Desertliving Cistanche anti-verouderingsactie: een vergelijkende studie
Mar 11, 2022
Contactpersoon: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
XU Hui, WEI Xiao- dong, OU Qin Li Ying Xu Xiao- Xia, WANG Jing- tao9TIAN Guo- Zhong
(Jiamusi Universiteit» Jiamusi 154007, China)Abstract
Doel: onderzoek doen naar de leeftijdsgerelateerde veranderingen inanti-oxidatievan mitochondria van rattenlever geïnduceerd door D-gal en de anti-verouderingseffecten vanwoestijnlevende cistancheen zijn waterextract, ethanoloplossing en polysacharidecomponenten op het niveau van mitochondriën. Methoden We gebruikten de door D-gal geïnduceerde ouder wordende rat als onderzoeksmonster. We maten de Ca2 plus -ATPase-activiteit in rattenlever en bepaalden het MDA-gehalte, membraanvloeibaarheid en PLA2-activiteit in mitochondriën van rattenlever in een poging om de effecten van verschillende componenten van woestijnlevende cistanche op de bovengenoemde indexen te bestuderen. Resultaten: Het MDA-gehalte en de PLA2-activiteit waren aanzienlijk verminderd, en de Ca2 plus-ATPase-activiteit en de vloeibaarheid van het membraan waren duidelijk verhoogd door het waterextract, de ethanoloplossing en de polysaccharidecomponenten aan de in de woestijn levende cistanchegroepen te geven (P<2 0.="" 05="">
trefwoorden:woestijnlevende cistanche; anti-veroudering; mitochondrion
Cistanche deserticola heeft veel effecten, klik hier voor meer informatie
De traditionele Chinese geneeskundeCistancheis de droge vlezige stengel van Cistanche, die de functies heeft van voedende nier-yang, voedende essentie en bloed, en het hydrateren van de darmen. Het heeft een bepaald farmacologisch effect op verschillende systeemfuncties van het lichaam. Het is een traditioneel Chinees medicijn voor tonic. Experimenten hebben bevestigd dat het anti-verouderingseffecten heeft, maar de vergelijking van deanti-aging effectenvan verschillende componenten van Cistanche en het onderzoek naar de anti-oxidatieve schade van mitochondriën op het niveau van mitochondriën en het mechanisme van verbetering van de mitochondriale functie en mechanisme zijn niet gerapporteerd in binnen- of buitenland. Dit experiment bestudeert deanti-aging effectenvan de verschillende componenten van Cistanche en biedt de theoretische en experimentele basis voor het bestuderen van het anti-verouderingsmechanisme van het verouderingsmechanisme en de componenten van de Chinese kruidengeneeskunde.
Anti-verouderingseffecten van cistanche
1 Experimenteel materiaal
1.1 Proefdieren
50 zuivere Wistar-ratten, lichaamsgewicht 180-210g, 3-4 maanden oud, half mannelijk en half mannelijk, gekocht bij het Experimental Animal Centre van Jiamusi University
1.2 Experimentele medicijnen
Cistanchewerd gekocht van Jiamusi Medicinal Material Company. Neem 400 g ruw medicijn, laat het 30 minuten in water weken en extraheer het tweemaal met ultrageluid. Na elke 30 minuten, na filtratie onder afzuiging, wordt het filtraat gecombineerd en geconcentreerd tot een equivalent van 0,5 g ruw geneesmiddel per milliliter, en vervolgens opgeslagen voor gebruik; vervolgens wordt 400 g van het ruwe geneesmiddel bereid volgens de bovenstaande methode om een waterig extract te verkrijgen. Herhaalde precipitatie door toevoeging van ethanol volgens de literatuurmethode, afzuigfiltratie om het precipitaat te scheiden, het precipitaat te wassen met absolute ethanol, aceton, ether, drogen en constant gewicht te verkrijgenCistanche deserticolapolysacharide, opslag bij 4C voor later gebruik; het in ethanol opgeloste deel werd onder verminderde druk geconcentreerd tot alcoholvrij. Smaak, bewaar bij 4 graden, breng het tot de vereiste concentratie voor gebruik.
1.3 Belangrijkste reagentia en instrumentreagentia:
DPH werd gekocht bij Sigma, HEPES werd gekocht bij Amreseo en NADH werd gekocht bij Amresco. MDA-testkit en Ca-ATPase-testkit werden gekocht bij Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute en D-galactose werd gekocht bij Shanghai Second Reagent Factory. Apparatuur: Shimadzu RF-5000 fluorescentiespectrofotometer, Sartorius PP-25 hooggevoelige PH-meter, GL-21M hogesnelheidsvriescentrifuge, RE-52A roterende verdamper, SHB- Ⅲ multifunctionele vacuümpomp met circulerend water.
Cistanche deserticolaextract
2 Experimentele methode
2.1 Diergeneeskunde en -behandeling
Vijftig ratten werden willekeurig verdeeld in een jonge controlegroep en een D-galactose-modelgroep. Het model werd gegeven aan deCistanchewaterextractgroep, het model werd gegeven aan Cistanche cistanche alcoholoplosbare groepen, en het model werd gegeven aan deCistanche polysacharidegroep, elke groep was 1oN. Alle ratten worden in aparte kooien in dezelfde kamer gehouden. De binnentemperatuur is 16-22C en de luchtvochtigheid is 50-65 procent. Ze eten en drinken normaal elke dag. Natuurlijk licht. De jonge controlegroep werd elke ochtend subcutaan met zoutoplossing geïnjecteerd, de dosis was gelijk aan de dosis van een gal in andere toedieningsgroepen en kreeg tegelijkertijd warm gekookt water. In de verouderingsmodelgroep werd D-gal elke ochtend subcutaan geïnjecteerd in een dosis van 50 mg/kg en tegelijkertijd gevuld met warm gekookt water. Het model geeft de Cistanche-waterextractgroep (aangeduid als de waterextractgroep) elke ochtend subcutaan D-gal in een dosis van 50 mg/kg en dient tegelijkertijd het cistanchewaterextract toe in een ruwe hoeveelheid geneesmiddel van 2 g/kg. kg. Het model gaf Cistanche in alcohol oplosbare groep (afgekort als in alcohol oplosbare groep) elke dag 's morgens en' s middags in een dosis van 50 mg/kg subcutane injectie van D-gal, tegelijkertijd de ruwe hoeveelheid geneesmiddel 2 g/kg water extract vancistanche water extractin alcohol oplosbare componenten. Het model gaf deCistanche polysacharidegroep (aangeduid als de polysacharidegroep) subcutane injectie van D-gal in een dosis van 50 mg/kg elke ochtend. Dien tegelijkertijd Cistanche Polysacchariden toe in een hoeveelheid van 2 g/kg van het ruwe geneesmiddel. Na continue toediening van 6N werden de dieren ter dood gebracht. Neem materiaal.
2.2 Indexmeting
Neem 1g van de lever. Spoel af met koud zout water, droog af en weeg. Voeg 9 keer het volume voorgekoeld homogenisatiemedium toe (pH 7,4, 0.01mol/L Tris-HC1, 0.0001mol/LEDTA{{11 }}Na, 0,01mol/L sucrose, 0,8 natriumchlorideoplossing), elektrisch. De homogenisator maalt volledig om leverweefselhomogenaat te verkrijgen, en het leverweefselhomogenaat wordt gedurende 10 minuten bij 3000r/regen gecentrifugeerd. Neem het supernatant en vries het in om te testen. Bereid leverhomogenaat volgens de bovenstaande methode, neem 10 procent leverweefselhomogenaat en centrifugeer bij 2000r/min gedurende 10 minuten, gooi het neerslag weg, neem het supernatant 10000r/regen en centrifugeer gedurende 15 minuten in een gekoelde centrifuge met hoge snelheid, het neerslag is mitochondriën, en de mitochondriën zijn gesuspendeerd in Medium. Voor indexbepaling. Meet de Ca-ATPase-activiteit van leverweefsel en het gehalte aan malondialdehyde (MDA) in levermitochondriën volgens de instructies van de testkit. De lipase A-activiteit en de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan van de lever werden gemeten volgens de literatuur.
2.3 Statistische analyse
De experimentele gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± standaarddeviatie (± s), en SPSS11.5 statistische software wordt gebruikt voor statistische analyse.
Effecten van cistanche: anti-aging
3. Resultaten
In de verouderingsmodelgroep namen de activiteit van Ca-ATPase in de lever en de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan van de lever af en nam het gehalte aan MDA- en PLA-activiteit van levermitochondriën toe. De verschillende onderdelen vanCistanchekan de Ca-ATPase-activiteit van de lever bij ouder wordende modelratten, de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan van de lever aanzienlijk verhogen en het MDA-gehalte en de PLA-activiteit van levermitochondriën aanzienlijk verminderen. Het effect van Cistanche-waterextract is duidelijker. Zie Tabel 1.
4. Discussie
In recente jaren. Onderzoek heeft uitgewezen dat mitochondriale oxidatieve schade en functionele veranderingen een belangrijke rol spelen bij het verouderingsproces van cellen, weefsels en organen]. De theorie van veroudering door vrije radicalen is altijd een belangrijke theorie geweest onder de vele verouderingstheorieën, en de hypothese van "vrije radicalen-mitochondriale schade" over veroudering is momenteel algemeen aanvaard [5]. Het verrijkt de theorie van vrije radicalen verder. Deze hypothese is van mening dat mitochondriën de belangrijkste zuurstofverbruikende delen van cellen zijn en de belangrijkste plaatsen voor het genereren van vrije radicalen. Daarom zijn ze ook de doelwitdelen van vrije radicalen. Daarom zijn de mitochondriën, een organel, een belangrijke foerageer- en traditionele Chinese geneeskunde. De studie van de anti-verouderingsmechanismen is van groot belang om de essentie van veroudering bloot te leggen. Cistanche is een tonisch Chinees medicijn. Het anti-verouderingseffect is bevestigd, maar het houdt verband met het anti-verouderingsmechanisme op mitochondriaal niveau en het effect van verschillende componenten vanCistanche over het anti-aging effectvan mitochondriën. Onderzoek, er is geen melding in binnen- en buitenland. In dit experiment werden Cistanche-waterextract, in alcohol oplosbare componenten en polysachariden gebruikt als toepassingsfactoren om het anti-verouderingsmechanisme van verschillende componenten vancistancheop mitochondriaal niveau. Veel experimentele bewijzen tonen aan dat modelratten met veroudering van D-galactose een reeks veranderingen hebben die vergelijkbaar zijn met natuurlijke veroudering L6]. Bij veroudering neemt de SOD-activiteit in de cel, vooral de mitochondriën, af. MDA-gehalte verhoogd.]. De resultaten van dit experiment tonen aan dat het gehalte aan malondialdehyde (MDA) in de mitochondriën in de lever van ouder wordende ratten aanzienlijk is toegenomen, wat erop wijst dat de vermindering van de opruimingssnelheid van antioxidanten tijdens het ouder worden de antioxidantcapaciteit van het lichaam vermindert, wat op zijn beurt de productie en eliminatie van reactieve zuurstofsoorten en andere vrije radicalen uit balans. Als gevolg hiervan hopen reactieve zuurstofsoorten zich op in het lichaam en beschadigen ze de cellen. Bovendien heeft de schade aan cellen veroorzaakt door calciumoverbelasting hoofdzakelijk twee aspecten: ① ontkoppeling van mitochondriale oxidatieve fosforylering en remming van celademhaling; ② activering van fosfolipase c en A., A. Dit experiment bevestigde dat de activiteit van Ca-ATPase in het leverweefsel van ouder wordende ratten afnam, en de levermitochondriën vertoonden PLA. De toename in activiteit geeft aan dat de afname van Ca-ATPase-activiteit de concentratie van cytosolisch Ca kan verhogen, wat leidt tot een toename van mitochondriale PLAz-activiteit. PLA: Het is een sleutelenzym in veel biochemische processen. Het kan zijn eigen fosfolipiden hydrolyseren om de kwetsbaarheid van het mitochondriale membraanraamwerk te vergroten, de afgifte van arachidonzuur te verhogen en een groot aantal vrije radicalen te genereren, wat leidt tot een toename van de membraanpermeabiliteit en een grote instroom van calciumionen. Activeer PLA L8] en creëer zo een vicieuze cirkel. Bovendien kan de toename in PLA-activiteit de samenstelling van membraanfosfolipiden veranderen en de vloeibaarheid van het membraan beïnvloeden. Het handhaven van de juiste vloeibaarheid van het membraan is essentieel voor elektronentransport, protonentransport en oxidatieve fosforylering. In deze studie werd de fluorescentiepolarisatiemethode gebruikt om te ontdekken dat de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan van de lever van ouder wordende ratten significant lager was dan die van jonge ratten, wat verder bevestigt dat de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan verandert tijdens het ouder worden.
Dit experiment toonde aan dat het waterextract van Cistanche deserticola, de in alcohol oplosbare componenten van het waterextract van Cistanche deserticola en de polysachariden van Cistanche deserticola verbeterden allemaal de activiteit van Ca-ATPase in de lever en de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan in verschillende mate, en verminderden het gehalte aan MDA en PLA: activiteit van lever mitochondriën. Het bewijst dat de verschillende componenten van Cistanche anti-aging effecten hebben. Het mechanisme kan te wijten zijn aan de verbetering van de antioxidantcapaciteit van elke toedieningsgroep, die zorgt voor de activiteit van Ca en zelfs ATPase, zodat de calciumionconcentratie binnen en buiten de levercellen een normaal niveau behoudt, waardoor de toename van mitochondriaal PLA wordt vermeden activiteit als gevolg van intracellulaire calciumoverbelasting. Hoog vermindert daardoor de invloed van verschillende factoren die de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan verminderen, houdt de vloeibaarheid van het mitochondriale membraan normaal en zorgt voor de functie van de mitochondriën. De resultaten toonden ook aan dat het waterige Cistanche-extract de indicatoren van de medicatiegroep kan herstellen op het niveau van de jonge groep, en het effect op de ouder wordende modelgroep is beter dan andere componenten. De literatuur meldde dat Cistanche deserticola polysaccharide de SOD-activiteit van longweefsel kan verhogen en het MDA-gehalte kan verlagen [9]. Xue Dejun bewees ook dat Cistanche deserticola polysaccharide serum SoD-activiteit kan activeren en hartspierlipofuscine kan verminderen_]. Dit experiment laat zien datCistanche deserticolapolysacharide heeft een anti-aging effect. Dit kan zijn omdat decistanche deserticolapolysacharide kan de immuunfunctie verbeteren, SOD activeren om direct of indirect vrije radicalen op te ruimen, de schade van vrije radicalen aan mitochondriën en de hele cel verminderen en zo een anti-verouderingseffect hebben. De in alcohol oplosbare componenten van Cistanche-waterextract kunnen de immuniteit en androgene hormoonachtige effecten verbeteren [1, uit dit experiment bleek dat het ook anti-verouderingseffecten heeft, wat te wijten kan zijn aan de anti-verouderingseffecten van de flavonoïden en glycosiden in het. Het anti-aging effect vanCistanche-waterextractis beter dan andere ingrediënten, wat aangeeft dat het anti-verouderingseffect van Cistanche-waterextract het resultaat is van het synergetische effect van de twee componenten. Tegelijkertijd bevat Cistanche anorganische elementen zoals Fe, Zn, Cu, die allemaal nodig zijn voor het lichaam. Sporenelementen, Fe is het actieve centrum of activator van enzymen, eiwitten, hormonen en vitamines; Zn kan verschillende enzymactiviteiten behouden; Cu is het hoofdbestanddeel van verschillende metaalenzymen en is een effectieve katalysator voor het redoxsysteem van het lichaam. Het is duidelijk dat het anti-verouderingseffect van Cistanche afhankelijk is van de organische actieve componenten (polysacchariden, enz.) en anorganische elementen om samen te werken.
Voordeel van cistanche-extract: anti-aging
Referenties :
[1] Sheng Wei, Gao Leining. Extractie, scheiding en fysische en chemische analyse van Cistanche-polysacchariden [J]. Chinese natie Civil Medicine Journal, 2001, 50: 166
[2] Chen Sifeng, Wu Zhongli. Een eenvoudige en snelle methode om fosfolipase A2 in lichaamsvloeistoffen en weefsels te bepalen [J]. tweede Journal of Military Medical University, 1989, l0(3): 254-256
[3] Nie Songqing, Bo Huiqing, Lin Kechun. Het effect van royal essence op de vloeibaarheid van het erytrocytmembraan bij ratten [J]. Journal of Beijing Medical College, 1983, 15(4): 249-252
[4] AmesBN, ShigenagaMK, HagenTM. Mitochondriaal verval bij veroudering [-J]. Biochim Biophys Acta, 1995, 1271(i): 165-170
[5] ZorovDB. Mitochondriale schade als bron van ziekte en veroudering: een strategie om deze te bestrijden [J]. Biochim Biophys Acta, 1996, l275 (1— 2): lO-15
[6]Zhang Xi, Li Wenbin, Zhang Binglie. D galactose subacute vergiftiging ratten veroudering biochemische veranderingen Verandering [J]. Chinees tijdschrift voor farmacologie en toxicologie, 1990, 4 (4): 309-310
[7] Zon Yun. Wang Dejun, Zhu Jin, enz. Cistanche cistanche op longeiwitgehalte en antioxidatie van ouder wordende muizen De impact van functionele relaties [J]. Chinees farmacologiebulletin. 2001, 17(I): 101-103
[8] Xue Dejun, Zhang Ming, Wu Xiaohong. Wacht. Onderzoek naar de anti-aging actieve componenten van Cistanche [J]. middelste National Journal of Traditional Chinese Medicine, 1995, 2O(11): 687
[9] He Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen, enz. Studie over deeffect van cistancheover het voeden van de nier en het versterken van yang voor en na verwerking [J]. Chinees tijdschrift voor traditionele Chinese geneeskunde, i996, 21 (9): 534-537
