Interventieonderzoek naar fenylethylalcoholglycosidesine Cistanche bij het perimenopauzale syndroom Diermodel Ⅲ

Experiment 2

Effect vanCistanche fenylethanolglycosideop muisperimenopauzemodel Materialen en methoden

Experimentele materialen

1.1 Proefdieren

Muizen van SPF-kwaliteit, Kunming-soort, vrouwelijk, 20-25g, geleverd door Wuhan Institute of Biological Products. Certificaatnummer: 42000400000611; Laboratoriumcertificaatnummer SYXK (Yu) 2010-001. 1.2 Experimentele medicijnen

Cistanche deserticola fenylethanolglycoside werd bereid volgens de methode van Experiment 1 en het gehalte bereikte 66,47%. Gengnian'an Capsule, ingrediënten: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, pioenenschors, Poria cocos, parelmoer, curculigo, Schisandra chinensis, magnetiet, Polygonum multiflorum vine, Uncaria, drijvende tarwe, polygonum multiflorum . Functies en indicaties: Voed yin en onderwerp yang, verlicht problemen en kalmeer de geest. Gebruikt voor opvliegers en zweten in de menopauze, duizeligheid, oorsuizen, prikkelbaarheid en slapeloosheid. Specificaties: 0,3 g per capsule. Gebruik en dosering: Oraal, 3 capsules per keer, 3 keer per dag. Fabrikant: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Productiebatchnummer: 121104. Goedkeuringsnummer: National Drug Approval No. Z14021848.

Soja-isoflavonen en vitamine E zachte capsules, ingrediëntenlijst: soja-isoflavonenpoeder, vitamine E, zonnebloemolie, gelatine, glycerine, water, tartrazine, titaniumdioxide. Iconische ingrediënten en inhoud: Elke 100 g bevat 55,2 mg soja-isoflavonen (berekend als genisteïne) en 608,5 mg vitamine E. Gezondheidsfuncties: Verhoog de botdichtheid. Gebruiksaanwijzing en dosering: 2 maal daags 1 capsule met warm water innemen. Specificaties: 500mg×100 capsules. Fabrikant: Weihai Ziguang Biotechnology Development Co., Ltd. Productiebatchnummer: 13070302. Goedkeuringsnummer: National Food Health G20080032.

Resultaat 1 Effect op autonome activiteiten in het perimenopauzale muismodel

De resultaten van de autonome activiteitstest van muizen in elke experimentele groep worden weergegeven in Tabel 2 en Figuur 2.

1.3 Experimentele reagentia

Natriumcarboxymethylcellulose, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., batchnummer: 20120418; penicilline-natrium voor injectie, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specificatie: 4 miljoen eenheden, productiebatchnummer: c1206807; formaldehyde-oplossing (analytische kwaliteit), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., productiebatchnummer: 20130902; 0,9% natriumchloride-injectie, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; specificatie: 250 ml, productiebatchnummer: 1301265303;

Chloraalhydraat, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, batchnummer 20120827; muis E2 ELISA-detectiekit, R&D Company, batchnummer: 20131001A; muis T ELISA-detectiekit, R&D Company, batchnummer: 20131001A; muis LH ELISA-detectietestkit, R&D Company, batchnummer: 20131001A;

Muis FSH ELISA-detectiekit, R&D Company, batchnummer: 20131001A. 1.4 Experimentele instrumenten

Elektronische weegschaal, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronische analytische balans, Ohaus (Shanghai) Company, model: AR1140/C; snelle desktopcentrifuge, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, model: TGL-168; Elektrisch thermostatisch waterbad, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Autonome activiteitentester voor muizen, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Muis donkervermijdingsmeter, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; hogesnelheidskoelcentrifuge, Zhongjia-afdeling van HKUST Innovation Co., Ltd., model: KDC-160HR; verstelbare pipet, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Microplaatlezer, Amerikaans BIO-RAD Company, model: 680;

Elektrische microscoop, Japan OLYMPUS bedrijf, model: BX61

HOE LANG DUURT HET VOORDAT CISTANCHE WERKT?

2 Experimentele methoden

2.1 Modellering en geneesmiddelenadministratie

Modelleringsmethode: neem 100 vrouwelijke Kunming-muizen met een gewicht van 23-25g, selecteer willekeurig 12 muizen als de blanco groep en voer een schijnoperatie uit, en de overige muizen worden gebruikt om menopauzemodellen te maken . Na het wegen werden de muizen verdoofd door intraperitoneale injectie van 10% chloraalhydraat (0,03 ml/10 g) en in de buikpositie gefixeerd. Vervolgens werd het haar vanaf de achterkant van de muis onder de laatste ribbe op het snijpunt van de midaxillaire lijn en ongeveer 1 cm vanaf de buitenkant van de wervelkolom geknipt en vervolgens gedesinfecteerd en geknipt. De huid en rugspieren zijn ongeveer 0,5-1cm geopend en er is een melkwitte, glanzende vetmassa te zien in het incisieveld, waarin de eierstok is ingebed. Gebruik een klein pincet om de vetmassa voorzichtig vast te pakken en uit de incisie te trekken, scheid de vetmassa en je ziet een groep dunne, onregelmatige, geelrode eierstokken. Bij het snijden bindt u eerst de eileiders (inclusief vet) onder de eierstokken af ​​met dunne draden en verwijdert u vervolgens de eierstokken. Na de operatie worden de baarmoederhoorns terug in de buikholte geplaatst, worden de spieren en de huid gehecht en worden beide eierstokken op dezelfde manier verwijderd. Na de operatie werden de dieren zorgvuldig grootgebracht en werd penicilline 200,000 u/kg (elk 0,1 ml) intramusculair geïnjecteerd om infectie te voorkomen, eenmaal per dag gedurende drie opeenvolgende dagen. Bij elke muis werd 5 dagen na de operatie, eenmaal daags gedurende 5 opeenvolgende dagen, een vaginaal uitstrijkje uitgevoerd om te bepalen of de eierstokken volledig waren verwijderd. De muizen die een oestrische reactie in het uitstrijkje vertoonden, werden weggegooid en 72 volledig gecastreerde muizen werden willekeurig en gelijkmatig verdeeld in 6 groepen voor experimentele doeleinden, namelijk de modelgroep,Gengniang'an capsulegroep, soja-isoflavon zachte capsulegroep en grote groep. , middelgrote en kleine dosesCistanche fenylethanolglycosidegroep. Bereidingsmethode: {{0}},5% CMC Bereidingsmethode: Weeg 4 g natriumcarboxymethylcellulose af en meng dit met gedestilleerd water om 800ml te verkrijgen. De doseringen van grote, middelgrote en kleine doses van de Cistanche-fenylethanolglycosidegroep waren respectievelijk 20{{30}} mg/kg, 100 mg/kg en 50 mg/kg (toedieningsvolume 0,1 ml/ 10g). Bereidingswijze: Weeg respectievelijk 2000 mg, 1000 mg en 500 mg Cistanche-fenylethanoïdeglycoside, los het op met een kleine hoeveelheid 0,5% CMC, pas het volume aan tot 100 ml, meng goed, en dat is alles. Gengniangan-capsules (675 mg/kg, gemengd met gedestilleerd water tot 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, overeenkomend met 15 maal de klinische dosering); Bereidingswijze: neem 9 Gengniangan-capsules, gebruik eerst een kleine hoeveelheid 0,5% CMC Dissolve, pas vervolgens het volume aan op 40 ml en meng goed om de dosis Gengnianan-capsulesuspensie (675 mg/kg) te verkrijgen. Soja-isoflavon vitamine E zachte capsule (250 mg/kg, gebruik gedestilleerd water om 25 mg/ml, 0,1 ml/10 g te bereiden, overeenkomend met 15 keer de klinische dosering); Bereidingswijze: neem 2 soja-isoflavoncapsules, gebruik eerst een kleine hoeveelheid 0,5 Dissolve%CMC, pas vervolgens het volume aan op 40 ml en meng goed om de dosis soja-isoflavoncapsulesuspensie te verkrijgen (250 mg/kg).

Bewaarwijze: in de koelkast bewaren, tijdens gebruik warm houden.

Toedieningsmethode: Dieren in elke groep kregen op de 10e dag na de operatie overeenkomstige medicijnen. De Gengnian'an-capsulegroep kreeg oraal Gengniang'an-capsulesuspensie 675 mg·kg-1 toegediend, en de soja-isoflavon-zachte capsulegroep kreeg oraal 250 mg·kg-1 soja-isoflavon-zachte capsule-suspensie toegediend, en groot, middel enkleine doses Cistanche-benzeenwerden toegediend. De ethanolglycosidegroep kreeg oraal grote, middelgrote en kleine doses Cistanche-fenylethanoïdeglycoside 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ {5}}, respectievelijk 0,1 ml/10 g. De blancogroep en de modelgroep kregen eenmaal daags gedurende 21 opeenvolgende dagen hetzelfde volume 0,5% CMC-oplossing toegediend.

Muis FSH ELISA-detectiekit, R&D Company, batchnummer: 20131001A. 1.4 Experimentele instrumenten

Elektronische weegschaal, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronische analytische balans, Ohaus (Shanghai) Company, model: AR1140/C; hogesnelheidsdesktopcentrifuge, Shanghai Anting Scientific Instrument Factory, model: TGL-168 ; Elektrisch thermostatisch waterbad, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Autonome activiteitentester voor muizen, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Muis donker vermijdingsmeter, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; hogesnelheidskoelcentrifuge, Zhongjia-afdeling van HKUST Innovation Co., Ltd., model: KDC-160HR; verstelbare pipet, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Microplaatlezer, Amerikaans BIO-RAD Company, model: 680;

Elektrische microscoop, Japan OLYMPUS bedrijf, model: BX61

2 Experimentele methoden

2.1 Modellering en medicijntoediening

Modelleringsmethode: neem 100 vrouwelijke Kunming-muizen met een gewicht van 23-25g, selecteer willekeurig 12 muizen als de blanco groep en voer een schijnoperatie uit, en de overige muizen worden gebruikt om menopauzemodellen te maken . Na het wegen werden de muizen verdoofd door intraperitoneale injectie van 10% chloraalhydraat (0,03 ml/10 g) en in de buikpositie gefixeerd. Vervolgens werd het haar vanaf de achterkant van de muis onder de laatste ribbe op het snijpunt van de midaxillaire lijn en ongeveer 1 cm vanaf de buitenkant van de wervelkolom geknipt en vervolgens gedesinfecteerd en geknipt. De huid en rugspieren zijn ongeveer 0,5-1cm geopend en er is een melkwitte, glanzende vetmassa te zien in het incisieveld, waarin de eierstok is ingebed. Gebruik een klein pincet om de vetmassa voorzichtig vast te pakken en uit de incisie te trekken, scheid de vetmassa en je ziet een groep dunne, onregelmatige, geelrode eierstokken. Bij het snijden bindt u eerst de eileiders (inclusief vet) onder de eierstokken af ​​met dunne draden en verwijdert u vervolgens de eierstokken. Na de operatie worden de baarmoederhoorns terug in de buikholte geplaatst, worden de spieren en de huid gehecht en worden beide eierstokken op dezelfde manier verwijderd. Na de operatie werden de dieren zorgvuldig grootgebracht en werd penicilline 200,000 u/kg (elk 0,1 ml) intramusculair geïnjecteerd om infectie te voorkomen, eenmaal per dag gedurende drie opeenvolgende dagen. Bij elke muis werd 5 dagen na de operatie, eenmaal daags gedurende 5 opeenvolgende dagen, een vaginaal uitstrijkje uitgevoerd om te bepalen of de eierstokken volledig waren verwijderd. De muizen die een oestrische reactie in het uitstrijkje vertoonden, werden weggegooid en 72 volledig gecastreerde muizen werden willekeurig en gelijkmatig verdeeld in 6 groepen voor experimentele doeleinden, namelijk de modelgroep, de Gengniang'an-capsulegroep, de zachte capsulegroep van soja-isoflavon en de grote groep. , middelgrote en kleine dosesCistanche fenylethanolglycosidegroep. Bereidingsmethode: 0,5% CMC Bereidingsmethode: Weeg 4 g natriumcarboxymethylcellulose af en meng dit met gedestilleerd water om 800 ml te verkrijgen. De doseringen van grote, middelgrote en kleine dosesCistanche fenylethanolglycosidegroep waren respectievelijk 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg en 50mg/kg (toedieningsvolume 0,1ml/10g). Bereidingswijze: Weeg respectievelijk 2000 mg, 1000 mg en 500 mg Cistanche-fenylethanoïdeglycoside, los het op met een kleine hoeveelheid 0,5% CMC, pas het volume aan tot 100 ml, meng goed, en dat is alles. Gengniangan-capsules (675 mg/kg, gemengd met gedestilleerd water tot 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, overeenkomend met 15 maal de klinische dosering); Bereidingswijze: neem 9 Gengniangan-capsules, gebruik eerst een kleine hoeveelheid 0,5% CMC Dissolve, pas vervolgens het volume aan op 40 ml en meng goed om de dosis Gengnianan-capsulesuspensie (675 mg/kg) te verkrijgen. Soja-isoflavon vitamine E zachte capsule (250 mg/kg, gebruik gedestilleerd water om 25 mg/ml, 0,1 ml/10 g te bereiden, overeenkomend met 15 keer de klinische dosering); Bereidingswijze: neem 2 soja-isoflavoncapsules, gebruik eerst een kleine hoeveelheid 0,5 Dissolve%CMC, pas vervolgens het volume aan op 40 ml en meng goed om de dosis soja-isoflavoncapsulesuspensie te verkrijgen (250 mg/kg).

Bewaarwijze: in de koelkast bewaren, tijdens gebruik warm houden.

Toedieningsmethode: Dieren in elke groep kregen de overeenkomstige medicijnen toegediend op de 10e dag na de operatie. De Gengnian'an-capsulegroep kreeg oraal Gengniang'an-capsulesuspensie 675 mg·kg-1 toegediend, en de soja-isoflavon-zachte capsulegroep kreeg oraal 250 mg·kg-1 soja-isoflavon toegediend zachte capsulesuspensie en grote, middelgrote en kleine doses Cistanche-benzeen werden toegediend. De ethanolglycosidegroep kreeg oraal grote, middelgrote en kleine doses Cistanche-fenylethanoïdeglycoside toegediend, respectievelijk 200 mg·kg-1, 10 mg·kg-1, 50 mg·kg-1, 0,1 ml/10 g. De blancogroep en de modelgroep kregen eenmaal daags gedurende 21 opeenvolgende dagen hetzelfde volume 0,5% CMC-oplossing toegediend.

2.2 Observatie-items en detectiemethoden

Het aantal spontane activiteiten van muizen in elke groep binnen 5 minuten werd gemeten op de 18e dag van toediening. De latentie van de muizen die voor de eerste keer de donkere kamer binnengingen en het aantal elektrische schokken dat binnen 5 minuten na het betreden van de donkere kamer werd ontvangen, werden gemeten op de 19e tot 20e dag van toediening. 2 uur na de laatste dosis (12 uur zonder voedsel of water) werden de muizen gewogen, werden hun oogbollen verwijderd, werd bloed afgenomen, werd het serum gescheiden en werd de inhoud van E2, T, LH en FSH in het serum bepaald. gemeten; de muizen werden vervolgens opgeofferd door cervicale dislocatie en ontleed. , verwijder de thymus, de milt en het baarmoederweefsel, weeg hun natte gewicht en bereken de orgaanindex (orgaanindex=orgaan nat gewicht mg/muisgewicht g), en verwijder vervolgens de hypofyse; fixeer de thymus, milt, baarmoeder en hypofyse op in 10% formaline-oplossing, ingebed in paraffine, in plakjes gesneden, HE-gekleurd, en de weefselmorfologische veranderingen van elke groep werden waargenomen onder een lichtmicroscoop.

2.2.1 Toets op het aantal zelfstandige activiteiten

De muizen in elke groep werden in het apparaat voor vrijwillige activiteiten geplaatst, eerst gedurende 1 minuut aangepast aan de omgeving, en vervolgens werd het aantal vrijwillige activiteiten binnen 5 minuten gemeten.

2.2.2 Donkere vermijdingstest

Plaats de muizen in elke groep in de testbox met hun staart naar de kleine opening in de donkere kamer gericht, en geef training. Na 24 uur werden de latentietijd van de muizen die voor het eerst de donkere kamer binnengingen en het aantal elektrische schokken dat binnen 5 minuten na het betreden van de donkere kamer werd ontvangen, opnieuw gemeten.

2.2.3 Methode voor het bepalen van de kit

Verkrijg serumspecimens: Gebruik reageerbuizen die vrij zijn van pyrogenen en endotoxinen. Vermijd elke celstimulatie tijdens de operatie. Nadat u het bloed heeft verzameld, centrifugeert u het gedurende 10 minuten bij 3000 rpm om het serum en de rode bloedcellen snel en zorgvuldig te scheiden. Muis estradiol (E2) ELISA detectiekit testmethode: Haal de vereiste strips uit de aluminiumfoliezak die gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur is geëquilibreerd, en sluit de resterende strips af in een zelfsluitende zak en plaats ze terug op 4 graden. . Zet standaardputten en monsterputten op en voeg 50 μl standaarden met verschillende concentraties toe aan elk standaardputje. Voeg eerst 10 μl van het te testen monster toe aan de monsterput en voeg vervolgens 40 μl monsterverdunningsmiddel toe (dat wil zeggen, het monster wordt 5 keer verdund); voeg het niet toe aan de blanco put. Voeg, met uitzondering van het blanco putje, 100 μl met mierikswortelperoxidase gelabeld detectie-antilichaam toe aan elk putje van het standaardputje en het monsterputje, en sluit de reactie goed af met een afdichtingsfilm. Incubeer in een waterbad van 37 graden of in een incubator gedurende 60 minuten. Gooi de vloeistof weg, dep ze droog op absorberend papier, vul elk putje met wasoplossing en laat 1 minuut staan. Schud de wasvloeistof eraf, dep het droog op absorberend papier en herhaal het wassen van de plaat 5 keer. Voeg eerst 50 μl van elk van de substraten A en B toe aan elk putje en incubeer gedurende 15 minuten bij 37 graden in het donker. Haal de enzymplaat eruit, voeg 50 μl stopoplossing toe aan elk putje en meet binnen 15 minuten de absorptiewaarde (OD-waarde) van elk putje bij een golflengte van 450 nm. Teken, afhankelijk van de concentratie van het standaardproduct en de overeenkomstige OD-waarde, de standaardproductregressiecurve en bereken de concentratiewaarde van elk monster volgens de curvevergelijking. De eindconcentratie is de daadwerkelijk gemeten concentratie vermenigvuldigd met de verdunningsfactor. Onder hen zijn de concentraties van standaardproducten (S0-S5) 0, 4, 8, 16, 32 en 64 pmol/L. De concentraties van de muis (muis) testosteron (T) ELISA-detectiekitstandaard (S0-55) zijn 0, 50, 100, 200, 400 en 800 pg/ml;

De concentraties van de muis (muis) luteïniserend hormoon (LH) ELISA-detectiekitstandaard (S{{0}}) zijn 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 mIU/ml;

De concentraties van de muis (muis) follikelstimulerend hormoon (FSH) ELISA-detectiekitstandaard (S0-55) zijn 0, 5, 10, 20, 40 en 80 mIU/ml.

2.3 Statistische verwerkingsmethoden

Voor gegevensanalyse werd SPSS17.0 medisch statistisch pakket gebruikt voor de statistische verwerking van gegevens. Meetgegevens werden uitgedrukt als gemiddelde ± standaardafwijking (-x ± s). Voor de vergelijking tussen groepen werd eenzijdige variantieanalyse gebruikt. De LSD-methode werd gebruikt om de homogeniteit van varianties te testen. werd de Games-Howell-test gebruikt voor ongelijke varianties en de Ridit-test voor cijfergegevens.

Figuur 3 Effect van Cistanche-fenylethanolglycoside op de latente periode van donkervermijdingsexperiment in het perimenopauzale muismodel

Figuur 4 Het effect van Cistanche-fenylethanolglycoside op het aantal elektrische schokken in het donkervermijdingsexperiment van het perimenopauzale muismodel. Uit Tabel 3 en Figuren 3-4 blijkt dat, vergeleken met de blanco groep, de incubatieperiode en het aantal elektrische schokken van de muizen in de modelgroep aanzienlijk waren verminderd (P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 Effecten op de orgaanindex in het perimenopauzale muismodel

De thymus-, milt- en baarmoederindexen van muizen in elke experimentele groep worden weergegeven in Tabel 4 en Figuur 5.

Zoals blijkt uit Tabel 4 en Figuur 5 was de baarmoederindex van de muizen in de modelgroep, vergeleken met de blanco groep, aanzienlijk lager (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

Inhoud van E2, T, FSH en LH in het serum van muizen in elke groep. Zie Tabellen 5~6 en Figuren 6~9. Uit tabellen 5-6 en figuren 6-9 blijkt dat, vergeleken met de blancogroep, de niveaus van E2 en T in het serum van muizen in de modelgroep aanzienlijk waren verlaagd (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 Effecten op serum-geslachtshormoonspiegels in het perimenopauzale muismodel

Inhoud van E2, T, FSH en LH in serum van muizen in elke groep. Zie Tabellen 5~6 en Figuren 6~9.

Uit tabellen 5-6 en figuren 6-9 blijkt dat, vergeleken met de blancogroep, de niveaus van E2 en T in het serum van muizen in de modelgroep aanzienlijk waren verlaagd (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

De pathologische en histologische observatieresultaten van de baarmoeder, thymus, milt en hypofyse van muizen in elke experimentele groep zijn als volgt. De pathologische foto's worden weergegeven in bijlage 1 voor de pathologische foto's van perimenopauzale muizen.

5.1 Effect op de baarmoederweefselmorfologie van perimenopauzale modelmuizen

Afhankelijk van de verschillende mate van veranderingen in het endometrium, de klieren en het myometrium van muizen in elke groep experimenten, werden semi-kwantitatieve standaarden gebruikt om de pathologische weefselmorfologie in vier niveaus te verdelen. De baarmoeder van muizen in elke groep experimenten werd gemeten. De observatieresultaten worden weergegeven in Tabel 7. Tabel 7 Effect van Cistanche deserticola fenylethanolglycoside op pathologische veranderingen in de baarmoeder bij perimenopauzale modelmuizen Eenheid: alleen

"-" De endometriumepitheelcellen, klieren, myometrium en serosa zijn allemaal normaal; "+" de epitheelcellen en klieren van het endometrium zijn geatrofieerd en het myometrium en de serosa zijn normaal; "++" het endometriumepitheel Cellen en klieren zijn gedeeltelijk geatrofieerd, de spierlaag is enigszins geatrofieerd en de serosa is normaal; "+++" endometriale epitheelcellen en klieren zijn aanzienlijk geatrofieerd en de serosa is normaal.

Na de Ridit-test kan uit de bovenstaande tabel worden afgeleid dat de baarmoeder van muizen in de modelgroep, vergeleken met de blanco groep, significante pathologische weefsellaesies vertoonde (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

Gebruik een micrometer om de dikte van de dikste en smalste delen van de thymuscortex van elke muis in elke experimentele groep te meten om het gemiddelde te verkrijgen; gebruik een micrometer om de basislijn op de miltknobbel te plaatsen en meet de twee diktes met de centrale slagader als middelpunt. De dikte van de miltknobbeltjes aan beide zijden werd berekend en gemiddeld; de resultaten worden getoond in Tabel 8 en Figuur 10.

Tabel 8 Effecten van Cistanche deserticola-fenylethanolglycoside op pathologische veranderingen van de thymus en de milt bij perimenopauzale modelmuizen (-x±s)

Zoals blijkt uit Tabel 8 en Figuur 10 waren, vergeleken met de blanco groep, de dikte van de thymuscortex en het volume van de miltknobbeltjes in de modelgroep aanzienlijk verminderd (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

Het gezichtsveld met hoge vergroting bestrijkt een gebied van 10.000 μm

2. Meet het aantal basofiele cellen en cellen van de hypofysevoorkwab in het microrechthoekige frame. De resultaten worden getoond in Tabel 9 en Figuren 11-12.

Uit Tabel 9 en Figuren 11-12 blijkt dat vergeleken met de blanco groep het aantal basofiele cellen en cellen van de hypofysevoorkwab in de modelgroep aanzienlijk was verminderd (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).