3.2. Effect van mediatorconcentratie op melanine-ontkleuring door LMS

Volgens relevante studies,cistancheis een veel voorkomend kruid dat bekend staat als "het wonderkruid dat het leven verlengt". Het hoofdbestanddeel is cistanoside, dat verschillende effecten heeft, zoalsAntioxidant, ontstekingsremmend, Enbevordering van de immuunfunctie. Het mechanisme tussen cistanche enbleken van de huidligt in het antioxiderende effect van cistanche-glycosiden. Melanine in de menselijke huid wordt geproduceerd door de oxidatie van tyrosine gekatalyseerd door tyrosinase, en de oxidatiereactie vereist de deelname van zuurstof, dus de zuurstofvrije radicalen in het lichaam worden een belangrijke factor die de melanineproductie beïnvloedt. Cistanche bevatcistanoside, wat een antioxidant is en dus de vorming van vrije radicalen in het lichaam kan verminderenremming van de productie van melanine.

Klik op Waar kan ik Cistanche kopen

Voor meer informatie:

david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501

Het effect van de mediatorconcentratie op de ontkleuringsopbrengst door LMS werd onderzocht (Figuur 3). De LMS met lacT en 100 µM acetosyringone vertoonde de hoogste ontkleuringsopbrengst, die 4,{3} keer hoger was dan die zonder de mediator. De LMS met lacM en 100 µM acetosyringon vertoonde de hoogste ontkleuringsopbrengst, die 6,{6} maal hoger was dan die zonder de mediator. Wanneer lacT werd gebruikt voor LMS, namen de ontkleuringsopbrengsten met behulp van acetosyringon, syringaldehyde en acetovanillon toe met toenemende concentratie en bereikten vervolgens een maximum bij concentraties van respectievelijk 100, 50 en 200 μM (Figuur 3a). Acetosyringon en syringaldehyde verbeterden efficiënter de ontkleuringsopbrengst bij een lagere concentratie dan acetovanillon. Wanneer kant werd gebruikt voor LMS, leek het effect van mediatorconcentratie erg op het resultaat dat werd verkregen met lacT. De ontkleuringsopbrengsten met behulp van acetosyringon, syringaldehyde en acetovanillon bereikten een maximum bij concentraties van respectievelijk 100, 50 en 200 µM (Figuur 3b). Een mediatorconcentratie van meer dan 200 uM verlaagde significant de ontkleuringsopbrengst (gegevens niet getoond). Daarom werd een mediator van 100 µM gekozen als de optimale concentratie voor de volgende experimenten. Lloret et al. rapporteerden dat de optimale mediatorconcentratie moet worden gebruikt omdat laccase kan worden geïnactiveerd door een hoge concentratie mediator [6], terwijl Khammuang en Sarnthima rapporteerden dat de melanine-ontkleuringsactiviteit van LMS met gebruik van vanilline en vanillinezuur niet significant werd beïnvloed door hoge concentraties van maximaal tot 10 mM [28]. De optimale mediatorconcentratie kan afhankelijk zijn van het type mediator en de doelverbinding van de door laccase gekatalyseerde reactie [5,6]. Wanneer de LMS de afbraak van isoproturon katalyseerde, nam de afbraakopbrengst toe met toenemende concentraties acetosyringon, terwijl de concentraties vanilline en syringaldehyde niet gerelateerd waren aan de afbraakopbrengst [7].

3.3. Cytotoxiciteit van natuurlijke bemiddelaars

Om natuurlijke bemiddelaars te gebruiken als cosmetische ingrediënten die de huid witter maken, werd de cytotoxiciteit van bemiddelaars (acetosyringon, syringaldehyde en acetovanillon) onderzocht met behulp van de B16F10-melanoomcellijn. De natuurlijke mediatoren werden op de gekweekte cellen behandeld en de levensvatbaarheid van de cellen werd gemeten met de NR-assay. Wanneer mediatoren van meer dan 22 mM aan de gekweekte cellen werden toegevoegd, verminderden ze de levensvatbaarheid van de cellen aanzienlijk (Figuur 4). Wanneer de concentratie van de mediator hoger was dan 5 mM, nam de levensvatbaarheid van de cellen toe in de volgende volgorde: acetosyringon > syringaldehyde > acetovanillon. Bovendien vertoonden mediatoren van minder dan 1 mM geen remmend effect op B16F10-melanoomcellen. Deze resultaten geven aan dat de optimale mediatorconcentratie van 0,1 mM die in dit werk werd gebruikt, verwaarloosbare cytotoxiciteit vertoonde.

3.4. Het effect van pH op melanine-ontkleuring door LMS

Figuur 5 toont het effect van de pH op de LMS-ontkleuringsopbrengst. Het ontbreken van een bemiddelaar vertoonde de hoogste ontkleuringsopbrengst bij pH 4, en de ontkleuringsopbrengst nam af met toenemende pH (Figuur 5a). Dit profiel is vergelijkbaar met het effect van pH op laccase-gekatalyseerde ABTS-oxidatie [37]. Over het algemeen heeft lacT een optimale activiteit bij zure omstandigheden van minder dan pH 5, en de activiteit neemt af met een verhoging van de pH. Bij hogere pH combineren de hydroxide-anionen met de T2/T3-kopers van lacT en verstoren de elektronenoverdracht en veroorzaken een afname van de katalytische activiteit. Het effect van pH op LMS is echter gecompliceerder en kan worden beïnvloed door de activiteit en stabiliteit van laccase en geoxideerde mediatoren [1,7]. De ontkleuringsopbrengst van lacT met acetosyringon nam toe met toenemende pH tot 7 (41 procent). De optimale ontkleuringsopbrengsten van lacT met syringaldehyde en acetovanillon waren respectievelijk 32 procent en 42 procent bij pH 6. Hoewel gebrek aan lagere katalytische activiteit bij hogere pH liet zien, nam melanine-ontkleuring toe met toenemende pH. Deze resultaten kunnen worden verklaard door de hoge activiteit en stabiliteit van de geoxideerde vormen van natuurlijke bemiddelaars bij hoge pH.

De lacM zonder mediator vertoonde de hoogste ontkleuringsopbrengst bij pH 6, en lacM vertoonde een lagere ontkleuringsopbrengst in alle pH-bereiken in vergelijking met de laatste. De optimale pH van kant was ongeveer 6 voor de oxidatie van ABTS [38]. Daarom was de optimale pH van lacM zonder mediator vergelijkbaar met die van lacM voor ABTS-oxidatie. Wanneer de natuurlijke bemiddelaars werden gebruikt met lacM, waren de ontkleuringsopbrengsten sterk afhankelijk van de reactie-pH (Figuur 5b). De ontkleuringsopbrengst van lacM met natuurlijke bemiddelaars nam toe met toenemende pH tot pH 7. De maximale ontkleuringsopbrengsten van lacM met acetosyringone, syringaldehyde en acetovanillone waren respectievelijk 40 procent, 32 procent en 33 procent bij pH 7. De hoge melanine Ontkleuringsactiviteit bij neutrale pH maakt het gebruik van LMS met natuurlijke mediatoren beter voor de huid omdat het optimale pH-bereik vergelijkbaar is met dat van een normale huid (ongeveer 5,5).

3.5. Kinetische studie van melanine-ontkleuring door LMS

Een kinetische studie van melanine-ontkleuring door LMS met acetosyringon werd kwantitatief onderzocht om het versterkende effect van natuurlijke mediatoren te begrijpen (Tabel 1). De Km-waarde van lacT zonder een mediator was 10,{2}}maal hoger dan die van lacT met acetosyringone. Dit betekent dat de affiniteit voor melanine sterk werd verbeterd door het gebruik van een mediator. De cat-waarde van lacT met de mediator was 22,6-maal hoger dan die van lacT zonder mediator. Dit geeft aan dat de ontkleuringssnelheid aanzienlijk werd verhoogd door de bemiddelaar. De specificiteitsconstante (kcat/Km) van lacT werd 247 keer verhoogd door acetosyringone als mediator te gebruiken. Deze resultaten laten duidelijk zien dat de beperkte toegang van melanine tot de actieve plaats van laccase werd overwonnen door acetosyringon. De Km-waarde van lacM zonder mediator was 2,4-maal hoger dan die van lacM met acetosyringon. De affiniteit van melanine kan worden verbeterd door een mediator te gebruiken. Het verhogend effect op de melanine-affiniteit van lacM met acetosyringon was echter lager dan dat van lacT met acetosyringon. De kattenwaarde van kant was ongeveer 26 procent van die van de laatste tijd. De veter zonder mediator vertoonde een zeer lage activiteit voor melanine-ontkleuring. De cat-waarde van lacM met de mediator was echter 161-voudig hoger dan die van lacM zonder mediator. De ontkleuringssnelheid door lacM werd aanzienlijk verhoogd door de bemiddelaar. Daarom was de specificiteitsconstante van kant 334 keer verbeterd met behulp van acetosyringon als bemiddelaar. Deze resultaten demonstreren het nut van acetosyringon als bemiddelaar van laccases voor melanine-ontkleuring.

3.6. Ontkleuring van de melanine/cellulosefilm door LMS

Een hydrogelfilm van melanine/cellulosecomposiet werd vervaardigd om melanine in de huid na te bootsen. De melanine/cellulose-hydrogelfilm zou kunnen worden bereid door het gezamenlijk oplossen van melanine en cellulose in [Emim][Ac], gevolgd door regeneratie met water. De verkregen film vertoonde een transparante donkerbruine kleur. De ontkleuring van de melanine/cellulose-hydrogelfilm werd uitgevoerd door lacM met acetosyringon in 0.1 M citroenzuurfosfaatbuffer (pH 5,5). De kleur van de melanine/cellulosefilm veranderde van donkerbruin in lichtbruin na de door LMS gekatalyseerde reactie (Figuur 6a). Toen de absorptie van de melanine / cellulosefilm werd gemeten na de ontkleuringsreactie in het bereik van 400-700 nm, nam de absorptie van de melanine / cellulosefilm aanzienlijk af over het gehele golflengtebereik (figuur 6b). De ontkleuring van melanine werd ook bevestigd door het meten van kleurwaarden (L*, a* en b*) van de melanine/cellulosefilm met behulp van een colorimeter. De ∆L-, ∆E-, YI- en WI-waarden werden berekend op basis van de kleurparameters (tabel 2). Na de melanine ontkleuringsreactie door LMS was de L* (lichtheid) waarde van de melanine/cellulose film aanzienlijk verhoogd, terwijl de a* (roodheid) en b* (geelheid) waarden iets afnamen. De ∆E-waarde die het kleurverschil tussen de monsters vertegenwoordigt, was 31,1. Een ∆E-waarde groter dan 12 gaf aan dat de kleuren van de film voor en na de reactie behoorlijk van elkaar verschillen [31]. De geelheid (YI) van de film nam af van 209 naar 92 na de ontkleuringsreactie, terwijl de witheid (WI) toenam van 16 naar 43. Łopusiewicz et al. meldde dat de YI van poly(melkzuur)/melaninefilm toenam met toenemend melaninegehalte, terwijl de WI van de film afnam [32]. Daarom verklaren de veranderingen in de kleureigenschappen kwantitatief de ontkleuring van melanine in de melanine/cellulose-hydrogelfilm. Deze resultaten tonen aan dat LMS melanine efficiënt kan ontkleuren in een cellulose-hydrogelomgeving.

3.7. Ontkleuring van natuurlijke melanine geproduceerd door melanoomcellen

Natuurlijke melanine in de menselijke huid is verdeeld in eumelanine (zwart tot bruin) en pheomelanine (geel tot rood), terwijl de synthetische melanine bereid door de oxidatie van tyrosine met waterstofperoxide een analoog is van eumelanine. Daarom werd in dit werk ook de ontkleuring van natuurlijke melanine geproduceerd door melanoomcellen onderzocht. De ontkleuring van synthetische melanine en natuurlijke melanine door LMS met kant en acetosyringon werd vergeleken door de absorptie te meten in het bereik van 400-700 nm (figuur 7). De absorptie van synthetisch melanine nam snel af met toenemende reactietijd bij alle golflengten. De absorptie van ontkleurde natuurlijke melanine vertoonde echter een ander patroon in vergelijking met die van ontkleurde synthetische melanine. De absorptie van ontkleurd natuurlijk melanine nam af bij golflengten van meer dan 450 nm, terwijl de absorptie toenam bij golflengten van minder dan 450 nm. Meer studies zijn nodig om de toename van de absorptie van ontkleurde natuurlijke melanine te begrijpen.

4. Conclusies

In deze studie werd melanine-ontkleuring bereikt door gebruik te maken van het "O2 / laccase / mediator" -systeem, aangezien laccase een lage katalytische activiteit vertoonde voor de directe oxidatie van melanine vanwege het lage redoxpotentieel en de beperkte toegang van melanine tot de actieve plaats van laccase. Zeven soorten natuurlijke bemiddelaars werden met succes gebruikt om synthetische bemiddelaars (HOBt) voor melanine-ontkleuring te vervangen door LMS met behulp van lacT en kant. Onder de geteste natuurlijke bemiddelaars vertoonden acetosyringon en syringaldehyde, die twee methoxygroepen bevatten, hoge ontkleuringssnelheden en opbrengsten. Acetovanillon met één methoxygroep en één ketongroep vertoonde ook een hoog ontkleuringsrendement in de evenwichtstoestand. De LMS met natuurlijke mediatoren vertoonde een hoge ontkleuringsactiviteit bij de pH van normale huid en de cytotoxiciteit van natuurlijke mediatoren was erg laag. Een kinetische studie van LMS waarbij acetosyringon werd gebruikt voor melanine-ontkleuring toonde aan dat acetosyringon op efficiënte wijze de beperkingen van lacT en lacM overwon door de affiniteit voor melanine en ontkleuringsactiviteit te vergroten. LMS met acetosyringon ontkleurde de melanine die aanwezig is in de cellulose-hydrogelfilm, die de huid nabootst. Bovendien kon LMS met acetosyringon niet alleen synthetische eumelanine-analogen ontkleuren die zijn bereid door de oxidatie van tyrosine, maar ook natuurlijke melanine geproduceerd door melanoomcellen. Zo kan LMS met behulp van natuurlijke bemiddelaars worden gebruikt als een effectief huidbleekmiddel in de cosmetica-industrie.

Aanvullende materialen:Het volgende is online beschikbaar, Afbeelding S1: De melanine-ontkleuring door LMS met behulp van laccase van T. versicolor en M. thermophila, Afbeelding S2: De initiële snelheid voor de melanine-ontkleuringsreactie door laccase van T. versicolor en M. thermophila.

Bijdragen van auteurs:Conceptualisatie, SP, DJ en SHL; Gegevensbeheer, SHL; Formele analyse, SP; Financiering acquisitie, SHL; Onderzoek, SP, DJ en HD; Methodologie, SP, DJ en HD; Projectadministratie, SHL; Middelen, SHL; Software, JY, DL en SH; Toezicht, SHL; Validatie, JY, DL, SH en SHL; Visualisatie, JY, DL en SH; Schrijven - origineel ontwerp, SP en DJ; Schrijven—review en redactie, SHL Alle auteurs hebben de gepubliceerde versie van het manuscript gelezen en gaan ermee akkoord.

Financiering:Dit werk werd in 2018 ondersteund door Konkuk University.

Verklaring van de institutionele beoordelingsraad:Niet toepasbaar.

Geïnformeerde toestemmingsverklaring:Niet toepasbaar.

Verklaring gegevensbeschikbaarheid:Niet toepasbaar.

Belangenconflicten:De auteurs verklaren geen belangenverstrengeling.

Referenties

1. Sterk, PJ; Claus, H. Laccase: een overzicht van zijn verleden en zijn toekomst in bioremediatie. Crit. Ds. Milieu. Wetenschap. Technologie 2011, 41, 373-434. [KruisRef]

2. Mayer, AM; Staples, RC Laccase: nieuwe functies voor een oud enzym. Fytochemie 2002, 60, 551-565. [KruisRef]

3. Camarero, S.; Ibarra, D.; Martinez, MJ; Martínez, AT Van lignine afgeleide verbindingen als efficiënte laccase-bemiddelaars voor het ontkleuren van verschillende soorten hardnekkige kleurstoffen. Appl. Omgeving. Microbiol. 2005, 71, 1775-1784. [Kruisreferentie] [PubMed]

4. Campos, R.; Cavaco-Paulo, A.; Kandelbauer, A.; Robra, KH; Gübitz, GM Indigo-afbraak met gezuiverde laccases van Trametes hirsuta en Sclerotium rolfsii. J. Biotechnologie. 2001, 89, 131-139. [KruisRef]

5. Ostadhadi-Dehkordi, S.; Tabatabaei-Sameni, M.; Forootanfar, H.; Kolahdouz, S.; Ghazi-Khansari, M.; Faramarzi, MA Afbraak van sommige benzodiazepines door een laccase-gemedieerd systeem in waterige oplossing. Bioresour. Technologie 2012, 125, 344-347. [KruisRef]

6. Lloret, L.; Eibes, G.; Lú-Chau, TA; Moreira, MT; Feijoo, G.; Lema, JM Laccase-gekatalyseerde afbraak van ontstekingsremmers en oestrogenen. Biochem. Eng. J. 2010, 51, 124-131. [KruisRef]

7. Zeng, S.; Qin, X.; Xia, L. Afbraak van het herbicide isoproturon door laccase-mediatorsystemen. Biochem. Eng. J. 2017, 119, 92-100. [KruisRef]

8. Ibarra, D.; Romero, J.; Martinez, MJ; Martinez, AT; Camarero, S. Onderzoek naar de enzymatische parameters voor optimale delignificatie van eucalyptuspulp door laccase-mediator. Enzym microb. Technologie 2006, 39, 1319-1327.

9. Fillat, A.; Kolom, JF; Vidal, T. Een nieuwe benadering van het biologisch bleken van vlaspulp met laccase met behulp van natuurlijke bemiddelaars. Bioresour. Technologie 2010, 101, 4104-4110. [Kruisreferentie] [PubMed]

10. Camarero, S.; Ibarra, D.; Martinez, AT; Romero, J.; Gutierrez, A.; del Río, JC Delignificatie van papierpulp met behulp van laccase en natuurlijke bemiddelaars. Enzym microb. Technologie 2007, 40, 1264-1271. [KruisRef]

11. Zerva, A.; Simi´c, S.; Topakas, E.; Nikodinovic-Runic, J. Toepassingen van microbiële laccases: octrooibeoordeling van het afgelopen decennium (2009–2019). Katalysatoren 2019, 9, 1023. [CrossRef]

12. Cañas, AI; Camarero, S. Laccases en hun natuurlijke bemiddelaars: biotechnologische hulpmiddelen voor duurzame milieuvriendelijke processen. Biotechnologie. Adv. 2010, 28, 694-705. [Kruisreferentie] [PubMed]

13. Shleev, S.; Tkac, J.; Christenson, A.; Ruzgas, T.; Jaropolov, AI; Whittaker, JW; Gorton, L. Directe elektronenoverdracht tussen koperbevattende eiwitten en elektroden. biosens. Bioelektron. 2005, 20, 2517-2554. [Kruisreferentie] [PubMed]

14. Christoffel, LP; Yao, B.; Ji, Y. Lignine biologische afbraak met laccase-mediatorsystemen. Voorkant. Energie Res. 2014, 2, 1–13. [KruisRef]

15. Bourbonnais, R.; Paice, MG Oxidatie van niet-fenolische substraten: een grotere rol voor lactase bij de biologische afbraak van lignine. FEBS Lett. 1990, 267, 99-102. [KruisRef]

16. Srebotnik, E.; Hammel, KE Afbraak van niet-fenolische lignine door het laccase/1-hydroxybenzotriazoolsysteem. J. Biotechnologie. 2000, 81, 179-188. [KruisRef]

17. Baiocco, P.; Barreca, AM; Fabbrini, M.; Galli, C.; Gentili, P. Bevordering van laccase-activiteit naar niet-fenolische substraten: een mechanistisch onderzoek met enkele laccase-mediatorsystemen. Org. Biomol. Chem. 2003, 1, 191–197. [KruisRef]

18. Fabbrini, M.; Galli, C.; Gentili, P. Vergelijking van de katalytische efficiëntie van sommige bemiddelaars van laccase. J Mol. Catal. B-Enzym. 2002, 16, 231-240. [KruisRef]

19. Gonzalez, MD; Vidal, T.; Tzanov, T. Elektrochemische studie van fenolverbindingen als versterkers in door laccase gekatalyseerde oxidatieve reacties. Elektroanalyse 2009, 21, 2249-2257. [KruisRef]

20. Yang, L.; Guo, X.; Jin, Z.; Guo, W.; Duan, G.; Liu, X.; Li, Y. Opkomst van op melanine geïnspireerde supercondensatoren. Nano Today 2021, 37, 101075. [CrossRef]

21. Caldas, M.; Santos, AC; Veiga, F.; Rebelo, R.; Reis, RL; Correlo, VM Melanine-nanodeeltjes als een veelbelovend hulpmiddel voor biomedische toepassingen - Een overzicht. Acta Biomater. 2020, 105, 26-43. [KruisRef]

22. Wauw, SH; Cho, JS; Lee, BS; Kim, EK Ontkleuring van melanine door lignineperoxidase van Phanerochaete chrysosporium. Biotechnologie. Bioproces Eng. 2004, 9, 256-260. [KruisRef]

23. Kaneko, S.; Cheng, M.; Murai, H.; Takenaka, S.; Murakami, S.; Aoki, K. Zuivering en karakterisering van een extracellulaire laccase van Phlebia radiata-stam BP-11-2 die schimmelmelanine ontkleurt. Biosci. Biotechnologie. Biochem. 2009, 73, 939-942. [KruisRef]

24. Mohorˇciˇc, M.; Friedrich, J.; Renimel, ik.; André, P.; Mandin, D.; Chaumont, J.-P. Productie van melanine-bleekenzym van schimmeloorsprong en de toepassing ervan in cosmetica. Biotechnologie. Bioproces Eng. 2007, 12, 200-206. [KruisRef]

25. Kim, BS; Blaghen, M.; Hong, H.; Lee, K. Zuivering en karakterisering van een biodegradatie-enzym van melanine uit Geotrichum sp. Int. J. Cosmetische wetenschap. 2016, 38, 622-626. [Kruisreferentie] [PubMed]

26. Gezongen, HJ; Khan, MF; Kim, YH Recombinant lignineperoxidase-gekatalyseerde ontkleuring van melanine met behulp van in-situ gegenereerde H2O2 voor toepassing in bleekcosmetica. Int. J. Biol. macromol. 2019, 136, 20–26. [KruisRef]

27. Scheenbeen, SK; Hyeon, JE; Joo, Y.; Jeong, DW; Jij, SK; Han, SO Effectieve afbraak van melanine door een synergetisch laccase-peroxidase-enzymcomplex voor het bleken van de huid en andere praktische toepassingen. Int. J. Biol. macromol. 2019, 129, 181-186. [KruisRef]

28. Khammuang, S.; Sarnthima, R. Ontkleuring van synthetische melanines door ruwe laccases van Lentinus polycarpous Lév. Folia microbiol. 2013, 58, 1–7. [Kruisreferentie] [PubMed]

29. Repetto, G.; del Peso, A.; Zurita, J. Neutrale rode opnametest voor de schatting van de levensvatbaarheid / cytotoxiciteit van cellen. Nat. Protocol. 2008, 3, 1125-1131. [Kruisreferentie] [PubMed]

30. Castellair, MR; Obón, JM; Fernández-López, JA De isolatie en eigenschappen van een geconcentreerde roodpaarse betacyanine-kleurstof voor levensmiddelen van Opuntia stricta-vruchten. J.Sci. Voedsel Agrarisch. 2006, 86, 122–128. [KruisRef]

31. Cserhalmi, Z.; Sass-Kiss, Á.; Tóth-Markus, M.; Lechner, N. Studie van gepulseerd elektrisch veld behandelde citrusvruchtensappen. Innov. Voedsel Wetenschap. opduiken. Technologie 2006, 7, 49-54. [KruisRef]

32. Łopusiewicz, L.; J˛edra, F.; Mizieli ´ska, M. Nieuwe poly(melkzuur) actieve verpakkingscomposietfilms waarin schimmelmelanine is verwerkt. Polymeren 2018, 10, 386. [CrossRef] [PubMed]

33. Pralea, IE; Moldavië, RC; Petrache, AM; Ilies, , M.; Heghes, , SC; Ielciu, ik.; Nicoară, R.; Moldavisch, M.; Ene, M.; Radu, M.; et al. Van extractie tot geavanceerde analytische methoden: de uitdagingen van melanine-analyse. Int. J Mol. Wetenschap. 2019, 3943. [KruisRef] [PubMed]

34. Tran-Ly, AN; Reyes, C.; Schwarze, FWMR; Ribera, J. Microbiële productie van melanine en de verschillende toepassingen ervan. Wereld J. Microbiol. Biotechnologie. 2020, 36, 1–9. [Kruisreferentie] [PubMed]

35. Medina, F.; Aguila, S.; Baratto, MC; Martorana, A.; Basosi, R.; Alderete, JB; Vazquez-Duhalt, R. Voorspellingsmodel gebaseerd op beslissingsboomanalyse voor laccase-bemiddelaars. Enzym microb. Technologie 2013, 52, 68-76. [KruisRef]

36. Fillat, U.; Prieto, A.; Camarero, S.; Martinez, AT; Martínez, MJ Biodeinking van flexografische inkten door laccases van schimmels met behulp van synthetische en natuurlijke bemiddelaars. Biochem. Eng. J. 2012, 67, 97-103. [KruisRef]

37. Hong, J.; Jung, D.; Park, S.; Oh, Y.; Oh, KK; Lee, SH Immobilisatie van laccase via verknoopte enzymaggregaten bereid met behulp van genipin als een natuurlijke vernetter. Int. J. Biol. macromol. 2021, 169, 541-550. [KruisRef]

38. Berka, RM; Schneider, P.; Golightly, EJ; Bruin, SH; Madden, M.; Bruin, KM; Halkier, T.; Mondorf, K.; Xu, F. Karakterisering van het gen dat codeert voor een extracellulaire laccase van Myceliophthora thermophila en analyse van het recombinante enzym dat tot expressie wordt gebracht in Aspergillus oryzae. Appl. Omgeving. Microbiol. 1997, 63, 3151-3157. [KruisRef]

Voor meer informatie: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501