheken [37,38]. De resultaten werden verder gecontroleerd door de experimentele retentie-index (RI) van de verbindingen te vergelijken met de semi-polaire fasen die RI in de literatuur rapporteerde. Experimentele RI's werden bepaald met behulp van twee standaardmengsels van n-alkanen als referentie (respectievelijk C8-C20 en C21-C40) met lineaire interpolatie [90]. De percentages van de gerapporteerde componenten werden berekend op GC-piekgebieden zonder FID-responsfactorcorrectie.

4.3. Schimmelwerende activiteit

Zeven dermatofytenstammen werden getest op antischimmelactiviteit van S. aurea EO. Respectievelijk werden drie klinische stammen verkregen uit nagel- en huidisolatie: Epidermophyton floccosum FF9, Trichophyton mentagrophytes FF7 en Microsporum canis FF1. Terwijl de overige vier dermatofytenstammen tot de Colección Espanõla de Cultivos Tipo (CECT) behoorden: T. mentagrophytes var. interdigital CECT 2958, T. rubrum CECT 2794, T. verrucosum CECT 2992 en M. gypseum CECT 2908. Alle stammen werden vóór elke test gekweekt in Sabouraud dextrose-agar (SDA) of Potato dextrose-agar (PDA) om zuiverheid en levensvatbaarheid te garanderen.

Minimale remmende concentraties (MIC) en de minimale dodelijke concentratie (MLC) van EO werden uitgevoerd volgens de wijzigingen voorgesteld door het CLSI-protocol voor microdilutie [91]. In het kort werd EO verdund in DMSO (5–0.32 µL/mL) en vervolgens toegevoegd aan de steriele reageerbuizen. Inoculum werd bereid door de troebelheid aan te passen tot 0.5 McFarland en vervolgens verdund in RPMI-1640 zonder glutamine en met 3-(N-morfolino)propaansulfonzuur (MOPS) pH 7.{ {10}} tot een concentratie van 1–2 × 104 CFU/ml, die vervolgens werd toegevoegd aan de reageerbuizen met de EO. De buisjes werden vervolgens 7 dagen bij 30°C geïncubeerd. Daarna werden de buisjes beoordeeld op schimmelgroei en de laagste concentratie waarbij geen groei werd waargenomen, werd beschouwd als de minimale remmende concentratie (MIC). De laagste concentratie waarbij geen groei werd waargenomen na het uitplaten van de negatieve buisjes in SDA gedurende 7 dagen bij 30 ºC, werd beschouwd als de minimale dodelijke concentratie (MLC). Een referentie-antischimmelverbinding, fluconazol (Pfizer), werd gebruikt om de gevoeligheid van de geteste micro-organismen te beheersen. De resultaten werden verkregen uit drie onafhankelijke experimenten die in tweevoud werden uitgevoerd, en de resultaten werden uitgedrukt als het gemiddelde. Negatieve en positieve controles werden ook opgenomen, weergegeven door respectievelijk een niet-geïnoculeerd medium en een geïnoculeerd medium met de maximale DMSO-concentratie (1 procent).

4.4. Ontstekingsremmende activiteit

4.4.1. Cel cultuur

De muizen leukemische macrofaag RAW 264.7 cellijn, die toebehoorde aan de American Type Culture Collection (ATCC TIB-71), werd gekweekt zoals eerder gerapporteerd door onze groep [92].

4.4.2. Productie van stikstofoxide

NO-productie werd geëvalueerd door de concentratie van nitraten in kweeksupernatanten te beoordelen met behulp van het Griess-reagens [93]. Cellen (0.6 × 106 cellen/putje) werden gekweekt in kweekplaten met 48-putjes. Macrofagen werden 's nachts gestabiliseerd, vervolgens gedurende 1 uur voorbehandeld met EO (0.08-1.25 µL/mL) verdund in DMSO en vervolgens geactiveerd met 50 ng/mL LPS gedurende 24 uur. LPS-gestimuleerde macrofagen en onbehandelde macrofagen werden gebruikt als respectievelijk de positieve en negatieve controles. De Griess-reactie werd uitgevoerd zoals eerder beschreven in onze groep [92]. Van DMSO in de hoogste gebruikte concentratie (0,4 procent) was al door onze groep aangetoond dat het geen ontstekingsremmende of cytotoxische werking had (gegevens niet getoond).

4.4.3. Expressie van pro-inflammatoire eiwitten, iNOS en COX-2 

RAW 264.7-cellen (1,2 x 106 cellen/putje) werden gekweekt in platen met 6-putjes en overnacht gestabiliseerd. Vervolgens werden deze cellen onderworpen aan 1 uur incubatie met EO bij een concentratie van 1,25 µL/ml, gevolgd door 24 uur LPS-activering (50 ng/ml). Een negatieve controle werd samengesteld uit de onbehandelde cellen en een positieve controle werd samengesteld uit alleen met LPS behandelde cellen. De bereiding van cellysaten volgde het protocol dat eerder werd uitgevoerd door Zuzarte et al. [92]

Het gehalte aan induceerbaar stikstofoxidesynthase (iNOS) en cyclo-oxygenase{{0}} (COX-2) werd beoordeeld door middel van Western-blotanalyse, zoals eerder beschreven [13]. Voor eiwitscheiding werd gedurende 1,5 uur een elektroforetische run uitgevoerd met 10% (v/v) SDS-polyacrylamidegels bij 130 V. De eiwitlijnen werden vervolgens geblot op polyvinylideenfluoridemembranen (eerder geactiveerd met methanol) bij 400 mA gedurende 3 uur. De membranen werden vervolgens gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met niet-specifieke IgG's met 5 procent (w/v) magere melk in TBS-T. Ze werden een nacht verder geïncubeerd bij 4 ◦C met specifieke anti-iNOS (1:500; R & D Systems) of anti-COX-2 (1:5000; Abcam, Cambridge, UK) antilichamen . Ten slotte werden ze 30 minuten gewassen met TBS-T (10 minuten, 3 keer) en 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd met secundaire antilichamen (1:40,000; Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, VS. ) geconjugeerd met mierikswortelperoxidase. De detectie van immunocomplexen werd uitgevoerd door een chemiluminescentiescanner (Image Quant LAS 500, GE, Boston, MA, VS). Antilichamen tegen tubuline (1: 20.000; Sigma, St. Louis, MO, VS) werden gebruikt als laadcontrole. ImageLab-softwareversie 6.1.0 (Bio-Rad Laboratories Inc., Hercules, CA, VS) werd gebruikt voor eiwitkwantificering.

4.5. Celmigratie

De muizenembryofibroblastcellijn NIH 3T3 (ATCC CRL-1658) werd gekweekt zoals eerder beschreven in [6].

4.5.2. Celmigratietest

Celmigratie werd uitgevoerd met behulp van de kraswondtest volgens Martinotti et al. [94] met kleine aanpassingen, zoals eerder gerapporteerd [13]. In het kort werden NIH 3T3 fibroblasten gezaaid met 2,5 x 105 cellen/ml en men liet ze confluentie bereiken. Daarna werd de wond toegebracht met een pipetpunt van 200 µl, en niet-hechtende cellen werden verwijderd door wassen met PBS pH 7,4. DMEM met 2 procent FBS met of zonder toevoeging van EO (1,25 µL/mL). De beelden werden verkregen op 0, 12 en 18 uur na de kras met behulp van een fasecontrastmicroscoop en het wondgebied werd gemeten met behulp van ImageJ/Fiji-software. De gepresenteerde resultaten zijn verkregen met behulp van de volgende vergelijking:

4.6. Levensvatbaarheid van de cel

Het effect van verschillende EO-concentraties op de levensvatbaarheid van macrofagen en fibroblasten werd beoordeeld met behulp van de resazurin-reductietest, zoals eerder gerapporteerd [6].

4.7. Etoposide-geïnduceerde senescentie

Senescentie werd geëvalueerd met behulp van etoposide als senescentie-inductor, zoals elders gerapporteerd [95], met enkele aanpassingen. In het kort, na 24 uur etoposide werden de cellen 72 uur verder geïncubeerd in aanwezigheid of afwezigheid (CT) van S. aurea EO. Beta-galactosidase werd beoordeeld met behulp van een in de handel verkrijgbare kit volgens het protocol van de fabrikant (#9860, Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, VS). De duidelijke blauwe kleuring duidt op bèta-galactosidase-activiteit. Na kleurontwikkelingen werden de putjes gefotografeerd voor daaropvolgende beeldanalyse. ImageJ-software werd gebruikt voor kwantitatieve analyse door het percentage senescente cellen te beoordelen.

4.8. Statistische analyse 

De experimenten werden ten minste in tweevoud uitgevoerd voor drie onafhankelijke experimenten. Gemiddelde waarden ± SEM (standaardfout van het gemiddelde) worden weergegeven in de resultaten. De statistische significantie voor ontstekingsremmende, cellevensvatbaarheids- en senescentie-assays werd geëvalueerd door een one-way variantieanalyse (ANOVA) en de post-hoctest van Dunnett met behulp van GraphPad Prism versie 9.3.0 (GraphPad Software, San Diego, CA , VERENIGDE STATEN VAN AMERIKA). Hoewel de statistische significantie voor celmigratietesten werd beoordeeld met behulp van tweeweg-ANOVA gevolgd door Sydák's meervoudige vergelijkingstests, werden p-waarden < 0.05 geaccepteerd als statistisch significant.

5. Conclusies

Dit werk versterkt de gunstige effecten die gewoonlijk worden toegeschreven aan Salvia spp. door enkele van de traditionele toepassingen die aan S. aurea worden toegeschreven, te valideren. Bovendien werd een unieke chemische samenstelling onthuld met 1,8-cineol, -pineen, cis-thujon, kamfer, (E)-caryofylleen, trans-thujon, -pineen, camfeen en -humuleen als belangrijkste verbindingen. We rapporteren hierin dat de EO schimmelwerende, ontstekingsremmende en wondgenezende effecten uitoefent, waarmee het traditionele gebruik van deze soort voor de behandeling van huidinfecties, ontstekingsgerelateerde ziekten en wonden wordt gevalideerd.

Bovendien rapporteert deze studie voor het eerst dat deze soort antisenescentie-effecten kon uitoefenen, waardoor de belangstelling voor deze soort verder werd bevorderd. Daarom benadrukken deze resultaten de rol van S. aurea bij het verminderen van ontstekingen en huidgerelateerde infecties, waardoor de belangstelling voor dermocosmetica wordt versterkt. Hoewel deze studie heeft aangetoond dat de productie van hoogwaardige metabolieten met relevante biologische activiteiten kan worden bevorderd door teelt, is een nauwkeurige chemische analyse van de gekweekte plant essentieel, gezien de extreme variabiliteit van het chemische profiel als gevolg van genetische en omgevingsfactoren. (stress, bodemeigenschappen, oogstseizoen).

Bijdragen van auteurs:LS en AM; validatie, DM, EC, MJG, MTC en SP; formele analyse, JMA-S., MJG en AP; onderzoek, JMA-S., AM en AP; bronnen, AM, MTC en LS; datacuratie, AP; schrijven - voorbereiding van origineel concept, EC, DM, JMA-S., AP en AM; schrijven - beoordelen en bewerken, EC, DM, MTC, LS en AM; visualisatie, JMA-S.; supervisie, LS en AM; projectadministratie, LS; financiering acquisitie, LS en MTC Alle auteurs hebben de gepubliceerde versie van het manuscript gelezen en gaan ermee akkoord.

Financiering: Dit werk werd gefinancierd door het COMPETE 2020—Operationeel programma voor concurrentievermogen en internationalisering en Portugese nationale fondsen via FCT—Fundação para a Ciência ea Tecnologia, in het kader van de projecten UIDB/04539/2020, UIDP/04539/2020 en LA/P/0058/ 2020.

Dankbetuigingen: De auteurs zijn dankbaar voor de waardevolle bijdrage van Daniela Standen, The International Study and Language Institute (The University of Reading, UK, d.standen@reading.ac.uk) voor technische ondersteuning.

Referenties

1. Kaur, N.; Ahmed, T. Bioactieve secundaire metabolieten van medicinale en aromatische planten en hun ziektebestrijdende eigenschappen. In geneeskrachtige en aromatische planten; Springer Nature: Basingstoke, VK, 2021; blz. 113-142. ISBN-nummer 978-3-030-58974-5.

2. Pinto, E.; Pina-Vaz, C.; Salgueiro, L.; Gonçalves, MJ; Costa-de-Oliveira, S.; Cavaleiro, C.; Palmeira, A.; Rodrigues, A.; Martinez-De-Oliveira, J. Antischimmelactiviteit van de etherische olie van Thymus pulegioides op Candida, Aspergillus en dermatofytsoorten. J Med. Microbiol. 2006, 55, 1367-1373. [KruisRef]

3. Santos, EL; Freitas, PR; Araújo, ACJ; Almeida, RS; Kuifje, SR; Paulo, CLR; Silva, ACA; Silva, LE; doen Amaral, W.; Deschamps, C.; et al. Verbeterde antibacteriële werking van antibiotica door de etherische olie van Aloysia gratissima (Gillies & Hook.) Tronc. en zijn belangrijkste bestanddeel beta-caryofylleen. Phytomedicine Plus 2021, 1, 100100. [CrossRef]

4. Edris, AE Farmaceutische en therapeutische mogelijkheden van etherische oliën en hun vluchtige bestanddelen: een overzicht. Fytoander. Res. 2007, 21, 308-323. [KruisRef]

5. Ghorbani, A.; Esmaeilizadeh, M. Farmacologische eigenschappen van Salvia Officinalis en zijn componenten. J. Traditie. Aanvulling. Med. 2017, 7, 433-440. [KruisRef]

6. Piras, A.; Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Silva, A.; Cruz, MT; Salgueiro, L.; Maxia, A. Chemische samenstelling en biologische activiteit van etherische olie van Teucrium natrium L. subsp. cardioïden (Schreb.) Arcang. (Lamiaceae) van het eiland Sardinië (Italië). Nat. prod. Res. 2022, 36, 5828-5835. [KruisRef]

7. Maccioni, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Alves-Silva, JM; Salgueiro, L.; Maxia, A. Antischimmelactiviteit en chemische samenstelling van de etherische olie uit de bovengrondse delen van twee nieuwe Teucrium capitatum L. chemotypes van het eiland Sardinië, Italië. Nat. prod. Res. 2020, 35, 6007-6013. [KruisRef]

8. Piras, A.; Porcedda, S.; Falconieri, D.; Maxia, A.; Gonçalves, M.; Cavaleiro, C.; Gonçalves, MJ; Salgueiro, L. Antischimmelactiviteit van etherische olie van Mentha spicata L. en Mentha pulegium L. die in het wild groeien op het eiland Sardinië (Italië). Nat. prod. Res. 2021, 35, 993-999. [KruisRef]

9. Leurder, JB; Sytsma, KJ Staminale evolutie in het geslacht Salvia (Lamiaceae): moleculair fylogenetisch bewijs voor meerdere oorsprongen van de staminale hefboom. Ann. bot. 2007, 100, 375-391. [KruisRef]

10. Waller, SB; Cleff, MB; Serra, EF; Silva, Alabama; dos Reis Gomes, A.; de Mello, JRB; de Faria, RO; Meireles, MCA Planten uit de Lamiaceae-familie als bron van antischimmelmoleculen in de humane en diergeneeskunde. microb. Pathogeen. 2017, 104, 232-237. [KruisRef]

11. Cocco, E.; Maccioni, D.; Sanjust, E.; Falconieri, D.; Farris, E.; Maxia, A. Ethnopharmacobotanie en diversiteit van mediterrane endemische planten in de subregio Marmilla, Sardinië, Italië. Planten 2022, 11, 3165. [CrossRef]

12. Afonso, AF; Pereira, OR; Fernandes, Â.; Calhelha, RC; Silva, AMS; Ferreira, RCF; Cardoso, SM Fytochemische samenstelling en bioactieve effecten van Salvia africana, Salvia Officinalis "Icterina" en Salvia mexicana waterige extracten. Moleculen 2019, 24, 4327. [CrossRef]

13. Alves-Silva, JM; Cocco, E.; Piras, A.; Gonçalves, MJ; Silva, A.; Falconieri, D.; Porcedda, S.; Cruz, MT; Maxia, A.; Salgueiro, L. Onthulling van de chemische samenstelling en biologische eigenschappen van Salvia cacaliifolia Benth. essentiële olie. Planten 2023, 12, 359. [CrossRef]

14. Nkomo, MM; Katerere, DD; Visser, HH; Cruz, TT; Balayssac, SS; Malet-Martino, MM; Makunga, NN Fusarium-remming door wilde populaties van de medicinale plant Salvia africana-lutea L. gekoppeld aan metabolomische profilering. BMC-aanvulling. Wissel af. Med. 2014, 14, 99. [Kruisreferentie]

15. Codd, LE Flora van zuidelijk Afrika: deel. 4 Lamiaceae; Botanisch onderzoeksinstituut: Pretoria, Zuid-Afrika, 1985; Deel 28, ISBN 0621082686.

16. Makunga, NP; Van Staden, J. Een efficiënt systeem voor de productie van klonale plantjes van de medicinaal belangrijke aromatische plant: Salvia africana-lutea L. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2007, 92, 63-72. [KruisRef]

17. Aston Philander, L. Een etnobotanie van de Western Cape Rasta bush-medicijn. J. Ethnopharmacol. 2011, 138, 578-594. [KruisRef]

18. Watt, JM; Breyer-Brandwijk, MG De geneeskrachtige en giftige planten van zuidelijk en oostelijk Afrika: een verslag zijn van hun geneeskrachtige en andere toepassingen, chemische samenstelling, farmacologische effecten en toxicologie bij mens en dier; E. & S. Livingstone: Edinburgh, VK, 1962.

19. Gupta, AK; Cooper, EA Update in antischimmeltherapie van dermatofytose. Mycopathologia 2008, 166, 353-367. [KruisRef]

20. Matiz, C.; Friedlander, SF Subcutane weefselinfecties en abcessen. In principes en praktijk van pediatrische infectieziekten; Elsevier: Amsterdam, Nederland, 2012; blz. 454–462.e2. [KruisRef]

21. De Oliveira, CB; Vasconcellos, C.; Sakai-Valente, NY; Sotto, MN; Luiz, FG; Belda Junior, W.; Sousa, M. da GT de; Benard, G.; Criado, PR Toll-like receptors (TLR) 2 en 4 expressies van keratinocyten van patiënten met gelokaliseerde en gedissemineerde dermatofytose. Ds. Inst. Med. Trop. São Paulo 2015, 57, 57-61. [KruisRef]

22. Celestrino, GA; Reis, APC; Criado, PR; Benard, G.; Sousa, MGT Trichophyton rubrum wekt fagocytische en pro-inflammatoire reacties op in menselijke monocyten via Toll-Like Receptor 2. Voorzijde. Microbiol. 2019, 10, 2589. [KruisRef]

23. Zon, S.-C. De niet-canonieke NF-B-route in immuniteit en ontsteking. Nat. Eerwaarde Immunol. 2017, 17, 545-558. [KruisRef]

24. Rao, KMK Moleculaire mechanismen die inos-expressie in verschillende celtypen reguleren. J. Toxicol. Omgeving. Gezondheid Deel B 2000, 3, 27-58. [KruisRef]

25. Minghetti, L. Cyclooxygenase-2 (COX-2) bij inflammatoire en degeneratieve hersenziekten. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 2004, 63, 901-910. [KruisRef]

26. Sharma, A.; Gupta, S. Beschermende manifestatie van herbonanoceutica als antischimmelmiddelen: een mogelijke kandidaat-geneesmiddel voor dermatofytische infectie. Gezondheidswetenschap. Rep. 2022, 5, e775. [KruisRef]

27. Guo, S.; DiPietro, LA Factoren die de wondgenezing beïnvloeden. J. Dent. Res. 2010, 89, 219-229. [KruisRef]

28. Zuzarte, M.; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Canhoto, J.; Vale-Silva, L.; Silva, MJ; Pinto, E.; Salgueiro, L. Chemische samenstelling en antischimmelactiviteit van de essentiële oliën van Lavandula viridis LHér. J Med. Microbiol. 2011, 60, 612-618. [KruisRef]

29. Martinez-Rossi, NM; Bitencourt, TA; Peres, NTA; Lang, EAS; Gomes, EV; Quaresemin, NR; Martins, parlementslid; Lopen, L.; Rossi, A. Dermatofytenresistentie tegen antischimmelmiddelen: mechanismen en prospectus. Voorkant. Microbiol. 2018, 9, 1108. [KruisRef]

30. Mourad, A.; Perfect, JR De oorlog tegen cryptokokkose: een overzicht van het antischimmelarsenaal. Mem. Inst. Oswaldo Cruz 2018, 113, 7. [KruisRef]

31. Vonkeman, HIJ; van de Laar, MAFJ Niet-steroïde anti-inflammatoire geneesmiddelen: bijwerkingen en hun preventie. Semin. Artritis Reuma. 2010, 39, 294-312. [KruisRef]

32. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Viljoen, AM Seizoensvariatie in de samenstelling van etherische olie, olietoxiciteit en de biologische activiteit van oplosmiddelextracten van drie Zuid-Afrikaanse Salvia-soorten. S. Afr. J Bot. 2008, 74, 230-237. [KruisRef]

33. Kamatou, GPP; van Zyl, RL; van Vuuren, SF; Viljoen, AM; Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Tilney, PM; Barroso, JG Chemische samenstelling, soorten bladtrichomen en biologische activiteiten van de essentiële oliën van vier verwante Salvia-soorten die inheems zijn in Zuidelijk Afrika. J Essent. Olie onderzoek. 2006, 18, 72-79. [KruisRef]

34. Najar, B.; Mecacci, G.; Nardi, V.; Cervelli, C.; Nardoni, S.; Mancini, F.; Ebani, VV; Giannecchini, S.; Pistelli, L. Vluchtige stoffen en antischimmel-antibacterieel-antivirale activiteit van Zuid-Afrikaanse Salvia spp. essentiële oliën gekweekt in uniforme omstandigheden. Moleculen 2021, 26, 2826. [KruisRef]

35. Motorkap, RM; Rundel, PW; Lamont, BB; Arroyo, MK; Arianoutsou, M. Plantendiversiteit in streken met een mediterraan klimaat. Trend Ecol. Evolueren. 1996, 11, 362-366. [KruisRef]

36. Médail, F. Ecosystemen: Middellandse Zee. In Encyclopedia of Ecology, deel 3; Elservier Inc.: Oxford, VK, 2008; Deel 5, blz. 2296-2308.

37. Adams, RP Identificatie van etherische oliecomponenten door middel van gaschromatografie/quadrupool massaspectrometrie, 4e ed.; Allured Publishing Corporation: Carol Stream, IL, VS, 2007.

38. National Institute of Standards and Technology Mass Spectral Library (NIST/EPA/NIH).

39. Guijarro-Muñoz, I.; Compte, M.; Álvarez-Cienfuegos, A.; Álvarez-Vallina, L.; Sanz, L. Lipopolysaccharide activeert Toll-like Receptor 4 (TLR4)-gemedieerde NF-KB-signaleringsroute en pro-inflammatoire respons in menselijke pericyten. J. Biol. Chem. 2014, 289, 2457-2468. [KruisRef]

40. Manning, J.; Goldblatt, P. Planten van de floristische regio Greater Cape. 1: De kernkaapflora; Zuid-Afrikaans Nationaal Instituut voor Biodiversiteit: Pretoria, Zuid-Afrika, 2012; ISBN 1919976744.

41. Lim Ah Tock, MJ; Kamatou, GPP; Combrinck, S.; Sandasi, M.; Viljoen, AM Een chemometrische beoordeling van de etherische olievariatie van drie Salvia-soorten die inheems zijn in Zuid-Afrika. Fytochemie 2020, 172, 112249. [CrossRef]

42. Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF; Fokou, JBH; Dongmo, PMJ; Boyom, FF De chemische samenstelling en farmacologische eigenschappen van etherische olie. In Essentiële Oliën — Oliën van de Natuur; El-Shemy, H., red.; IntechOpen: Londen, VK, 2020; blz. 13-36. ISBN-nummer 978-1-78984-641-6.

43. Figueiredo, AC; Barroso, JG; Pedro, LG; Scheffer, JJC Factoren die de productie van secundaire metabolieten in planten beïnvloeden: vluchtige componenten en etherische oliën. Smaak. Fragr. J. 2008, 23, 213-226. [KruisRef]

44. van Vuuren, S.; Ramburrun, S.; Kamatou, G.; Viljoen, A. Inheemse Zuid-Afrikaanse etherische oliën als potentiële antimicrobiële middelen om voetgeur (bromodose) te behandelen. S. Afr. J Bot. 2019, 126, 354-361. [KruisRef]

45. Scott, G.; Springfield, EP; Coldrey, N. Een farmacognostische studie van 26 Zuid-Afrikaanse plantensoorten die als traditionele medicijnen worden gebruikt. Pharm Biol. 2004, 42, 186-213. [KruisRef]

46. ​​Oosthuizen, CB; Gasa, N.; Hamilton, CJ; Lall, N. Remming van mycothioldisulfidereductase en mycobacteriële biofilm door geselecteerde Zuid-Afrikaanse planten. S. Afr. J Bot. 2019, 120, 291-297. [KruisRef]

47. Alves, M.; Gonçalves, MJ; Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Cavaleiro, C.; Cruz, MT; Salgueiro, L. Onthulling van het antischimmelpotentieel van twee etherische oliën van Iberische tijm: effect op C. albicans kiembuis en uitgevoerde biofilms. Voorkant. Pharmacol. 2019, 10, 446. [KruisRef]

48. Shukla, R.; Singh, P.; Prakash, B.; Dubey, NK Antischimmel-, aflatoxineremming en antioxiderende werking van Callistemon lanceolatus (Sm.) Zoete etherische olie en het belangrijkste bestanddeel 1,8-cineol tegen schimmelisolaten uit kikkererwtenzaden. Voedselcontrole 2012, 25, 27-33. [KruisRef]

49. Yu, D.; Wang, J.; Shao, X.; Xu, F.; Wang, H. Schimmeldodende werkingsmechanismen van theeboomolie en zijn twee karakteristieke componenten tegen Botrytis cinerea. J. Appl. Microbiol. 2015, 119, 1253-1262. [KruisRef]

50. Morcia, C.; Malnati, M.; Terzi, V. In vitro antischimmelactiviteit van terpineen-4-ol, eugenol, carvon, 1,8-cineol (eucalyptol) en thymol tegen mycotoxigene plantpathogenen. Voedingssupplement. Besmetten. Deel A 2011, 29, 415-422. [KruisRef]

51. Kim, H.-M.; Kwon, H.; Kim, K.; Lee, S.-E. Antischimmel- en anti-aflatoxigene activiteiten van 1,8-cineol en t-cinnamaldehyde op Aspergillus afflatus. Appl. Wetenschap. 2018, 8, 1655. [KruisRef]

52. da Silva, ACR; Lopen, PM; de Azevedo, MMB; Costa, DCM; Alviano, CS; Alviano, DS Biologische activiteiten van a-pineen en -pineen enantiomeren. Moleculen 2012, 17, 6305-6316. [KruisRef]

53. Jang, S.-K.; Lee, S.-Y.; Kim, S.-H.; Hong, C.-Y.; Park, M.-J.; Choi, I.-G. Schimmelwerende werking van etherische oliën van zes coniferen tegen Aspergillus fumigatus. J. Koreaans Hout Sci. Technologie 2012, 40, 133-140. [KruisRef]

54. de Macedo Andrade, AC; Rosalen, PL; Freires, IA; Scotti, L.; Scotti, MT; Aquino, SG; de Castro, RD Schimmeldodende activiteit, werkingswijze, voorspelling van aanhechting en anti-biofilmeffecten van (plus)- -pineen-enantiomeren tegen Candida spp. Curr. Bovenkant. Med. Chem. 2018, 18, 2481-2490. [KruisRef]

55. Shin, S. Antischimmelactiviteiten van etherische oliën van Glehnia littoralis alleen en in combinatie met ketoconazol. Nat. prod. Wetenschap. 2005, 11, 92-96.

56. Iraji, A.; Yazdanpanah, S.; Alizadeh, F.; Mirzamohammadi, S.; Ghasemi, Y.; Pakshir, K.; Yang, Y.; Zomorodian, K. Screening van de antischimmelactiviteiten van monoterpenen en hun isomeren tegen Candida-soorten. J. Appl. Microbiol. 2020, 129, 1541-1551. [KruisRef]

57. Jaafar, M.; Mitri, S.; Na'was, T. Remming van gramnegatieve bacteriegroei en biofilmvorming door alfa-thujon. IOSR J. Pharm. Biol. Wetenschap. 2018, 13, 2. [Kruisreferentie]

58. Teker, T.; Sefer, Ö.; Gazda ˘glı, A.; Yörük, E.; Varol, G.˙I.; Albayrak, G. -thujon vertoont antischimmelactiviteit tegen F. graminearum door oxidatieve stress, apoptose, epigenetische veranderingen en verminderde toxinesynthese te induceren. EUR. J. Plantpathol. 2021, 160, 611-622. [KruisRef]

59. Huo, H.; Jongen.; Cao, Y.; Liu, N.; Jia, P.; Kong, W. Antifungale activiteit van kamfer tegen vier fytopathogenen van Fusarium. S. Afr. J Bot. 2022, 148, 437-445. [KruisRef]

60. Wu, K.; Lin, Y.; Chai, X.; Duan, X.; Zhao, X.; Chun, C. Mechanismen van antibacteriële werking in de dampfase van etherische olie van Cinnamomum camphora var. linaloofera Fujita tegen Escherichia coli. Voedsel Wetenschap. Nutr. 2019, 7, 2546-2555. [KruisRef]

61. Magiatis, P.; Skaltsounis, A.-L.; Chinou, ik.; Haroutounian, SA Chemische samenstelling en in-vitro antimicrobiële activiteit van de essentiële oliën van drie Griekse Achillea-soorten. Z. Für Nat. C2002, 57, 287-290. [Kruisreferentie] [PubMed]

62. Dahham, S.; Tabana, Y.; Iqbal, M.; Beschaamd, M.; Ezzat, M.; Majid, A.; Majid, A. De kankerbestrijdende, antioxiderende en antimicrobiële eigenschappen van het sesquiterpeen-caryofylleen uit de etherische olie van Aquilaria crassna. Moleculen 2015, 20, 11808-11829. [KruisRef]

63. Pieri, FA; de Castro Souza, MC; Vermelho, LLR; Vermelho, MLR; Perciano, PG; Vargas, FS; Borges, APB; da Veiga-Junior, VF; Moreira, MAS Gebruik van -caryofylleen om bacteriële tandplakvorming bij honden tegen te gaan. BMC Dierenarts. Res. 2016, 12, 216. [KruisRef]

64. Goren, AC; Piozzi, F.; Akcicek, E.; Kılıç, T.; Çarıkçı, S.; Mozio ˘glu, E.; Setzer, WN Essentiële oliesamenstelling van tweeëntwintig Stachys-soorten (bergthee) en hun biologische activiteiten. Fytochem. Lett. 2011, 4, 448-453. [KruisRef]

65. Yadav, N.; Chandra, H. Onderdrukking van ontstekings- en infectiereacties in longmacrofagen door eucalyptusolie en het bestanddeel 1,8-cineol: rol van patroonherkenningsreceptoren TREM-1 en NLRP3, de MAP-kinaseregulator MKP{{5 }}, en NFKB. PLoS ONE 2017, 12, e0188232. [KruisRef]

66. Bier, AM; Zagorchev, P.; Filipova, DM; Lukanov, J. Effecten van 1,8-cineol op de activiteit van cyclo-oxygenase en cyclo-oxygenase 1 en cyclo-oxygenase 2 isovormen. Nat. prod. Chem. Res. 2017, 5, 1000253. [KruisRef]

67. Bastos, VPD; Gomes, ALS; Lima, FJB; Brito, TS; Soares, PMG; Pinho, JPM; Silva, CS; Santos, AA; Souza, MHLP; Magalhães, PJC ingeademd 1,8-cineol vermindert ontstekingsparameters in de luchtwegen van ovalbumine-geprovoceerde cavia's. Eenvoudig. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2011, 108, 34-39. [KruisRef]

68. Juergens, LJ; Racke, K.; Tuleta, ik.; Stoeber, M.; Juergens, UR Ontstekingsremmende effecten van 1,8-cineol (eucalyptol) verbeteren de glucocorticoïde-effecten in vitro: een nieuwe benadering van steroïde-sparende aanvullende therapie voor COPD en astma? Synergie 2017, 5, 1–8. [KruisRef]

69. Santos, FA; Rao, VSN Ontstekingsremmende en antinociceptieve effecten van 1,8-cineol een terpenoïdeoxide aanwezig in veel etherische oliën van planten. Fytoander. Res. 2000, 14, 240-244. [KruisRef]

70. Mohammed, HA; Mohammed, SAAA; Khan, O.; Ali, HM Topische eucalyptolzalf versnelt wondgenezing en oefent antioxiderende en ontstekingsremmende effecten uit in het huidverbrandingsmodel van ratten. J.Oleo Sci. 2022, 71, ess22214. [KruisRef]

71. Juergens, UR; Dethlefsen, U.; Steinkamp, ​​G.; Gillissen, A.; Repges, R.; Vetter, H. Ontstekingsremmende activiteit van 1.8-cineol (eucalyptol) bij bronchiale astma: een dubbelblinde, placebogecontroleerde studie. Adem in. Med. 2003, 97, 250-256. [KruisRef]

72. Lima, PR; de Melo, TS; Carvalho, KMMB; de Oliveira, Í.B.; Arruda, BR; de Castro Brito, GA; Rao, VS; Santos, FA 1,8-cineole (eucalyptol) verlicht door ceruleïne geïnduceerde acute pancreatitis via modulatie van cytokines, oxidatieve stress en NF-KB-activiteit bij muizen. Levenswetenschappen. 2013, 92, 1195-1201. [KruisRef]

73. Coté, H.; Boucher, M.-A.; Pichette, A.; Legault, J. Ontstekingsremmende, antioxiderende, antibiotische en cytotoxische activiteiten van Tanacetum vulgare l. etherische olie en haar bestanddelen. Geneesmiddelen 2017, 4, 34. [CrossRef]

74. Rufino, AT; Ribeiro, M.; Judas, F.; Salgueiro, L.; Lopen, MC; Cavaleiro, C.; Mendes, AF Ontstekingsremmende en chondroprotectieve activiteit van (plus)- -pineen: structurele en enantiomere selectiviteit. J. Nat. prod. 2014, 77, 264-269. [KruisRef]

75. Schepetkin, IA; Kushnarenko, SV; Özek, G.; Kirpotina, LN; Utegenova, GA; Kotoekhov, YA; Danilova, AN; Özek, T.; Baser, KHC; Quinn, MT Remming van reacties van menselijke neutrofielen door de etherische olie van Artemisia kotuchovii en zijn bestanddelen. J. Agric. Voedsel Chem. 2015, 63, 4999-5007. [KruisRef]

76. dos Santos, E.; Leidtão, MM; Agüero Ito, CN; Silva-Filho, SE; Arena, wisselstroom; de Souza Silva-Comar, FM; Nakamura Cuman, RK; Oliveira, RJ; Nazari Formagio, AS; Leite Kassuya, CA Pijnstillende en ontstekingsremmende gewrichtseffecten van etherische olie en kamfer geïsoleerd uit Ocimum kilimandscharicum Gürke-bladeren. J. Ethnopharmacol. 2021, 269, 113697. [KruisRef]

77. Adhikari, A.; Bhandari, S.; Pandey, DP Ontstekingsremmende stoffen kamfer en methylsalicylaat van traditioneel gebruikte pijnstillende plant Equisetum arvense LJ Nepal Chem. Soc. 2019, 40, 1–4. [KruisRef]

78. Silva-Filho, S.; de Souza Silva-Comar, F.; Würzler, L.; doen Pinho, R.; Greenspan, R.; Bersani-Amado, C.; Cuman, R. Effect van kamfer op het gedrag van leukocyten in vitro en in vivo bij de acute ontstekingsreactie. Trop. J. Pharm. Res. 2015, 13, 2031. [KruisRef]

79. Cho, JJ; Chang, H.-J.; Lee, S.-K.; Kim, H.-J.; Hwang, J.-K.; Chun, HS Verbetering van door dextraansulfaat natrium geïnduceerde colitis bij muizen door orale toediening van -caryofylleen, een sesquiterpeen. Levenswetenschappen. 2007, 80, 932-939. [KruisRef]

80. Gushiken, LFS; Beserra, FP; Hussni, MF; Gonzaga, MT; Ribeiro, VP; de Souza, PF; Campos, JCL; Massaro, TNC; Hussni, CA; Takahira, RK; et al. Bèta-caryofylleen als een antioxiderende, ontstekingsremmende en re-epithelisatie-activiteit in een excisiemodel voor huidwonden bij ratten. Oxide. Med. Cel Longev. 2022, 2022, 1–21. [KruisRef]

81. Brito, LF; Oliveira, HBM; Neves Selis, N.; Souza, CLS; Junior, MNS; Souza, EP; da Silva, LSC; Souza Nascimento, F.; Amorim, AT; Campos, GB; et al. Ontstekingsremmende activiteit van -caryofylleen gecombineerd met docosahexaeenzuur in een model van sepsis geïnduceerd door Staphylococcus aureus bij muizen. J.Sci. Voedsel Agrarisch. 2019, 99, 5870-5880. [KruisRef]

82. Sousa, LFB; Oliveira, HBM; das Neves Selis, N.; Morbeck, LLB; Santos, TC; da Silva, LSC; Viana, JCS; Reis, MM; Sam-terras, BA; Campos, GB; et al. -caryofylleen en docosahexaeenzuur, geïsoleerd of geassocieerd, hebben potentiële antinociceptieve en ontstekingsremmende effecten in vitro en in vivo. Wetenschap. Rep. 2022, 12, 19199. [CrossRef]

83. Scandiffio, R.; Geddo, F.; Cottone, E.; Querio, G.; Antoniotti, S.; Gallo, parlementslid; Maffei, IK; Bovolin, P. Beschermende effecten van (e)- -caryofylleen (bcp) bij chronische ontsteking. Voedingsstoffen 2020, 12, 3273. [CrossRef]

84. Salas-Oropeza, J.; Jiménez-Estrada, M.; Perez-Torres, A.; Castell-Rodriguez, AE; Becerril-Millan, R.; Rodriguez-Monroy, MA; Jarquin-Yañez, K.; Canales-Martinez, MM Wondgenezende activiteit van -pineen en -phellandreen. Moleculen 2021, 26, 2488. [KruisRef]

85. Rocha Caldas, GF; da Silva Oliveira, AR; Araújo, AV; Lafayette, SSL; Albuquerque, GS; da Costa Silva-Neto, J.; Costa-Silva, JH; Ferreira, F.; van Costa, JGM; Wanderley, AG Gastroprotectieve mechanismen van de monoterpeen 1,8-cineole (eucalyptol). PLoS ONE 2015, 10, e0134558. [KruisRef]

86. Chabane, S.; Boudjelal, A.; Napels, E.; Benkhaled, A.; Ruberto, G. Fytochemische samenstelling, antioxidant en wondgenezingsactiviteiten van Teucrium polium subsp. capitatum (L.) Briq. essentiële olie. J Essent. Olie onderzoek. 2021, 33, 143–151. [KruisRef]

87. Tran, TA; Hoe, MT; Lied, YW; Cho, M.; Cho, SK Camphor induceert proliferatieve en anti-senescentie-activiteiten in menselijke primaire dermale fibroblasten en remt door uv veroorzaakte rimpelvorming in de huid van muizen. Fytoander. Res. 2015, 29, 1917-1925. [KruisRef]

88. Rodenak-Kladniew, B.; Castro, A.; Stärkel, P.; Galle, M.; Crespo, R. 1,8-Cineole bevordert het stoppen van de G0/G1-celcyclus en door oxidatieve stress veroorzaakte senescentie in HepG2-cellen en maakt cellen gevoelig voor geneesmiddelen tegen veroudering. Levenswetenschappen. 2020, 243, 117271. [KruisRef]

89. Directoraat voor de kwaliteit van medicijnen en gezondheidszorg van de Raad van Europa. Europese Farmacopee; EDQM: Straatsburg, Frankrijk, 2010; ISBN-nummer 978-92-871-6700-2.

90. Van den Dool, H.; Kratz, PD Een generalisatie van het retentie-indexsysteem inclusief lineaire temperatuurgeprogrammeerde gas-vloeistofpartitiechromatografie. J. Chromatogr. 1963, 11, 463-471. [KruisRef]

91. CLSI Instituut voor klinische en laboratoriumnormen. Referentiemethode voor bouillonverdunning Testen van schimmelwerende gevoeligheid van draadschimmels. CLSI-document M38-A2, goedgekeurde norm, 2e ed.; Instituut voor klinische en laboratoriumnormen: Wayne, PA, VS, 2008; Deel 28, ISBN 1-56238-668-9.

92. Zuzarte, M.; Alves-Silva, JM; Alves, M.; Cavaleiro, C.; Salgueiro, L.; Cruz, MT Nieuwe inzichten in het ontstekingsremmende potentieel en veiligheidsprofiel van etherische oliën van Thymus carnosus en Thymus camphoratus en hun belangrijkste verbindingen. J. Ethnopharmacol. 2018, 225, 10–17. [KruisRef]

93. Groen, LC; Wagner, D.A.; Glogowski, J.; Schipper, PL; Wishnok, JS; Tannenbaum, SR Analyse van nitraat, nitriet en [15N] nitraat in biologische vloeistoffen. Anaal. Biochem. 1982, 126, 131-138. [KruisRef]

94. Martinotti, S.; Ranzato, E. Kraswondgenezingstest. In epidermale cellen: methoden in de moleculaire biologie; Turksen, K., red.; Humana: New York, NY, VS, 2019; Deel 2109, blz. 225-229. [KruisRef]

95. Moreira, P.; Sousa, FJ; Matos, P.; Britten, GS; Gonçalves, MJ; Cavaleiro, C.; Figueirinha, A.; Salgueiro, L.; Batista, MT; Branco, PC; et al. Chemische samenstelling en effect tegen huidveranderingen van bioactieve extracten verkregen door de hydrodestillatie van Eucalyptus globulus bladeren. Farmacie 2022, 14, 561. [CrossRef]

【Voor meer info: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】