Therapeutisch effect van Cistanche deserticola op ontlasting in seniele constipatie rat model
Mar 27, 2022
Contact:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Abstract
ACHTERGROND
Constipatie is een van de chronische gastro-intestinale functionele ziekten. Het serieus beïnvloedt de kwaliteit van leven. Cistanche deserticola (C. deserticola) kan constipatie behandelen uiteraard, maar het mechanisme ervan is niet opgehelderd. We veronderstelden dat mechanisme ervan verbeterde de darmmotiliteit door interstitiële Cajal te stimuleren cellen (ICC). Activering van de C-kit receptor op het oppervlak van ICC is nauw verwant naar ICC-functie, en de stamcelfactor (SCF)/C-kit signaleringsroutes spelen een belangrijke rol daarin. Om het mechanisme te onderzoeken van hoe C. deserticola behandelt constipatie, deze studie was gericht op het vaststellen van een constipatiemodel bij ratten en de rol van de SCF/C-kit signaleringsroute in de behandeling te onderzoeken.
DOEL
Het verkennen van de SCF/C-kit signaleringsroutes in de rol van C. deserticola voor behandeling van constipatie door een constipatie rattenmodel.
METHODEN
Achtenveertig 8-mo-oude Sprague-Dawley ratten werden willekeurig in 4 groepen verdeeld gewichtsmethode: Normale groep (n = 12), modelgroep (n = 12), C. deserticola-groep (n = 12) en blokkergroep (n = 12). De normale groep kreeg een normale zoutoplossing door maagsonde; de modelgroep kreeg loperamide door een maagsonde; de blokkergroep kreeg loperamide en C. deserticola door een maagsonde en STI571 werd intraperitoneaal geïnjecteerd. Tijdens de behandeling, het gewicht, fecale korrels en fecale kwaliteit werden om de 10 d opgenomen. Op dag 20 na modelinductie, de dikke darmweefsels van elke groep werd verwijderd. Hematoxyline en eosinekleuring werd gebruikt om te observeren pathologische veranderingen. Expressieniveaus van SCF-, C-kit- en Aquaporinegenen werden gedetecteerd door immunohistochemie, western blotting en real-time kwantitatieve polymerasekettingreactie. De colonepitheel mitochondriën en bekercellen werden waargenomen door transmissie-elektronenmicroscopie.
RESULTATEN
Vergeleken met de normale groep, naarmate de behandeling vorderde, werd het gewicht van ratten in het model en de blokkergroepen namen aanzienlijk af, het gewicht van de ontlasting nam af, en de kwaliteit van de ontlasting was droog (P< 0.05).="" c.="" deserticola="" reversed="" the="" decrease="" in="" body="" weight="" and="" stool="" weight="" and="" improved="" stool="" quality.="" histopathological="" analysis="" indicated="" that="" the="" colonic="" mucosal="" epithelium="" in="" the="" model="" group="" was="" incomplete,="" and="" the="" arrangement="" of="" the="" glands="" was="" irregular="" or="" damaged.="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" improved="" the="" integrity="" and="" continuity="" of="" the="" epithelial="" cells="" and="" regular="" arrangement="" of="" the="" glands.="" the="" blocking="" agents="" inhibited="" the="" effects="" of="" c.="" deserticola="" immunohistochemistry="" and="" real-timequantitative="" polymerase="" chain="" reaction="" showed="" that="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" protein="" or="" genes="" in="" the="" colonic="" tissue="" of="" the="" model="" group="" was="" decreased="" (p="">< 0.05),="" while="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" increased="" protein="" or="" gene="" expression="" (p="">< 0.05).="" western="" blotting="" showed="" that="" expression="" of="" aquaporin="" apq3="" was="" increased,="" while="" the="" expression="" of="" cx43="" decreased="" in="" the="" model="" group.="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" inhibited="" expression="" of="" apq3="" and="" promoted="" expression="" of="" cx43.="" transmission="" electron="" microscopy="" showed="" that="" the="" mitochondria="" of="" the="" colonic="" epithelium="" in="" the="" model="" group="" were="" swollen="" and="" arranged="" disorderly,="" and="" microvilli="" were="" sparse.="" the="" condition="" was="" better="" in="" the="" c.="" deserticola="" group.="" mice="" treated="" with="" sti571="" blocker="" confirmed="" that="" blocking="" the="" scf/c-kit="" pathway="" inhibited="" the="" improvement="" of="" constipation="" by="" c.="">
CONCLUSIE
C. deserticola verbeterde ontlasting bij ratten met constipatie en de SCF / C-kit signaleringsroute, een belangrijke schakel van de ICC-functie, speelde een belangrijke rol in de behandeling.
Trefwoorden:Cistanche deserticola; Seniele constipatie; Stamcelfactoren; C-kit
verse cistanche grondstof
INTRODUCTIE
Seniele constipatie (SC) is een van de meest voorkomende chronische gastro-intestinale functies ziekten bij geriatrische patiënten, die cerebrovasculaire voorvallen induceren of verergeren en andere ziekten en ernstige gevolgen voor de levenskwaliteit van de oudere bevolking[1,2]. Volgens de traditionele Chinese geneeskunde, de belangrijkste etiologie en pathogenese van SC zijn gastro-intestinale warmte, tekort aan Yin en Jin, en intestinale ontvochtiging [3,4], terwijl Cistanche deserticola (C. deserticola) de nieren kan verwarmen en de darmen kan ontspannen. Onderzoekers hebben gemeld dat het effect van intestinale motiliteit verbetering en de behandeling van SC is duidelijk, maar het mechanisme ervan is niet verduidelijkt[5,6]. Interstitiële Cajal cellen (ICCs) zijn een speciaal type mesenchymale cellen in het maagdarmkanaal. Activering van de C-kit receptor op het oppervlak van ICCs is nauw verwant aan celproliferatie, differentiatie en functie. ICC's nemen deel aan de pathogenese van velen gastro-intestinale motorische disfuncties[7,8]. Activering van C-kit is afhankelijk van de binding van de ligandstamcelfactor (SCF)[9]. Om het effect en het werkingsmechanisme van C. deserticola op SC, deze studie had tot doel een SC-model vast te stellen bij ratten geïnduceerd door loperidol om de rol van de SCF/C-kit signaleringsroute bij de behandeling van constipatie door C. deserticola.
MATERIALEN EN METHODEN
Experimentele materialen
Proefdieren:De proefdieren waren 48 mannelijke 8-mo-oude SpragueDawley-ratten met een gewicht van 500-550 g; allemaal gekocht bij Changsha Tianqin Biotechnology Co. Ltd. Ratten werden grootgebracht in het dierenlaboratorium van Chongqing Weisiteng Biomedical Technology Co Ltd., gegeven normale dag en nacht licht, eten en drinken. Alle procedures voldeed aan de managementrichtlijnen van de Ethische Commissie van Chongqing Traditionele Chinese Geneeskunde Ziekenhuis.
Primaire reagentia:De primaire reagentia omvatten loperamide (Sigma, St. Louis, MO, Verenigde Staten), C. deserticola van Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine Decoction Co. Ltd., STI571 van Chinese Selleck Co. Ltd., en SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporine 3 (AQP3) en β-actine-antilichamen (Abcam, Cambridge, MA, Verenigde Staten), PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit en Premix Taq™ (Ex Taq™ Versie 2.0) (Takara Co. Ltd., Japan).
cistanche kruiden extract supplementen
Methoden
Sc model voorbereiding en groepering:Om de invloed van verstorende factoren te voorkomen zoals het lichaamsgewicht op de experimentele resultaten, werden de ratten willekeurig gegroepeerd op de methode voor willekeurige blokgroepering. Achtenveertig ratten werden gedurende 1 week adaptief gevoerd, en de ratten waren genummerd in volgorde van gewicht van licht naar zwaar. Volgens de volgorde van het lichaamsgewicht, de ratten werden verdeeld in 12 zones (het gewicht van ratten in elke zone was vergelijkbaar), met 4 ratten in elke zone. De 12 zones werden verdeeld in 4 groepen van 12 (normaal, model, C. deserticola en blokker). Ratten in de modelgroep kregen loperamide (0,0625/100 g, 10 ml/kg) door een maagsonde. De eerste maagsondedosis werd verdubbeld, en het medicijn werd elke dag om 10:00 uur gegeven, eenmaal per dag gedurende 20 opeenvolgende dagen. De de normale groep kreeg dezelfde hoeveelheid normale zoutoplossing door een maagsonde. Daarnaast is de modelgroep werd behandeld met C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) via een maagsonde. De blokkergroep kreeg C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) via een maagsonde en STI571 (25 mg/ml, 1 ml/kg) door intraperitoneale injectie. Tijdens het experiment, lichaam gewicht, ontlastingsgewicht en ontlastingsconditie werden elke 10 d geregistreerd. Geen ongelukken de dood vond plaats bij een van de ratten. Twintig dagen later werden de ratten gedood en de colonweefsel werd verwijderd voor onderzoek en vloeibare stikstofconservering. De de overige onderdelen werden gefixeerd en ingebed.
Histopathologische analyse:De ratten die 's nachts vastten, werden de volgende dag verdoofd door intraperitoneale injectie met 7% chloraalhydraat (5 ml / kg). De buik was geopend om het darmweefsel te scheiden en 8-10 mm van de dikke darm werd verwijderd. De darminhoud werd verwijderd door zachtjes te schudden in voorgekoeld polybutyleen succinaat en gedurende 24 uur gefixeerd in een 4% paraformaldehyde fixatieve oplossing. Conventioneel paraffine-inbedding werd uitgevoerd. Weefselsecties (5 μm) werden verwijderd voor hematoxyline- en eosinekleuring en de histopathologische morfologie werd waargenomen onder een microscoop.
Detectie van expressie van SCF en C-kit door immunohistochemische kleuring:De paraffineweefsels onderzocht door histopathologie hierboven werden gesneden, gerehydrateerd met gesegmenteerd xyleen van was ontdane gradiëntethanol, antigeen verholpen door hitte en verzegeld voor 1 h met geitenserum bij kamertemperatuur. SCF en C-kit primaire antilichamen werden toegevoegd druppelsgewijs en weefsels werden 's nachts bij 4 °C bewaard. Na het spoelen met polybutyleen succinaat, mierikswortelperoxidase werd gedropt om secundair antilichaam te labelen, gespoeld met polybutyleensuccinaat gedurende 5 min, druppel 2,4-diaminoboterzuurchromogeen oplossing, opnieuw verven met hematoxyline, omgekeerde gradiënt alcohol dehydratie, transparant gemaakt door xyleen en een neutrale harsafdichting. Microscopisch waren de kernen paarsblauw en de positieve resultaatproducten waren bruingele of gele deeltjes.
Detectie van expressie van C-kit mRNA in colonweefsel door real-time-kwantitatief polymerasekettingreactie (RT-qPCR):Bevroren darmweefsel van ratten werd gemalen door een homogenisator en 1 ml RNAiso Plus werd toegevoegd. Totaal RNA van colonweefsel was geëxtraheerd door de chloroform/isopropanol-methode en de RNA-kwaliteit werd gedetecteerd door gel elektroforese. Na identificatie door een Bio-Rad gel imager was 1 μg RNA omgekeerd getranscribeerd in cDNA door Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Volgens NCBI-database Gene ID: 64030 was het CDS-gebied van het C-kit-gen gevonden en gecombineerd met NCBI Primer-Blast design Primer-sequentie, die gesynthetiseerd door Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit primer sequence sense strand 5'-AGGTGTACCGTTCCTGTCCC-3', antisense streng 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', β -actin sense streng 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisense streng 5'- CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. PCR-versterking werd uitgevoerd op een Bio-Rad CFX90 Real-Time PCR-instrument. De voorwaarden voor pcr-test waren initieel denaturatie bij 95 °C gedurende 5 minuten, 30 cycli van 95 °C gedurende 30 s, 60 °C gedurende 30 s en 72 °C gedurende 1 min gevolgd door een laatste verlenging bij 72 °C gedurende 10 min. 2 -ΔΔCt (ΔCt = Ct-waarde - β-actine Ct waarde) werd genomen om relatieve genexpressie te analyseren.
Detectie van het eiwitexpressieniveau van Cx43 en AQP3 in colonweefsel door Western blotting:Ongeveer 1 cm bevroren darmweefsel werd verzameld en gelyseerd met RIPA sterke pyrolysevloeistof (100 μL). Het weefsel werd gehomogeniseerd met een glas homogenisator 20 keer en overgebracht naar een centrifugebuis van 1,5 ml. Het supernatant werd geëxtraheerd na centrifugeren bij 12000 tpm bij 4 °C gedurende 5 minuten, en de concentratie van het totale eiwit in het supernatant werd bepaald met behulp van de BCA-methode. We hebben er 25 verwijderd μg gedenatureerd eiwit om natriumdodecylsulfaat-polyacrylamidegelelektroforese uit te voeren en vervolgens de eiwitten in de gel over te brengen naar polyvinylideenfluoride membraan bij een constante stroom van 200 mA en vervolgens afgedicht door 5% magere melkverstopping vloeistof gedurende 2 uur bij kamertemperatuur. Overeenkomstige primaire antilichamen werden verdund met afdichtingsvloeistof, 's nachts geïncubeerd bij 4 °C en vervolgens de membraanweerstand gewassen en voegde tweede antilichamen toe. Na toevoeging van ECL-vloeistof werden ze onder de belichtingsmeter voor de test door middel van een optische dichtheidsanalyse.
Transmissie elektronenmicroscopie:We namen ongeveer 1 cm proximaal colonweefsel, fixeerde het in 2,5% glutaaraldehyde gedurende 24 uur, dehydrateerde het met gegradeerde aceton, ingebed het in Epon812, en sneden 50 nm ultradunne secties op een ultramicrotoom. De secties werden gekleurd met uraniumdioxideacetaat en loodcitraatverfvloeistof in de kamer temperatuur gedurende 10 min. We observeerden colonvilli, epitheelcel mitochondriën en goblet cellen onder een Philips Tecnai-10 transmissie elektronenmicroscoop.
Statistische analyse
SPSS 19.0-software werd gebruikt voor gegevensanalyse en GraphPad Prism8.4-software was gebruikt voor het plotten van de resultaten. De Shapiro-Wilk's test werd gebruikt voor normaliteit testen. Gegevens met een normale verdeling werden weergegeven door gemiddelde ± SD. Foutitems werden gebruikt om de gemiddelde ± SD van hemoglobine na de behandeling weer te geven. De t-toets van de student werd gebruikt voor vergelijking tussen twee groepen. Analyse van variantie werd gebruikt voor vergelijking tussen meerdere groepen. De Student-Newman-Keuls methode werd gebruikt voor vergelijking tussen meerdere groepen in paren, en dunnett's test werd gebruikt om te meten de verschillen tussen elke experimentele groep en controlegroep in volgorde. Geassocieerde gegevens werden gemeten door meerdere tijdspunten en herhaalde metingen er werd een data-analyse van variantie uitgevoerd. Als de sfericiteitstest P > 0,05 aantoonde, herhaalde analyse van de variantie van de meetgegevens werd gebruikt. Als P< 0.05,="" the="" generalized="" estimation="" equation="" was="" taken.="" data="" that="" did="" not="" conform="" to="" a="" normal="" distribution="" were="" represented="" by="" m="" (p25,="" p75),="" and="" the="" kruskal-wallis="" h="" rank-sum="" test="" was="" used="" for="" comparison="" between="" groups.="" the="" χ="" 2="" test="" was="" used="" to="" compare="" between="" groups="" when="" the="" data="" was="" unordered="" data,="" and="" pearson’s="" χ="" 2="" test="" was="" used="" if="" the="" proportion="" of="" cells="" with="" theoretical="" frequency="">< 5="" was="">< 20%.="" if="" the="" proportion="" of="" cells="" with="" theoretical="" frequency="">< 5="" was="" ≥="" 20%,="" fisher’s="" exact="" test="" was="" used.="" p="">< 0.05="" was="" used="" to="" determine="" that="" the="" difference="" was="" statistically="">
Figuur 1 Histopathologische veranderingen in de dikke darm.
RESULTATEN
Algemene voorwaarden
Een dag na de maagsonde van loperamide in vergelijking met de normale groep, het lichaam gewicht en ontlastingsgewicht in de modelgroep waren significant afgenomen (P< 0.05),="" but="" there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" stool="" quality="" score="" (p="">0.05). C. deserticola behandeling in de modelgroep vertraagde de afname van lichaamsgewicht en ontlastingsgewicht (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="">< 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="">< 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="">0,05). Op dag 20 vóór de bemonstering, het lichaamsgewicht van de ratten in het model de groep was significant lager dan die in de normale groep en de kwaliteit van de ontlasting score was significant verhoogd (P< 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p=""><>
Colon histopathologie
Hematoxyline- en eosinekleuring van colonweefsel van ratten is weergegeven in figuur 1. In het normale groep, intestinale villi waren intact, darmslijmvlies was intact en continu, cellen en klieren werden regelmatig gerangschikt. Mucosa en submucosa werden niet geïnfiltreerd door ontstekingscellen en de weefselstructuur was normaal. In de modelgroep, intestinale villi en mucosa werden grotendeels vernietigd, lokale villi werden afgeworpen en losjes gerangschikt, en een deel van de glandulaire structuur verdween. In de C. deserticola-groep was de histopathologische kleuring minder dan die van de modelgroep, maar er was necrose bij sommigen bekercellen. Na intraperitoneale injectie in de blokkergroep, vergeleken met de C. deserticola-groep, was er nog steeds het lokale verlies van intestinale villi en er was breuk en verlies van darmslijmvlies.
Figuur 2 Expressie van stamcelfactor en relatieve optische dichtheidsverhouding in colonweefsel door immunohistochemische detectie.
Detectie van expressie van stamcelfactor en C-kit eiwit door immunohistochemische kleuring
Immunohistochemische kleuring toonde aan dat SCF en C-kit tot expressie kwamen in de dikke darm van de controlegroep. Vergeleken met de controlegroep, expressie van SCF en C-kit in de modelgroep was significant afgenomen (P< 0.05).="" compared="" with="" the="" model="" group,="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" in="" the="" c.="" deserticola="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="">< 0.05).="" there="" was="" no="" difference="" in="" expression="" of="" scf="" and="" c-kit="" between="" the="" blocker="" and="" model="" groups="" (p="">< 0.05,="" figures="" 2="" and="">
RT-qPCR
RT-qPCR toonde aan dat de expressie van C-kit mRNA in de modelgroep significant was lager dan in de normale groep (figuur 4, P< 0.05).="" compared="" with="" the="" model="" group,="" c-kit="" in="" the="" c.="" deserticola="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="">< 0.05).="" there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" c-kit="" mrna="" level="" between="" the="" model="" and="" blocker="" groups="" (p="">0.05). Deze resultaten gaven aan dat de expressie van de C-kit werd aangepast door C. deserticola nam deel aan de verbetering van constipatie en blokkers remden de werkzaamheid van C. deserticola.
cistanche salsa voordelen
Western blotting
Western blotting toonde aan dat AQP3-eiwit op een laag niveau tot expressie kwam in de normale controlegroep, terwijl deze significant was toegenomen in de modelgroep vergeleken met de controlegroep (figuur 5) (P< 0.05).="" expression="" of="" aqp3="" protein="" was="" decreased="" after="" treatment="" with="" c.="" deserticola,="" and="" the="" inhibitory="" effect="" of="" c.="" deserticola="" on="" the="" expression="" of="" aqp3="" was="" inhibited="" by="" blocker="" treatment="" (p="">< 0.05).="" expression="" of="" cx43="" was="" the="" opposite="" of="" that="" of="" aqp3.="" these="" results="" suggested="" that="" the="" pharmacology="" effect="" of="" c.="" deserticola="" on="" rats="" with="" sc="" was="" achieved="" by="" promoting="" the="" expression="" of="" cx43="" and="" inhibiting="" the="" expression="" of="" aqp3="" (figures="">
Transmissie elektronenmicroscopie
Na loperamide-inductie traden mitochondriale zwelling en autofagie op bij sommigen van de colonslijmvliesepitheelcellen in de modelgroep. Het aantal en de lengte van intestinale microvilli namen af en gobletcel pyknosis trad op (figuur 8). Na behandeling met C. deserticola nam het aantal intestinale microvilli toe. De microvilli waren netjes gerangschikt en de structuur was compleet. De bokaalcellen korter lang, onregelmatige morfologie van mitochondriën en ernstige pyknosis van bokaal Cellen.
Figuur 3 Expressie van C-kit en relatieve optische dichtheidsverhouding in colonweefsel door immunohistochemische detectie.
DISCUSSIE
Constipatie komt vaak voor bij ouderen en is een van de meest voorkomende symptomen die van invloed zijn op de gezondheidstoestand en de kwaliteit van leven van ouderen[10,11]. In termen van de traditionele Chinese geneeskunde, Bai et al[12] geloofden dat de basispathogenese van SC was de disfunctie van de geleidingsfunctie van de dikke darm, seniel lichaamsfalen, geleidelijk verlies van lever- en nierfuncties, gebrek aan qi en bloed en verlies van lichaamsvocht, wat leidde tot droge ontlasting, resulterend in constipatie[13]. SC zet druk op patiënten en hun families in vele aspecten, en het is belangrijk om de pathogenese ervan te onderzoeken.
C. deserticola heeft de functies van het tonificeren van nier Yang, ten voordele van bloed, en regulering van de immuniteit van het lichaam[14]. C. deserticola en Chinees kruidenafkooksel bevattende C. deserticola zijn op grote schaal gebruikt bij de behandeling van constipatie, en de klinische effect is opmerkelijk. Du et al[15] gevonden in een rattenmodel van Yang-deficiëntie en constipatie dat C. deserticola de contractieamplitude van geïsoleerde dikke darm verbeterde, versterkte de contractiliteit van het darmkanaal en keerde het niveau van gastro-intestinale hormonen naar normaal. Bovendien verbetert voedingsvezel van C. deserticola, een verwerkend bijproduct van C. deserticola, het waterhoudend vermogen van uitwerpselen en heeft het voordeel van een lage dosis en een goed effect in voedende darmen en verbetering van de ontlasting[16]. Onze studie wees uit dat de behandeling met C. deserticola de fecale vocht en colon histopathologie van ratten met constipatie.
ICS's worden gevonden in het hele darmkanaal en spelen een vitale rol in de neurale controle van de darmbeweging als pacemakers en intestinale zenuwtransmissie[17]. Proto-oncogen codering receptor tyrosine kinase, C-kit, wordt uitgedrukt door ICCs, en SCF is een ligand van C-kit[18]. Het SCF/C-kit systeem is cruciaal bij de ontwikkeling van ICC's. De SCF/C-kit signaleringsroute is geanalyseerd tijdens de behandeling van langzame overdracht constipatie bij ratten door acupunctuur[19]. Elektroacupunctuur bij Tianshu point verhoogde het aantal colon-ICS bij met ACK2 behandelde muizen, upregulated expressie van SCF- en C-kit-eiwitten en keerden het fenotype van ICC om. Recept voor verkwikkende qi en milt kunnen de expressie van ICC in colonweefsel verhogen en upreguleer expressie van C-kit en SCF mRNA, waardoor constipatie wordt verbeterd symptomen[20]. In onze studie toonde immunohistochemie aan dat C. deserticola significant geüpreguleerde expressie van SCF- en C-kit-eiwit in een rattenmodel van SC, en RT-qPCR toonde aan dat C. deserticola de expressie van C-kit aanzienlijk upreguleerde Mrna. C-kit blocker remde de upregulatie van SCF en C-kit expressie geïnduceerd door C. deserticola.
Fecaal watergehalte en colonwatertransport zijn nauw verwant aan AQP's, die spelen een belangrijke rol in het darmwatermetabolisme[21]. In een studie van ratten met langzame transport constipatie, Ontlastingsafkooksel aanzienlijk verbeterde constipatie symptomen door het reguleren van intestinale waterabsorptie door het downreguleren van AQP3 en AQP4[22]. In een rattenmodel van functionele constipatie, het behandelingsmechanisme van Orale Xiaofu Tongjie-vloeistof voor functionele constipatie kan worden gerealiseerd door de expressie van vasoactief intestinaal polypeptide en AQP3 in de dikke darm te reguleren[23]. Kloof juncties spelen een essentiële rol bij het bemiddelen van de synchrone contractie van gladde spiercellen. Cx43 is het belangrijkste eiwit tijdens dat proces[24]. Verlies van Cx43 expressie kan gedeeltelijk verantwoordelijk zijn voor motorische disfunctie van gladde spieren[25]. Herstel van de netwerkstructuur van het intestinale zenuwstelsel bij ratten met langzame doorvoer constipatie kan de expressie van Cx43 etc. en constipatie symptomen verbeteren[26]. Deze resultaten geven aan dat de verhoogde expressie van AQP3 fecaal water vermindert inhoud, leidend tot constipatie, wat een belangrijk mechanisme van constipatie. Expressie van Cx43 kan verband houden met contractie van darmgladd spier en verminder het optreden van constipatie. In onze studie, western blotting toonde aan dat de Cx43-expressie verhoogd was en dat de AQP3-expressie werd geremd door C. deserticola behandeling, wat resulteerde in verhoogde gladde spiercontractie en verminderde waterabsorptie en blokkerbehandeling draaiden deze effecten om.
Voor meer informatie, klik hier.
CONCLUSIE
Kortom, C. deserticola kan de expressie van AQP3 remmen en de expressie van Cx43 via de SCF/C-kit-route, waardoor constipatie wordt verbeterd die wordt veroorzaakt door loperamine en het verminderen van darmweefselschade bij oudere ratten. Deze studie leverde een goede theoretische basis voor het klinische gebruik van C. deserticola.
