Lipaseproductie door Yarrowia Lipolytica in fermentatie in vaste toestand met behulp van Amazon-fruitbijproducten en sojameel als substraat Deel 2
Jun 30, 2023
2.5. Visolie Hydrolyse
Lipasen zijn gebruikt bij de hydrolyse van vetzuren om meervoudig onverzadigde vetzuren (PUFA's) te concentreren [44,45]. Het belangrijkste voordeel van de toepassing van lipasen bij de productie van meervoudig onverzadigde vetzuren is de specificiteit van het enzym en de reacties die plaatsvinden bij gematigde temperatuuromstandigheden, wat het behoud van de structuur van PUFA's bevordert [44]. Het gebruik van lipasen heeft de voorkeur boven chemische methoden, omdat ze glyceriden opleveren met een lage opbrengst en zuiverheid [46]. De rol van lipasen bij de selectieve hydrolyse van verzadigde vetzuren (SFA's) en enkelvoudig onverzadigde vetzuren (MUFA's) uit triacylglycerolen (TAG's) is het produceren van glyceriden die rijk zijn aan PUFA's. Het principe van deze methode is de sterische hindering veroorzaakt door de moleculaire configuratie van de koolstof-cis dubbele bindingen in PUFA's die het vouwen van vetzuurketens veroorzaken. De enzymatisch actieve sites hebben dus geen toegang tot de esterbindingen van deze vetzuren met hun glycerolskeletten [47,48]. Talrijke voordelen worden in verband gebracht met de invoeging van vetzuren in de voeding, zoals de ontwikkeling van kinderen, preventie van hart- en vaatziekten, kanker en verschillende psychische stoornissen (depressie, aandachtstekortstoornis, hyperactiviteit), naast het ontstekingsremmende potentieel en mogelijke hypertensie controle [49].
Glycoside van cistanche kan ook de activiteit van SOD in hart- en leverweefsels verhogen en het gehalte aan lipofuscine en MDA in elk weefsel aanzienlijk verminderen, waardoor verschillende reactieve zuurstofradicalen (OH-, H₂O₂, enz.) door OH-radicalen. Cistanche-fenylethanoïdeglycosiden hebben een sterk wegvangend vermogen van vrije radicalen, een hoger reducerend vermogen dan vitamine C, verbeteren de activiteit van SOD in spermasuspensie, verminderen het gehalte aan MDA en hebben een zeker beschermend effect op de functie van het spermamembraan. Cistanche-polysacchariden kunnen de activiteit van SOD en GSH-Px in erytrocyten en longweefsels van experimenteel senescente muizen veroorzaakt door D-galactose verbeteren, evenals het gehalte aan MDA en collageen in long en plasma verminderen en het gehalte aan elastine verhogen, hebben een goed wegvangend effect op DPPH, verlengt de tijd van hypoxie bij senescente muizen, verbetert de activiteit van SOD in serum en vertraagt de fysiologische degeneratie van de longen bij experimenteel senescente muizen Met cellulaire morfologische degeneratie hebben experimenten aangetoond dat Cistanche het goede antioxiderende vermogen heeft en heeft het potentieel om een medicijn te zijn om huidverouderingsziekten te voorkomen en te behandelen. Tegelijkertijd heeft echinacoside in Cistanche een aanzienlijk vermogen om DPPH-vrije radicalen op te vangen en heeft het het vermogen om reactieve zuurstofsoorten op te vangen en door vrije radicalen veroorzaakte collageenafbraak te voorkomen, en heeft het ook een goed herstellend effect op schade door anionen door vrije radicalen van thymine.
【Voor meer informatie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
De productie van enzymextracten voor toepassing in processen zoals hydrolyse kan een dure aangelegenheid zijn. Onderzoek naar grondstoffen die de productiekosten verlagen, kan dus een interessant alternatief zijn. Het gebruik van een vaste biokatalysator is wenselijk omdat deze vaste biokatalysator hergebruikt kan worden in enzymatische reacties, naast een uitstekende opslagstabiliteit bij kamertemperatuur, zonder koelingskosten, en gemak van transport [41]. Er zijn geen rapporten over het gebruik van een vaste biokatalysator van Yarrowia lipolytica om PUFAS te produceren door de enzymatische hydrolyse van visolie. Zo werd de toepassing van het ruwe enzymatische extract en de vaste biokatalysator geproduceerd met behulp van andiroba-oliecake en sojabonenmeel (50:50) bestudeerd om de mogelijke toepassing van enzymen bij de hydrolyse van visolie te evalueren om verder meervoudig onverzadigde vetzuren te produceren in een geschikt proces. (Afbeelding 6). Het is mogelijk om een hoge mate van hydrolyse (DH) in kortere reactietijden waar te nemen met behulp van een vaste biokatalysator (63, 70,8, 72,5 en 74,7 procent) dan het enzymatische extract (47,5, 61,5, 66,5 en 74,8 procent) na 24, respectievelijk 48, 72 uur en 144 uur.
Het enzymatische hydrolyseproces wordt constant toegepast om geconcentreerde meervoudig onverzadigde vetzuren te verkrijgen. Gao et al. [50] gebruikte lipase bij de hydrolyse van kabeljauwolie en de inhoud van EPA en DHA werd respectievelijk 3,{2}}voudig en 1,{4}}voudig verbeterd. Aarthi et al. [20] gebruikte geconcentreerde lipase (1000 U/mL) bij de hydrolyse van visolie en vond ook een hydrolysepercentage van meer dan 60 procent na 72 uur. In dit werk werden betere hydrolysegraden bereikt met behulp van een ruw enzymatisch extract van lipase (dwz zonder zuivering) bij het vergelijken van dezelfde hydrolysetijd. Andere auteurs hebben de hydrolyse van Musteleus mustelusleverolie en zeehondenblubberolie bestudeerd en rapporteerden 75 procent en 70 procent hydrolyse na respectievelijk 24 en 9 uur reactie [25,26].
Martins et al. [51] gebruikte een commerciële lipase van Burkholderia cepacia (Amano) voor de hydrolyse van visolie en verkreeg na 48 uur reactie 55,6 procent DHA in vergelijking met het maximale berekende gehalte. In ons werk, in een voorbereidende studie, verkregen we 70,8 procent hydrolyse na 48 uur reactie met behulp van de vaste biokatalysator.
Tot nu toe hebben dergelijke bevindingen de levensvatbaarheid gesuggereerd van het gebruik van bijproducten om lipase te produceren in vaste toestand fermentatie als een manier om milieuschade te verminderen, bijproducten te evalueren en kosteneffectiviteit. Bovendien tonen de resultaten de mogelijke toepassing aan van het lipase-enzym bij de hydrolyse van visolie om meervoudig onverzadigde vetzuren te produceren in een geschikt proces.
Ondanks dat er een overvloed is aan goedkope agro-industriële bijproducten, vormen de bepaling en standaardisatie van de samenstelling, naast de kostenraming voor het verkrijgen van het enzymatische extract en de vaste biokatalysator uit goedkope agro-industriële bijproducten, nog steeds een uitdaging, maar extreem afhankelijk van onder andere het type bijproduct, seizoensinvloeden en gegenereerde hoeveelheid, evenals het gebruikte proces en de geografische locatie. Zo moeten onder andere de complexiteit van de keten en de bijbehorende logistieke kosten, het gebruik van complexe en kostbare processen, het hoge energieverbruik en regelgevingskwesties worden overwonnen. In die zin moet de verwerking van bijproducten verschillende barrières overwinnen alvorens economisch levensvatbaar te worden, waaronder de noodzaak om grote hoeveelheden grondstoffen te verwerken, de capaciteit om heterogene grondstoffen te verwerken, geïntegreerde logistiek met verschillende verwerkende industrieën en de mogelijkheid van de integratie proces in de verwerkingseenheid om onder meer hoogwaardige ingrediënten te genereren [52-55].
3. Materialen en methoden
3.1. Materiaal
Sojameel werd gekocht bij Caramuru Alimentos (Goiás, Brazilië). Andiroba-oliecake geproduceerd uit oliewinning werd geleverd door Beraca Ingredientes Naturais (Pará, Brazilië). Beide substraten waren gestandaardiseerd over granulometrie (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).
3.2. Omstandigheden voor het kweken van micro-organismen en inoculum
Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682, geïsoleerd uit een estuarium in Guanabara Bay, Rio de Janeiro, Brazilië [56] werd gekweekt bij 28 ◦C in YPD-agarmedium (w/v: gistextract 1 procent; pepton, 2 procent; glucose, 2 procent ; agar, 3 procent). De cellen werden gekweekt in een vloeibaar medium met gistextract 1 procent (w/v), pepton, 2 procent (w/v) en glucose 2 procent (w/v) gedurende 72 uur, 160 rpm bij 28 °C.
3.3. Karakterisering van agro-industriële bijproducten
De fysisch-chemische samenstelling van het sojameel en de andiroba-oliecake werd bepaald in termen van vocht, eiwit, koolhydraten, as, etherextract, onoplosbare vezels en het gehalte aan oplosbare vezels, volgens de methodologie gerapporteerd door de Association of Official Analytical Chemists (AOAC). ) [57]. Aangezien lipaseproductie door Y. lipolytica wordt beïnvloed door beluchting [58], werd bovendien de bedporositeit in SSF geëvalueerd volgens vergelijking (1), waarbij ε de porositeit is (uitgedrukt in m3 lucht·m−3 bed); ρdrysolid is de schijnbare dichtheid van het droge monster (kg·m−3 ); en ρwetsolid is de dichtheid van het monster na toevoeging van water (kg·m−3 ) [58].
3.4. Lipaseproductie door SSF
De vaste matrix met sojabonenmeel en andiroba-oliekoek werd bereid vóór de inoculatie in de schotelvormige reactor met verschillende verhoudingen van het substraat en geautoclaveerd bij 121 ◦C gedurende 20 min. De vaste procesparameters die werden gebruikt voor lipaseproductie waren een vochtgehalte van 55 procent en een inoculumconcentratie van 0,71 mg droge biomassa/g substraat [24]. De reactoren werden geïncubeerd in een biochemisch zuurstofverbruik (BZV) kamer bij 28 ◦C en tijdens de fermentatie werden opofferingsmonsters genomen (dwz één schotelvormige reactor voor de bemonsteringstijd) voor analyse.
SSF werd geëvalueerd met verschillende combinaties van andiroba-oliekoek en sojameel ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 en 100:0) op verschillende tijdstippen (0, 12, 24, 32 en 48 uur). Daarna werd de suppletie van de vaste matrix met andiroba-oliecake en sojabonenmeel (50:50) geëvalueerd door 1,5 (% w/v) sojaolie toe te voegen in de loop van de tijd (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, en 72 uur) om een verhoging van de lipolytische activiteit te verkrijgen. Bovendien werd de aanwezigheid van Tween 80 (0,001 procent w/v) in het fermentatiemedium dat 1,5 (procent w/v) sojaboonolie bevatte getest. De fermentatie werd gevolgd door bepaling van de lipase- en protease-activiteit evenals de vochtigheid en pH (beschreven in paragraaf "3.6. Analytische bepalingen").
3.5. Enzymextractie en productie van vaste biokatalysator
De enzymextractie werd uitgevoerd door 50 ml 50 mM kaliumfosfaatbuffer pH 7,0 toe te voegen aan de bioreactoren, gevolgd door incubatie bij 37 °C, 200 rpm, gedurende 20 minuten. Vervolgens werd het in de buffer gesuspendeerde gefermenteerde materiaal geperst met behulp van een stamper met blik en 5 minuten gecentrifugeerd bij 3000 rpm. De vaste biokatalysator werd verkregen uit het vriesdrogen van de gehele massa verkregen aan het einde van het fermentatieproces gedurende 72 uur en gedurende 7 maanden bij kamertemperatuur bewaard om de enzymatische stabiliteit te verifiëren.
3.6. Analytische bepalingen
3.6.1. Lipase-activiteit
Lipase-activiteit werd uitgevoerd met behulp van de methode voorgesteld door Freire et al. [59]. Het reactiemedium werd geëmulgeerd in een Ultra Turrax (IKA) homogenisator met 5 procent (w/v) olijfolie en 5 procent (w/v) Arabische gom in 100 mM fosfaatbuffer (pH 7.0). Enzymatisch extract (1 ml) of 0,5 g van de vaste biokatalysator werd toegevoegd aan 19 ml van het reactiemengsel en gedurende 20 min, 200 rpm bij 37°C geïncubeerd. De reactie werd onderbroken door toevoeging van 20 ml aceton-ethanoloplossing en de vrije vetzuren werden getitreerd in een automatische titrator (Metrohm 916-Ti-Touch) met behulp van 0,04 mol/L NaOH-oplossing. Eén eenheid lipase-activiteit (U) werd gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die 1 µmol vetzuur per minuut produceert, onder de testomstandigheden.
3.6.2. Protease-activiteit
Protease-activiteit werd gekwantificeerd volgens de methodologie van Charney en Tomarelli [60]. Enzymatisch extract (0.5 ml) werd toegevoegd aan 0.5 ml 0.5 procent (w/v) azocaseïne-oplossing bereid met 50 mM acetaatbuffer (pH) en geïncubeerd bij 32 ◦C gedurende 40 min. De reactie werd gestopt door toevoeging van 0,5 ml trichloorazijnzuuroplossing 15 procent (w/v) en de monsters werden gedurende 15 minuten bij 3000 rpm gecentrifugeerd. Het supernatant (100 µl) werd toegevoegd in een 96-microtiterplaat met 100 µl 5 M kaliumhydroxide en de absorptie bij 428 nm werd gemeten in een microtiterplaatlezer (SpectraMax, Molecular Devices). Eén activiteitseenheid werd gedefinieerd als de hoeveelheid enzym die in staat is een eenheidstoename in absorptie per minuut te bevorderen.
3.6.3. Vochtgehalte en pH
Het vochtgehalte werd gecontroleerd met behulp van een vochtanalysatorbalans (AND MX-50). De pH werd gemeten met een pH-meter (TECNAL, model TR-107 PT100, Brazilië).
3.7. SDS-PAGINA
De elektroforese werd uitgevoerd volgens de methode gerapporteerd door Laemmli [61] in een polyacrylamidegel (5 procent stapelen, 15 procent scheiden, 0.75 mm dikte). De monsters werden gemengd in een verhouding (1:4) van een combinatie van andiroba-oliecake en sojabonen (50:50) met monsterbuffer die -mercapto-ethanol bevatte, gedurende 5 minuten verwarmd tot 95 °C en aangebracht op de gel. Elektroforese werd uitgevoerd bij 150 V gedurende 30 minuten (Bio-Rad, Hercules, CA, VS) en de gel werd onthuld met behulp van Coomassie Blue R-250. Een standaard eiwitmarker (Bio-rad, Hercules, CA, VS) met een molecuulgewicht variërend van 10 tot 250 kDa werd gebruikt.
3.8. Visoliehydrolyse: een mogelijke toepassing
De mate van hydrolyse (DH) van visolie werd gemeten door 1 g visolie af te wegen en 25 ml fosfaatbuffer pH 7 toe te voegen.0 om de mogelijke toepassing van het enzym bij de hydrolyse van visolie te verifiëren. Vervolgens werd 5 ml van het enzymatische extract (37 U) in amberkleurige kolven gedurende 168 uur geroerd. De reactie werd gestopt met 20 ml aceton en de vrije vetzuren werden getitreerd in een automatische titrator met 0,1 M methanolische KOH. De reactieblanco werd verkregen met de toevoeging van het enzym pas aan het einde van de reactie.
De hydrolysegraad (DH) werd berekend volgens vergelijking (2):
waarbij As de zuurgraad van het monster is; Aa is de zuurgraad van autohydrolyse; Si is de verzepingsindex.
3.9. Statistische analyse
Alle experimenten werden drie keer herhaald. Bij elke replicatie werden de analyses in drievoud uitgevoerd. De resultaten kwamen overeen met het gemiddelde ± standaarddeviatie. Gegevens werden geanalyseerd met de eenwegs variantieanalyse (ANOVA), terwijl Tukey's test (p < 0.05) werd gebruikt om verschillen tussen gemiddelden te testen met behulp van de Sisvar 5.6.
4. Conclusies
Het fermentatiemedium dat werd verkregen na het mengen van andiroba-oliecake en sojabonenmeel was zeer effectief bij de productie van lipase. De gekozen fermentatiematrix was het mengsel van andiroba-oliekoek en sojabonenmeel in een verhouding van 50:50, waarbij 63,70 U·g −1 lipolytische activiteit werd geproduceerd. De maximale lipolytische activiteit werd verkregen (82,52 U·g −1) na gebruik van de andiroba-oliecake en sojabonenmeelverhouding van 50:50 na suppletie met Tween 80 (0,001 procent) en sojaolie (1,5 procent). Bij de elektroforetische analyse werden eiwitbanden gedetecteerd die al in de literatuur vermeld staan als YL Lip2 (37 en 40 kDa). De eerdere toepassing van lipase bij oliehydrolyse leverde na 24 uur tot 63 procent van de hydrolyse op. Deze studie toonde aan dat het mogelijk is om lipase te produceren met behulp van bijproducten uit het Amazonegebied in combinatie met sojameel en dit toe te passen op visoliehydrolyse om meervoudig onverzadigde vetzuren te produceren in een geschikt proces.
Bijdragen van auteurs:Conceptualisatie, BDR, ACL en MAZC; Methodologie, ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL en MAZC; Formele analyse, ASSC, JCSS en FVdN; Onderzoek, ASSC, JCSS en FVdN; Middelen, ASSC, JCSS en FVdN; Datacuratie, ASSC, JCSS en FVdN; Schrijven—voorbereiding origineel concept, ASSC, JCSS, FVdN en CECdS; Schrijven - beoordelen en bewerken, BDR, CECdS, ACL en MAZC; Toezicht, BDR, CECdSACL en MAZC; Projectadministratie, BDR, ACL en MAZC; Financiering acquisitie, BDR, ACL en MAZC Alle auteurs hebben de gepubliceerde versie van het manuscript gelezen en gaan ermee akkoord.
Dankbetuigingen: De auteurs erkennen de Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES—Finance Code 001); de Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); en de Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ).
Referenties
1. Serra, JL; Rodrigues, AMDC; Freitas, RA; Meirelles, AJdA; Darnet, SH; Silva, LHMd Alternatieve bronnen van oliën en vetten van planten uit het Amazonegebied: vetzuren, methyltools, totale carotenoïden en chemische samenstelling. Voedsel Res. Int. 2019, 116, 12–19. [Kruisreferentie] [PubMed]
2. Penido, C.; Conte, FP; Chagas, MS; Rodrigues, CA; Pereira, JF; Henriques, MG Ontstekingsremmende effecten van natuurlijke tetranortriterpenoïden geïsoleerd uit Carapa guianensis Aublet op door zymosan geïnduceerde artritis bij muizen. Ontsteking. Res. 2006, 55, 457-464. [Kruisreferentie] [PubMed]
3. Penido, C.; Costa, KA; Pennaforte, RJ; Costa, MF; Pereira, JF; Siani, AC; Henriques, MG Anti-allergische effecten van natuurlijke tetranortriterpenoïden geïsoleerd uit Carapa guianensis Aublet op allergeen-geïnduceerde vasculaire permeabiliteit en hyperalgesie. Ontsteking. Res. 2005, 54, 295-303. [KruisRef]
4. Santos, KIP; Benjamin, JKF; Costa, KAD; Reis, AS; Souza Pinheiro, WB; Santos, AS Metabolomics-technieken toegepast bij het onderzoek naar fenolzuren uit het agro-industriële bijproduct van Carapa guianensis Aubl. Arabisch. J Chem. 2021, 14, 103421. [KruisRef]
5. Lourenço, JNP; Ferreira, LMM; Martins, GC; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brazilië, 2017; p. 36.
6. Biologisch, S. Óleo de Andiroba.
7. Conab. Boletim da Sociobiodiversidade; Conab: Brasília, Brazilië, 2017; Deel 1, p. 67.
8. Souza, CR; Lima, RMB; Azevedo, CP; Rossi, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: Brasilia, Brazilië, 2006; 21 uur
9. Oliveira, F.; Souza, CE; Peclat, VROL; Salgado, JM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ; Venâncio, A.; Belo, I. Optimalisatie van lipaseproductie door Aspergillus ibericus uit oliekoeken en de toepassing ervan in veresteringsreacties. Voer Bioprod. Proces. 2017, 102, 268-277. [KruisRef]
10. Pandey, A. Fermentatie in vaste toestand. Biochem. Eng. J. 2003, 13, 81-84. [KruisRef]
11. Martinez, O.; Sanchez, A.; Lettertype, X.; Barrena, R. Verbetering van de bioproductie van aromastoffen met toegevoegde waarde via fermentatie in vaste toestand van suikerrietbagasse en suikerbietmelasse: operationele strategieën en opschaling van het proces. Bioresour. Technologie 2018, 263, 136-144. [Kruisreferentie] [PubMed]
12. Ano, T.; Jin, GY; Mizumoto, S.; Rahman, MS; Okuno, K.; Shoda, M. Fermentatie in vaste toestand van lipopeptide-antibioticum iturine A met behulp van een nieuw reactorsysteem voor fermentatie in vaste toestand. J. Omgeving. Wetenschap. 2009, 21 (suppl. S1), S162-S165. [KruisRef]
13. Vandenberghe, LPS; Karp, SG; Oliveira, PZ; Carvalho, JC; Rodrigues, C.; Soccol, CR Hoofdstuk 18 - Fermentatie in vaste toestand voor de productie van organische zuren. In huidige ontwikkelingen in biotechnologie en bio-engineering; Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, red.; Elsevier: Amsterdam, Nederland, 2018; blz. 415-434.
14. Sala, A.; Vittone, S.; Barrena, R.; Sanchez, A.; Artola, A. Scannen van agro-industrieel afval als substraten voor de productie van schimmelbiopesticide: gebruik van Beauveria bassiana en Trichoderma harzianum bij fermentatie in vaste toestand. J. Omgeving. Beheer 2021, 295, 113113. [CrossRef] [PubMed]
15. Banaat, IM; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. Biosurfactants: de groene generatie van speciale chemicaliën en potentiële productie met behulp van Solid-State-fermentatietechnologie (SSF). Bioresour. Technologie 2021, 320, 124222. [CrossRef] [PubMed]
16. Pereira, AS; Sant'Ana, GCF; Amaral, PFF Mango agro-industrieel afval voor lipaseproductie uit Yarrowia lipolytica en het potentieel van de gefermenteerde vaste stof als biokatalysator. Voer Bioprod. Proces. 2019, 115, 68-77. [KruisRef]
17. Brígida, AIS; Amaral, PFF; Coelho, MAZ; Gonçalves, LRB Lipase van Yarrowia lipolytica: productie, karakterisering en toepassing als industriële biokatalysator. J Mol. Catal. B Enzym. 2014, 101, 148-158. [KruisRef]
18. Treichel, H.; Oliveira, D.; Mazutti, MA; Di Luccio, M.; Oliveira, JV Een recensie over de productie van microbiële lipasen. Voedsel Bioprocestechnologie. 2010, 3, 182–196. [KruisRef]
19. Mehta, A.; Guleria, S.; Sharma, R.; Gupta, R. 6 - De lipasen en hun toepassingen met de nadruk op de voedingsindustrie. In microbiële biotechnologie in voeding en gezondheid; Ray, RC, red.; Academic Press: Cambridge, MA, VS, 2021; blz. 143-164.
20. Aarthy, M.; Saravanan, P.; Ayyadurai, N.; Gowthaman, MK; Kamini, NR Een proces in twee stappen voor de productie van omega 3-meervoudig onverzadigde vetzuurconcentraten uit sardineolie met behulp van Cryptococcus sp. MTCC 5455 lipase. J Mol. Catal. B Enzym. 2016, 125, 25-33. [KruisRef]
21. Nascimento, FV; Castro, AM; Secchi, AR; Coelho, MAZ Inzichten in mediasuppletie bij fermentatie in vaste toestand van sojabonenschillen door Yarrowia lipolytica: impact op de productie van lipase in de bak en geïsoleerde bioreactoren met gepakt bed. Biochem. Eng. J. 2021, 166, 107866. [KruisRef]
22. Verkoop, JCS; Castro, AM; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Suppletie van watermeloenschillen als een versterker van lipase- en esteraseproductie door Yarrowia lipolytica bij fermentatie in vaste toestand en hun potentiële gebruik als biokatalysatoren in depolymerisatiereacties van poly(ethyleentereftalaat) (PET). Biocatal. Biotransformatie. 2020, 38, 457-468. [KruisRef]
23. Aguieiras, ECG; de Barros, DSN; Fernandez-Lafuente, R.; Freire, DMG Productie van lipasen in katoenzaadmeel en toepassing van de gefermenteerde vaste stof als biokatalysator in veresterings- en omesteringsreacties. Vernieuwen. Energie 2019, 130, 574-581. [KruisRef]
24. Souza, CEC; Farias, MA; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Waarde toevoegen aan agro-industriële nevenproducten van canola- en sojaolie-extractie door lipaseproductie met behulp van Yarrowia lipolytica bij fermentatie in vaste toestand. Afval Biomassa Valorisatie 2017, 8, 1163-1176. [KruisRef]
25. Hij, H.; Li, Y.; Zhang, L.; Ding, Z.; Shi, G. Begrip en toepassing van Bacillus-stikstofregulatie: een perspectief van synthetische biologie. J. Adv. Res. 2022; in de pers. [KruisRef]
26. Almeida, AF; Taulk-Torniselo, SM; Carmona, EC Invloed van koolstof- en stikstofbronnen op lipaseproductie door een nieuw geïsoleerde Candida Viswanathan-stam. Ann. Microbiol. 2013, 63, 1225-1234. [KruisRef]
27. Salihu, A.; Alam, MZ; Abdul Karim, MI; Salleh, HM Lipase-productie: een inzicht in het gebruik van hernieuwbare landbouwresiduen. Hulpbron. Behoud. Recyclen. 2012, 58, 36-44. [KruisRef]
28. Liu, X.; Yu, X.; Hij, A.; Xia, J.; Hij, J.; Deng, Y.; Xu, N.; Qiu, Z.; Wang, X.; Zhao, P. Fermentatie in één pot voor de productie van erythritol uit distilleerdersgranen door de gezamenlijke teelt van Yarrowia lipolytica en Trichoderma reesei. Bioresour. Technologie 2022, 351, 127053. [KruisRef] [PubMed]
29. Wang, W.; Wei, H.; Alahuhta, M.; Chen, X.; Hyman, D.; Johnson, Denemarken; Zhang, M.; Himmel, ME Heterologe expressie van xylanase-enzymen in lipogene gist Yarrowia lipolytica. PLoS ONE 2014, 9, e111443. [Kruisreferentie] [PubMed]
30. Nascimento, FVd; Lemes, AC; Castro, AMD; Secchi, AR; Zarur Coelho, MA Een temporeel evolutieperspectief van lipaseproductie door Yarrowia lipolytica bij fermentatie in vaste toestand. Processen 2022, 10, 381. [CrossRef]
31. Mandari, V.; Nema, A.; Devarai, SK Sequentiële optimalisatie en grootschalige productie van lipase met behulp van een tri-substraatmengsel van Aspergillus niger MTCC 872 door fermentatie in vaste toestand. Proces Biochem. 2020, 89, 46-54. [KruisRef]
32. Malá, JG; Edwin Oliver, NG; Kamini, NR; Puvanakrishnan, R. Fermentatie in vaste toestand met gemengd substraat voor de productie en extractie van lipase uit Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. Microbiol. 2007, 53, 247-253. [KruisRef]
33. Barth, G.; Gaillardin, C. Yarrowia lipolytica. In niet-conventionele gisten in de biotechnologie; Wolf, K., red.; Springer: New York, NY, VS, 1996; blz. 313-388.
34. Moftah, OA; Grbavˇci´c, S.; Zuža, M.; Lukovic, N.; Bezbradica, D.; Kneževi´c-Jugovi´c, Z. Waarde toevoegen aan de oliekoek als afval van de olieverwerkende industrie: productie van lipase en protease door Candida-gebruik bij fermentatie in vaste toestand. Appl. Biochem. Biotechnologie. 2012, 166, 348-364. [KruisRef]
35. Contesini, FJ; da Silva, VC; Maciel, RF; de Lima, RJ; Barros, FF; de Oliveira Carvalho, P. Responsoppervlakanalyse voor de productie van een enantioselectieve lipase van Aspergillus niger door fermentatie in vaste toestand. J.Microbiol. 2009, 47, 563-571. [KruisRef]
36. Rigo, E.; Ninow, JL; Di Luccio, M.; Oliveira, JV; Polloni, AE; Remonatto, D.; Scheidsrechter, F.; Vardanega, R.; Oliveira, D.; Treichel, H. Lipaseproductie door vaste fermentatie van sojameel met verschillende supplementen. LWT Voedselwetenschap. Technologie 2010, 43, 1132-1137. [KruisRef]
37. Zon, SY; Xu, Y. Vastestoffermentatie voor de productie van 'hele cel synthetische lipase' van Rhizopus chinensis en identificatie van het functionele enzym. Proces Biochem. 2008, 43, 219-224. [KruisRef]
38. Farias, MA; Valoni, EA; Castro, AM; Coelho, MAZ Lipaseproductie door Yarrowia Lipolytica in fermentatie in vaste toestand met behulp van verschillende agro-industriële residuen. Chem. Eng. Trans. 2014, 38, 301-306.
39. Sidhu, P.; Sharma, R.; Soni, SK; Gupta, JK Productie van extracellulaire alkalische lipase door een nieuwe thermofiele Bacillus sp. Folia microbiol. 1998, 43, 51-54. [KruisRef]
40. Corzo, G.; Revah, S. Productie en kenmerken van de lipase van Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. Technologie 1999, 70, 173-180. [KruisRef]
41. Souza, CEC; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Karakterisering en toepassing van Yarrowia lipolytica-lipase verkregen door SolidState-fermentatie bij de synthese van verschillende esters die in de voedingsmiddelenindustrie worden gebruikt. Appl. Biochem. Biotechnologie. 2019, 189, 933-959. [KruisRef]
42. Fickers, P.; Fudalej, F.; Dall, MTL; Casaregola, S.; Gaillardin, C.; Thonart, P.; Nicaud, JM Identificatie en karakterisering van LIP7- en LIP8-genen die coderen voor twee extracellulaire triacylglycerollipasen in de gist Yarrowia lipolytica. Schimmel genet. Biol. 2005, 42, 264-274. [KruisRef]
43. Cheng, Y.-H.; Hsiao, FS-H.; Wen, C.-M.; Wu, C.-Y.; Dybus, A.; Yu, Y.-H. Gemengde fermentatie van sojameel door protease en probiotica en de effecten ervan op de groeiprestaties en immuunrespons bij vleeskuikens. J. Appl. Anim. Res. 2019, 47, 339-348. [KruisRef]
44. Chakraborty, K.; Paul Raj, R. Selectieve verrijking van n-3 meervoudig onverzadigde vetzuren met C18-C20 acylketenlengte van sardineolie met behulp van Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipase. Voedsel Chem. 2009, 114, 142-150. [KruisRef]
45. Zarai, Z.; Eddehech, A.; Rigano, F.; Oteri, M.; Micalizzi, G.; Dugo, P.; Mondello, L.; Cacciola, F. Karakterisering van monoacylglycerolen en diacylglycerolen rijk aan meervoudig onverzadigde vetzuren geproduceerd door hydrolyse van Musteleus mustelus leverolie gekatalyseerd door geïmmobiliseerde bacteriële lipase. J. Chromatogr. 2020, 1613, 460692. [KruisRef]
46. Yang, J.; Lied, X.; Wang, L.; Cui, Q. Uitgebreide analyse van metabole veranderingen in Schizochytrium sp. stammen met een verschillend DHA-gehalte. J. Chromatogr. B 2020, 1160, 122193. [KruisRef]
47. Yang, Z.; Jin, W.; Cheng, X.; Dong, Z.; Chang, M.; Wang, X. Enzymatische verrijking van n-3 meervoudig onverzadigde vetzuurglyceriden door selectieve hydrolyse. Voedsel Chem. 2021, 346, 128743. [KruisRef]
48. Okada, T.; Morrissey, MT Productie van n-3 meervoudig onverzadigd vetzuurconcentraat uit sardineolie door geïmmobiliseerde Candida rugosa lipase. J. Voedselwetenschap. 2008, 73, C146-C150. [KruisRef]
49. Riediger, ND; Othman, RA; Suh, M.; Moghadasian, MH Een systemisch overzicht van de rol van n-3 vetzuren bij gezondheid en ziekte. J. Am. Eetpatroon. assoc. 2009, 109, 668-679. [Kruisreferentie] [PubMed]
50. Gao, K.; Chu, W.; Zon, J.; Mao, X. Identificatie van een alkalische lipase die in staat is tot een betere verrijking van EPA dan DHA vanwege de selectiviteit en regioselectiviteit van vetzuren. Voedsel Chem. 2020, 330, 127225. [KruisRef]
51. Martins, Pennsylvania; Trobo-Maseda, L.; Lima, FA; de Morais Junior, WG; De Marco, JL; Salum, TFC; Guisán, JM Omega-3 productie door hydrolyse van visolie met behulp van lipase van Burkholderia gladioli BRM58833 geïmmobiliseerd en gestabiliseerd door post-immobilisatietechnieken. Biochem. Biophys. Rep. 2022, 29, 101193. [CrossRef] [PubMed]
52. Lemes, AC; Egea, MB; Oliveira Filho, JGd; Gauterio, GV; Ribeiro, BD; Coelho, MAZ Biologische benaderingen voor extractie van bioactieve verbindingen uit agro-industriële bijproducten: een overzicht. Voorkant. Bioeng. Biotechnologie. 2022, 9, 1–18. [Kruisreferentie] [PubMed]
53. Lemes, AC; Sala, L.; Ertsen, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Een overzicht van de nieuwste ontwikkelingen in gecodeerde bioactieve peptiden uit eiwitrijk afval. Int. J Mol. Wetenschap. 2016, 17, 950. [KruisRef]
54. Lemes, AC; Coelho, MAZ; Gauterio, GV; Paula, LC; Filho, JGdO; Egea, MB Hoofdstuk 11—Industriële afvalstoffen en bijproducten: een bron van functionele voedingsmiddelen, nutraceuticals en biopolymeren. In biopolymeren in nutraceuticals en functionele voedingsmiddelen; The Royal Society of Chemistry: Londen, VK, 2023; blz. 329-360.
55. Pintado, ME; Teixeira, JA Valorisatie van subproducten van de industriële voeding: Verkrijg de ingrediënten van waardevolle hectares. Bol. Biotechnol. 2015, 1, 10–12.
56. Hagler, AN; Mendonça-Hagler, LC Gisten uit mariene en estuariene wateren met verschillende niveaus van vervuiling in de staat Rio de Janeiro, Brazilië. Appl. Omgeving. Microbiol. 1981, 41, 173-178. [KruisRef]
57. AOAC. Officiële analysemethoden van AOAC International; Vereniging van officiële analytische chemici: Washington, DC, VS, 1995.
58. Castro, AMD; Castilho, LdR; Freire, DMG Karakterisering van babassu-, canola-, ricinuszaad- en zonnebloemresiducakes voor gebruik als grondstof voor fermentatieprocessen. Ind. Gewassen Prod. 2016, 83, 140-148. [KruisRef]
59. Freire, DM; Teles, EM; Bon, EP; Sant 'Anna, GL, Jr. Lipaseproductie door Penicillium beperkt in een fermentor op tafel: effect van koolstof- en stikstofvoeding, agitatie en beluchting. Appl. Biochem. Biotechnologie. 1997, 63-65, 409-421. [KruisRef]
60. Charney, J.; Tomarelli, RM Een colorimetrische methode voor de bepaling van de proteolytische activiteit van duodenumsap. J. Biol. Chem. 1947, 171, 501-505. [Kruisreferentie] [PubMed]
61. Laemmli, VK Splitsing van structurele eiwitten tijdens de montage van het hoofd van bacteriofaag T4. Natuur 1970, 227, 680-685. [Kruisreferentie] [PubMed]
Disclaimer/Opmerking van de uitgever:De verklaringen, meningen en gegevens in alle publicaties zijn uitsluitend die van de individuele auteur(s) en bijdrager(s) en niet van MDPI en/of de redacteur(en). MDPI en/of de redacteur(en) wijzen alle verantwoordelijkheid af voor enig letsel aan mensen of eigendommen als gevolg van ideeën, methoden, instructies of producten waarnaar in de inhoud wordt verwezen.
【Voor meer informatie:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
