Darmpermeabiliteit en depressie bij patiënten met inflammatoire darmziektenⅠ
Dec 20, 2023
Samenvatting: Depressie is een mondiaal gezondheidsprobleem dat een vroege en nauwkeurige diagnose vereist om snelle toegang tot de juiste behandeling te garanderen. De recente aandacht heeft zich geconcentreerd op het analyseren van de hersen-darm-microbiota-as tussen meerdere psychopathologische paden. De darmbarrière speelt een sleutelrol, en disfuncties die op dit niveau optreden, hebben gevolgen voor de geestelijke gezondheid. De huidige studie had tot doel de rol van biomarkers voor de darmpermeabiliteit, dat wil zeggen calprotectine, zonuline, lipopolysacharide-bindend eiwit (LBP) en intestinaal vetzuurbindend eiwit (I-FAB), te onderzoeken bij depressie bij patiënten met inflammatoire darmziekten (IBD). ).
Dit is het eerste onderzoek van deze soort dat plaatsvindt in Roemenië, Oost-Europa, met de nadruk op patiënten met de ziekte van Crohn en colitis ulcerosa. De gevonden correlaties tussen depressie en calprotectine en depressie en lage rugpijn hebben het potentieel om licht te werpen op het proces van snelle diagnose van depressie met behulp van biomarkers. Omdat depressie gecorreleerd is met een afname van de kwaliteit van leven bij patiënten met IBD, moet de behoefte aan toegang tot geschikte behandelingen dringend zijn.
1. Inleiding
Depressie is een individuele, professionele en sociale handicap die gepaard gaat met somatische morbiditeiten [1,2] en met een hoog risico op sterfte door zelfmoord [3]. De toegang tot specialisten, een juiste diagnose en een effectieve behandeling zijn echter beperkt [4]. Een vroege en nauwkeurige diagnose [5,6], evenals een gepersonaliseerde behandelingskeuze [7], zijn noodzakelijk om het lijden en de financiële last van de ziekte te verminderen [3]. Volgens de diagnostische criteria in het Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM V) [8] is depressie een affectieve stoornis met een heterogene groep symptomen. Om de diagnose te stellen is de aanwezigheid van vijf van de negen volgende symptomen vereist: depressieve stemming, gebrek aan plezier, slaapproblemen en eetlust, laag energieniveau, cognitieve veranderingen, schuldgevoelens en schuldgevoelens, en zelfmoordgedachten. pathofysiologische mechanismen om baat te hebben bij een effectieve behandeling zijn niet bekend. Verschillende mechanismen zijn in twijfel getrokken, maar de theorieën zijn nog in ontwikkeling.
Zo zijn disfuncties op de hypothalamus-hypofyse-as, neurotransmitters, nervus vagus, vetzuurmetabolieten met korte keten, tryptofaan, ontstekingsfactoren en de hersen-darm-microbiota-as onderzocht [9-12]. Het is bewezen dat stressgerelateerde stoornissen niet alleen veranderingen teweegbrengen in de samenstelling van de darmmicrobiota via de hypothalamus-hypofyse-bijnier-as, maar dat de darm ook de darmen beïnvloedt.
centrale zenuwstelsel door vagale stimulatie, darmpermeabiliteit en de afgifte van ontstekings- en ontstekingsremmende stoffen en veranderingen in de circulerende stoffen in het bloed [13]. In de afgelopen twintig jaar is het onderzoek naar de betrokkenheid van de hersenen-darm-microbiota bij psychische stoornissen in een stroomversnelling gekomen [9,14]. In deze context heeft de rol van het lekkende darmsyndroom meer aandacht gekregen [15,16].
De darmbarrière speelt de hoofdrol bij de vertering en opname van voedingsstoffen; secundair controleert het strikt het transport van antigenen van het lumen naar de submucosa, en handhaaft het de balans tussen tolerantie en de immuunrespons die ontstekingen veroorzaakt. De integriteit van de darmbarrière kan worden beïnvloed door voeding, dysbiose van de darmmicrobiota of door andere factoren. Deze hebben het potentieel om immuunactivatie te veroorzaken door translocatie van microbiële antigenen en metabolieten. Momenteel zijn serumzonuline, intestinaal vetzuurbindend eiwit (IFABP/FABP2) en LBP, evenals fecaal albumine, calprotectine en zonuline, geanalyseerd als darmpermeabiliteit. markers [17]. Calprotectine is een eiwit dat calcium en zink bindt, aanvankelijk geïsoleerd uit leukocyten; het is nuttig bij het onderscheiden van inflammatoire darmziekten en het prikkelbare darm syndroom. Het speelt een belangrijke rol tijdens ontstekingen en wordt beschouwd als een eiwit in de acute fase [18 ].
Normale waarden liggen tussen 10 en 50 of 60 (ug/g). Waarden boven de 200 (ug/g) kunnen duiden op een ontstekingsziekte, en waarden boven de 500-600 (ug/g) duiden zeker op het bestaan van een darmziekte [19]. Lipopolysacharide-bindend eiwit (LBP) is een essentiële lipidecomponent van het externe membraan. van Gram-negatieve bacteriën [20], die endotoxemie veroorzaken [21]. LBP wordt geproduceerd door hepatocyten, vetweefsel en darmcellen en functioneert als een acuut fase I-eiwit en speelt een belangrijke rol in de immuunrespons [22]. LBP is aanwezig in serum in concentraties van 5-15 mg/ml en neemt 10 tot 50 keer toe tijdens de acutefasereactie. De barrièrefunctie wordt in stand gehouden door zonuline, bekend als de enige fysiologische modulator van nauwe intracellulaire verbindingen (TJ’s) [15,23, 24]. Zonuline opent reversibel de TJ en werkt in op de protease-geactiveerde receptor 2 die zich in de intracellulaire ruimte van het junctiecomplex bevindt [25]. De mediaanwaarde van zonuline is 34 ng/ml [26].
Intestinaal vetzuurbindend eiwit (I-FABP/FABP2) is een van de negen verschillende geïdentificeerde FABP's, die behoren tot een superfamilie van eiwitten die lipiden binden. De belangrijkste rol is intracellulair transport en de regulatie van de vetzuurabsorptie [27]. Wanneer schade aan de epitheliale darmbarrière optreedt, komt I-FABP vrij in de bloedsomloop en neemt de plasmaconcentratie ervan toe [28]. De drempelwaarde voor I-FAPB wordt beschouwd als 2 ng/ml. In deze context wilden we de rol onderzoeken van biomarkers voor de darmpermeabiliteit bij depressie bij patiënten met inflammatoire darmziekten (IBD) door (i) de relatie te onderzoeken tussen calprotectine, zonuline, LBP , IFABP/FABP2 en depressie en door (ii) het evalueren van de invloed van depressie op de kwaliteit van leven.
2. materialen en methoden
2.1. Studiegroep
De eerste groep bestond uit 60 patiënten van de Gastroenterology Clinic van het Constanta County Clinical Hospital tussen april en juni 2021. De inclusiecriteria waren een diagnose van IBD, leeftijd 18 jaar en ouder, kennis van lezen en schrijven, en toestemming om deel te nemen aan het onderzoek. De uitsluitingscriteria waren weigering van toestemming, ernstige depressie of andere ernstige psychische stoornissen waarvoor zij werden doorverwezen naar de gespecialiseerde psychiatrische dienst. Na geïnformeerde toestemming werden de patiënten telefonisch gecontacteerd door een onderzoeker om een sociodemografische vragenlijst over depressie en een vragenlijst over de kwaliteit van de behandeling af te nemen. In het onderzoek waren 30 patiënten opgenomen die alle stadia van het onderzoek doorliepen.
2.2. Vragenlijsten gebruikt
De Patient Health Questionnaire-9 (PHQ-9) [29] werd op de deelnemers toegepast om het niveau van depressie te beoordelen waardoor zij getroffen werden. Deze standaardvragenlijst bevat negen items waarop moet worden gereageerd op basis van de symptomen die de patiënt de afgelopen 14 dagen heeft gehad. De scores zijn als volgt geclassificeerd: 1–4 minimale depressie, 5–9 milde depressie, 10–14 matige depressie, 15–19 matig ernstige depressie en 20–27 ernstige depressie. Op dezelfde manier hebben we een vragenlijst voor de kwaliteit van leven toegepast (EQ{{ 14}}D) [30,31] om gegevens te verzamelen over de kwaliteit van leven. De items in dit hulpmiddel zijn de mobiliteit van de patiënt, zelfzorg, betrokkenheid bij gebruikelijke activiteiten, pijn of ongemak, en ervaren angst of depressie. De items worden beantwoord op een schaal met vijf niveaus.
2.3. Monsterverzameling en laboratoriumanalyse
Serologische monsters voor zonuline, IFABP/FABP2, LBP en fecale monsters voor calprotectine werden verzameld volgens het protocol voor het verzamelen en transporteren van potentieel infectieuze biologische monsters. Serummonsters werden verzameld door veneuze punctie, vasten en in de vacutainer met een activatordoek. Fecale monsters werden verzameld uit spontaan uitgestoten ontlasting in containers zonder dragermedium. Het serum werd getest op zonuline met MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, VS). en IFABP/FABP2 en LBP met Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Kit (Wuhan, China). De monsters werden getest op calprotectine met de EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG-kit. Alle tests werden uitgevoerd met een enzymgerelateerde immunosorbenttest (ELISA) op een ADALTIS Analyzer GEN-4 en Victor X4 volgens de instructies van de fabrikant van de kit.
Het bereik van normale waarden is door de fabrikant van de kit alleen voor calprotectine als volgt gedefinieerd: kleiner dan of gelijk aan 50.0 mcg/g zoals normaal, 50.1– 120,0 mcg/g als grenswaarde, en groter dan of gelijk aan 120,1 mcg/g als positief voor darmziekten. Voor zonuline heeft de fabrikant van de reactiekit geen lagere detectielimieten opgegeven. De onderste detectielimiet voor de IFABP/FABP2-kit was 0,156 ng/ml, 3,125 ng/ml voor LRP en 3,125 ng/ml voor calprotectine. Voor zonuline, I-FABP/FABP2 en LBS/LBP communiceerde de fabrikant van de kit geen reeks normale waarden, en werden waarden gebruikt die door andere auteurs in hun onderzoeken werden gebruikt. Het serum werd uit elk bloedmonster geëxtraheerd door centrifugeren bij 3000 x g. gedurende 30 minuten met behulp van een Thermo Scientific SL16R-centrifuge.
Alle verkregen sera werden bij −200 ◦C ingevroren gehouden totdat de analyses werden uitgevoerd. Voor IFABP/FABP2 en LBP werden de monsters voorafgaand aan het testen tot 1/2 verdund met een monsterverdunningsbuffer. De ontlastingsmonsters werden tot de testdag bij −20 ◦C gehouden. Extractie van het ontlastingsmonster werd uitgevoerd met behulp van een extractiebuffer van 980 Iu samen met 20 mg ontlasting, 30 seconden geroerd en vervolgens 10 minuten gecentrifugeerd bij 2000 x g met behulp van de Thermo Scientific SL16R-centrifuge. De verdunning van de monsters werd vervolgens uitgevoerd met 980 IE monsterbuffer en 20 IE extractiesupernatant.
Voor de vier markers werden microplaten met 96 putjes gecoat met vangantilichamen gebruikt: anti-calprotectine-antilichamen, anti-IFABP/FABP2-antilichamen, anti-LBP-antilichamen of anti-zonuline-antilichamen. De principes van de test waren hetzelfde, gebaseerd op enzymgerelateerde immunologische testtechnologie (ELISA). Standaardmonsters, testmonsters en biotine-geconjugeerde detectie-antilichamen werden later aan de putjes toegevoegd. TMB-substraten (3,30,5,50-tetramethylbenzidine) werden gebruikt om de enzymatische reactieHRP (mierikswortelperoxidase) zichtbaar te maken. HRP katalyseerde TMB en produceerde een blauw product dat na toevoeging van een zuurstopoplossing in geel veranderde.
De dichtheid van de gele vlek was evenredig met de hoeveelheid monster die in de plaat was opgevangen. De kleurintensiteit werd gemeten bij 450 nm in de microplaatlezer en vervolgens werd de doelconcentratie berekend.
2.4. Statistische analyse
Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van IBM SPSS-statistieksoftware versie 23 (Armonk, NY, VS: IBM Corp.). Gegevens worden weergegeven als mediaan en IQR (interkwartiel).bereik P75–P25) voor continue variabelen in het geval van scheve verdelingen of als percentages voor categorische variabelen.
Aangezien de Shapiro-Wilk-test van normaliteit, in het geval van de geanalyseerde continue variabelen, statistische waarden aangaf van de test waarvan de waarschijnlijkheid (p) lager was dan het significantieniveau {{0}}.05, de toestand van aan de normaliteit werd niet voldaan, behalve voor de variabelen LBP en PHQ 9, waarvoor p >=0.05. Wij waren van oordeel dat een anonparametrische benadering van het onderzoek naar de correlatie tussen de variabelen in kwestie, met de presentatie van Spearmans rho-correlatiecoëfficiënt (ρ) en de daarmee geassocieerde waarschijnlijkheid (p) geschikter was. Het significantieniveau werd vastgesteld op 0,05.
Natuurlijke kruidengeneeskunde voor het verlichten van constipatie-Cistanche
Cistanche is een geslacht van parasitaire planten dat behoort tot de familie Orobanchaceae. Deze planten staan bekend om hun geneeskrachtige eigenschappen en worden al eeuwenlang gebruikt in de Traditionele Chinese Geneeskunde (TCM). Cistanche-soorten worden voornamelijk aangetroffen in droge en woestijngebieden van China, Mongolië en andere delen van Centraal-Azië. Cistanche-planten worden gekenmerkt door hun vlezige, geelachtige stengels en worden zeer gewaardeerd vanwege hun potentiële gezondheidsvoordelen. In TCM wordt aangenomen dat Cistanche versterkende eigenschappen heeft en vaak wordt gebruikt om de nieren te voeden, de vitaliteit te verbeteren en de seksuele functie te ondersteunen. Het wordt ook gebruikt om problemen aan te pakken die verband houden met veroudering, vermoeidheid en algeheel welzijn. Hoewel Cistanche een lange geschiedenis van gebruik in de traditionele geneeskunde heeft, is het wetenschappelijk onderzoek naar de werkzaamheid en veiligheid ervan nog gaande en beperkt. Het is echter bekend dat het verschillende bioactieve verbindingen bevat, zoals fenylethanoïdeglycosiden, iridoïden, lignanen en polysachariden, die kunnen bijdragen aan de geneeskrachtige effecten ervan.
van Wecistanchecistanche-poeder, cistanche-tabletten, cistanche-capsules, en andere producten worden ontwikkeld met behulp vanwoestijncistancheals grondstoffen, die allemaal een goed effect hebben op het verlichten van constipatie. Het specifieke mechanisme is als volgt: Er wordt aangenomen dat Cistanche potentiële voordelen heeft voor het verlichten van constipatie op basis van het traditionele gebruik ervan en bepaalde verbindingen die het bevat. Hoewel wetenschappelijk onderzoek specifiek naar het effect van Cistanche op constipatie beperkt is, wordt aangenomen dat het meerdere mechanismen heeft die kunnen bijdragen aan het potentieel ervan om constipatie te verlichten. Laxerend effect:Cistanchewordt in de Traditionele Chinese Geneeskunde al lang gebruikt als middel tegen constipatie. Er wordt aangenomen dat het een mild laxerend effect heeft, wat de stoelgang kan bevorderen en constipatie kan veroorzaken. Dit effect kan worden toegeschreven aan verschillende verbindingen in Cistanche, zoals fenylethanoïdeglycosiden en polysachariden. Bevochtiging van de darmen: Op basis van traditioneel gebruik wordt aangenomen dat Cistanche hydraterende eigenschappen heeft, specifiek gericht op de darmen. Het bevorderen van hydratatie en smering van de darmen kan ertoe bijdragen dat de hulpmiddelen zachter worden en de doorgang gemakkelijker wordt, waardoor constipatie wordt verlicht. Ontstekingsremmend effect: Constipatie kan soms gepaard gaan met ontstekingen in het spijsverteringskanaal. Cistanche bevat bepaalde verbindingen, waaronder fenylethanoïdeglycosiden en lignanen, waarvan wordt aangenomen dat ze ontstekingsremmende eigenschappen hebben. Door ontstekingen in de darmen te verminderen, kan het de regelmaat van de stoelgang helpen verbeteren en constipatie verlichten.
