Deel 1: Interacties van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside in de aan- en afwezigheid van ijzer tijdens thermische verwerking en de invloed op antioxidantactiviteit

Mar 15, 2022


Neem voor meer informatie contact op mettina.xiang@wecistanche.com


Abstract: Bioactieve stoffen in groenten en fruit beïnvloeden elkaarsAntioxidantactiviteit. Zuivere normen en mengsels van de gebruikelijke plantaardige stoffen, namelijkAscorbinezuur, 5-caffeoylquinic acid en quercetine-3-rutinoside (som 0,3 mM), in aanwezigheid en afwezigheid van ijzer, werden geanalyseerd voor- en na thermische verwerking in een waterige oplossing. Antioxidant activiteit werd gemeten door het totale fenolgehalte (TPC), 1,1-difenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) en 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonzuur) (TEAC) radical-scavenging assays. Ionisch ijzer (Fe2+) en ijzer (Fe)werden fotometrisch gemeten. Voor de kwalificatie en kwantificering van reactieproducten werd HPLC gebruikt. De resultaten toonden aan dat thermische verwerking niet noodzakelijkerwijs leidt tot een verminderde antioxidantactiviteit, zelfs als de samengestelde concentraties daalden, omdat afbraakproducten zelf antioxiderende activiteit hebben. In alle gebruikte antioxidanttests had de 2:1-verhouding van ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur in aanwezigheid van ijzer sterke synergetische effecten, terwijl de 1:2-verhouding sterke antagonistische effecten had. Het pro-oxidant ijzer had een positieve invloed op de antioxiderende activiteit in combinatie met de gebruikte antioxidanten, terwijl ijzer zelf interageerde met gemeenschappelijke in vitro testen voor totale antioxidantactiviteit. Deze resultaten geven aan dat de antioxiderende activiteit van verbindingen wordt beïnvloed door factoren zoals interactie met andere moleculen, temperatuur en de aanwezige mineralen.

Zoekwoorden: ABTS; antagonisme;ascorbinezuur;bioactieve stoffen;5-caffeoylquininezuur; chelaatvormende complexen; ijzer; ijzer; HPLC; quercetine-3-rutinoside synergisme; TPC

Klik hier voor meer informatie

flavonoids antioxidant

1. Inleiding

In het menselijke dieet worden de hele dag door veel verschillende plantaardige producten geconsumeerd, zelfs binnen dezelfde maaltijd. Groenten en fruit worden geassocieerd met verschillende gezondheidsvoordelen, vanwege hun verscheidenheid aan bioactieve stoffen, d.w.z. vitamines, mineralen en secundaire plantaardige metabolieten |1]. In vergelijking met vitaminen en mineralen worden secundaire plantaardige metabolieten, zoals fenolen, door de huidige kennis niet als essentieel voor de menselijke gezondheid beschouwd[2]. Veel secundaire plantenmetabolieten zijn echter krachtige antioxidanten, die helpen om biologische systemen te beschermen tegen reactieve zuurstofsoorten (ROS) en reactieve stikstofsoorten (RNS)[3]. Deze bioactieve stoffen kunnen vóór consumptie met elkaar interageren, wat resulteert in tal van daaropvolgende reactieproducten of -complexen. Bijgevolg kan hun bijdrage aan de gezondheid van de consument en hun antioxiderende activiteit (AOA) worden gewijzigd 4| of verloren vóór voedselinname. Verschillende moleculaire structuren van verbindingen en hun diverse combinaties kunnen leiden tot extra, synergetische of zelfs antagonistische effecten door interacties. De effecten van interacties tussen plantencomponenten op hun radicalenopruimend vermogen zijn nog niet volledig begrepen, vooral vanwege de vele verschillende oxidatiestadia en hun vermogen om complexen te bouwen. Een belangrijke bioactieve stof, gevonden in tal van plantensoorten, is 5-caffeoylquinic acid (chlorogeenzuur), een hydroxycinnamic acid ester van cafeïnezuur en quinic acid. Het kan ijzercomplexen vormen, die over het algemeen worden geassocieerd met verminderde absorptie van niet-heemijzer bij mensen[5,6]. IJzer, als bestanddeel van hemoglobine, is een essentieel mineraal voor het menselijk lichaam, terwijl een teveel aan ijzer oxidatieve stress in cellen kan veroorzaken [7]. Interacties met andere voedingsstoffen kunnen de opname van ijzer verhogen of verlagen, bijvoorbeeld door complexen te vormen. Bovendien heeft ijzer het vermogen om elektronen gemakkelijk te accepteren en te doneren.

Een andere interessante bioactieve stof in planten isquercetine-3-rutinoside(rutine), eenflavonoïde glycoside, die voornamelijk wordt gesynthetiseerd door planten om zichzelf te beschermen tegen UV-straling [8,9]. Het heeft een lage waterige oplosbaarheid [10] en kan niet direct in de menselijke bloedcirculatie komen, dus de bioactieve activiteit begint pas zes tot negen uur na consumptie wanneer het door het darmmicrobioom gaat. In voedingssupplementen wordt quercetine-3-rutinoside vaak gecombineerd met ascorbinezuur [11].Ascorbinezuuris een essentiële vitamine voor het menselijk lichaam en is nodig in veel metabolische processen. Het is ook een krachtige in water oplosbare antioxidant, maar kan ook fungeren als een pro-oxidant, wat te wijten is aan zijn vermogen om ijzer te verminderen via de vorming van chelaatcomplexen, gevolgd door de transformatie van ijzer en een ascorbineradicaal [12]. Verhoogde absorptie in het menselijk lichaam van de bioactieve verbindingen quercetine-3-rutinoside, 5-caffeoylquinic acid of ijzer werd gevonden door toevoeging van ascorbinezuur [12], terwijl 5-caffeoylquinic acid de ijzerabsorptie verminderde door te complexatie [6]. Om de gezondheidsvoordelen van verschillende producten te voorspellen, met betrekking tot bioactieve stoffen, worden vaak in vitro antioxidanttests gebruikt. Deze voorspelling van gezondheidseffecten is beperkt vanwege de variabele biologische beschikbaarheid van verbindingen, metabolisatie en verschillende antioxidantmechanismen|13]. Deze testen zijn echter nog steeds nuttig om te testen op bioactieve verbindingen, zoals polyfenolen, of, zoals in deze studie, om de AOA van afzonderlijke verbindingen en hun interacties te beoordelen. Groenten en fruit bevatten een gevarieerde reeks bioactieve stoffen, die complexen kunnen vormen met andere verbindingen en eiwitten die ermee kunnen interageren. Deze interacties kunnen het gedrag van de verbindingen en de resulterende AOA beïnvloeden. Dit werk is echter bedoeld om bij te dragen aan de kennis van hoe bioactieve stoffen met elkaar interageren en hun impact op de AOA. De nieuwigheid van deze studie is de interacties van veel voorkomende fenolverbindingen, namelijk ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur, quercetine-3-rutinoside, met elkaar en de minerale ijzer pre- en post-thermische verwerking. Voorafgaand aan deze studie werden deze factoren afzonderlijk geëvalueerd, niet in combinatie. De focus lag op de AOA en het vermogen om complexen te bouwen. De hypothesen waren (1) thermische verwerking beïnvloedt de AOA negatief als gevolg van afbraak van de antioxidanten, (2) mengsels in verschillende verhoudingen van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside leiden tot een synergetisch effect met betrekking tot de AOA, en (3) toevoeging van het mineraal en pro-oxidant ijzer zal de antioxidantactiviteit van de antioxidanten alleen of in mengsels verminderen.

flavonoids clear free radicals

2. Resultaten

2.1.Invloed van thermische verwerking op antioxidantactiviteit van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinosidenormen en het mineraal ijzer

In geen van de zuivere monsters van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur, ofquercetine-3-rutinoside(Figuur 1)of mengsels daarvan (figuren 2 en 3,)was een effect van kooktijden tussen 0 en 40 min op waargenomen AOA, behalve in de combinatie van ascorbinezuur en ijzer. AOA was lager in TEAC- en DPPH-assays na 40 minuten koken in vergelijking met ongekookte monsters (figuur 1). Monsters die ascorbinezuur bevatten, hebben de neiging om hun AOA te verminderen, terwijl monsters die quercetine-3-rutinoside bevatten de neiging hebben om hun AOA te verhogen met een langere kooktijd (figuren 1-3).

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red),  quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey’s HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with  and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked  with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and  are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.  In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant  or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA  of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the  ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their  iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid  with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence  of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic  acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron,  being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA  of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or  cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid  mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was  found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside.  Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey’s HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid  (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate  the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences  (p ≤ 0.05 by Tukey’s HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and  without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a  triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times  and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.  In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of  iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in  the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of  the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher  Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey’s HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2.Invloed van ijzer en verschillende combinaties van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside-normen op antioxidantactiviteit

Analyses met een TEAC-test (figuur la) toonden aan dat de AOA van zuiver ascorbinezuur lager was dan de AOA van quercetine-3-rutinoside. In aanwezigheid van ijzer was de AOA van ascorbinezuur zelfs lager dan de AOA van quercetine-3-rutinoside en5-caffeoylquininezuur. Het toevoegen van ijzer verhoogde de AOA van quercetine-3-rutinoside en 5-caffeoylquininezuur. Bij een kooktijd van 0min was alleen de AOA van 5-caffeoylquinic acid hoger in de aan- en afwezigheid van ijzer. De DPPH-test (figuur 1b) detecteerde een hogere AOA van quercetine-3-rutinoside in afwezigheid van ijzer in vergelijking met 5-caffeoylquininezuur en ascorbinezuur. De aanwezigheid van ijzer leidde tot een AOA-toename voor 5-caffeoylquininezuur en een AOA-afname voor quercetine-3-rutinosidemonsters. Op 0 min kooktijd was alleen quercetine-3-rutinoside hoger in afwezigheid van ijzer dan in aanwezigheid van ijzer. Alleen in de TPC-test (figuur lc) had ijzer geen invloed op de AOA en bleef de volgorde van de drie stoffen gelijk.

In binaire mengsels, gedetecteerd door de TEAC-test (figuur 2a-c), leidde ijzer tot een significante of trendmatige toename van AOA. Bij monsters zonder ijzer werden geen verschillen tussen AOA van mengsels of verhoudingen gevonden. In aanwezigheid van ijzer op een kooktijd van 0 min, waren de verhoudingen 1: 1 en 1: 2 van ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur, en een 2: 1-verhouding van het 5-caffeoylquinic-zuur en quercetine-3-rutinoside-mengsel, hoger in hun AOA dan hun ijzervrije tegenhangers. In de DPPH-test (figuur 2d-f) toonde de combinatie van ascorbinezuur met 5-caffeoylquininezuur, evenals met quercetine-3-rutinoside, in aanwezigheid van ijzer in alle verhoudingen een hogere AOA dan de AOA van zuiver ascorbinezuur. Ascorbinezuur in combinatie met quercetine-3-rutinoside vertoonde echter een hogere AOA in afwezigheid van ijzer, vergelijkbaar met zuiver quercetine-3-rutinoside. In de TPC-test (figuur 2g-i) vertoonde de AOA van alle drie de binaire mengsels identieke patronen. Er was geen invloed van ijzer of kooktijd op AOA. Deze resultaten komen overeen met eerdere bevindingen in zuivere stoffen (figuur 1): de laagste AOA werd gedetecteerd in ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuurmengsels, gevolgd door ascorbinezuur met quercetine-3-rutinoside, en de hoogste AOA werd gevonden in de combinatie van 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside.

In alle ternaire mengsels werden geen verschillen tussen verhoudingen, ongeacht de aanwezigheid van ijzer, in TEAC- en DPPH-assays gevonden (figuur 3a-f). Hogere AOA's werden gevonden in de TEAC-test (figuur 3a-c) in aanwezigheid van ijzer. Op 0min kooktijd waren de AOAs van het equimolaire mengsel en de 1:2:1 verhouding van ascorbinezuur,5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside hoger in aanwezigheid van ijzer. De DPPH-test toonde een hogere AOA in monsters met ijzer voor de verhouding 1:2:1 (figuur 3e). In overeenstemming met binaire mengsels werd de TPC-test niet beïnvloed door ijzer of door de kooktijd (figuur 3g-i). Bovendien had het equimolaire mengsel in afwezigheid van ijzer een lagere AOA dan de verhouding van 1:2:2. In niet-equimolaire mengsels met één verdubbelde verbinding was de 1:1:2-verhouding hoger in AOA in vergelijking met de 2:1:1-verhouding (figuur 3h) en in de niet-equimolaire met twee verdubbelde verbindingen was de 1:2:2-verhouding hoger in AOA in vergelijking met de 2:1:2- en 2:2:1-verhouding (figuur 3i) in de aan- en afwezigheid van ijzer.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey’s HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. Synergetische en antagonistische effecten van antioxidantactiviteit

Alle testtests toonden voornamelijk zwakke synergetische en antagonistische effecten met interacties van minder dan 10% (figuur 4). Opmerkelijk is dat van alle gebruikte testtests de 2:1-verhouding van ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur in aanwezigheid van ijzer sterke synergetische effecten had, terwijl de 1:2-verhouding van ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur sterke antagonistische effecten had. In de TPC-test kwamen deze verschijnselen ook voor in mengsels zonder ijzer. In de DPPH-test werd een ander sterk antagonistisch effect gedetecteerd in alle verhoudingen van binaire mengsels zonder ijzerhoudend 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside (figuur 4b). Voor ternaire ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside mengsels toonde de TEAC-test sterke antagonistische effecten voor de 2:2:1-verhouding met ijzer (figuur 4a). In ternaire mengsels met ijzer toonde de DPPH-test sterke antagonistische effecten in gekookte monsters in verhoudingen van 1:2:1,1:1:2,2:1:1 en 2:2:1, evenals in mengsels zonder ijzer in de verhoudingen1:1:2, 1:2:2 en 2:1:1 (figuur 4b). De TPC-test vertoonde sterke synergetische effecten in mengsels zonder ijzer in de verhouding 1:2:1 (figuur 4c).

demostraction as the chart

2.4.Totaal en logisch ijzer

Ionisch ijzer werd toegevoegd als een equimolair mengsel van 50% ijzer (Fe3+) en 50% ijzer (Fe2+) aan de bovengenoemde zuivere, binaire en ternaire mengsels. In alle monsters verschoof de verhouding van ijzer naar ijzer in vergelijking met de aanvankelijk toegevoegde equimolaire verhouding. Wanneer ascorbinezuur in monsters aanwezig was, nam gebonden ijzer af met de kooktijd en verdween of stabiliseerde vervolgens (tabel 1). Een Pearson-correlatie op de TEAC-testgegevens onthulde een sterke negatieve correlatie (-0,641,p ≤2,2 * 10-16) tussen de AOA en ijzerionen, en een positieve correlatie tussen AOA en ijzer (0,377,p<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

In zuivere ascorbinezuurmonsters waren alleen sporen van ijzer detecteerbaar, ongeacht hun kooktijd. Bovendien nam de hoeveelheid ijzer toe, terwijl gebonden ijzer in alle ascorbinezuurmonsters na het koken afnam. In 5-caffeoylquininezuurmonsters daalde ijzer met 13,3% na 40 minuten thermische verwerking, terwijl tegelijkertijd ijzer licht toenam. Quercetine-3-rutinosidemonsters met ijzer resulteerden in een bijna stabiele hoeveelheid ijzer. Gebonden ijzer nam toe met verlengde kooktijd, terwijl ijzer met 20,49% afnam na 40 minuten koken (tabel 1).

In aanwezigheid van ascorbinezuur bevatten 0 min gekookte binaire monsters tussen 18,9% en 28,9% gebonden ijzer, dat door het koken werd afgestoten. Gebonden ijzer werd gevonden in binaire mengsels na 20 en 40 minuten koken alleen wanneer ascorbinezuur afwezig was. Mengsels van ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur bevatten een hogere hoeveelheid ijzer dan combinaties van ascorbinezuur en quercetine-3-rutinoside. De combinatie van 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside in alle verhoudingen vertoonde vergelijkbare patronen, ijzer ijzer nam licht toe en ijzer nam af met langere kooktijd. Gebonden ijzer werd pas na 20 en 40 minuten koken in dit mengsel gevonden (tabel 2).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

In ternaire mengsels was de hoeveelheid ijzer hoger en de hoeveelheid ijzer lager dan aanvankelijk piekte equimolaire concentraties van elk. Het totale hoogste gehalte aan ijzer werd gevonden in monsters wanneer de concentratie van ascorbinezuur werd verdubbeld (verhoudingen 2:1:1, 2:1:1, 2:2:1). Het kookproces verhoogde de hoeveelheid ijzer en ijzer verder, terwijl gebonden ijzer afnam (tabel 3).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5.Kwalitatieve en kwantitatieve analyse van de mengsels van stoffen door HPLC

HPLC-gegevens toonden aan dat in alle 0 min gekookte monsters, in de aan- en afwezigheid van ijzer, alleen de aanvankelijk ingebrachte stoffen van ascorbinezuur, 5-caffeoylquininezuur en quercetine-3-rutinoside aanwezig waren (gegevens niet getoond). Na 40 minuten koken werden twee extra pieken (pieken 3 en 4) afgeleid van ascorbinezuur, ongeacht de aanwezigheid van ijzer (figuur 5). In aanwezigheid van ijzer werden twee nieuwe producten van 5-caffeoylquininezuur (pieken 6 en 7) en één van quercetine-3-rutinoside (piek 8) gedetecteerd (figuur 5b).

Bij afwezigheid van ijzer daalden de ascorbinezuurconcentraties in alle mengsels in een dosis-responsrelatie van een beginconcentratie van 0,3 mM na 40 minuten koken tot 26,79% van de beginconcentratie en met een initiële 0,2 mM tussen 44,08% en 51,67%, met een initiële 0,15 mM tussen 60,49% en 65,47%, met een initiële 0,1 mM 77,84% en 86,41% en toenemend tot 90,05% met een initiële 0,06 mM (tabel S1).

In aanwezigheid van ijzer, alleen in zuivere ascorbinezuurmonsters, werd een daling van de concentratie gevonden na 40 minuten koken, hoger in vergelijking met het ascorbinezuurmonster zonder ijzer (tabel S1). In tegenstelling tot de ascorbinezuurmonsters zonder ijzer leidden hogere ascorbinezuurconcentraties tot hogere afbraakverhoudingen (tabel S1). In alle binaire mengsels daalden alleen de ascorbinezuurconcentraties in gekookte monsters van 0 minuten. Na 40 minuten koken werd een afname van de concentratie 5-caffeoylquininezuur of quercetine-3-rutinoside gevonden in combinatie met ascorbinezuur. Beide stoffen minimaliseren de afname van de ascorbinezuurconcentratie. Hogere 5-caffeoylquinic zuurconcentraties leidden tot het minimaliseren van de afbraak van ascorbinezuur. In binaire mengsels van 5-caffeoylquinic acid en quercetine-3-rutinoside daalde 5-caffeoylquinic acid in zijn concentratie, terwijl quercetine-3-rutinoside stabiel bleef na 40min koken. In ternaire mengsels bleef quercetine-3-rutinoside stabiel na 40 minuten koken, terwijl de concentraties ascorbinezuur en 5-caffeoylquininezuur daalden.

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract


Klik voor meer informatie op de onderstaande link voor deel 2:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactions-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html



Misschien vind je dit ook leuk