Extractieparameters en droogmethoden van Cistanche Deserticola

Cistanche is de Cistanche deserticola YC Ma ofCistanche tubulosa (Schenk) Wightdroge, vlezige stengel met geschubde bladeren van de Orobanchiaceae-plantCistanche deserticola YC Ma[1]. Het belangrijkste actieve ingrediënt van Cistanche deserticola zijn fenylethanolglycosiden [2-4]. Farmacologische onderzoeken hebben aangetoond dat het de functies heeft vanafrodisiacum, het verbeteren van de immuniteit, Enhet verbeteren van het geheugen[4-9].

De afgelopen jaren is de responsoppervlaktemethodologie op grote schaal gebruikt bij de extractie van traditionele Chinese geneeskunde [{{0}}]. De responsoppervlakmethode heeft de inherente voordelen van een hoge detectienauwkeurigheid, een kleiner aantal benodigde experimenten, een nauwkeurige voorspelling van functiemodellen en het vermogen om de relatie tussen factoren en voorspelde waarden weer te geven [15-17]. Daarom gebruikt dit experiment de uitgebreide score van de inhoud van de vijf fenylethanolglycosiden als responswaarde, en wordt Design-Expert 8.0.6.1-software gebruikt om het experiment te ontwerpen, het extractieproces van Cistanche deserticola te optimaliseren en informatie te verstrekken voor de identificatie en vaststelling van kwaliteitsnormen vanCistanche woestijn.

Momenteel is de indexcomponenten echinaceaside en verbascosidezijn populaire onderzoeksthema's in de extractie- en verwerkingstechnologie vanCistanche woestijn. De 2015-editie van de Chinese Farmacopee bepaalt dat de verwerkingsmethode van Cistanche deserticola is: "onzuiverheden verwijderen, wassen, bevochtigen, in dikke plakjes snijden en drogen." [1] Er zijn geen duidelijke voorschriften over de droogmethode. Daarom werd bij dit experiment acht verschillende droogmethoden gebruikt, waaronder drogen in de zon, drogen in de schaduw, drogen in een oven (40, 60, 80, 100, 120 graden) en vriesdrogen, om Cistanche deserticola [18] te verwerken, wat een theoretische basis vormde voor de droogproces van Cistanche deserticola.

Over begeleiding.

CISTANCHE-EXTRACT MET 30% ECHINCAOSIDE

1 Materialen en instrumenten

Verse Cistanche deserticola werd in oktober 2018 geoogst. De plaats van herkomst is Mitan Township, Minqin County, Baiyin, provincie Gansu. Universitair hoofddocent Guo Yehong van de Gansu Agricultural University identificeerde het als Cistanche deserticola YC Ma, een vlezige stengel met geschubde bladeren. Referentiestoffen echinaceaside (partijnummer 82854-37-3, massafractie groter dan of gelijk aan 98%), cistancheaside A (partijnummer 93236-42-1, massafractie groter dan of gelijk aan 95%), verbascoside (partijnummer { {5}}, massafractie groter dan of gelijk aan 98%), isomurabasine (partijnummer 61303-13-7, massafractie groter dan of gelijk aan 98%), 2′-acetylverbascoside (partijnummer 94492-24-7 , massafractie Groter dan of gelijk aan 95%) werd gekocht bij Chengdu Pu. Feide Biotechnologie Co., Ltd.; mierenzuur en methanol zijn van chromatografiekwaliteit, Merck Company uit Duitsland; water is gezuiverd water en andere reagentia zijn van analytische kwaliteit.

Waters Acquity vloeistofchromatograaf, PDA-detector, Empower-chromatografiewerkstation en quaternair oplosmiddelbeheersysteem; KQ-100E ultrasone reiniger, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Bedrijf; AL104 analytische balans, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 vriesdroger, Telstar, Spanje.

2 Methoden en resultaten

2.1 Bereiding van referentieoplossing

Weeg nauwkeurig de juiste hoeveelheden afechinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascoside, en 2'-acetylverbascoside-referentiestandaarden, en voeg 70% methanol toe om de massaconcentraties 1.04, 0.61, 0.63, te maken, 0,39 en 0,48 mg/ml gemengde referentieoplossing.

2.2 Chromatografische omstandigheden van Cistanche deserticola

Watersymmetrie C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); kolomtemperatuur 30 graad, volumestroom 1,0 ml/min; mobiele fase is methanol-0.1% waterige mierenzuuroplossing, elutiegradiënt: 0~12 min, 29%~34% methanol; 12-40 min, 34%-40% methanol; 30-35 min, 40%-35% methanol; 35-40 min., 30% methanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acetylacteoside

Fig. 1 HPLC van gemengde referentie (A) en C. deserticola-monster (B)

2.3 Bereiding van de testoplossing

Weeg nauwkeurig 1 g gedroogd Cistanche deserticola-poeder af in een erlenmeyer (door een zeef met mazen van 65-), voeg 50 ml 50% methanol toe, weeg de massa, ultrasoon op 40 kHz bij 150 W, koel af tot kamertemperatuur , en verzin de massa om het te krijgen.

2.4 Onderzoek naar lineaire relatie

Neem {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 en 8 ml van de bovenstaande gemengde referentieoplossing in een 10 ml maatkolf en voeg 70% methanol toe tot de maatstreep. Trek nauwkeurig 10 μl af en meet volgens de chromatografische omstandigheden van "2.2". De massaconcentratie is de abscis (X) en het piekoppervlak is de ordinaat (Y). Voer lineaire regressie uit en de regressievergelijkingen zijn: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, lineair bereik 10,4~832,0 ug/ml; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r=0.999 8, lineair bereik 6.3-504,0 ug/ml; Isomurabasine Y＝92 831 Glycoside Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, lineair bereik 4,8~384,0 ug/ml.

2.5 Methodologische beoordeling

2.5.1 Precisie-inspectie

Neem 20 μl van de gemengde referentieoplossing in item "2.1" en injecteer 6 keer continu om de piekgebieden van echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascoside en 2'-acetylverbascoside te meten. De RSD's bedragen respectievelijk 0,23%. , {{10}}.71%, 0.59%, 0,41%, 0,29%, wat aangeeft dat het instrument een goede precisie heeft.

2.5.2 Herhaalbaarheidstest

Neem 6 porties van hetzelfde Cistanche deserticola-monster, bereid de testoplossing volgens item "2.3", injecteer het monster onder de chromatografische omstandigheden van item "2.2" en meet het piekoppervlak. Resultaten De gemiddelde massafracties van echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside en 2′-acetylverbascoside waren 1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% en {{15 }},68% respectievelijk, en de RSD's waren respectievelijk 1,32. %, 0,83%, 1,24%, 2,19%,

0,78%, wat aangeeft dat de methode een goede herhaalbaarheid heeft.

2.5.3 Stabiliteitstest

Bepaal de stabiliteit van dezelfde testoplossing (bereid volgens "2.3") na 0, 2, 4, 8, 12, 24 en 48 uur om echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside en isolebascoside te verkrijgen. , 2′-acetylverbascoside piekoppervlak, RSD waren respectievelijk 0.58%, 0.21%, 1,58%, 1,46%, 2,19%, wat aangeeft dat de testoplossing binnen 48 uur stabiel was.

2.5.4 Monsterhersteltest

Neem 1 g van 6 Cistanche deserticola-monsters met een bekende inhoud en voeg nauwkeurig een bepaalde hoeveelheid gemengde referentieoplossing toe (Echinaceaside 1.06 mg/ml, Cistancheoside A 0.86 mg /ml, Verbascoside 2,17 mg/ml, Isolebascoside 0.79 mg /ml, 2′-acetylverbascoside 0.91 mg/ml), voeg 70% methanol toe tot 50 ml, en injecteer monsters volgens de chromatografische omstandigheden van "2.2". De gemiddelde gemeten terugvorderingen zijn respectievelijk 101,52%, 99,21% en 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD zijn respectievelijk 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13%, en het monsterherstelpercentage is goed.

Cistanche is een bekend versterkend kruid dat de nieren kan voeden en beschermen. In de theorie van de traditionele Chinese geneeskunde is Cistanche het beste kruid voor de nieren. Cistanche is rijk aan echinacoside, acteoside en flavonoïden. Deze effectieve ingrediënten in Cistanche kunnen de apoptose van niercellen verminderen en de proliferatie van niercellen verhogen. Daarom is Cistanche een natuurlijk niersupplement.