De RNA M6 A-lezer YTHDF2 controleert NK-cel-antitumor- en antivirale immuniteit Deel 6

Metastatisch melanoommodel en MCMV-uitdaging

B16F10-cellen (105) werden iv in muizen geïnjecteerd. 14 dagen na injectie werden de muizen geëuthanaseerd voor postmortale analyse. Metastatische knobbeltjes in de longen werden macroscopisch geanalyseerd en geteld. De B16F10-cellijn werd geleverd door Hua Yu (City ofHope, Los Angeles, CA). Ythdf2ΔNK- en Ythdf2WT-muizen werden geïnfecteerd met een ip-injectie van de Smith-stam MCMV (2,5 x 104 PFU), die was gekocht bij de American Type Culture Collection (VR-1399). Perifere bloedmonsters werden verkregen via submandibulaire punctie op dag 0, 4 en 7 na infectie.

Longmetastaseknobbeltjes verwijzen naar knobbeltjes gevormd door kwaadaardige tumorcellen van andere plaatsen die via het bloed of het lymfestelsel naar de longen migreren. Voor veel patiënten is dit een veel voorkomende uiting van longkanker.

Hoewel longmetastaseknobbeltjes een bedreiging vormen voor de lichamelijke gezondheid van patiënten, bestaat er geen directe relatie tussen dit en het geheugen. Daarom moeten we actief de uitdagingen van longkanker en longmetastasen aangaan, en mogen we niet toelaten dat negatieve emoties en angst onze fysieke en mentale gezondheid aantasten.

Tegelijkertijd kunnen we het geheugen behouden en verbeteren via een aantal positieve methoden. Voer bijvoorbeeld wat geheugentraining uit, zoals wiskundige berekeningen, lezen, naar muziek luisteren, spelletjes spelen, enz. Daarnaast kan het naleven van goede leefgewoonten, zoals regelmatige lichaamsbeweging, voldoende slaap krijgen, gezond eten, enz. ook helpen. ons geheugen verbeteren.

Het belangrijkste is om een ​​positieve houding te behouden. Ongeacht met welke moeilijkheden u te maken krijgt, u moet geloven in uw kracht en de flexibiliteit van uw zenuwstelsel, en door positieve aanpassingen en reacties zult u de moeilijkheden uiteindelijk met succes overwinnen.

Kortom, hoewel metastatische knobbeltjes in de longen een bedreiging vormen voor de lichamelijke gezondheid, houden ze niet direct verband met het geheugen. We moeten het positief onder ogen zien en ons geheugen behouden en verbeteren door onze levensstijl aan te passen en een goede houding aan te nemen. Het is duidelijk dat we het geheugen moeten verbeteren, en Cistanche deserticola kan het geheugen aanzienlijk verbeteren, omdat Cistanche deserticola ook de balans van neurotransmitters kan reguleren, zoals het verhogen van de niveaus van acetylcholine en groeifactoren. Deze stoffen zijn erg belangrijk voor het geheugen en het leren. Bovendien kan Cistanche deserticola ook de bloedstroom verbeteren en de zuurstoftoevoer bevorderen, wat ervoor kan zorgen dat de hersenen voldoende voedingsstoffen en energie ontvangen, waardoor de vitaliteit en het uithoudingsvermogen van de hersenen worden verbeterd. Het is duidelijk dat we het geheugen moeten verbeteren, en Cistanche deserticola kan het geheugen aanzienlijk verbeteren, omdat Cistanche deserticola ook de balans van neurotransmitters kan reguleren, zoals het verhogen van de niveaus van acetylcholine en groeifactoren. Deze stoffen zijn erg belangrijk voor het geheugen en het leren. Bovendien kan Cistanche deserticola ook de bloedstroom verbeteren en de zuurstoftoevoer bevorderen, wat ervoor kan zorgen dat de hersenen voldoende voedingsstoffen en energie ontvangen, waardoor de vitaliteit en het uithoudingsvermogen van de hersenen worden verbeterd.

Klik op supplementen kennen om het geheugen te vergroten

Om de virusbelasting in het perifere bloed, de milt en de lever te meten, werd DNA geïsoleerd met behulp van een QIAGEN DNeasy Blood and Tissue Kit voor qPCR-analyse. De volgende primers werden gebruikt: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (vooruit) en MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (achteruit).

In vivo muizenbehandeling met IL-15

Voor in vivo behandeling van muizen met IL-15 werden Ythdf2ΔNK en Ythdf2WT muizen gedurende 5 dagen geïnjecteerd met 2 µg ip recombinant menselijk IL-15 (cat.nr. 745101; National Cancer Institute). De behandelde en controlemuizen werden vervolgens geëuthanaseerd voor een flowcytometrische analyse.

Flowcytometrie

Eencellige suspensies werden bereid uit BM, bloed, milt, lever en long van Ythdf2ΔNK- en Ythdf2WT-muizen zoals eerder beschreven (Wang et al., 2018b). Flowcytometrieanalyse en celsortering werden uitgevoerd op respectievelijk een LSRFortessa X-20 en een FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences).

Gegevens werden geanalyseerd met behulp van NovoExpress-software (Agilent Technologies).

De volgende met fluorescentiekleurstof gelabelde antilichamen van BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen of Cell Signaling Technology werden gebruikt: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5 ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7),CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70),CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1),KLRG1 (2F1), CD45 ({{46 }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzyme B (QA16A02), perforine (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), annexine V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) en Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), fosfo-S6 ribosomaal eiwit fosfo-Stat3 (Tyr705, #9145) en fosfo-Stat5 (Tyr694,#9539).

Voor de evaluatie van NK-celproliferatie werden de cellen gelabeld met 5 µM CTV (Invitrogen) volgens het protocol van de fabrikant voordat ze werden overgebracht naar ontvangende muizen. Intracellulaire kleuring van Ki67, Tbet en Eomes werd uitgevoerd door fixatie en permeabilisatie met de Foxp3/Transcription Factor Staining Kit (eBioscience).

Voor detectie van gefosforyleerde eiwitten werden gezuiverde milt-NK-cellen gedurende 1 uur voorbehandeld met recombinant menselijk IL-15 (50 ng/ml) en vervolgens gefixeerd met Phosflow Fix Buffer I gevolgd door permeabilisatie met Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) en kleuring met antilichamen.

Adoptieve celoverdracht

Om het effect van Ythdf2-deficiëntie op de rijping van NK-cellen te beoordelen, werd een mengsel van 5 x 106 BM-cellen in een verhouding van 1: 1 van CD45.1- of Ythdf2ΔNK CD45.2-muizen gecotransfereerd naar Rag2-/-Il2rg-/-muizen. De reconstitutie van de ontvangers werd 8 weken na de transplantatie beoordeeld door middel van flowcytometrie.

Voor door lymfopenie geïnduceerde homeostatische proliferatie-experimenten werden gelijke aantallen gezuiverde milt-NK-cellen van CD45.1- of Ythdf2ΔNK CD45.2-muizen gecotransfereerd naar Rag2−/−Il2rg−/− muizen, gevolgd door beoordeling van de relatieve percentages overgedragen WT- en Ythdf2ΔNK-NK-cellen in de milten. van Rag2−/−Il2rg−/− ontvangers door flowcytometrie op aangegeven tijdstippen.

Voor het metastatische melanoommodel werden 106 IL-2-geëxpandeerde NK-cellen van Ythdf2ΔNK of Ythdf2WTmuizen iv geïnjecteerd in Rag2−/−Il2rg−/− muizen. 1 dag later werden B16F10-cellen (105) iv in muizen geïnjecteerd. 14 dagen na injectie werden de muizen geëuthanaseerd voor postmortemanalyse. In sommige experimenten werden cellen gelabeld met CTV (5 µM, Invitrogen) om celproliferatie vóór overdracht te traceren.

In vivo mensenhandeltest

Voor het detecteren van het verkeer van NK-cellen van BM naar perifeer bloed werd 1 µg iv APC-gelabeld anti-CD45-antilichaam geïnjecteerd in C57BL/6-muizen. Twee minuten na de antilichaaminjectie werden de muizen onmiddellijk geëuthanaseerd en werden de BM-cellen verzameld voor flowcytometrie nadat de cellen waren gekleurd met CD3- en NK1.1-antilichamen. Parenchymale NK-cellen werden geïdentificeerd door het ontbreken van CD45-kleuring, terwijl sinusoïdale NK-cellen werden geïdentificeerd door de aanwezigheid van CD45-labeling. Daarom geeft de verhouding van NK-cellen in de sinusoïden (CD45+) tot die in de parenchymale gebieden (CD45−) de NK-celhandel vanuit BM-topperifeer bloed in een stabiele toestand aan.

Realtime RT-qPCR en immunoblotting

RNA werd geïsoleerd met behulp van een RNeasy Mini Kit (QIAGEN) en vervolgens omgekeerd getranscribeerd naar cDNA met PrimeScript RT Reagent Kit met gDNA Eraser (Takara Bio) volgens de instructies van de fabrikant. mRNA-expressieniveaus werden geanalyseerd met behulp van SYBRGreen PCR Master Mix en een QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR System (beide van Thermo Fisher Scientific). Primersequenties worden vermeld in Tabel S1.

Immunoblotting werd uitgevoerd volgens standaardprocedures, zoals eerder beschreven (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). De volgende antilichamen werden gebruikt:METTL3 (cat.nr. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (cat.nr.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (cat.nr. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (cat.nr. RN123PW; MBL), YTHDF3 (cat.nr.25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (cat.nr. ab195377; Abcam),FTO (cat.nr. ab124892; Abcam), MDM2 (cat.nr. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (cat.nr. PA5-29949; Invitrogen) en -actin(cat.nr. {{20 }}Ig; Proteintech).

siRNA-knockdown-test

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% zoals gemeten met flowcytometrie. De efficiëntie van de genenknockdown werd bepaald door qPCR en immunoblotting. 3 dagen na transfectie werden celapoptose en proliferatie geanalyseerd met behulp van flowcytometrie zoals hierboven beschreven.

Luciferase-reportertest

Het Ythdf2-promotergebied variërend van –2,000 bp tot +100 bp van de TSS werd geamplificeerd uit NK-cellen van muizen en gekloond in apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector (Promega) om apGL te genereren{ {5}}Ythdf2-reporterplasmide. HEK293T-cellen gekocht bij ATCC werden gecotransfecteerd met de pGL4-Ythdf2-reporterplasmiden evenals STAT5a- of STAT5b-overexpressieplasmiden of een lege vector, samen met een pRL-TK Renilla-reporterplasmide (Promega) voor normalisatie van de transfectie-efficiëntie. De cellen werden 24 uur na transfectie geoogst voor lysis en de luciferaseactiviteit werd fluorimetrisch gekwantificeerd met het Dual-LuciferaseSystem (Promega). Primersequenties voor het klonen van de Ythdf2-promoter en STAT5a- en STAT5b-overexpressieplasmiden staan ​​vermeld in Tabel S1.

ChIP-testen

ChIP-tests werden uitgevoerd met behulp van een Pierce Magnetic ChIP Kit (cat.nr. 26157; Thermo Fisher Scientific) volgens de instructies van de fabrikant. In het kort werd een gelijke hoeveelheid ananti-anti-fosfo-Stat5 (Tyr694, cat. nr. 9351; Cell Signaling Technologies) of overeenkomstig controle-normaal konijn-IgG afzonderlijk gebruikt om de verknoopte DNA-eiwitcomplexen afgeleid van 5 x te precipiteren. 106 gezuiverde primaire NK-cellen van muizen die gedurende 1 uur werden voorbehandeld met IL-15 (50 ng/ml). Na de omkering van de verknoping werd het door het aangegeven antilichaam immunologisch neergeslagen DNA getest met qPCR. De sequenties van alle primers staan ​​vermeld in Tabel S1.

Ex vivo cytotoxiciteitstest

Ex vivo cytotoxiciteit van NK-cellen werd geëvalueerd met standaard 51Cr-release-assays. Muizenlymfoomcellijnen RMA-S (MHC klasse Ideficiënt) en RMA (MHC klasse I voldoende) cellen, een geschenk van Andre'Veillette (McGill University, Montreal, Canada), werden als doelcellen gebruikt. Muizen werden behandeld met ip-injectie van polyinosine: polycytidylzuur [poly (I: C); 200 µg/muizen] gedurende 18 uur. Poly (I: C)-geactiveerde NK-cellen werden geïsoleerd uit de milt met behulp van EasySepMouse NK Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies). Gezuiverde NK-cellen werden samen met doelcellen gekweekt in een verhouding van 5:1, 2,5:1 en 1,25:1 in aanwezigheid van IL-2 (50 U/ml).

m6A-seq

Gezuiverde NK-cellen uit de milt werden in vitro gedurende 7 dagen geëxpandeerd met IL-2 (1,000 U/ml, cat.nr. Bulk Ro 23-6019; National Cancer Institute). Totaal RNA werd geïsoleerd door TRIzol-reagens (Thermo FisherScientific) uit 50 miljoen IL-2-geëxpandeerde NK-cellen. Gepolyadenyleerd RNA werd verder verrijkt uit totaal RNA door gebruik te maken van Dynabeads mRNA Purification Kit (Invitrogen). mRNA-monsters werden gefragmenteerd in 100-nt-lange fragmenten met RNA-fragmentatiereagentia (Invitrogen).

Gefragmenteerd mRNA (5 µgmRNA) werd gebruikt voor m6A-immunoprecipitatie met behulp van een m6A-antilichaam (202003; Synaptic) volgens het standaardprotocol van de Magna MeRIP m6A Kit (Merck Millipore). RNA werd verrijkt via RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) voor het genereren van bibliotheken met een KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche). Sequencing werd uitgevoerd in de genomics-faciliteit van City of Hope op een Illumina HiSeq 2500-machine met single read 50-bp-modus. Sequencing-lezingen werden toegewezen aan het muisgenoom met behulp van HISAT2 v101-software (Kim et al., 2015).

Mappedreads van immunoprecipitatie en invoerbibliotheken werden geleverd met behulp van het R-pakket exomePeak (Meng et al., 2014). m6Apeaks werden gevisualiseerd met behulp van Integrative Genomics Viewersoftware (//www.igv.org). Het m6A-bindende motief werd geanalyseerd door MEME (//meme-suite.org) en HOMER (//homer.ucsd.edu/homer/motif). Genoemde pieken werden geannoteerd door kruising met genarchitectuur met behulp van de Rpackage ChIPseeker (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (vouwverandering)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 miljoen IL-2-geëxpandeerde NK-cellen werden geoogst en tweemaal gewassen met koude PBS, en de celpellet werd gelyseerd met 2 vol lysebuffer (10 mM Hepes, pH 7,6, 150 mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol, 1:100 proteaseremmercocktail [Thermo Fisher Scientific] en 400 U/ml SUPERase-In RNase-remmer [Thermo Fisher Scientific]).

Het lysaat werd 5 minuten op ijs geïncubeerd en 15 minuten gecentrifugeerd om het lysaat te klaren. Een tiende volume cellysaat werd als input bewaard. Het grootste deel van het cellysaat werd geïncubeerd met 5 µg anti-YTHDF2 (cat.nr. RN123PW; MBL) dat was gekoppeld aan Protein A Magnetic Beads (cat.nr. 10001D; Invitrogen) bij 4 graden gedurende 2 uur met zachte rotatie. Daarna werden de kralen vijf keer gewassen met 1 ml ijskoude wasbuffer (50 mM HEPES, pH 7,6.200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol en 200 U/ml RNase remmer).

Immunoprecipiteerde monsters werden onderworpen aan proteïnase K-digestie in wasbuffer aangevuld met 1% SDS en 2 mg/ml Proteinase K (ThermoFisher Scientific), geïncubeerd onder schudden bij 1200 rpm bij 55 graden gedurende 1 uur. Totaal RNA werd geëxtraheerd uit zowel het input- als het immuungeprecipiteerde RNA door het toevoegen van 5 vol. TRIzol-reagens gevolgd door Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

De cDNA-bibliotheek werd gegenereerd met een KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) en gesequenced op een Illumina HiSeq 2500-platform. Piekoproepresultaten met immunoprecipitatie en invoerbibliotheken werden gegenereerd door het R-pakket RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMER werd gebruikt om motieven van de gegevensverdeling in piekgebieden te vinden. Genoemde pieken werden geannoteerd door kruising met gen- en transcriptarchitectuur met behulp van ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

mRNA-stabiliteitstest

Gezuiverde milt-NK-cellen van Ythdf2ΔNK- en Ythdf2WT-muizen werden gekweekt met IL-15 (50 ng/ml). 3 dagen na de kweek werden de cellen gedurende de aangegeven tijd behandeld met actinomycine D (5 µg/ml, cat.nr. A9415; Sigma). Cellen zonder behandeling werden om 0 uur gebruikt. Cellen werden op het aangegeven tijdstip verzameld en totaal RNA werd uit de cellen geëxtraheerd voor qPCR. De mRNA-halfwaardetijd werd berekend met behulp van de methode die eerder werd beschreven door Weng et al. (2018). Primersequenties worden vermeld in Tabel S1.

Online databaseanalyse

We hebben de online bron BioGPS (//biogps.org) gebruikt om de weefselspecifieke expressie van de Ythdf2 te analyseren. De RNA-seqdatasets waren van GEO onder toetredingsnrs. GSE106138,GSE113214 en GSE25672. Genormaliseerde gegevens van RNA-seq-analyses werden geëxporteerd en de z-score van genexpressie werd gevisualiseerd met de Heatmap.2-functie binnen de gplots Rlibrary

Statistieken

Ongepaarde Student's t-tests (tweezijdig) werden uitgevoerd met behulp van GraphPad Prism-software. Eenzijdige of tweezijdige ANOVA werd uitgevoerd wanneer drie of meer onafhankelijke groepen met elkaar werden vergeleken. P-waarden werden aangepast voor meerdere vergelijkingen met behulp van de Holm-Sˇ´ıdak-procedure. P < 0.05 werd als significant beschouwd. *, P < {{10}}.05; **, P <0,01; en ***, P <0,001.

Online aanvullend materiaal

Fig. S1 toont de eiwitniveaus van YTHDF2 in immuuncellen, inclusief NK-cellen als reactie op IL-15-stimulatie, MCMV-infectie en tumorprogressie; de generatie van muizen met NKcel-specifieke deletie van Ythdf2. Fig. S2 toont de virale titers in de milt en lever van muizen geïnfecteerd met MCMV en het percentage en absoluut aantal Ly49H+ en/of Ly49D+ NK-cellen in muizen geïnfecteerd met MCMV. Fig. S3 toont de proliferatie, overleving, rijping en expressie van activerende en remmende receptoren van NK-cellen van Ythdf2WT- en Ythdf2ΔNK-muizen. Fig.S4 toont de regulatie van YTHDF2-expressie door IL-15-STAT5-signalering en de expressie van de componenten van IL-15-receptoren, de PI3K – AKT-route en de MEK – ERK-route in NK-cellen van Ythdf2WT en Ythdf2ΔNK muizen. Fig. S5 toont transcriptoombrede RNA-seq-, m6A-seq- en RIP-seq-testen in NK-cellen. Tabel S1 geeft een overzicht van de primers die in het onderzoek zijn gebruikt.

Beschikbaarheid van data

De RNA-seq-, m6A-seq- en RIP-seq-gegevens zijn gedeponeerd bij het National Center for Biotechnology Information GEO onder toegangsnummer. GSE174027. De resterende gegevens die de bevindingen van dit onderzoek ondersteunen, zijn op verzoek verkrijgbaar bij de overeenkomstige auteurs.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 en CA210087), de Leukemia and Lymphoma Society (1364-19), het California Institute for Regenerative Medicine (DISC2COVID{{ 9}}), en de Breast Cancer Alliance 2021 Exceptional ProjectAward. Dit werk werd ook gedeeltelijk ondersteund door een USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Auteursbijdragen: S. Ma, J. Yu en MA Caligiuri bedachten en ontwierpen het project. S. Ma, J. Yan, J. Zhang en J. Yu voerde experimenten en/of data-analyses uit. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun en J. Chen droegen reagentia en materiële ondersteuning bij. S. Ma, J. Yu, J. Chen en MA Caligiuri hebben het artikel geschreven, beoordeeld en/of herzien. Alle auteurs bespraken de resultaten en gaven commentaar op het manuscript.

Openbaarmakingen: J. Chen rapporteerde "overig" van Genovel BiotechCorp. buiten het ingediende werk en is wetenschappelijk oprichter van Genovel Biotech Corp. en wetenschappelijk adviseur van rassenoncologie. Er zijn geen andere onthullingen gerapporteerd.

Referenties

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill en LL Lanier. 2002. Directe herkenning van cytomegalovirus door activerende en remmende NK-celreceptoren. Wetenschap. 296: 1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli en FE Baralle. 2008. TDP-43 reguleert de fosforylatie van retinoblastoma-eiwitten door de repressie van cycline-afhankelijke kinase 6-expressie. Proc. Nat. Acad. Wetenschap VERENIGDE STATEN VAN AMERIKA. 105: 3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han, et al. 2017. Promoter-gebonden METTL3 handhaaft myeloïde leukemie door m6A-afhankelijke translatiecontrole. Natuur. 552: 126–131.

4.Becknell, B., en MA Caligiuri. 2005. Interleukine-2, interleukine-15 en hun rol in menselijke natuurlijke killercellen. Gev. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim en RA de Bruin. 2013. Controle van celcyclustranscriptie tijdens G1- en S-fasen. Nat. Ds. Mol. Cel Biol. 14: 518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath en LL Lanier. Immunologisch genoomprojectconsortium. 2012. Moleculaire definitie van de identiteit en activering van natuurlijke killercellen. Nat. Immunol. 13: 1000–1009.

7.Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein en MA Caligiuri. 1994. Interleukine (IL) 15 is een nieuw cytokine dat menselijke natuurlijke killercellen activeert via componenten van de IL-2-receptor. J. Exp. Med. 180: 1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann en MA Caligiuri. 1997. Een potentiële rol voor interleukine-15 bij de regulatie van de overleving van menselijke natural killer-cellen.J. Klin. Investeren. 99: 937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth en L. Martinet. 2014. Moleculaire mechanismen van activering van natuurlijke killercellen als reactie op cellulaire stress. CeldoodVerschil. 21: 5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, et al. 2016. Combinatietherapie van EGFR-CAR NK-cellen en oncolytisch herpes simplex-virus 1 voor hersenmetastasen van borstkanker. Oncotarget. 7: 27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com