Bereidingstechnologie voor Wenyang Tongbian-korrels

Abstract:

ObjectiefBepalen en optimaliseren van de bereidingstechnologie van Wenyang Tongbiangranules.

MethodenWaterafkooksel werd geëxtraheerd. Het gehalte aan echinacea-glycoside in monarchdrug en de opbrengstverbinding werden als indexen gebruikt. De L9 (34) orthogonale test werd gebruikt om de extractie van Wenyang Tongbian-korrels te optimaliseren. Het beste vormingsproces werd geoptimaliseerd op basis van granulatiemoeilijkheden, vervormbaarheid en deeltjesopbrengst. Resultaten De optimale extractie omvatte het toevoegen van 10 maal water en het driemaal extraheren, telkens 1 uur. Het beste vormingsproces: het type hulpmateriaal wasdextrine, de verhouding van hulpstoffen was 1∶0,9 en het beste bevochtigingsmiddel was 85% ethanol. Conclusie Het extractie- en vormproces is stabiel en redelijk, eenvoudig en haalbaar, met goede reproduceerbaarheid, wat een basis kan vormen voor de industriële productie van Wenyang Tongbian-korrels.

Trefwoorden: Wenyang Tongbiaanse korrel; orthogonale test; extractie; gieten

NIEUWE KRUIDENFORMULERING VOOR NIERENYang-tekort

Ondersteunende dienst van Wecistanche

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/tel:+86 15292862950

Yang-deficiëntie constipatiekomt vaak voor bij ouderen en vrouwen. De behandelmethode mag geen eenvoudige zuivering zijn. De Warming Yang-methode kan goede resultaten opleveren [1]. Wenyang Tongbian Granules zijn een preparaat voor in het ziekenhuis ontwikkeld op basis van de klinische ervaring van professor Lin Aizhen van het Hubei Provinciaal Ziekenhuis voor Traditionele Chinese Geneeskunde bij de behandeling van functionele constipatie bij ouderen. Het is samengesteld uit Cistanche deserticola, kaneelschors, astragalus en Atractylodes macrocephala. In de formule heeft Cistanche deserticola de functies van het versterken van nier-yang en het bevorderen van essentie en bloed, en is het belangrijkste medicijn dat yang verwarmt; kaneelschors heeft de functies van het verwarmen van meridianen en het deblokkeren van bloedvaten, het aanvullen van vuur en het ondersteunen van yang; astragalus heeft de functie van het verhogen van yang en het aanvullen van qi, het samentrekken van zweren en het bevorderen van weefselregeneratie; en Atractylodes macrocephala heeft de functie van het versterken van de milt en het aanvullen van qi, het drogen van vocht en het bevorderen van diurese.

Studies hebben aangetoond dat fenylethanolglycosiden de belangrijkste actieve ingrediënten zijn in Cistanche deserticola [2]. Onder hen zijn echinacoside en verbascoside de karakteristieke ingrediënten voor de kwaliteitscontrole van Cistanche deserticola zoals gespecificeerd in de Chinese Farmacopee. Liu Xianhong et al. [3] heeft op basis van in vivo proeven bij mensen geconcludeerd dat Cistanche deserticola geschikt is voor de klinische behandeling van constipatie en zowel de symptomen als de oorzaak kan behandelen. De belangrijkste chemische componenten van kaneelschors zijn onder meer vluchtige oliën, polysachariden, flavonoïden, enz. Moderne farmacologische onderzoeken hebben aangetoond dat kaneelschors farmacologische effecten heeft, zoals vasodilatatie, maagzweren en antibacteriële effecten [4]. Astragalus-polysachariden, flavonoïden en astragaloside IV zijn de belangrijkste chemische componenten die immunomodulerende effecten uitoefenen [5]. Atractylodes macrocephala versterkt de milt en reguleert darmflorastoornissen en kan klinisch worden gebruikt om gastro-intestinale disfunctie te behandelen [6]. Het originele recept wordt voornamelijk gebruikt in afkooksels uit de Chinese geneeskunde, maar het heeft nadelen zoals ongemak bij het afkooksel, grote dosering en ongemak bij het dragen. Om dit klinische ervaringsvoorschrift breed toepasbaar te maken in de klinische praktijk, werd het ontwikkeld tot granulaat. Dit experiment gebruikte de pasta-opbrengst en het gehalte aan echinacoside, het belangrijkste actieve ingrediënt in het belangrijkste medicijn, als indicatoren, bleef het traditionele waterafkookproces gebruiken en gebruikte de L9 (34) orthogonale testmethode om de hoeveelheid toegevoegd water te optimaliseren , afkooktijd en afkooktijden in het extractieproces om het beste extractieproces te verkrijgen. Tegelijkertijd werd het korrelvormproces onderzocht om een ​​stabiel en redelijk vormproces te bepalen, dat een referentie vormde voor de proefproductie, kwaliteitscontrole en klinische toepassing van het preparaat [7-8].

1 Instrumenten en reagentia

1.1 Instrumenten

Alliantie e2695hoogwaardige vloeistofchromatograaf, 2998 diode array detector (Waters, VS), ES225SMDR 1/100,000 analytische balans (Precisa, Zwitserland), UPT-11-10T ultrapuur watermachine (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE CNC-ultrasone reiniger met dubbele frequentie (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Proefgeneesmiddelen

Wijn Cistanche plakjes(partijnummer: 2322050113, geproduceerd in Binnen-Mongolië), plakjes kaneel (partijnummer: 2323020103, geproduceerd in Guangxi), plakjes astragalus (partijnummer: 2323020105, geproduceerd in Gansu), plakjes Atractylodes macrocephala (partijnummer: 2322080101, geproduceerd in Zhejiang ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., alle plakjes zijn als authentiek geïdentificeerd door Chen Shuhe, hoofdapotheker van het Institute ofTraditionele Chinese Geneeskundevan het Hubei Provinciaal Ziekenhuis voor Traditionele Chinese Geneeskunde, en zijn gekwalificeerd volgens de 2020-editie van deChinees FarmacopeeDeel I). Echinacoside-referentiestof(batchnummer: 111670-201907, zuiverheid: 91,8%, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrine (partijnummer: 230102), maïszetmeel (partijnummer: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sucrose (partijnummer: TF28221205), microkristallijne cellulose (partijnummer: TF471211001), lactose (partijnummer: TF28221205), microkristallijne cellulose (partijnummer: TF471211001), lactose (partijnummer: TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Methoden en resultaten

2.1 Bepaling van het echinacosidegehalte

2.1.1 Chromatografische omstandigheden: Agilent 5 TC-C18 (250 nm×4,6 mm, 5 μm) werd gebruikt als de chromatografische kolom; methanol werd gebruikt als de mobiele fase A, 0,1% mierenzuuroplossing werd gebruikt als de mobiele fase B, gradiëntelutie (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 min,

29,5%A, 54-55 min, 29,5% → 26,5%A; 55-60min, 26,5%A); stroomsnelheid 1.0 ml·min-1; kolomtemperatuur 30 graden; diode-arraydetector, detectiegolflengte 330 nm; injectievolume 10μL; het theoretische plaatnummer, berekend op basis van de echinacosidepiek, mag niet minder zijn dan 3000[9].

2.1.2 Bereiding van referentieoplossing

Neem een ​​passende hoeveelheid echinacoside, weeg nauwkeurig 9,65 mg af, doe dit in een maatkolf van 25 ml en voeg 50% toe.

methanol om op te lossen en te verdunnen tot de maatstreep als de referentievoorraadoplossing. Pipetteer nauwkeurig 1 ml echinacoside stockoplossing in een maatkolf van 25 ml, voeg 50% methanol toe om te verdunnen tot de maatstreep, schud goed en bereid een referentieoplossing van 14,17 ug per 1 ml [9].

2.1.3 Bereiding van de testoplossing

Neem ongeveer 0,5 g droge pastapoeder, vermaal het tot poeder, weeg het nauwkeurig, doe het in een conische fles met bruine stop, voeg nauwkeurig 50 ml 50% methanol toe, sluit het goed af, schud het goed, weeg het, behandel het ultrasoon gedurende 40 minuten (vermogen 250 W, frequentie 45 kHz), laat het afkoelen, weeg het opnieuw, voeg 50% methanol toe om het verloren gewicht te compenseren, schud het goed, laat het staan, neem het supernatant op, filter het en neem het filtraat.

2.1.4 Bereiding van negatieve monsteroplossing

Neem ongeveer 0,5 g van het droge pastapoeder met de formule zonder wijn Cistanche-medicinale materialen en bereid de negatieve monsteroplossing volgens de methode onder "2.1.3".

2.1.5 Specificiteitstest

Pipetteer respectievelijk de testoplossing, de referentieoplossing en de negatieve monsteroplossing nauwkeurig en meet volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.1.1". Noteer het chromatogram. De resultaten worden weergegeven in Figuur 1. Er is geen interferentie met het negatieve monster. Uit de resultaten blijkt dat de methode een goede specificiteit heeft.

Fig. 1 Specifiek chromatogram van Wenyang Tongbian-korrels

2.1.6 Lineair relatieonderzoek

Neem een ​​geschikte hoeveelheid echinacoside, weeg dit nauwkeurig af tot 10,11 mg, doe het in een maatkolf van 25 ml, voeg 50% methanol toe om het te verdunnen tot een reeks concentraties referentieoplossing en injecteer het volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.1 .1" om de piekoppervlaktewaarde van echinacoside te bepalen. Teken een standaardcurve, met de injectiehoeveelheid echinacoside-referentie als de horizontale as (ug, X) en de integrale waarde van het piekgebied als de verticale as (Y), en voer lineaire regressie uit.

De regressievergelijking is Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. De resultaten laten zien dat de integrale waarde van het piekoppervlak van de echinacoside-injectiehoeveelheid in een goed lineair verband ligt tussen 1,4850 en 371,2392 µg.

2.1.7 Precisietest

Zuig nauwkeurig 10 μl van de referentieoplossing (massaconcentratie van 37,12 ug · ml - 1) op onder "2.1.6", injecteer 6 keer, noteer respectievelijk de piekoppervlakwaarde van echinacoside en bereken de RSD-waarde op 1,1%, wat aangeeft dat het instrument een goede nauwkeurigheid heeft.

2.1.8 Herhaalbaarheidstest

Neem dezelfde droge pasta, maal deze tot poeder, weeg nauwkeurig 6 porties af, die elk ongeveer 0,5 g wegen, en plaats ze in een conische fles met bruine stop. Extraheer volgens de methode onder "2.1.3", bepaal de inhoud en bereken. Uit de resultaten blijkt dat het gemiddelde gehalte aan echinacoside in het monster 1,46 mg·g－ 1 bedraagt ​​en de RSD-waarde 2,7%, wat aangeeft dat de herhaalbaarheid van deze methode goed is.

2.1.9 Stabiliteitstest

Neem dezelfde monsteroplossing, trek nauwkeurig 10 μl af en injecteer deze binnen respectievelijk 0, 2, 4, 8, 12, 18 en 24 uur. De RSD-waarde van het piekoppervlak is 0,71%, wat aangeeft dat de monsteroplossing binnen 24 uur een goede stabiliteit heeft.

2.1.10 Monsterhersteltest

Weeg nauwkeurig 6 porties van dezelfde batch testmonsters, elk 0,24 g, en plaats ze in een conische fles met bruine stop. Voeg, afhankelijk van de massaverhouding van 1:1 van de componenten in het testmonster, nauwkeurig 0,9 ml van de echinacoside-referentiestof toe (massaconcentratie is 371,24 ug·mL－ 1) onder "2.1.6", bereid de testoplossing volgens de methode onder "2.1.3", bepaal het chromatografische piekoppervlak van echinacoside en bereken de inhoud. Uit de resultaten blijkt dat het gemiddelde terugwinningspercentage van echinacoside 101,09% bedraagt ​​en de RSD-waarde 1,6%.

2.2 Experimenteel plan en evaluatie-indicatoren

Als te onderzoeken factoren werden de hoeveelheid toegevoegd water (A), de extractietijd (B) en het aantal extracties (D) gekozen. Er werden drie factorniveaus ingesteld op basis van de resultaten van het vorige onderzoek met één factor, zie Tabel 1. In het experiment werd de orthogonale testtabel L9 (34) gebruikt, zie Tabel 2. Bij de test werd gebruik gemaakt van de opbrengst aan pasta en het gehalte aan echinacoside. als evaluatie-indicatoren om het optimale waterwinningsproces te onderzoeken.

Tab 1 Factor en niveau van de orthogonale toets

2.2.1 Orthogonale test

Weeg volgens de receptverhouding 18 porties van elke medicinale smaak, elk 55 g, en voer de extractie van waterafkooksel uit volgens het orthogonale ontwerpschema in Tabel 2. Elke groep heeft 2 parallelle porties. Het afkooksel wordt gefilterd door een 80-gaasscherm, het filtraat wordt gecombineerd, gekoeld, het afkookselvolume wordt gemeten, 50 ml wordt nauwkeurig gepipetteerd in een indampschaaltje dat constant is gewogen en drooggedampt en gedroogd onder verminderde druk bij 60 graden om de orthogonale experimentele droge pasta te verkrijgen. Bereken de pasta-opbrengst (pasta-opbrengst=(droog pastagewicht × volume medicinale vloeistof) / (50 × gewicht afkookselstuk) × 100%). Volgens de chromatografische omstandigheden onder "2.1.1" en de methode onder "2.1.3" werd respectievelijk de extractiehoeveelheid echinacoside in de 9 groepen orthogonale testextracten bepaald. Hoeveelheid extractie van echinacoside=gewicht droge pasta × inhoud echinacoside / gewicht stuk wijn Cistanche-afkooksel. Uitgebreide score=echinacoside-inhoud ÷ maximale inhoud × 0,5 × 100% + pasta-opbrengst ÷ maximale pasta-opbrengst × 0,5 × 100% [10]. De resultaten worden weergegeven in Tabel 2.

Zoals weergegeven in Tabel 3, waarbij de uitgebreide score van de pasta-opbrengst en het echinacosidegehalte als evaluatie-indicatoren wordt genomen, laat de R-waarde in de tabel zien dat de primaire en secundaire effecten van elke factor D > B > A zijn; uit de resultaten van de variantieanalyse blijkt dat de D-factor (afkooktijden) statistisch significant is (P < 0.05), en dat het D3-niveau is geselecteerd; de A-factor (watertoevoeging) en de B-factor (afkooktijd) zijn niet statistisch significant (P > 0,05). Gezien het feit dat de waterabsorptiesnelheid van de medicinale materialen in dit preparaat relatief hoog is (155%), en gecombineerd met factoren zoals de werkelijke productiebehoeften, worden de optimale extractieomstandigheden geselecteerd als A2B1D3, dat wil zeggen 10 keer water toevoegen, afkoken 3 keer, telkens 1 uur.